ABSTRACT
Introducción: Las técnicas de coloración histológica son útiles en el análisis ultraestructural de muestras tisulares, incluyendo el tejido gingival. Objetivo: Comparar la utilidad de tres métodos histoquímicos (hematoxilina-eosina, Masson Goldner y rojo sirio) en la identificación de elementos celulares y otros constituyentes del tejido gingival. Métodos: Estudio experimental in vitro que comprendió el análisis de tejidos gingivales de donantes sanos sin signos de inflamación gingival y con indicación de cirugía periodontal. Las muestras de encía se obtuvieron mediante gingivectomía, se procesaron e incluyeron en parafina, posteriormente se realizaron cortes con un micrótomo y se depositaron en portaobjetos de adhesión con polisina. Las muestras se agruparon y fueron teñidas con hematoxilina-eosina, Masson Goldner y rojo sirio, finalmente fueron visualizadas en un microscopio óptico Leica DM 750®. La lectura de los hallazgos fue realizada por patólogos orales. Resultados: La coloración hematoxilina-eosina evidencia elementos celulares y extracelulares del tejido epitelial y conectivo. Núcleos de color azul violeta, citoplasmas rosados, fibras de colágeno de matiz rosa claro, arteriolas y vénulas con túnica adventicia, media e íntima diferenciadas. La coloración Masson Goldner diferencia núcleos de coloración púrpura y citoplasma fucsia, presenta especificidad en identificar fibras de colágeno con tonalidad verde, distribuidas densa, homogénea y paralelamente en el tejido conectivo gingival. La tinción rojo sirio, permitió identificar las fibras de colágeno de color rosa brillante, mientras que el tejido epitelial y los vasos sanguíneos fueron de color amarillo. Conclusión: Cada coloración histológica evaluada en el presente trabajo tiene cierta afinidad y sensibilidad por estructuras celulares y componentes de la matriz extracelular específica. Su empleo es útil en el estudio de tejidos gingivales y podrían contribuir en el análisis de biopsias gingivales(AU)
Introduction: Histological staining techniques are useful in the ultrastructural analysis of tissue samples, including gingival tissue. Objective: Compare the usefulness of three histochemical methods (hematoxylin-eosin, Masson-Goldner and sirius red) for identification of cellular elements and other constituents of gingival tissue. Methods: An in vitro experimental study was conducted which included the analysis of gingival tissue from healthy donors without gingival inflammation signs and indication of periodontal surgery. The gum samples were obtained by gingivectomy, processed with paraffin, cut with a microtome and placed on Polysine adhesion slides. The samples were grouped, stained with hematoxylin-eosin, Masson Goldner and sirius red, and visualized under a Leica DM 750® microscope. Reading of the findings was performed by oral pathologists. Results: Hematoxylin-eosin staining found cellular and extracellular elements of the epithelial and connective tissue: violet-blue nuclei, pink cytoplasms, light rose collagen fibers, and arterioles and venules with differentiated tunica adventitia, media and intima. Masson-Goldner staining differentiated purple nuclei and fuchsia cytoplasm. It displayed specificity identifying green collagen fibers with dense, homogeneous and parallel distribution in the gingival connective tissue. Sirius red staining allowed identification of bright rose collagen fibers, whereas epithelial tissue and blood vessels were yellow. Conclusion: Each of the histological staining methods evaluated in the study shows a certain affinity with and sensitivity to cellular structures and components of the specific extracellular matrix. All three are useful for the study of gingival tissue and could contribute to the analysis of gingival biopsies(AU)
Subject(s)
Humans , Connective Tissue/injuries , Gingivectomy , Hematoxylin , In Vitro Techniques , CollagenABSTRACT
Abstract Background: Fibrosis is present in several pathologies associated with mammary carcinogenesis. Objective: To evaluate and quantify the fibrosis present in malignant and benign mammary neoplasms in bitches. Methods: Eighty-three samples were divided according to histopathological diagnosis into benign (n= 21) and malignant (n= 62) neoplasms. Haematoxylin-eosin and Masson's trichrome were used to locate the connective tissue, and the extent of fibrosis was assessed with image software. Results: Benign neoplasms were classified into adenomas (cystic, complex, and tubular), benign mixed tumor, and ductal and lobular hyperplasia. Malignant neoplasms were classified as carcinomas (complex, mixed tumor, in situ tubular, tubulopapillary, and solid). Grade I was the most prevalent histopathological class, followed by grade II and III. Fibrosis was classified as severe, moderate, or discrete. No significant (p >0.05) difference was observed for the percentage of fibrosis between malignant and benign group neoplasms. However, difference (p=0.028) was found for fibrosis percentage between histopathological subtypes of tumors. The benign subtype of lobular hyperplasia presented differences between cystic adenoma and benign mixed tumor. The in situ malignant tubular carcinoma subtype presented differences between solid and tubulopapillary carcinoma. Conclusions: Fibrosis in canine mammary tumors can be estimated with Massons's trichrome staining.
Resumen Antecedentes: La fibrosis está presente en diversas patologías asociadas con carcinogénesis mamaria. Objetivo: Analizar si existe una correlación entre fibrosis tisular y malignidad en tumores mamarios caninos. Métodos: 83 muestras de tejido mamario fueron divididas en masas benignas (n=21) y malignas (n=62), de acuerdo con sus características histopatológicas. En estas muestras se utilizaron las coloraciones de hematoxilina-eosina y tricromo de Masson para localizar el tejido conectivo y se analizó la proporción y cuantificación de fibrosis en los mismos con un software de imagen especializado. Resultados: Las masas mamarias benignas se diagnosticaron como adenomas (quístico, complejo y tubular), tumor mixto benigno, e hiperplasia ductal y lobular; las masas malignas, como carcinomas (complejo, tumor mixto, tubular in situ, túbulopapilar y solido). Los tumores grado I fueron los más prevalentes, seguidos por los grados II y III. La fibrosis se clasifico como discreta, moderada o severa. No se observó diferencia (p>0,05) en el porcentaje de fibrosis entre neoplasias benignas y malignas. No obstante, el porcentaje de fibrosis mostro diferencias (p=0,028) entre subtipos tumorales. La hiperplasia lobular fue diferente en relación a los adenomas quísticos y tumor mixto mamario. El subtipo maligno carcinoma tubular in situ fue diferente respecto a los carcinomas complejo, mixto maligno, sólido, y tubulopapilar. Conclusiones: La fibrosis en los tumores mamarios caninos se puede estimar por la tinción con tricromo de Masson.
Resumo Antecedentes: A fibrose participa em diversas patologias e ainda possui função adicional associada à carcinogênese mamária. Objetivo: Objetivou-se avaliar a fibrose e correlacionar com a malignidade nas neoplasias mamárias em cadelas. Métodos: 83 amostras foram divididas em dois grupos baseado no diagnóstico histopatológico: neoplasias benignas (n= 21) e neoplasias malignas (n= 62). Hematoxilina e eosina e Tricômico de Masson foram usadas para vizibilização de tecido conjuntivo e avaliação de fibrose através de programa de imagens. Resultados: As neoplasias benignas foram: adenoma (cístico, complexo e tubular), tumor misto benigno, hiperplasia ductal e lobular. As malignas foram: carcinoma complexo, em tumor misto maligno, tubular in situ, tubulopapilar e sólido. O grau histopatológico prevalente foi grau I, seguido do grau II e III. A fibrose nas neoplasias mamárias malignas foi classificada como severa, moderada e discreta. Não houve diferença significativa (p>0,05) na porcentagem de fibrose entre neoplasias malignas e benignas. A estatística revelou diferença significativa (p=0,028) na porcentagem de fibrose em relação ao diagnóstico histopatológico. O subtipo benigno hiperplasia lobular apresentou diferença entre o adenoma cístico e o tumor misto benigno. O subtipo maligno carcinoma tubular in situ apresentou diferença entre carcinoma complexo, misto maligno, sólido e tubulopapilar. Conclusões: A fibrose nos tumores mamários caninos pode ser estimada através da coloração de tricrômio de Masson.
