Phytochemistry and fungitoxic potential of extract and fractions of pouteria ramiflora on fusarium solani f. sp. phaseoli / Fitoquímica e potencial fungitóxico de extrato e frações de Pouteria ramiflora SOBRE Fusarium solani f. sp. phaseoli

Among the fungus that attack the common bean crop there is Fusarium solani f.sp. phaseoli (Fsp), causing major losses. Taking into account its importance, the objective of this work was to determine the secondary metabolites class and the potential fungicide of the Pouteria ramiflora leaves on Fsp. The ethanol extract was dissolved in methanol/water and partitioned successively with hexane, dichloromethane, chloroform, ethyl acetate and butanol, subjected to the chemical profile. The solutions were prepared in concentrations of 800, 1200, 1600, 2000 and 2400 µ g/mL and poured into Petri dishes; then, 0.5 cm disc of diameter with spores and mycelia of Fsp was deposited. These dishes were incubated in temperature of 25 ± 2 °C and the evaluations, performed by measuring the colonies diameter (five replications) until reaching the dishes border (three days) with a completely randomized experimental design. Through the Mycelial Index Growth Speed (MIGS) data, analysis of variance was performed and when significant, applied the regression analysis. The results indicated that all fractions and the extract have the phenolic compounds and/or derivatives as one of the major constituents except the hydroethanolic fraction. The extract and its fractions decreased the Fsp MIGS, in the same proportion in which concentrations were increased; the greatest reduction occurred in the butanol fraction at the concentration of 2400 µg/mL, with growth close to zero, indicating its potential use for the Fsp control, probably due to the presence of anthraquinones.

Entre os fungos que acometem a cultura do feijão está Fusarium solani f.sp. phaseoli, causando perdas na produtividade. Levando-se em consideração sua importância, o objetivo deste trabalho foi determinar a classe de metabólitos secundários e o potencial fungicida das folhas de curriola (Pouteria ramiflora) sobre F. solani, em condições de laboratório. O extrato etanólico foi dissolvido em metanol/água e particionado sucessivamente com hexâno, diclorometano, clorofórmio, acetato de etila e butanol, submetidos ao perfil químico. As soluções foram preparadas nas concentrações de 800, 1200, 1600, 2000 e 2400 µ g/mL evertidas em placas de petri (10 mL); em seguida, foi depositado um disco de 0,5 cm de diâmetro com esporos e micélio de F. solani. As placas foram incubadas a temperatura de 25 ± 2 °C e as avaliações, realizadas por meio da medição do diâmetro das colônias (cinco repetições) até atingir a borda da placa (três dias), com delineamento experimental inteiramente casualizado. Através dos dados do Índice de Velocidade de Crescimento Micelial (IVCM), foi realizada a análise de variância e quando significativa, aplicada a análise de regressão. Os resultados indicaram que todos as frações e o extrato possuem os compostos fenólicos e/ou derivados como um dos constituintes majoritários, exceto a fração hidrometanólica. O extrato e suas frações diminuíram o IVCM de F. solani, à medida que se aumentava as concentrações; a maior redução ocorreu na fração butanolica para a concentração de 2400 µ g/mL, com crescimento próximo a zero, indicando seu potencial de uso para controle de F. solani, provavelmente devido a presença de antraquinonas em sua composição.

Influência de diferentes extratos aquosos de plantas medicinais no desenvolvimento de Colletotrichum gloeosporioides e de Fusarium moniliforme / Influence of different aqueous extracts of medicinal plants in the development of Colletotrichum gloeosporioides and Fusarium moniliforme

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência dos extratos aquosos das plantas medicinais alecrim, alho, cravo-da-índia, sálvia, capim-limão, orégano ou pimenta-do-reino no desenvolvimento in vitro de Colletotrichum gloeosporioides e de Fusarium moniliforme. Os extratos foram obtidos pela infusão de 60 g de cada planta medicinal em 200 mL de água fervente. Cada extrato aquoso foi fracionado em concentrações de 0, 5, 10 e 20% (p:v) e incorporado ao meio de cultivo BDA (batata-dextrose-ágar) antes da esterilização em autoclave. Posteriormente, um disco de 8 mm de diâmetro de micélio fúngico de cada patógeno foi transferido para o centro de placas de Petri. Após 24, 48 e 96 horas de incubação em câmara de crescimento a 22 ± 2 ºC e fotoperíodo de 12 horas avaliou-se o crescimento micelial de F. moniliforme e de C. gloesporioides. No último período de incubação, também se quantificou o número de conídios de cada fungo. Para o teste de germinação adicionou-se nas cavidades de placas de teste Elisa, uma alíquota de 40 µL de cada extrato nas concentrações de 0, 5, 10 e 20%, e outra alíquota, da suspensão de conídios de cada patógeno. Após 24 horas a 22 ± 2 ºC, no escuro, a germinação dos conídios foi paralisada com a adição de 20 µL de lactofenol; avaliou-se então a porcentagem de germinação de conídios. Os experimentos foram conduzidos no delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 7 x 4 (extratos de plantas medicinais x concentrações) com quatro repetições. Para ambos os patógenos o extrato aquoso de alho e cravo-da-índia apresentaram maior ou total inibição do crescimento micelial, respectivamente, quando comparado com os demais extratos. Para C. gloeosporioides, o extrato de cravo-da-índia apresentou menor número de conídios em todas as concentrações testadas, e para o extrato de alho a 20%, também não foi observada a germinação de conídios. O extrato de alho foi eficiente em reduzir o número e a germinação dos conídios de F. moniliforme na concentração de 20%. Os extratos de alecrim, cravo-da-índia, orégano e pimenta-do-reino, nas maiores concentrações, tiveram efeito positivo na redução da produção de conídios deste mesmo fungo.

The objective of this study was to evaluate the influence of aqueous extracts of the medicinal plants rosemary, garlic, clove, sage, lemongrass, oregano and black pepper in the in vitro development of Colletotrichum gloeosporioides and Fusarium moniliforme. The extracts were obtained by infusing 60 g of each medicinal plant in 200 mL of boiling water. Each aqueous extract was fractionated in the concentrations of 0, 5, 10 and 20% (w:v) and incorporated into the PDA (potato dextrose agar) culture medium before sterilization by autoclaving. Later, an 8 mm diameter disc of each pathogen mycelium was transferred to the center of the Petri dishes. After 24, 48 and 96 hours of incubation in a growth chamber at 22 ± 2 ºC and a photoperiod of 12 hours, we evaluated the mycelial growth of F. moniliforme, and C. gloesporioides. In the last period of incubation, we quantified the production of conidia of each fungus. For the germination test, we added, into the wells of an ELISA test plates, a 40 µL aliquot of each extract at the concentrations of 0, 5, 10 and 20% and another aliquot of a suspension of conidia of each pathogen. After 24 hours at 22 ± 2 ºC in the dark, the germination of the fungi was stopped with the addition of 20 µL of lactophenol. Then, we evaluated the germination of conidia. The experiments followed a completely randomized 7 x 4 factorial design (medicinal plants x concentrations) with four replications. For both pathogens, the aqueous extract of garlic and clove showed a greater or total inhibition of the mycelial growth, when compared to the other extracts. For the C. gloeosporioides, the clove extract showed a lower number of conidia at all concentrations tested, and the garlic extract at 20% showed not conidial germination. The garlic extract was efficient to reduce the conidial number and germination of F. moniliforme at 20%. Extracts of rosemary, clove, oregano and black pepper, in the highest concentrations, had positive effect in reducing the production of spores of the same fungus.

Incidência e viabilidade de sementes crioulas de milho naturalmente infestadas com fungos em pré e pós-armazenamento / Incidence and viability of creole seeds of corn naturally infested with fungi in pre-and post-storage

Objetivou-se com este trabalho avaliar a qualidade sanitária e fisiológica de quatorze variedades de sementes de milho crioulas em pré e pós-armazenamento em embalagens de polietileno tereftalato (PET). Houve efeito das variedades e das épocas de avaliações sobre a incidência de fungos e germinação. Dentre a micobiota observada, Fusarium moniliforme (88%), Penicillium spp. (6,9%) e Aspergillus spp. (2,1%) tiveram a maior porcentagem de incidência. Após o armazenamento, houve decréscimo de F. moniliforme (69%) e aumento de Penicillium spp. (35%) e Aspergillus spp. (22%). A incidência desses fungos não comprometeu a qualidade fisiológica das sementes, que apresentaram elevadas porcentagens de vigor e germinação.

The objective of this study was to evaluate the sanitary and physiological quality of fourteen varieties of creole corn seeds in pre-and post-storage in packaging of polyethylene terephthalate (PET). Among the mycobiota observed Fusarium moniliforme (88%), Penicillium spp. (6,9%) and Aspergillus spp. (2,1%) had the highest incidence. After storage there was a slight decrease in the percentage of F. moniliforme (69%) and a increase of Penicillium spp. (35%) and Aspergillus spp. (22%). The incidence of these fungi did not compromise the physiological quality of seeds that showed high percentages of vigor and germination.

Evaluation of pathogenic fungi occurrence in traumatogenic structures of freshwater fish / Avaliação da ocorrência de fungos patogênicos em estruturas traumatogênicas de peixes fluviais

INTRODUCTION: Fungal infections in human skin, such as sporotrichosis, can occur after fish induced trauma. This work aimed to identify fungi in freshwater fish that are pathogenic to humans. METHODS: Extraction of dental arches from Serrassalmus maculatus (piranha) and Hoplias malabaricus (wolf fish), stings from Pimelodus maculatus (mandis catfish), dorsal fin rays from Plagioscion spp. (corvina) and Tilapia spp., for culture in Mycosel agar. Some cultures were submitted to DNA extraction for molecular identification by sequencing ITS-5.8S rDNA. RESULTS: Cultures identified most yeast as Candida spp., while sequencing also permitted the identification of Phoma spp. and Yarrowia lipolytica. CONCLUSIONS: While the search for S. schenckii was negative, the presence of fungus of the genera Phoma and Candida revealed the pathogenic potential of this infection route. The genus Phoma is involved in certain forms of phaeohyphomycosis, a subcutaneous mycosis caused by dematiaceous fungi, with reports of infections in human organs and systems. Traumatizing structures of some freshwater fish present pathogenic fungi and this may be an important infection route that must be considered in some regions of Brazil, since there are a large number of a fisherman in constant contact with traumatogenic fish.

INTRODUÇÃO: Infecções fúngicas na pele humana (como a esporotricose) podem se manifestar após traumatismos por peixes. O objetivo deste trabalho é procurar fungos patogênicos para o homem em peixes fluviais. MÉTODOS: Extração de arcadas dentárias Serrassalmus maculatus (piranha) e Hoplias malabaricus (traíra), ferrões de Pimelodus maculatus (mandis), raios da nadadeira dorsal de Plagioscion spp. (corvina) e Tilapia spp. para a realização do cultivo em agar Mycosel. Algumas culturas foram submetidas à extração de DNA para a identificação molecular pelo seqüenciamento da região ITS-5.8S do rDNA. RESULTADOS: As culturas mostraram que a maioria das leveduras era Candida spp. e o sequenciamento também permitiu a identificação de Phoma spp. e Yarrowia lipolytica. CONCLUSÕES: Embora a pesquisa para S. schenckii tenha sido negativa, a presença de fungos do gênero Phoma e Candida revela o potencial patogênico desta via de infecção. O gênero Phoma está envolvido em alguns casos de feohifomicoses, micoses subcutâneas causadas por fungos dematiáceos com relatos de infecções em órgãos e sistemas humanos. As estruturas traumatizantes de alguns peixes fluviais apresentam fungos patogênicos e esta pode ser uma importante via de infecção que deve ser considerada em algumas regiões do Brasil, uma vez que há um grande número de pescadores e peixes traumatogênicos.

Current relevance of fungal and trypanosomatid glycolipids and sphingolipids: studies defining structures conspicuously absent in mammals

Recently, glycosphingolipids have been attracting attention due to their role on biological systems as second messengers or modulators of signal transduction, affecting several events, which range from apoptosis to regulation of the cell cycle. In pathogenic fungi, glycolipids are expressed in two classes: neutral monohexosylceramides (glucosyl-or galactosylceramide) and acidic glycosylinositol phosphorylceramides (the latter class carries longer glycan chains). It is worth to mention that monohexosylceramides exhibit significant structural differences in their lipid moieties compared to their mammalian counterparts, whereas the glycosylinositol phosphorylceramides exhibit remarkable structural differences in their carbohydrate moieties in comparison to mammal glycosphingolipids counterpart. We observed that glycosylinositol phosphorylceramides are capable of promoting immune response in infected humans. In addition, inhibiting fungal glycosphingolipid biosynthetic pathways leads to an inhibition of colony formation, spore germination, cell cycle, dimorphism and hyphal growth. Other pathogens, such as trypanosomatids, also present unique glycolipids, which may have an important role for the parasite development and/or disease establishment. Regarding host-pathogen interaction, cell membrane rafts, which are enriched in sphingolipids and sterols, participate in parasite/fungal infection. In this review, it is discussed the different biological roles of (glyco) (sphingo) lipids of pathogenic/opportunistic fungi and trypanosomatids.

Recentemente, glicoesfingolipídeos têm atraído atenção devido ao seu papel na biologia celular como segundo-mensageiro ou moduladores da transdução de sinal, afetando vários eventos, desde apoptose até a regulação do ciclo celular. Em fungos patogênicos, existem duas classes de glicolipídeos: monohexosil ceramidas neutras (glucosil-ou galactosilceramida) e glicosilinositol fosforilceramidas (os quais apresentam cadeias de carboidratos mais longas). É importante enfatizar que as monohexosil ceramidas exibem diferenças estruturais nas suas porções lipídicas quando comparadas às de mamíferos, enquanto que glicosilinositol fosforilceramidas exibem diferenças estruturais marcantes em suas porções carboidratos em comparação aos glicoesfingolipídeos de mamíferos. Observamos também que glicosilinositol fosforilceramidas são capazes de promover resposta imune em indíviduos infectados. Além do mais, inibição das vias biossintéticas de glicoesfingolipídeos de fungos acarreta a inibição da formação de colônias, germinação de esporos, ciclo celular, dimorfismo e crescimento de hifas. Outros patógenos, como os tripanosomatídeos, também apresentam glicolipídeos únicos, os quais apresentam um papel importante para o desenvolvimento do parasita e/ou para o estabelecimento da doença. Em relação à interação hospedeiro-patógeno, os "membrane rafts", estruturas da membrana plasmática enriquecidas em esfingolipídeos e esteróis, têm participação fundamental na infecção do parasita/fungo. Nesta revisão, discutimos os diferentes papéis biológicos dos (glico) (esfingo) lipídeos de fungos patogênicos/oportunistas e de tripanosomatídeos.

Produção de fatores de virulência in vitro por espécies patogênicas do gênero Candida / Production of virulence factors in vitro by pathogenic species of the genus Candida

Avaliou-se, in vitro, a capacidade de crescimento em 39ºC e 42ºC, a produção de enzimas hidrolíticas e a atividade hemolítica de 21 cepas clínicas e de referência de sete espécies de Candida spp, Candida dubliniensis e Candida krusei demonstraram menor potencial de virulência e Candida albicans maior.

The growth capacity at 39ºC and 42ºC, production of hydrolytic enzymes and hemolytic activity of 21 clinical and reference strains of seven species of Candida spp were evaluated in vitro.Candida dubliniensis and Candida krusei demonstrated lower virulence potential and Candida albicans higher potential.

Estudo comparativo de inoculação do Lacazia loboi em camundongos BALB/c e B10. A, a partir da analise histopatológica, número de fungos e índice de viabilidade / Comparative study of inoculation Lacazia loboi in BALB / c mice and B10. A from the histopathological analysis of number and viability of fungi indices

O presente estudo teve por objetivos avaliar a susceptibilidade de camundongos isogenicos das linhagens BALB/c e B10.A a infeccao pelo fungo Lacazia loboi (L. loboi), mediante estudo do aspecto histopatologico das lesoes produzidas, numero de fungos e indice de viabilidade obtidos nos diferentes periodos de sacrificio e tambem verificar se o padrao de resposta aos parametros avaliados, nos animais isogenicos, e homogeneo, de modo a permitir correlacao dos resultados entre si. Ambos coxins plantares traseiros de quarenta camundongos BALB/c e quarenta e quatro B10.A foram intradermicamente inoculados com 0,03ml de uma suspencao fungica. A suspensao foi obtida a partir de um unico fragmento de lesao, coletado de um paciente portador da doenca de Jorge Lobo.

Resistência das plantas a moléstias fúngicas / Plant resistance to fungal diseases

As plantas apresentam resistência a moléstias causadas por fungos patogênicos em função da sua constituição genética e de falares do ambiente. Em programas de melhoramento genético, um dos principais objetivos é a obtenção de plantas com alto potencial de rendimento e com resistência às moléstias. Para aumentar a eficiência da seleção, é importante o conhecimento das bases genéticas da resistência. Como a variabilidade dos fungos é bastante ampla, há a necessidade da utilização de estratégias que reduzam a probabilidade de estabelecimento do patógeno nas culturas.

Plant resistance to fungic diseases is due to their genetic constitution and environmental factors. In breeding programs, one of the main objectives is to obtain high grainyield potenlial plants with resistance to the prevalent diseases. Knowledge of genetic basis of resistance is importam to increase selection efficiency and due to the wide variability of fungi there is the necessity of using different strategies to reduce the probability of pathogen estabtishment in crops.