First evidence of systemic infection and specific cytotoxic T lymphocyte immune response evoked by oral infection with recombinant Salmonella entérica serovar Albany-Ovalbumin in C57BL/6 mice / Primera evidencia de infección sistémica y respuesta inmune celular citotóxicaespecífica evocada por la infección oral en ratones C57BL/6 con Salmonella entericaserovar Albany-Ovoalbúmina recombinante

Abstract Our group isolated Salmonella enterica serovar Albany from food and feces of wildcaptive carnivores in a zoo from northwestern Mexico. This serovar was also associated with thedeath of an ocelot (Leopardus pardalis) in the same zoo. Another group associated S. Albanywith the death of a human patient. It is due to this zoonotic potential that the in vivo study of thehost-S. Albany relationship is critical. The recombinant S. Albany-Ovalbumin (rSAO) strain wasused to analyze a murine oral infection and its specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) response.Our results have shown for the first time that rSAO establishes a systemic infection and evokesepitope-specific lysis with a Th1-like cytokine profile in vivo.

Resumen Salmonella entérica serovar Albany fue aislada por nuestro grupo de investigación de alimentos contaminados y de heces de animales carnívoros en cautiverio en un zoológico del noroeste de México; posteriormente, se logró asociar a este serovar con la muerte de un ocelote (Leopardus pardalis), dentro de este mismo zoológico. Otro grupo de investigación asoció a este serovar con la muerte de un paciente. Es debido a este potencial zoonótico que el estudio in vivo de la relación hospedero-S. Albany es crítico. La cepa recombinante S. Albany-Ovoalbúmina (rSAO) fue utilizada para analizar la infección múrida, al igual que la respuesta inmune celular citotóxica específica. Nuestros resultados demuestran, por primera vez, que rSAO establece una infección sistémica y evoca lisis epítopo-específica con un perfil de citocinas tipo Th1 in vivo.

First evidence of systemic infection and specific cytotoxic T lymphocyte immune response evoked by oral infection with recombinant Salmonella enterica serovar Albany-Ovalbumin in C57BL/6 mice.

Our group isolated Salmonella enterica serovar Albany from food and feces of wild captive carnivores in a zoo from northwestern Mexico. This serovar was also associated with the death of an ocelot (Leopardus pardalis) in the same zoo. Another group associated S. Albany with the death of a human patient. It is due to this zoonotic potential that the in vivo study of the host-S. Albany relationship is critical. The recombinant S. Albany-Ovalbumin (rSAO) strain was used to analyze a murine oral infection and its specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) response. Our results have shown for the first time that rSAO establishes a systemic infection and evokes epitope-specific lysis with a Th1-like cytokine profile in vivo.

Aislamiento de Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC) en heces de ganado y detección de factores de virulencia asociados con su patogénesis / Isolation of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) in cattle stool and detection of virulence factors associated with its pathogenesis

Resumen Objetivo: Aislar STEC en las heces del ganado bovino en el municipio de Ulloa, Valle del Cauca y detectar factores de virulencia asociados con la patogénesis. Materiales y métodos: Se tomaron 21 muestras provenientes de bovinos, las cuales fueron tomadas directamente del recto del animal mediante hisopos. Las muestras se procesaron hasta obtener colonias puras a las cuales se les evaluó la presencia de los genes stx1, stx2, eae, saa y hlyA mediante PCR y posteriormente, se evaluó el efecto citotóxico de las muestras positivas sobre células Vero (ATCC-CCL-81.4). Resultados: De las 21 muestras de heces de bovinos,12 presentaron bacterias con uno o ambos genes stx. Se obtuvieron 106 aislamientos totales de STEC y se observaron diferencias en cuanto a la presencia y ausencia de los genes de virulencia evaluados en los aislamientos de cada bovino, obteniendo cinco combinaciones de genes. 48 aislamientos presentaron únicamente el gen stx2 y 58 presentaron tanto el gen stx1 como el gen stx2; de los 106 aislamientos, se detectaron 44 con el gen hlyA y 57 con el gen saa. Conclusiones: Todos los sobrenadantes de STEC analizados mostraron actividad citotóxica sobre las células Vero, mientras que en ausencia de STEC las células formaron monocapa después de 48 h de incubación. Este trabajo es el primer reporte en Colombia que aporta información sobre la presencia de STEC en el ganado bovino, la presencia de factores de virulencia y el potencial efecto citotóxico que poseen estas cepas nativas.

Abstract Objective: To isolate STEC in stool samples from cattle in Ulloa, Valle del Cauca, and to detect virulence factors associated with its pathogenesis. Materials and methods: We took 21 samples from cattle, which were taken directly from the rectum of the animal using swabs. The samples were processed until obtaining pure colonies and evaluated for the presence of the stx1, stx2, eae, saa and hlyA genes by PCR. Afterward, the cytotoxic effect of positive samples were evaluated on Vero cells (ATCC-CCL- 81.4). Results: We observed that from the 21 stools samples, 12 presented bacteria with one or both stx genes. A total of 106 isolates of STEC were obtained and differences among each other were observed regarding the presence and absence of the virulence genes, obtaining five combinations of genes. We found that 48 isolates presented only stx2 gene and 58 presented both the stx1 and stx2 gene. Regarding the other virulence genes, the hlyA gene was detected in 44 isolates and the saa gene was detected in 57 isolates. Conclusions: All the STEC supernatants showed cytotoxic activity on Vero cells, while in its absence the cells formed monolayer after 48 h of incubation. This work is the first report in Colombia that provides information about the presence of STEC in stool cattle, virulence genes and its potential cytotoxic effect in native strains.

Synthesis and cytotoxic evaluation of protoanemonin and three brominated derivatives / Síntesis y evaluación citotóxica de la protoanemonina y tres derivados bromados / Síntese e avaliação citotóxica de protoanemonina e três derivados bromados

Abstract The protoanemonin, a natural furanone, was synthesized from (Z)-4-bromo-5-(bromomethylene)-furan-2(5H)-one by a reductive dehalogenation reaction with zinc. The 5-(dibromomethylene)-2(5H)-furanone and (E)-5-(bromomethylene)-2(5H)-furanone were also synthetized from levulinic acid bromination and acid promoted cyclization. The antiproliferative activity of all synthesized compounds against the human cancer cell lines PC-3 (prostate) and U-251 (glioblastoma) was investigated. The results showed that all the obtained furanones are more active than the reference drug cisplatin, with iC50 values in the range of 0.31 ± 0.02 to 7.30 ± 0.08 µM. However, (E)-5-(bromomethylene)-2(5H)-furanone, with a bromine atom in the double bond, was the most active, and demonstrated to be about 25-fold more active than the reference drug cisplatin.

Resumen La protoanemonina, una furanona de origen natural, fue sintetizada a partir de la (Z)-4-bromo-5-(bromometilen)-furan-2(5H)-ona mediante una deshalogenación reductiva con zinc. La 5-(dibromometilen)-2(5H)-furanona y la (E)-5-(bromometilen)-2(5H)-furanona también fueron sintetizadas a partir del ácido levulínico mediante bromación y posterior ciclación promovida por ácido. Se investigó la actividad antiproliferativa de todos los compuestos sintetizados en las líneas celulares de cáncer humano PC-3 (próstata) y U-251 (glioblastoma). Los resultados demostraron que todas las furanonas obtenidas son más activas que el fármaco de referencia cisplatino, con un intervalo de Ci50 de 0,31 ± 0,02 hasta 7,30 ± 0,08 µM. Sin embargo, la (E)-5-(bromometilen)-2(5H)-furanona, con un átomo de bromo en el doble enlace, demostró ser 25 veces más activa que el fármaco de referencia cisplatino.

Resumo Protoanemonina, uma furanona natural, foi sintetizada de (Z)-4-bromo-5-(bromometileno)-furan-2(5H)-ona por desalógenação redutora do zinco. Também foram sintetizados 5-(Dibromometileno)-2(5H)-furanona e (E)-5-(Bromometileno)-2(5H)-furanona a partir da brominação com ácido levulínico e ciclização promovida por ácido. Foi investigada a atividade antiproliferativa de todos os compostos sintetizados nas linhas celulares humanas de câncer PC-3 (próstata) e U-251 (glioblastoma). Os resultados mostram que todos os furanonas obtidos são mais ativos que a cisplatina do medicamento de referência, com intervalo Ci50 de 0,31 ± 0,02 até 7,30 ± 0,08 µM. Entretanto, a mais ativa foi a (E)-5-(Bromometileno)-2(5H)-furanona, que com um átomo de bromo na dupla ligação exocíclica, provou ser 25 vezes mais ativa que a medicamento de referência cisplatina.

Mortalidad en pacientes oncológicos tratados con quimio o inmunoterapia durante la pandemia de COVID-19 / Mortality in cancer patients treated with chemotherapy or immunotherapy during the COVID-19 pandemic

INTRODUCCIÓN Los datos sobre el riesgo de muerte de pacientes oncológicos en tratamiento citotóxico e inmune durante la pandemia provienen predominantemente de estudios retrospectivos o aquellos que incluyen pacientes positivos para COVID-19. OBJETIVO Estimar la mortalidad en la población general de pacientes oncológicos en tratamiento citotóxico e inmunomodulador en Argentina e identificar sus predictores clínicos. MÉTODOS En esta cohorte prospectiva multicéntrica incluimos pacientes con tumores sólidos en tratamiento quimio o inmunomodulador en cuatro hospitales de distintas zonas geográficas. El desenlace de interés fue mortalidad por cualquier causa. Para el análisis de sobrevida usamos el método de Kaplan-Meier, prueba log-rank y regresión de Cox. Como variables predictoras utilizamos edad, sexo, status tabáquico, hipertensión, diabetes, índice de masa corporal (IMC), puntaje ECOG, el tipo y la línea de tratamiento. RESULTADOS Se incluyeron 158 pacientes. La mediana de edad fue 61 años, rango intercuartil (47­ 71 años). El 48% realizaba tratamiento (neo)adyuvante, el 52% - terapia para enfermedad avanzada. El 92% recibía drogas citotóxicas, el 8% inmunoterapia, La mediana de seguimiento fue 92 días. Diez pacientes (6%) habían fallecido, todos ellos tenían enfermedad metastásica. En los análisis uni- y multivariable la línea de tratamiento (segunda línea vs primera línea HR 2,89 [IC 95% 0,58-14,3] p = 0.2; tercera o mayor línea vs primera línea HR 6,07 [IC 95% 1,34-27,5] p = 0,019), ECOG (ECOG2 vs ECOG0 HR 10,4, [IC 95% 1,08-100], p = 0,043; ECOG3 vs ECOG0 HR 50,8 [IC 95% 4,54-568] p = 0,01) y el IMC >30, (HR 4,61 IC 95% [1,24-17,2] p = 0,023) estaban significativamente asociados a la probabilidad de muerte. DISCUSIÓN La (neo)adyuvancia podría ser administrada con seguridad durante la Pandemia por COVID-19. Las líneas avanzadas de tratamiento, el pobre puntaje ECOG y la obesidad implicarían un mayor riesgo de muerte en pacientes en tratamiento citotóxico o inmune

Immunotherapy in Nonmelanoma Skin Cancer. / Inmunoterapia en cáncer cutáneo no melanoma.

Immunotherapy is emerging as a new and promising treatment for a great variety of tumors, including nonmelanoma skin cancer. Checkpoint inhibitors -antibodies that block proteins that regulate the immune system- mainly target the surface protein CTLA-4 (cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen 4) and the PD-1/PD-L1 (programmed cell death protein 1/PD-ligand 1) axis. We review the CTLA-4 and PD-1/PD-L1 pathways and current evidence supporting checkpoint inhibitor therapy in the main types of nonmelanoma skin cancer.

Cytotoxic T Lymphocyte-associated Antigen 4 Polymorphisms Correlated with Graves' Disease in Patients of Han Ethnicity in Yunnan, China / Polimorfismos del antígeno 4 del linfocito T citotóxico correlacionados con la enfermedad de Graves en pacientes de la etnia Han en Yunnan, China

ABSTRACT Objective: To investigate the correlations between polymorphisms at position 49 in exon 1 and position 318 in the promoter of the cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 (CTLA-4) gene and autoimmune thyroid diseases in a Han Chinese population. Methods: Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism was utilized. The MseI and BbvI restriction endonucleases were used to detect and analyse position 49 in exon 1 and position 318 in the promoter as well as the T/C alleles of the CTLA-4 gene in peripheral blood samples from 112 patients with Graves' disease (GD), 101 with Hashimoto's thyroiditis (HT) and 100 healthy individuals. Results: At position 49 of exon 1, the frequencies of the GG genotype and the G allele in the GD group (χ2 = 12.147; p = 0.002) were statistically significantly higher than those in the control group (χ2 = 9.925; p = 0.002), while no statistically significant differences were found between the frequencies of the GG genotype and the G allele in the HT group (χ2 = 1.195; p = 0.550) and those in the control group (χ2 = 0.984; p = 0.321). No statistically significant differences in the promoter (−318) or the T/C alleles were observed among the three groups. Position 49 in the 17th codon of exon 1 of the CTLA-4 gene may be a candidate susceptibility marker in patients of Han ethnicity with GD. Conclusion: This finding helps us to better understand the genetic risks for GD and provides a direction for targeted gene therapy.

RESUMEN Objetivo: Investigar las correlaciones entre los polimorfismos en la posición 49 en el exón 1 y la posición 318 en el promotor del gen del antígeno 4 asociado al linfocito T citotóxico (CTLA-4), con las enfermedades autoinmunes de la tiroides en una población China de Han. Métodos: Se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa-polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción. Las endonucleasas de restricción de MseI y BbvI se utilizaron para detectar y analizar la posición 49 en el exón 1 y la posición 318 en el promotor, así como los alelos T/C del gen CTLA-4 en muestras de sangre periférica de 112 pacientes con enfermedad de Graves (EG), 101 con tiroiditis de Hashimoto (TH) y 100 individuos sanos. Resultados: En la posición 49 de exón 1, las frecuencias del genotipo GG y el alelo G en el grupo de EG (χ2 = 12.147; p = 0.002) fueron estadísticamente significativamente más altas que las del grupo de control (χ2 = 9.925; p = 0.002), pero no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las frecuencias del genotipo GG y el alelo G en el grupo de TH (χ2 = 1.195; p = 0.550) y las del grupo de control (χ2 = 0.984; p = 0.321). No se observaron diferencias estadísticamente significativas en el promotor (−318) ni en los alelos T/C entre los tres grupos. La posición 49 en el codón17.° del exón 1 del gen CTLA-4 puede ser un marcador de susceptibilidad candidato en pacientes de la etnia Han con EG. Conclusión: Este hallazgo nos ayuda a comprender mejor los riesgos genéticos de la EG y ofrece una dirección para la terapia génica dirigida.

Protección de la Spirulina maxima sobre la citotoxicidad de la hidroxiurea en células embrionarias de ratón / Protection of Spirulina maxima on cytotoxicity of hydroxyurea in mouse embryonic cells / Proteção de Spirulina maxima em citotoxicidade de hidroxiureia em células embrionárias de camundongo

La Spirulina maxima (SP) tiene efectos farmacológicos protectores por su contenido de ficobiliproteínas que están relacionados con su actividad antioxidante. La hidroxiurea (HU) es un fármaco antineoplásico, citotóxico y teratógeno que implica la inducción del estrés oxidativo. El objetivo de este trabajo fue determinar si la SP y su extracto acuoso de proteína (SPE) protegen contra el efecto citotóxico de HU en cultivos celulares primarios a partir de embriones de ratón de once días. Los efectos de SP, SPE e HU sobre la viabilidad celular se determinaron por el ensayo de fluorescencia de resazurina en cultivos celulares de embriones completos de ratones de once días, de encéfalo y de brotes de extremidades anteriores. Se demostró que ni SP ni su extracto provocaron efectos citotóxicos en ninguna concentración ensayada, por lo que se aumentaba la viabilidad celular. Se encontró que las células expuestas a HU de embriones completos y encéfalo mostraron mayor toxicidad que las células de los miembros anteriores. La SP y el SPE protegieron contra la citotoxicidad de HU de una manera dependiente de la concentración hasta 48 h después de la exposición al fármaco. Este efecto podría ser adecuado para prevenir la muerte celular que deriva en un proceso teratogénico, atribuido a sus propiedades antioxidantes.

Spirulina maxima (SP) has protective pharmacological effects that are related to the antioxidant activity due to its phycobiliprotein content. Hydroxyurea (HU) is an antineoplastic, cytotoxic and teratogenic drug, which involves the induction of oxidative stress. The aim of this study was to determine whether SP and its aqueous protein extract (SPE) protect against the cytotoxic effect of HU in primary cell cultures from mouse embryos. The effects of SP, SPE, and HU on cell viability were determined by resazurin fluorescence assay in whole embryo cell cultures, encephalon, and eleven-day-old forehead bud outbreaks. It was shown that neither SP nor its extract caused cytotoxic effects at any concentration tested, increasing cell viability. It was found that cells exposed to HU of whole embryos and encephalon showed higher toxicity than cells of the previous limbs. SP and SPE protected HU cytotoxicity in a concentration-dependent manner up to 48 hours after exposure to the drug. This effect could be adequate to prevent cell death resulting in a teratogenic process attributed to its antioxidant properties.

Spirulina maxima (SP) tem efeitos farmacológicos protetores devido a seu conteúdo de ficobiliproteínas, que estão relacionadas com sua atividade antioxidante. A hidroxiureia (HU) é uma droga antineoplásica, citotóxica e teratogênica, que envolve a indução do estresse oxidativo. O objetivo deste estudo foi determinar se a SP e seu extrato aquoso de proteína (SPE) protegem contra o efeito citotóxico da HU em culturas celulares primárias a partir de embriões de camundongo de onze dias. Os efeitos de SP, SPE e HU na viabilidade celular foram determinados pelo ensaio de fluorescência de resazurina em culturas celulares de embriões inteiros de camundongos de onze dias, de encéfalo e de surtos de extremidades anteriores. Demonstrou-se que nem a SP nem seu extrato causaram efeitos citotóxicos em qualquer concentração testada, aumentando a viabilidade celular. Verificou-se que as células expostas à HU de embriões completos e encéfalo mostraram maior toxicidade do que as células dos membros anteriores. SP e SPE protegem contra a citotoxicidade de HU de forma dependente da concentração até 48 h após a exposição ao medicamento. Esse efeito poderia ser adequado para prevenir a morte celular, que resulta em um processo teratogênico atribuído a suas propriedades antioxidantes.

Immunostimulatory monoclonal antibodies for hepatocellular carcinoma therapy: Trends and perspectives

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the second cause of cancer-related death in the world and is the main cause of death in cirrhotic patients. Unfortunately, the incidence of HCC has grown significantly in the last decade. Curative treatments such as surgery, liver transplantation or percutaneous ablation can only be applied in less than 30% of cases. The multikinase inhibitor sorafenib is the first line therapy for advanced HCC. Regorafenib is the standard of care for second-line patients. However, novel and more specific potent therapeutic approaches for advanced HCC are still needed. The liver constitutes a unique immunological microenvironment, although anti-tumor immunity seems to be feasible with the use of checkpoint inhibitors such as nivolumab. Efficacy may be further increased by combining checkpoint inhibitors or by applying loco-regional treatments. The success of immune checkpoint blockade has renewed interest in immunotherapy in HCC.

El hepatocarcinoma (HCC) es la segunda causa de muerte relacionada con el cáncer en el mundo y es la principal causa de muerte en pacientes cirróticos. Desafortunadamente, la incidencia de HCC ha crecido significativamente en la última década. Los tratamientos curativos como la cirugía, el trasplante de hígado o la ablación solo pueden aplicarse en menos del 30% de los casos. El sorafenib es el tratamiento de primera línea para el HCC avanzado, mientras que el regorafenib se reserva como segunda línea. Sin embargo, todavía son necesarios nuevos enfoques terapéuticos potentes y más específicos para el HCC avanzado. El hígado constituye un microambiente inmunológico único, aunque la inmunidad antitumoral parece ser factible mediante el uso de inhibidores de punto de control como nivolumab. La eficacia puede aumentarse adicionalmente combinando inhibidores de puntos de control inmunitario o aplicando tratamientos loco-regionales. En este sentido, el éxito del uso de anticuerpos monoclonales, que bloquean el control inmunitario, ha renovado el interés en la inmunoterapia para el HCC.

Actividad antioxidante y citotóxica de 35 plantas medicinales de la Cordillera Negra / Antioxidant and cytotoxic activity of 35 medicinal plants of the Cordillera Negra

Introducción: La flora de la Cordillera Negra, alberga variedad de especies vegetales y de acuerdo con las encuestas realizadas a los pobladores son usadas para curar algunas enfermedades. Objetivos: Determinar la actividad antioxidante y citotóxica de 35 plantas medicinales de la Cordillera Negra. Diseño: No experimental y Experimental. Lugar: Laboratorios de la Facultad de Ciencias biológicas, Medicina y Farmacia y Bioquímica. Material biológico: Plantas medicinales y Tetrapygus niger. Intervenciones: No experimental; encuestas (cuestionario de preguntas), tamizaje fitoquímico. Experimental (actividad antioxidante a 100, 50 y 25 µg/mL y actividad citotóxica 166 y 333 µg/mL) Resultados: Los pobladores tienen conocimiento tradicional de las especies estudiadas. Las 35 especies presentan metabolitos secundarios. La actividad antioxidante a 100 µg/mL, dio el 74.29% CRL del total de las especies, 50 µg/mL fue el 14.28% CRL y a 25 µg/mL se obtuvo el 5.71% CRL. El IC50 se pudo realizar a Tecuar, Lengua de perro, Santa lucia y Aliso, por presentar mayor capacidad de captación de radicales libres. La actividad citotóxica haciendo uso de los huevos fértiles de erizo de mar por efecto de los 35 extractos a las 24 horas a 166 µg/mL se observó 28.57% mortalidad y a 333 µg/mL presentó 40% mortalidad. A las 48 horas en la concentración de 166 µg/mL se apreció 28.57% mortalidad y a 333 µg/mL se encontró 42.85% mortalidad. Conclusiones: Se valora el conocimiento etnofarmacológico de los pobladores de la Cordillera Negra, el tamizaje fitoquímico indica la presencia e metabolitos secundarios, se evidencia la actividad antioxidante y la actividad citotóxica en la mayoría de las 35 plantas medicinales de la Cordillera Negra.

Free radical scavenging capacity and cytotoxic and antiproliferative effects of Vaccinium meridionale Sw. agains colon cancer cell lines / Capacidad atrapadora de radicales libres, efectos citotóxicos y antiproliferativos de Vaccinium meridionale Sw. en líneas celulares de cáncer de colon

Introduction: Vaccinium meridionale Swartz, of the family Ericaceae, is commonly known as mortiño or agraz. The plant is considered a functional food, with a content of anthocyanins and antioxidants similar to or greater than that reported for other Vaccinium species. However, little is known about its nutraceutical and medicinal properties. Objectives: determine the antioxidant activity and cytotoxic and antiproliferative effect of mortiño fruit aqueous extract against colon adenocarcinoma cells (SW480) and their derived metastatic cells (SW620). Methods: total phenols and anthocyanins were determined by the Folin-Ciocalteu method. Caffeoyl derivatives were determined by HPLC-DAD. Antioxidant activity was analyzed as the ability to scavenge reactive oxygen species (ROS), reactive nitrogen species (RNI), peroxyl radicals and hydroxyl radicals. Cytotoxic and antiproliferative activities were studied by MTT and sulforhodamine B. Results: the following substances were found in 100 g of lyophilized extract: total phenols (2 546 mg GAE), anthocyanins (150.7 mg C3G), chlorogenic acid (126 mg), ferulic acid (108 mg) and coumaric acid (63 mg). Hydroxyl radical scavenging capacity was 36 147.5 ?mol DMSO, whereas ROS and RNS scavenging capacity was 29 255.9 y 41 775.2 ?molTrolox, respectively. ORAC value was 41 775.2 ?molTrolox. A dose-dependent cytotoxic and antiproliferative effect was observed. IC50 value was 59.12 µg/ml for SW480 and 56.10 µg/mL for SW620. Conclusions: mortiño fruit aqueous extract exhibited antioxidant, cytotoxic and antiproliferative activities comparable to those of other berries of the genus Vaccinium, which could be partly explained by the presence of a high content of anthocyanins and phenolic acids.

Introducción: Vaccinium meridionale Swartz, pertenece a la familia Ericaceae, conocida comúnmente como mortiño agraz. Considerado un alimento funcional por su contenido de antocianinas y antioxidantes similares o mayor al reportado para otras especies de Vaccinium. Sin embargo, poco se conoce sobre sus propiedades nutracéuticas y en la salud. Objetivos: determinar en extracto acuoso del fruto mortiño, la actividad antioxidante y su efecto citotóxico y antiproliferativo en células de adenocarcinoma de colon (SW480) y sus derivadas metastásicas (SW620). Métodos: contenido de fenoles y antocianinas totales se determinó por el método Folin-Ciocalteu, los derivados caffeoil por HPLC-DAD. La actividad antioxidante se analizó como habilidad para atrapar especies reactivas del oxígeno (ROS) y del nitrógeno (RNI), radicales peróxilo e hidróxilo. La actividad citotóxica y antiproliferativa se estudiaron por MTT y sulforodamina B. Resultados : en 100 g de liofilizado se encontrófenoles totales (2546 mg GAE), antocianinas (150,7 mg C3G), ácido clorogénico (126 mg), ácido ferúlico (108 mg) y cumárico (63 mg), capacidad atrapadora de radical hidroxilo fue 36147,5 ?mol DMSO, capacidad atrapadorade ROS y RNS fue 29255,9 y 41775,2 ?mol Trolox, respectivamente, valor ORAC 41775,2 ?mol Trolox. Se observó un efecto citotóxico y antiproliferativo dosis-dependiente. El valor IC50 para SW480: 59,12 µg/mL y SW620: 56,10 µg/mL. Conclusiones: el extracto acuoso del fruto del mortiño exhibió actividades antioxidantes, citotóxicas y antiproliferativas comparables a las de otras bayas del género Vaccinium, lo que podría ser explicado parcialmente por la presencia del alto contenido de antocianinas y ácidos fenólicos.

Identificación, análisis y evaluación del riesgo de exposición ocupacional en servicios de preparación de citostáticos de la Red Nacional de Prestadores / Identification, analysis and risk assessment of occupational exposure in cytostatic preparation services of the Providers National Network

Se identifica, analiza y evalúa el riesgo de exposición ocupacional a citostáticos, en una muestra de instalaciones destinadas a preparación de mezclas destinadas a tratamiento terapéutico oncológico, pertenecientes a la Red Nacional de Prestadores autorizados; en relación con el tipo y nivel de infraestructura de control y frecuencia de exposición asociada. Los resultados de la evaluación revelan una gran variedad de situaciones en las que, pese a la existencia de una regulación que define el tipo y caracteristicas de la contención mínima necesaria, se observan insuficiencias en el nivel de control observado y consiguiente riesgo al que se expone el personal. Del total de instalaciones incluidas en el estudio, sólo el 7% presenta un nivel de control aceptable y cercano al óptimo esperado, el 43% presenta un nivel de control regular y mejorable a través de correcciones menores. En tanto el 50% restante, revela un significativo nivel de insuficiencia; destacando que el 36% de las instalaciones evidencia condiciones extremas de exposición laboral.

The risk of occupational exposure to cytostatic was identified, analyzed and evaluated, in a sample of facilities used for preparation of mixtures for oncological therapeutic treatment, belonging to the National Network of Authorized Providers; regarding the type and level of infrastructure of control and frequency of associated exposure. The results of the evaluation reveal a great variety of situations where, despite the existence of a regulation that defines the type and characteristics of the minimum containment required, gaps are observed in the observed level of control and consequent risk which personnel is exposed to. From the total number of facilities included in the study, only 7% have a level of control acceptable and close to the optimal that is expected, 43% present a control level that is regular and improvable through minor corrections. Meanwhile, the remaining 50% show a significant level of insufficiency; it is underlined that 36% of facilities evidence extreme occupational exposure conditions.

Citotoxicidad in vitro de extractos laticiferos de Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton y Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit / In vitro cytotoxicity of laticifers extracts from Calotropis procera (Aiton) WT and Pedilanthus tithymaloides (L) Poit

In order to assess the anticancer action of extracts obtained by latex from Calotropis procera and Pedilanthus tithymaloides, samples were collected from adult plants. Soluble proteins were extracted with 16 uL of 50 mM sodium acetate pH 5/ug integral latex and centrifugation at 16,000 x g for 15 min, the supernatant was named "latex crude extract" (LCE). The "latex methanolic extract" (LME) was obtained on dried latex. Both extracts were tested in vitro by cytotoxic and cytostatic activity in Jurkat cell cultures. Cellular viability, proliferation, necrosis and apoptosis were evaluated. LCE and LME of C. procera were found with cytotoxic and cytostatic activity after 24 incubation hours (p < 0,05) with doses from 1ug/mL. The LCE and LME of P. tithymaloides presented cytotoxic effect (p < 0,05) from 50 ug/mL and from 1ug/mL, respectively.

Con el objetivo de evaluar el potencial anticanceroso de extractos de látex de Calotropis procera y Pedilanthus tithymaloides se colectaron muestras de plantas adultas. Las proteínas solubles fueron extraídas con 16 uL de acetato de sodio 50 mM pH 5/ug de látex integral y centrifugación a 16.000 x g durante 15 min, denominándose al sobrenadante “extracto crudo de látex” (ECL). El “extracto metanólico de látex” (EML) se obtuvo sobre látex deshidratado. Ambos extractos fueron probados en su actividad citotóxica y citostática in vitro sobre cultivos de células Jurkat. Se realizaron estudios de viabilidad, proliferación, necrosis y apoptosis celular. El ECL y el EML de C. procera presentaron actividad citotóxica y citostática después de 24 y 48 horas de incubación (p < 0,05) con dosis desde 1 ug/mL. Los ECL y EML de P. tithymaloides presentaron efectos citotóxicos (p < 0,05) a partir de 50 ug/mL y desde 1 ug/mL respectivamente.

Utilidad de la prueba de micronúcleos y anormalidades nucleares en células exfoliadas de mucosa oral en la evaluación de daño genotóxico y citotóxico / Utility micronucleus test and nuclear abnormalities in exfoliated cells of oral mucosa in the evaluation of genotoxic and cytotoxic damage

Los micronúcleos son fragmentos o cromosomas completos que quedan fuera del núcleo durante la mitosis; mediante su estudio se pueden evaluar los efectos de genotóxicos ambientales y ocupacionales. Esta prueba es ampliamente utilizada y es una alternativa eficaz, sencilla y económica para detectar la perdida de material genético. Por otra parte, la cavidad oral puede reflejar el estado de salud de los individuos, debido a que la mucosa que la recubre, puede presentar evidencias a nivel microscópico como macroscópico de cambios indicativos de enfermedad local sistémica o por exposición a sustancias tóxicas así como efectos secundarios por tratamientos. Dichas ventajas, favorecen su utilización en pruebas para evaluar genotóxicos o citotóxicos. La mucosa es una barrera protectora del resto del organismo, es un punto de contacto de agentes potencialmente peligrosos; por tanto, se torna susceptible de sufrir daños. El epitelio de revestimiento oral (60 por ciento) es estratificado no queratinizado formado por células con abundante citoplasma, permite la penetración de colorantes y facilita la observación e identificación de características morfológicas del núcleo y membrana celular. Además la mucosa tiene elevada capacidad proliferativa y aunque esta particularidad mantiene la población celular constante, por otro lado, se vuelve más vulnerable a daño al ADN. Esto cobra relevancia ya que el 90 por ciento del cáncer tienen origen epitelial, así que la mucosa oral es usada para monitorear eventos genotóxicos tempranos causados por cancerígenos inhalados o ingeridos. Este epitelio es de fácil acceso, poco invasivo, por lo que al tomar la muestra a los individuos, se les genera mínimo estrés. Por todo lo anterior, el epitelio oral es un tejido ideal para aplicar la técnica de micronúcleos y detección de anormalidades nucleares sin necesidad de cultivos celulares, lo que representa una oportunidad para realizar estudios epidemiológicos en poblaciones de alto riesgo.

Micronucleus are fragments or whole chromosomes that are outside the nucleus during mitosis. Through this study we can evaluate the environmental and occupational the genotoxic effects. This test is widely used because it is a very effective alternative, it is a simple, fast and inexpensive way to detect the loss of genetic material. Meanwhile a healthy oral cavity is evidenced because in the overlying mucosa changes indicative of local or systemic disease, toxic exposure and side effects of treatments can be observed. This favors their use in tests to assess the presence of genotoxins or cytotoxins. Although protective barrier from the rest of the body is the point of contact of potentially dangerous agents thus becoming susceptible to damage. Coating and oral epithelium (60 percent) are formed by stratified non-keratinized cells with abundant cytoplasm, allowing the absorption of dyes and facilitating microscopic observation and identification of nucleus and membrane morphological characteristics. It has a particularly proliferative capacity, and even though this particularity maintains constant cell population, on the other hand, becomes more vulnerable to DNA damage. This information is relevant as 90 percent of all cancers are of epithelial origin. Therefore, the oral mucosa is used to monitor early events caused by inhaled or ingested genotoxic carcinogens. Epithelium is easily accessible and minimally invasive, thereby generating less stress when samples are obtained from study participants. In view of the above, oral epithelium tissue is ideal for implementing micronucleus assay and for the detection of nuclear abnormalities without the need for cell cultures, which presents a unique opportunity for epidemiological studies in high-risk populations.

Antioxidant and antiproliferative activity of ethanolic and aqueous extracts from leaves and fruits juice Passiflora edulis / Actividad antioxidante y antiproliferativa de extractos etanólico y acuoso de las hojas y el jugo del fruto de Passiflora edulis

Background: Extracts from a variety of fruit trees have been used for therapeutic applications for preventing oxidative stress associated to chronic diseases. Objective: To investigate the antioxidant and antiproliferative activity of ethanolic and aqueous extracts from leaves and fruits of Passiflora edulis. Materials and methods: A preliminary phytochemical screening was performed; antioxidant activity was evaluated through DPPH assay, the scavenging activity for hydroxyl radical, antihemolytic activity and total phenolic content; cytotoxic and antiproliferative activities were evaluated by MTT and sulforhodamine B assays respectively in colon adenocarcinoma SW480 cells and their metastatic-derived SW620 cells. Results: Phytochemical analyses revealed presence of tannins, flavonoids and cardiotonic glycosides. Ethanolic extract from leaves showed the best antioxidant activity (EC50 = 0.096 mg/ml) in the DPPH assay and the juice (EC50 = 0.022 mg/ml) for the Hydroxyl free radical-scavenging activity. All extracts inhibited more than 98% the hemolysis induced by H2O2. The aqueous extract from leaves showed the highest cytotoxic activity against SW480 and SW620 cells. Conclusions: Findings from this study suggest that P. edulis is a potential source of phytochemical compounds with antioxidant and antiproliferative properties.

Antecedentes: extractos de varios árboles frutales se han utilizado en diferentes aplicaciones terapéuticas para prevenir el estrés oxidativo asociado a enfermedades crónicas. Objetivo: investigar la actividad antioxidante y antiproliferativa de extractos etanólico y acuosos de las hojas y del fruto de Passiflora edulis. Materiales y métodos: se realizó marcha fitoquímica preliminar, la actividad antioxidante se evaluó por DPPH, actividad de remoción de radicales hidroxilo, actividad antihemolítica y contenido fenólico total. En células de adenocarcinoma de colon SW480 y sus derivadas metastásicas SW620 se evaluó la actividad citotóxica y antiproliferativa por el método de MTT y sulforodamina B respectivamente. Resultados: el análisis fitoquímico reveló la presencia de taninos, flavonoides y glicósidos cardiotónicos. El extracto etanólico de las hojas mostró la mayor actividad antioxidante (EC50 = 0,096 mg/ml) por DPPH y el jugo (EC50 = 0,022 mg/ml) para remover el radical hidroxilo. Todos los extractos inhibieron más del 98% la hemólisis inducida por H2O2. El extracto acuoso de las hojas mostró la mayor actividad citotóxica y antiproliferativa contra células SW480 y SW620. Conclusiones: los hallazgos de este estudio sugieren que P. edulis es una fuente potencial de compuestos fitoquímicos con propiedades antioxidante y antiproliferativa.

[Utility of diffusion-weighted magnetic resonance imaging in severe focal traumatic brain injuries]. / Utilidad de la resonancia magnética potenciada en difusión en pacientes con lesiones focales por traumatismo craneoencefálico grave.

OBJECTIVE: To describe the apparent diffusion coefficient (ADC) in a series of severe traumatic brain injuries, their clinical and outcome features, and possible implications. DESIGN: A descriptive, observational case-series study was carried out. PATIENTS AND INTERVENTIONS: Patients with severe traumatic brain injuries (TBIs) admitted to the ICU were subjected to MRI study using a 1.5 T scanner. Diffusion-weighted images (DWMR) were obtained using the following echo-planar pulse sequence: TR 10000 ms, TE 126.9 ms, with b values 1000 s/mm2 in the three spatial dimensions. Combining the three sets of images, an isotropic image conforming a map of the mean ADCs was obtained. RESULTS: DWMR was performed in 23 patients with severe TBI admitted to the ICU between 2001 and 2004. In the MR images we selected 26 regions of interest (ROIs) where ADC was recorded. We observed a clear increase in diffusion in non-treated space-occupying lesions versus other types of injuries and the normal values. A poorer outcome was recorded in patients with lower ADC values. CONCLUSIONS: Mean ADC in the lesions was greater than the normal values and greater in contusions than in other types of injuries, as an expression of extracellular edema. ADCs were decreased in patients with a poor outcome, suggesting an association between ischemia and the patient prognosis.

Encefalopatía hepática fulminante vinculada a hiperintensidad de la corteza cerebral en la resonancia magnética / Fulminant hepatic encephalopathy vinculated with hyperintensity of the cerebral cortex in magnetic resonance

Background: The presence of manganese deposits in basal ganglia is an expression of chronic liver damage in neuroimaging, whereas diffuse edema of the white matter and hyperintensity of the internal capsule are seen in MRI in acute decompensation. In fulminant encephalopathy, changes in intensity in the cerebral cortex have been described, suggesting different pathogenic aspects. Purpose: To describe and try to interpret hyperintensities images of the cerebral cortex in fulminant hepatic encephalopathy. Case report: A 42 years old woman, with history of hyperthyroidism treated with propylthiouracil developed abdominal pain, choluria and general malaise, without fever. At admission, she had jaundice, elevated liver enzymes, and hyperammronemia of 481 ug. She developed progressive impairment of consciousness falling into a non-reactive coma with intermediate size and poorly reactive pupils, absence of oculocephalic reflexes and diminished osteotendinous reflexes, with indifferent plantar reflexes. Brain CT showed brain edema without focal lesions. The MRI showed hyperintense signal abnormalities in the fronto-parietal cortex in T2 and FLAIR with restriction in difussion sequency. She became brain dead. Comment: These exceptional images on MRI are considered an expression of cytotoxic damage, consistent with high levels of ammonium in fulminant hepatic encephalopathy. The swelling of astrocytes and cortical neurons is caused by the accumulation of intracellular glutamine, highly osmophilic, and explains the restriction on the difussion and lower values in the ADC. Interstitial edema would be part of the chronic forms by acquisition of compensatory mechanisms capable of preventing the accumulation of glutamine.

Antecedentes: La presencia de depósitos de manganeso en los núcleos basales es una expresión neuroimagenológica de daño hepático crónico, así como el edema difuso de la substancia blanca y la hiperintensidad de la cápsula interna con RM en descompensaciones agudas. En encefalopatías fulminantes se ha visualizado cambio de intensidad en la corteza cerebral, sugiriendo aspectos patogénicos distintos. Propósito: Describir e intentar interpretar imágenes hiperintensas de la corteza cerebral en una encefalopatía hepática fulminante. Caso clínico: Mujer de 42 años, hipertiroidea en tratamiento con propiltiouracilo. Consultó por dolor abdominal, coluria y compromiso del estado general, sin fiebre. Ingresó con ictericia, enzimas hepática elevadas, e hiperamonemia de 481 ug. Desarrolló progresivo compromiso de conciencia cayendo en un coma no reactivo, con pupilas de tamaño intermedio pobremente reactivas, ausencia de reflejos oculocefálicos y reflejos osteotendíneos apagados, con reflejos plantares indiferentes. TAC de cerebro mostró edema cerebral, sin lesiones focales. La RM definió áreas hiperintensas en la corteza fronto-parietal en T2 y FLAIR, que presentaban incremento de señal en la difusión. Evolucionó hasta la muerte cerebral. Comentario: Estas imágenes excepcionales en la RMson consideradas expresión de daño citotóxico, en concordancia con los altos niveles de amonio de una encefalopatía hepática fulminante. El edema de astrocitos y neuronas corticales se origina por la acumulación de glutamina intracelular, altamente osmofílica, y explica la restricción en la difusión y valores menores en el ADC. El edema intersticial, sería atributo de las formas crónicas, debido a la adquisición de mecanismos compensatorios capaces de impedir la acumulación de glutaminas.

Antitumoral activity of allicin from garlic / Actividad antitumoral de alicina de ajo

Epidemiological studies link increased garlic consumption with a reduced incidence of cancer in various human populations. Experimental carcinogenesis studies in animal models and in cell culture systems indicate that several allium-derived compounds exhibit inhibitory effects. To provide a better understanding of the effects of allium derivatives on the prevention of cancer, we examined allicin, the major component of garlic, for their effects on antitumoral activity in vitro and in L5178Y lymphoma bearing mice. We found that allicin decreased the growth of tumor cells whereas in vivo, the compound shown an antitumor effect in murine L5178Y lymphoma. Allicin enhanced the secretion of IL-2, IFN-gamma and TNF-alpha cytokines from mouse plasma. These cytokines are associated with the beneficial Th1 antitumor response, which is characteristic of effective cancer immunotherapies.

Los estudios epidemiológicos relacionan el aumento del consumo de ajo con una disminución en la incidencia de cáncer en diferentes poblaciones humanas. Los estudios experimentales de carcinogénesis en modelos animales y en los cultivos de células tumorales indican que varios compuestos derivados del ajo tienen efectos inhibitorios. A fin de proporcionar una mejor comprensión de los efectos de derivados del ajo en la prevención del cáncer, se evaluó la alicina el principal componente del ajo, en la actividad antitumoral in vitro y en ratones con linfoma. Se encontró que la alicina disminuyó el crecimiento de células tumorales, mientras que in vivo, el compuesto muestra un efecto antitumoral en el linfoma murino L5178Y. La alicina incrementó la secreción de las citocinas IL-2, interferón-gamma y TNF-alfa obtenidas de plasma de ratón con linfoma. Estas citocinas están asociadas con la respuesta antitumoral benéfica Th1, que es característica de inmunoterapias efectivas para el cáncer.

Cytogenotoxicity of Cymbopogon citratus (DC) Stapf (lemon grass) aqueous extracts in vegetal test systems

The lemon grass, Cymbopogon citratus (DC) Stapf, is an important species of Poaceae family commonly used in the folk medicine in many countries. The aim of this study was to investigate the cytotoxic and genotoxic effects of aqueous extracts from C. citratus leaves on Lactuca sativa (lettuce) root tip meristem cells by cytogenetic studies that have never been done before for lemon grass extracts. For this, lettuce seeds were treated for 72h with different concentrations of lemon grass aqueous extracts (5; 10; 20 and 30 mg/mL). The percentage of germination, root development and cellular behavior were analyzed, and the results showed that the highest concentration of aqueous extracts reduced the mitotic index, the seed germination and the root development of lettuce. The extracts have also induced chromosome aberrations and cellular death in the roots cells of L. sativa.

O capim-limão, Cymbopogon citratus (DC) Stapf, é uma importante espécie da família Poaceae com uma comum utilização na medicina popular em vários países. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos citotóxicos e genotóxicos do extrato aquoso das folhas de C. citratus em células meristemáticas de Lactuca sativa (alface) por meio de estudos citogenéticos, uma vez que estudos desta natureza não existem para extratos aquosos de capim-limão. Para isso, sementes de alface foram tratadas por 72h com diferentes concentrações de extratos aquosos feitos das folhas de capim-limão (5, 10, 20 e 30 mg/mL). O percentual de germinação, desenvolvimento radicular e o comportamento celular foram avaliados e os resultados mostraram que as concentrações mais elevadas dos extratos aquosos reduziram o índice mitótico, o percentual de germinação das sementes e desenvolvimento radicular da alface. Os extratos também induziram aberrações cromossômicas e morte celular nas células das raízes de L. sativa.