A perspective of the prevalent H9N2 virus with a special focus on molecular and pathological aspects in commercial broiler chicken in Punjab, Pakistan / Perspectiva do vírus H9N2 prevalente com foco especial em aspectos moleculares e patológicos em frangos de corte comerciais em Punjab, Paquistão

Frequent outbreaks of avian influenza H9N2 virus in Pakistan revealed that this subtype has become endemic in the poultry industry and, besides economic losses, poses a threat to public health. The present study describes the molecular characterization and pathological alterations in naturally infected broiler chickens with the current H9N2 field strain and their phylogenomic dynamics. In this study, tissue samples (trachea, lung, kidney and intestine) from 100 commercial chicken flocks were collected from July 2018 to August 2019. Samples were subjected to molecular detection, phylogeny and subsequent pathological examination. The complete length of the HA gene was successfully amplified in five samples. Nucleotide sequencing revealed positive samples placed in a clade belonging to the B2 sub-lineage of the G1 genotype and categorized as LPAIV based on the amino acid sequence of the HA gene at the cleavage site (PAKSSR/G). Genetic analysis of the haemagglutinin (HA) gene revealed nt: 80.5%-99.5%; aa: 83.8%-98.9% homology to H9N2 strains reported previously from Pakistan, neighbouring countries, and (A/Quail/Hong Kong/G1/97). Gross lesions include a slight airsacculitis, mild hemorrhages, diffuse congestion and purulent exudate in tracheal mucosa, fibrinonecrotic cast in the trachea lumen and mild pulmonary congestion. Histopathological alterations include sloughing of epithelial cells and infiltration of inflammatory cells in the trachea, mononuclear cells (MNCs) infiltration, pulmonary congestion and exudate in the lumen of parabronchi, peritubular congestion in the kidneys with degeneration of tubular epithelial cells and degenerative changes in the intestinal villi epithelial cells and goblet cell hyperplasia. Immunohistochemistry analysis confirmed the presence of AIVH9N2 antigen in the trachea, lungs, kidney and intestine. Electron microscopy revealed ultrastructural changes in the trachea, including degenerated cilia, mitochondrial swelling and enlarged endoplasmic reticulum. Based on all essential analysis, the present study revealed the distribution of the H9N2 virus of G1 genotype in Punjab, Pakistan, with mild to moderate pathogenicity.

Surtos frequentes do vírus da gripe aviária H9N2 no Paquistão revelaram que esse subtipo se tornou endêmico na avicultura e, além das perdas econômicas, representa uma ameaça à saúde pública. O presente estudo descreve a caracterização molecular e as alterações patológicas em frangos de corte naturalmente infectados com a atual cepa H9N2 e sua dinâmica filogenômica. Neste estudo, amostras de tecidos (traqueia, pulmões, rim e intestino) de 100 lotes comerciais de frangos foram coletadas de julho de 2018 a agosto de 2019. As amostras foram submetidas à detecção molecular, filogenia e posterior exame patológico. O comprimento completo do gene HA foi amplificado com sucesso em cinco amostras. O sequenciamento de nucleotídeos revelou amostras positivas colocadas em um clado pertencente à sublinhagem B2 do genótipo G1 e categorizado como LPAIV com base na sequência de aminoácidos do gene da hemaglutinina (HA) no local de clivagem (PAKSSR/G). A análise genética do gene da HA revelou: nt = 80,5%-99,5%; aa = 83,8%-98,9% de homologia com cepas de H9N2 relatadas anteriormente no Paquistão e em países vizinhos (A/Quail/Hong Kong/G1/97). As lesões macroscópicas incluíram aerossaculite leve, hemorragias leves, congestão difusa e exsudato purulento na mucosa traqueal, cilindro fibrinonecrótico no lúmen da traqueia e congestão pulmonar leve. As alterações histopatológicas incluíram descamação de células epiteliais, infiltração de células inflamatórias na traqueia, infiltração de células mononucleares (MNCs), congestão pulmonar e exsudato no lúmen dos parabrônquios, congestão peritubular nos rins com degeneração das células epiteliais tubulares, alterações degenerativas nas células epiteliais das vilosidades intestinais e hiperplasia de células caliciformes. A análise imunoistoquímica confirmou a presença do antígeno AIVH9N2 na traqueia, nos pulmões, no rim e no intestino. A microscopia eletrônica revelou alterações ultraestruturais na traqueia, incluindo cílios degenerados, inchaço mitocondrial e retículo endoplasmático aumentado. Com base em todas as análises, o presente estudo revelou a distribuição do vírus H9N2 do genótipo G1 em Punjab, Paquistão, com patogenicidade de leve a moderada.

Influência da via hippo no reparo da mucosite oral quimicamente induzida em modelo murino submetida a tratamento com laser, geleia real ou própolis / Influence of the hippo pathway on the repair of chemically induced oral mucositis in a murine model subjected to treatment with laser, royal jelly or propolis

A via hippo é uma via de transdução de sinal altamente conservada que está implicada no desenvolvimento, homeostase e regeneração celular/tecidual. A YAP tem papel fundamental na via hippo uma vez que junto com a TAZ ativam fatores de transcrição que levam ao crescimento, diferenciação e migração celular. O mecanismo de fosforilação da YAP/TAZ pela LATS1/LATS2 cria um sítio de ligação para manter a YAP no citoplasma (fosforilada) impedindo suas funções a nível nuclear. Diante das importantes funções desta via no reparo e crescimento tecidual, esta pesquisa avaliou se a via hippo exerceu influência na resposta ao tratamento da MO através da expressão das proteínas YAP e LATS2 em mucosite oral (MO) quimicamente induzida pelo 5- fluoracil (5-FU), em modelo murino, tratada com própolis (P), geleia real (GR) ou laser (L) comparadas ao grupo controle (C), sem tratamento. Foram utilizadas amostras de ratos machos wistar divididos nos seguintes grupos: C, P, GR e L (intraoral 6 J/cm2 ) separados em três tempos experimentais: dias 08, 10 e 14. O perfil de imunomarcação foi feito por escores padronizados entre 0 a 3 levando em consideração a marcação nuclear e/ou citoplasmática. Na análise de imunomarcação da YAP, no dia 08, o grupo controle obteve os escore 0 e 1 na maioria das amostras, já nos dias 10 e 14 a maior parte das amostras obteve os escore 2 e 3. Nos grupos experimentais (L, GR e P), o escore 2 prevaleceu em todos os tempos experimentais. Para LATS2 houve prevalência do escore 2 tanto no grupo controle quanto nos grupos teste em todos os tempos experimentais. Em relação a análise estatística da imunoexpressão da proteína YAP, verificou-se diferença estatítica significativa (p= 0,020), apenas no dia 08 entre o grupo controle comparado aos grupos experimentais (L, GR e P). Já para LATS2 nenhuma diferença estatística foi encontrada. Na avaliação estatística dos diferentes tempos experimentais dentro um mesmo grupo, só foi encontrada diferença estatística significativa no grupo laser e apenas para LATS2 (p=0,025). Adicionalmente foi realizada a correlação de spearman, entre YAP e LATS2 para todos os grupos, porém não houve associação estatística significativa. A maior imunoexpressão de YAP e LATS2 (escores 2 e 3) observada nos grupos experimentais, indica que a via hippo é ativada e parece influenciar o processo de reparo nas mucosites orais quimioinduzidas e tratadas pelos diferentes métodos (AU).

The hippo pathway is a highly conserved signal transduction pathway that is implicated in cell/tissue development, homeostasis and regeneration. YAP plays a key role in the hippo pathway since, together with TAZ, they activate transcription factors that lead to cell growth, differentiation and migration. The YAP/TAZ phosphorylation mechanism by LATS1/LATS2 creates a binding site to keep YAP in the cytoplasm (phosphorylated) preventing its functions at the nuclear level. Given the important functions of this pathway in tissue repair and growth, this research evaluated whether the hippo pathway exerted influence on the response to OM treatment through the expression of YAP and LATS2 proteins in oral mucositis (OM) chemically induced by 5-fluororacil (5- FU), in a murine model, treated with propolis (P), royal jelly (GR) or laser (L) compared to the control group (C), without treatment. Samples of male Wistar rats divided into the following groups were used: C, P, GR and L (intraoral 6 J/cm2) separated into three experimental times: days 08, 10 and 14. The immunostaining profile was performed by standardized scores between 0 to 3 taking into account nuclear and/or cytoplasmic labeling. In the YAP immunostaining analysis, on day 08, the control group obtained scores 0 and 1 in most samples, while on days 10 and 14 most samples obtained scores 2 and 3. In the experimental groups (L, GR and P), score 2 prevailed at all experimental times. For LATS2 there was a prevalence of score 2 both in the control group and in the test groups at all experimental times, showing a very heterogeneous expression. Regarding the statistical analysis of YAP protein immunoexpression, there was a statistically significant difference (p= 0.020), only on day 08 between the control group compared to the experimental groups (L, GR and P). As for LATS2, no statistical difference was found. In the statistical evaluation of the different experimental times within the same group, a statistically significant difference was only found in the laser group and only for LATS2 (p=0.025). Additionally, the Spearman correlation was performed between YAP and LATS2 for all groups, but there was no statistically significant association. The greater immunoexpression of YAP and LATS2 (scores 2 and 3) observed in the experimental groups indicates that the hippo pathway is activated and seems to influence the repair process in chemoinduced oral mucositis treated by different methods (AU).

Câncer de pele não melanoma: revisão integrativa / Non-melanoma skin cancer: an integrative review

Introdução: O câncer de pele não melanoma compeende grupo de neoplasias com alta incidência na população mundial. É dividido em carcinoma basocelular e de células escamosas. Por ser de grande prevalência, entender o processo de oncogênese e a relação com íons, proteínas e receptores celulares no câncer de pele não melanoma pode contribuir para que novas terapêuticas sejam avaliadas. Objetivo: Entender o processo da oncogênese dos tumores de pele não melanomas e sua relação com a imunolocalização do IP3R. Métodos: Revisão integrativa da literatura com síntese de evidências. A base de dados foi o PubMed; a estratégia de busca: "carcinoma espinocelular, AND/ OR carcinoma basocelular, AND/OR IP3R, AND/OR imunoistoquímica". Foram considerados para revisão os trabalhos publicados entre 2018 e 2023. Foram incluídos 40 trabalhos, integralmente lidos e resumidos. Resultados: Câncer de pele não melanoma são os tumores malignos mais comuns em todo o mundo, sendo 75-80% o carcinoma basocelular, e até 25% o de células escamosas. As interações moleculares de forma geral, envolvem grande participação de moléculas supressoras tumorais, assim como de procto-oncogenes. Além disso, canais iônicos voltagem dependente controlam o fluxo citosólico de íons, dentre eles o cálcio. O IP3R (receptor do fosfatidil inositol-3) permite a saída de cálcio do retículo endoplasmático para que seja utilizado pela célula para atividades fisiológias como proliferação, angiogênese, motilidade e capacidade de invasão. Conclusão: O IP3R, pelas características de expressão imunoistoquímica, parece estar relacionado também, à fisiopatologia do câncer de pele não melanoma.

Introduction: Non-melanoma skin cancer comprises a group of neoplasms with a high incidence in the world population. It is divided into basal cell carcinoma and squamous cell carcinoma. As it is highly prevalent, understanding the process of oncogenesis and the relationship with ions, proteins and cellular receptors in nonmelanoma skin cancer can contribute to the evaluation of new therapies. Objective: To understand the oncogenesis process of non-melanoma skin tumors and its relationship with the immunolocalization of IP3R. Methods: Integrative literature review with evidence synthesis. The database was PubMed; the search strategy: "squamous cell carcinoma, AND/OR basal cell carcinoma, AND/OR IP3R, AND/OR immunohistochemistry". Works published between 2018 and 2023 were considered for review; 40 works were included, fully read and summarized. Results: Non-melanoma skin cancer is the most common malignant tumor worldwide, with 75-80% being basal cell carcinoma, and up to 25% being cell carcinoma. Molecular interactions in general involve a large participation of tumor suppressor molecules, as well as procto-oncogenes. Furthermore, voltage-dependent ion channels control the cytosolic flow of ions, including calcium. The IP3R (phosphatidyl inositol-3 receptor) allows the exit of calcium from the endoplasmic reticulum so that it can be used by the cell for physiological activities such as proliferation, angiogenesis, motility and invasion capacity. Conclusion: The IP3R, due to its immunohistochemical expression characteristics, appears may also be related to the pathophysiology of nonmelanoma skin cancer.

Influência da via hippo em carcinomas de células escamosas de língua oral / Influence of the hippo pathway on oral tongue squamous cell carcinomas

O carcinoma de células escamosas de língua oral (CCELO) apresenta altas taxas de morbidade e mortalidade. Apesar dos progressos alcançados nesta área, os pesquisadores continuam em busca de biomarcadores moleculares que tenham valor preditivo no prognóstico dos pacientes e que possibilitem o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Neste contexto, várias pesquisas têm destacado o papel da via Hippo com esta finalidade. Portanto, esta pesquisa teve como objetivo avaliar se as proteínas relacionadas à Via Hippo, LATS2 e YAP1, exercem alguma influência sobre o comportamento biológico dos CCELOs. A amostra foi constituída por 26 casos de CCELO e 8 casos de mucosa oral normal como controle. Para avaliar a morfologia dos CCELOs foram utilizadas as gradações propostas pela OMS (2005) e por Almangush et al. (2014). O perfil imunoistoquímico de LATS2 e YAP1 foi avaliado por escores (0-3), com base na sua imunoexpressão em localização intracelular (núcleo e/ou citoplasma) e distribuição epitelial. Para a análise entre os parâmetros estudados foram realizados os testes estatísticos Qui-quadrado de Pearson e Exato de Fisher. A análise de sobrevida foi realizada através do método de Kaplan Meier e do teste log-rank. Para todas as avaliações foram considerados valores significativos com p<0,05. Foi observada alta expressão da LATS2 tanto em mucosa oral normal (100%) quanto na maioria dos CCELOs (73,1%), sem diferença estatística significativa (p=0,160). Foi possível evidenciar o aumento da imunoexpressão da YAP nos casos de CCELO em comparação à mucosa oral normal (p<0,001). Verificou-se ainda que a baixa expressão da LATS2 foi associada com menores taxas de sobrevida livre da doença (p=0,039). Além disso, constatou-se que a elevada expressão da YAP foi associada à classificação de alto risco do modelo BD (p=0,034), sugerindo que a imunoexpressão desta proteína pode estar associada a TEM e invasão celular em CCELO. A elevada expressão de ambas as proteínas, na maioria dos CCELOs, sugere que outras vias de sinalização, além da regulação através da LATS2, podem estar induzindo a expressão nuclear de YAP nestes tumores. Portanto, conclui-se que a via Hippo pode influenciar o comportamento biológico dos CCELOs (AU).

Oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC) has high morbidity and mortality rates. Despite the progress made in this area, researchers continue to search for molecular biomarkers that have predictive value in the prognosis of patients and allow the development of new therapeutic strategies. In this context, several studies have highlighted the role of the Hippo pathway for this purpose. Therefore, this research aimed to evaluate whether the proteins related to the Hippo pathway, LATS2 and YAP1, have some influence on the OTSCC biological behavior. The sample consisted of 26 OTSCC cases and 8 normal oral mucosa cases as control. For the morphological assessment of OTSCC, the gradations proposed by the WHO (2005) and by Almangush et al. (2014) were performed. The immunohistochemical profile of LATS2 and YAP1 was evaluated by scores (0-3), based on their immunoexpression in intracellular location (nucleus and/or cytoplasm) and epithelial distribution. Pearson's Chi-square and Fisher's Exact statistical tests were performed for the analysis of the studied parameters. Survival analysis was performed using the Kaplan-Meier method and the log-rank test. For all evaluations, values with p<0.05 were considered significant. High expression of LATS2 was observed both in normal oral mucosa (100%) and in most OTSCC (73,1%), with no statistically significant difference (p=0,160). It was possible to observe the increase in YAP immunoexpression in cases of OTSCC compared to the normal oral mucosa (p<0.001). It was also found that the LATS2 low expression was associated with lower rates of disease-free survival (p=0.039). Furthermore, YAP high expression was found associated with the BD model's high-risk classification (p=0.034), suggesting this protein immunoexpression may be associated with EMT and cell invasion in OTSCC. The high expression of both proteins in most OTSCC suggests that other signaling pathways, in addition to regulating through LATS2, may be inducing the nuclear YAP expression in these tumors. Therefore, it is concluded that the Hippo pathway can influence the OTSCC biological behavior (AU).

Recorrência do ameloblastoma: análise de fatores clínicoradiográficos e imunoexpressão de hMSH2, hMLH1 e KI-67 / Ameloblastoma recurrence: analysis of clinical-radiographic factors and immunoexpression of hMSH2, hMLH1 and KI-67

Introdução: O ameloblastoma é uma neoplasia odontogênica benigna, que apresenta altas taxas de recorrência pós-operatória. Diversos estudos mostram a relação entre as características clínico-patológicas e as modalidades de tratamento na recorrência do ameloblastoma. Os mecanismos moleculares envolvidos com a etiopatogenia deste tumor são pouco conhecidos, e apesar de alterações no Sistema Mismatch favorecerem o desenvolvimento de diferentes neoplasias humanas, a importância destes no desenvolvimento do ameloblastoma ainda permanece pouco compreendido. Objetivo: Identificar os fatores clínico-patológicos associados à recorrência do ameloblastoma, bem como investigar o papel da imunoexpressão das proteínas hMLH1, hMSH2 e Ki-67 na recidiva desses tumores odontogênicos. Metodologia: Tratou-se de um estudo descritivo, transversal e restrospectivo, com uma amostra constituída por 22 casos de ameloblastomas recidivantes e 22 casos não-recidivantes. A análise imunoistoquímica foi realizada de forma quantitativa, considerando a localização celular (nuclear) das proteínas estudadas. O teste de McNemar foi utilizado para comparar as variáveis entre lesões da 1ª biópsia e recorrentes de AMB. A sobrevida livre de recorrência foi analisada pelo método de Kaplan-Meier e as funções de sobrevida foram comparadas de acordo com as variáveis pelo teste log-rank. Resultados: O gênero mais acometido foi o feminino (n=24; 54,5%), com média de idade de acometimento de 39,1 ± 19,8 anos, sendo 45,5% (n=20) leucodermas. A região posterior de mandíbula foi a mais frequente no grupo recidivante (n=18, 81,8%) e também para os casos que não apresentaram recidivas (n=16, 72,8%). O tempo livre de recorrência foi de 50,0 (34,5 ­ 63,6) meses. Foram fatores significativamente associadas à recorrência dos ameloblastomas: presença de expansão da cortical (p=0,0089), ausência de reconstrução óssea (p=0,018), tratamento conservador (p=0,021), perda de imunoexpressão de hMSH2 (p=0,006) e hMLH1 (p=0,038) e forte imunoexpressão de Ki-67 (p=0,029). Conclusão: Baseado nos achados desta pesquisa, aspecto radiográfico, modalidade do tratamento e imunoexpressão de proteínas do Sistema Mismatch e Ki-67 podem ser utilizados como indicadores para a recorrência em ameloblastomas (AU).

Introduction: Ameloblastoma is a benign odontogenic neoplasm, which has high rates of postoperative recurrence. Several studies show the relationship between clinicopathological characteristics and treatment modalities in ameloblastoma recurrence. The molecular mechanisms involved in the etiopathogenesis of this tumor are little known, and although changes in the Mismatch System favor the development of different human neoplasms, their importance in the development of ameloblastoma still remains poorly understood. Objective: To identify clinical and pathological factors associated with ameloblastoma recurrence, as well as to investigate the role of immunoexpression of hMLH1, hMSH2 and Ki-67 proteins in the recurrence of these odontogenic tumors. Methodology: This was a descriptive, cross-sectional and retrospective study, with a sample consisting of 22 cases of recurrent ameloblastoma and 22 non-recurrent cases. Immunohistochemical analysis was performed quantitatively, considering the cellular (nuclear) location of the studied proteins. McNemar's test was used to compare variables between 1st biopsy and recurrent AMB lesions. Recurrence-free survival was analyzed using the Kaplan-Meier method and survival functions were compared according to variables using the log-rank test. Results: The most affected gender was female (n=24; 54.5%), with a mean age of involvement of 39.1 ± 19.8 years, 45.5% (n=20) being white. The posterior region of the mandible was the most frequent in the relapsed group (n=18, 81.8%) and also for the cases that did not present recurrences (n=16, 72.8%). Recurrence-free time was 50.0 (34.5 ­ 63.6) months. Factors significantly associated with recurrence of AMBs were: presence of cortical expansion (p=0.0089), absence of bone reconstruction (p=0.018), conservative treatment (p=0.021), loss of hMSH2 immunoexpression (p=0.006) and hMLH1 (p=0.038) and strong Ki-67 immunoexpression (p=0.029). Conclusion: Based on the findings of this research, radiographic appearance, treatment modality and immunoexpression of proteins from the Mismatch System and Ki-67 can be used as indicators for recurrence in ameloblastomas (AU).

Estudo comparativo da expressão de ALDH1 em líquen plano oral, lesão liquenoide e leucoplasia em epitélio e no infiltrado inflamatório liquenoide / Comparative study of ALDH1 expression in oral lichen plane, lichenoid lesion and leucoplasia in epithelial and lichenoid inflammatory infiltrate

O líquen plano oral é uma doença potencialmente maligna e compartilha muitas características clínicas e histopatológicas com outras lesões semelhantes. O ALDH1 é um biomarcador específico na identificação de células-tronco, porém seu papel nas células estromais do infiltrado inflamatório imune não foi explorado. O objetivo deste estudo foi investigar a imunoexpressão de ALDH1 em células epiteliais e estromais de Líquen Plano Oral e outras lesões liquenóides. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) sob o parecer no 5.410.374, CAAE: 52763021.0.0000.5149. Foi realizada uma busca no arquivo do laboratório de Patologia Oral e Bucomaxilofacial da UFMG em um período de 10 anos (2011 ­ 2021) de casos diagnosticados como Líquen Plano oral, Lesão Liquenoide, Leucoplasia e Processo Inflamatório Inespecífico (controle). Foram selecionados 633 casos e após a utilização dos critérios de inclusão e exclusão, a expressão imuno-histoquímica do ALDH1 foi investigada em 64 casos, 16 de cada diagnóstico. O ALDH1 foi avaliado tanto no epitélio quanto nas células estromais do infiltrado inflamatório liquenóide. Um percentual de 5% de células ALDH1+ foi considerado positivo no epitélio. A avaliação das células estromais foi feita de forma semiquantitativa. Os campos foram classificados em escores, segundo os critérios: 1 (0 a 10%); 2 (11 a 50%) e 3 (mais de 51%). O valor médio da soma dos campos foi o escore final. Diferenças estatísticas entre os grupos foram investigadas e a significância foi estabelecida considerando p < 0,05. A análise estatística foi realizada utilizando o software: SPSS ­ Statistical Package for the Social Science® (versão 26.0, 2019, Chicago, IL, USA). A expressão de ALDH1 no epitélio foi baixa em todos os grupos sem diferença entre eles, embora a maioria dos casos tenha sido encontrada na amostra de inflamação crônica inespecífica. O escore de células ALDH1+ na lâmina própria foi maior para LPO (2,0), seguido por Leucoplasia (1,3), LLO (1,2) e processo inflamatório inespecífico (1,1) (p<0,05). A imunoexpressão do ALDH1 no epitélio de lesões com um infiltrado liquenóide não mostrou uma ferramenta contributiva, porém o ALDH1 em células estromais no infiltrado inflamatório do líquen plano merece atenção, pois pode estar envolvido no complexo processo de regulação imune associado à patogênese desta doença.

Oral lichen planus (OLP) is a potentially malignant lesion and shares clinical and histopathological features with similar lesions. ALDH1 is a specific biomarker in the identification of stem cells, but its role in the stromal cells of the immune inflammatory infiltrate has not been elucidated yet. The aim of this study was to investigate the ALDH1 immunoexpression in epithelial and stromal cells from OLP and other lichenoid lesions. The study was approved by the Research Ethics Committee of the Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) under protocol no 5.410.374, CAAE: 52763021.0.0000.5149. An search of the biopsy records of the Oral and Maxillofacial Pathology Laboratory at UFMG in a period of 10 years (2011 - 2021) was performed including the diagnosis of Oral Lichen Planus (OLP), Oral Lichenoid Lesion (OLL), Oral Leukoplakia (OLK) and Unspecific Inflammatory Process (UIP) ­ as control. Initially were obtained 633 cases. After inclusion and exclusion criteria a total of 64 cases were investigated for the ALDH1 immunohistochemical expression, 16 cases of each diagnose. ALDH1 was evaluated both in the epithelium and in the stromal cells. A percentage of ≤5% of ALDH1+ cells was considered positive in the epithelium. The evaluation of stromal cells was performed semi-quantitatively. The fields were classified into scores, according to the following criteria: 1 (0 to 10%); 2 (11 to 50%) and 3 (more than 51%). The mean value of the sum of the fields represented the final score. Statistical differences between groups were investigated and significance was established considering p < 0.05. Statistical analysis was performed using the software: SPSS ­ Statistical Package for the Social Science® (version 26.0, 2019, Chicago, IL, USA). The expression of ALDH1 in the epithelium was low in all groups with no difference between them, although most cases were found in the UIP samples. ALDH1+ cells in the lamina propria was higher for OLP (2.0) than others followed by OLK (1.3), OLL (1.2) and UIP (1.1) (p<0.05). The ALDH1 immunoexpression in the epithelium of lichenoid diseases did not prove to be contributory to show a malignant potential, but ALDH1 in stromal cells from OLP infiltrate might be involved in the complex immune regulation process associated with the pathogenesis of this disease.

Perfil do componente mioepitelial em neoplasias de glândulas salivares / Myoepithelial component profiling in salivary gland tumors

As neoplasias de glândulas salivares são um grupo heterogêneo de lesões que correspondem aproximadamente a 3-6% dos casos de neoplasias de cabeça e pescoço e apresentam características histológicas distintas. A grande variação no padrão histológico das lesões de glândulas salivares tem sido atribuída à presença de células mioepiteliais, que apresentam padrões distintos em cada neoplasia. O objetivo deste trabalho é avaliar a expressão de um painel de proteínas do citoesqueleto, adesão e proliferação celular, sendo elas: actina de músculo liso (AML), calponina, caldesmon, citoceratina 14 (CK14), E-caderina, vimentina, beta-catenina, Ki-67 e p63 em neoplasias malignas das glândulas salivares utilizando a técnica de imunoistoquímica (IHQ). Foram selecionadas retrospectivamente, um total de 15 amostras, sendo 08 amostras de carcinoma ex-adenoma pleomórfico, 04 de carcinoma mioepitelial, 03 de adenocarcinoma de células basais. Os casos foram analisados e os resultados, obtidos através da imumoistoquímica, comparados com os dados demográficos, clínicos e patológicos. A expressão das proteínas foi analisada qualitativamente e semi-quantitativamente, sendo classificada em negativo, positivo focal, positivo difuso ou positivo abundante. A actina de músculo liso (AML) foi observada em dois casos de adenocarcinoma de células basais (ACCB), três de carcinoma mioepitelial (CAME) e três de carcinoma ex-adenoma pleomórfico (CXAP). A calponina foi expressa em dois casos, tanto de ACCB quanto de CAME e em três casos de CXAP. A proteína caldesmon foi observada em dois casos de ACCB, os quatros casos de CAME e sete casos de CXAP. Três casos de ACCB e de CAME e cinco de CXAP apresentaram expressão de CK14. A E-caderina foi observada em todos os casos dos três tipos tumorais, assim como a beta-catenina. A proteína vimentina foi expressa em todos os casos de ACCB e CAME, e predominantemente nos casos de CXAP. Poucos casos, tanto de ACCB, CAME e CXAP apresentaram positividade para Ki-67. A proteína p63 foi observada em todos os casos de ACCB e CAME, sendo pouco expressa em CXAP. A análise de clusterização hierárquica demonstrou a formação de dois clusters, sendo um deles predominantemente composto por CXAP. A comparação da expressão das proteínas com as características demográficas, clínicas e patológicas demonstrou associação entre a perda de expressão das proteínas CK14 e p63 e a ocorrência de metástase. Os resultados sugerem que a expressão das proteínas beta-catenina, E-caderina, caldesmon e vimentina apresentou-se de forma muito similar, sugerindo um perfil equivalente de expressão entre essas neoplasias derivadas do ducto intercalar. Já a ausência de expressão de AML e calponina parece estar associada à separação dos grupos na análise de clusterização, sugerindo que deve ser considerada como um fator na diferenciação tumoral.

Salivary gland neoplasms are a heterogeneous group of lesions that account for approximately 3-6% of head and neck tumors, with distinct histological characteristics. The variation in the histological pattern of salivary gland lesions has been attributed to the presence of myoepithelial cells, that present different patterns in each neoplasm. The aim of the study was to evaluate the expression of a panel of cytoskeletal, cell adhesion and cell proliferation proteins, namely: smooth muscle actin (SMA), calponin, caldesmon, cytokeratin 14 (CK14), E-cadherin, vimentin, beta- catenin, Ki-67 and p63 in salivary glands malignant neoplasms, using immunohistochemical technique (IHC). Fifteen samples werer etrospectively selected, being 08 carcinoma ex-pleomorphic adenoma samples, 04 myoepithelial carcinoma samples, 03 basal cell adenocarcinoma samples. The immunohistochemical results were analyzed and compared with demographic, clinical and pathological data. Protein expression were qualitatively and semi-quantitatively analyzed and classified as negative and positive (focal, diffuse, or abundant). Smooth muscle actin (SMA) was observed in two cases of basal cell adenocarcinoma (BCAC), three cases of myoepithelial carcinoma (MECA) and three cases of carcinoma ex-pleomorphic adenocarcinoma (CXPA). Calponin was expressed in two cases of BCAC, two cases of MECA, and three cases of CXPA. Caldesmon protein was observed in two cases of BCAC, four cases of MECA and seven cases of CXPA. Three cases of BCAC and MECA and five of CXPA presented CK14 expression. E-cadherin was observed in all cases of the three tumor types, as well as beta-catenin. Vimentin protein was expressed in all BCAC and MECA cases, and predominantly in CXPA cases. Few cases of BCAC, MECA and CXPA were positive for Ki-67. p63 protein was observed in all cases of BCAC and MECA, and present low expression in CXPA. The hierarchical clustering analysis demonstrated the formation of two clusters, one of them being predominantly composed of CXPA. Protein expression comparison with demographic, clinical and pathological characteristics demonstrated an association between loss of expression of CK14 and p63 proteins and the occurrence of metastasis. The results suggest that the expression of beta-catenin, E-cadherin, caldesmon and vimentin proteins was very similar, suggesting an equivalent expression profile among these neoplasms derived from the intercalated duct of the salivary gland. The absence of SMA and calponin expression seems to be associated with the separation of groups in the clustering analysis, suggesting that it should be considered as a factor in tumor differentiation

Marcação imunoistoquímica de CDX2 e Ki67 no adenocarcinoma gástrico / CDX2 and Ki67 immunohistochemistry marking in gastric adenocarcinoma

Introdução: A proteína CDX2 é um fator de transcrição específico do intestino, que está presente no tecido gástrico apenas quando há uma metaplasia intestinal. A metaplasia intestinal é uma lesão precursora do adenocarcinoma gástrico. O Ki67 é um biomarcador de proliferação celular. Objetivo: Verificar a presença da proteína CDX2 no adenocarcinoma gástrico. Comparar a expressão da CDX2 entre os diferentes graus de diferenciação e entre os níveis de proliferação celular. Método: A partir de 62 blocos histológicos contendo amostras de adenocarcinoma gástricos (4 bem diferenciados, 30 moderadamente diferenciados e 28 pouco diferenciados), foi feita a construção de blocos multiamostrais (TMA). Procedeu-se a marcação imunoistoquímica com os anticorpos escolhidos e realizou-se a leitura da área positiva imunocoradas. Resultados: 31 amostras foram positivas para a CDX2 e 31 negativas, sem diferença significativa entres os graus de diferenciação (p = 0,576). 38 amostras foram classificadas como de baixo grau de proliferação celular e 24 como de alto grau. Não houve diferença estatística de grau de proliferação celular entre os graus de diferenciação (p = 0,676). O grau de proliferação celular variou dependendo da expressão da CDX2 (p = 0,036). Conclusão: A expressão da proteína CDX2 esteve presente em 50% dos adenocarcinomas gástricos. Não houve diferença estatística da expressão do CDX2 entres os graus de diferenciação do adenocarcinoma gástrico. A proliferação celular variou dependendo da expressão da CDX2, havendo um maior nível de proliferação celular nas amostras que apresentaram expressão positiva para CDX2

Background: CDX2 protein is an intestinal specific transcription factor that is present in the gastric tissue only when there is intestinal metaplasia. Intestinal metaplasia is a gastric adenocarcinoma precursor injury. Ki67 is a cell proliferation biomarker. Objective: Verify the presence of CDX2 protein in gastric adenocarcinoma. Compare the CDX2 expression between the differentiation degree groups and between the cell proliferation degrees. Methods: It was collected 62 paraffin blocks containing the gastric adenocarcinoma samples (4 well differentiated adenocarcinoma, 30 moderately differentiated and 28 poorly differentiated). It was made the tissue microarrays blocks (TMA), so it was proceeded to immunohistochemical staining with the anti-CDX2 and the anti-Ki67 antibodies and it was accomplished the read of the positive immune-stained area. Results: 31 samples were positive for CDX2 expression, and 31 were negative. There was no statistical difference of the CDX2 expression between the differentiation degree groups (p = 0.576). 38 samples were classified as low degree of cell proliferation and 24 as high degree. There was no statistical difference of the cell proliferation degree between the differentiation degree groups (p = 0.676). The degree of cell proliferation ranged depending on the CDX2 expression (p = 0.036). Conclusion: Protein CDX2 expression was observed in 50% of gastric adenocarcinoma samples. There was no statistical difference of the CDX2 expression between the differentiation degree groups. The cell proliferation ranged depending of CDX2 expression, with a higher index of cell proliferation in the positive CDX2 expression samples

Between prolene®, ultrapro® and bard soft® meshes which presents the best performance in the repair of the abdominal wall? / Dentre as telas prolene®, ultrapro® ebard soft® qual apresenta melhor desempenho no reparo da parede abdominal?

ABSTRACT Background: In the definition of the mesh to be used to correct hernias, porosity, amount of absorbable material and polypropylene should be considered in the different stages of healing process. Aim: To evaluate the inflammatory reaction in the use of macro and microporous meshes of high and low weight in the repair of defects in the abdominal wall of rats. Methods: Ninety Wistar rats (Rattus norvegicus albinus) were used. The animals were submitted to similar surgical procedures, with lesion of the ventral abdominal wall, maintaining the integrity of the parietal peritoneum and correction using the studied meshes (Prolene®, Ultrapro® and Bard Soft®). Euthanasia was performed at 30, 60 and 120 days after surgery. The abdominal wall segments were submitted to histological analysis using H&E, Masson's trichrome, immunohistochemistry, picrosirius red and tensiometric evaluation. Results: On the 120th day, the tensiometric analysis was superior with Ultrapro® macroporous mesh. The inflammatory process score showed a significant prevalence of subacute process at the beginning and at the end of the study. Microporous meshes showed block encapsulation and in macroporous predominance of filamentous encapsulation. Conclusion: The Ultrapro® mesh showed better performance than the others in healing process of the abdominal wall.

RESUMO Racional: Na definição da tela a ser utilizada na correção das hérnias deve-se considerar a porosidade, quantidade de material absorvível e polipropileno ou inabsorvível nas diversas fases da cicatrização. Objetivo: Avaliar a reação inflamatória das telas macro e microporosas de alta e baixa gramatura no reparo de defeito da parede abdominal de ratos. Método: Foram utilizados 90 ratos da raça Wistar (Rattus norvegicus albinus). Os animais foram submetidos a procedimentos cirúrgicos semelhantes, com lesão da parede abdominal ventral, mantendo a integridade do peritônio parietal e correção utilizando as telas Prolene®, Ultrapro® e Bard Soft®. Realizou-se a eutanásia aos 30, 60 e 120 dias de pós-operatório. Os segmentos da parede abdominal foram submetidos à análise histológica com H&E, tricômio de Masson, imunoistoquímica, picrosirius red e análise tensiométrica. Resultado: No 120º dia a análise tensiométrica mostrou superioridade da tela macroporosa Ultrapro®. O escore do processo inflamatório demonstrou prevalência significativa de processo subagudo no início e no final do estudo. As telas microporosas mostraram encapsulamento em bloco e as macroporosas encapsulamento predominantemente filamentar. Conclusão: A tela Ultrapro® mostrou melhor desempenho em relação às demais na cicatrização da parede abdominal.

A imunoistoquímica em pacientes com proliferação acinar atípica no câncer prostático / Immunohistochemistry in patients with atypical acinar proliferation in prostatic cancer

Na análise histopatológica do câncer prostático muitas vezes pode-se deparar com lesões duvidosas pseudoneoplásicas e inconclusivas. Avaliar sua prevalência através do uso da imunoistoquímica em pacientes com proliferação acinar atípica (PAAP) pode melhorar a eficácia diagnóstica. Este estudo retrospectivo incluiu pacientes com diagnóstico de PAAP e imunoistoquímica utilizando: AMACR, 34BE12 e p63. Foram analisados 1542 pacientes positivos para PAAP em 293 pacientes (19%). Não houve diferença significativa na eficiência dos três marcadores; a sensibilidade foi de 99,7%; 100% e 100%, e a especificidade de 79,4%; 89% e 83,5%, respectivamente. O valor preditivo positivo foi em 90,3%, 94,3% e 91,3%, e o negativo em 99,3%; 100% e 100%, respectivamente. A exiguidade da área atípica foi citada em 92 (12,9%) como dificuldade para o diagnóstico. A imunoistoquímica foi capaz de elucidar o diagnóstico em 83,5% dos casos e a prevalência de adenocarcinoma prostático foi de 52,2%.

In the histopathological analysis of prostate cancer, it is often possible to come across doubtful pseudoneoplastic and inconclusive lesions. Assessing its prevalence through the use of immunohistochemistry in patients with atypical acinar proliferation (PAAP) can improve diagnostic efficacy. This retrospective study included patients diagnosed with PAAP and immunohistochemistry using: AMACR, 34BE12 and p63. A total of 1542 PAAP positivity in 293 patients (19%) were analyzed. There was no significant difference in the efficiency of the three markers. Sensitivity was 99.7%; 100% and 100%, and the specificity of 79.4%; 89% and 83.5%, respectively. The positive predictive value was in 90.3%, 94.3% and 91.3%, and the negative in 99.3%; 100% and 100%, respectively. The smallness of the atypical area was mentioned by 92 (12.9%) as a difficulty for diagnosis. Immunohistochemistry was able to elucidate the diagnosis in 83.5% of the cases and the prevalence of prostate adenocarcinoma was 52.2%.

Evaluation of galectins 1 and 3 expression in canine melanoma / Avaliação da expressão das galectinas 1 e 3 no melanoma canino

Canine melanoma is a frequently-occuring neoplasm in dogs and presents as malignant and highly metastatic in this context, studies that contribute to the understanding of the tumor microenvironment in melanoma include the role of galectins. Galectins are proteins of the family of animal lectins that display carbohydrate recognition domains. Galectin-1 and galectin-3 are associated with neoplastic transformation, neoplastic cell survival, angiogenesis, immune system evasion, and metastasis. The goal of this study was to establish a correlation between expression patterns of galectin-1 and galectin-3 and the different degrees of aggressiveness of canine melanoma, as well as to determine serum concentration of galectin-3 in dogs with melanoma. Galectin-1 and galectin-3 expression was analyzed by immunohistochemistry in 30 canine melanomas, six melanocytomas and nine metastatic lymph nodes from patients whose primary tumors were also processed and analyzed. Serum samples from 30 dogs were collected and galectin-3 concentration was determined by ELISA and compared to the samples of 10 healthy dogs. Canine melanoma samples expressed galectin-1 in the cytoplasm and presented a variable pattern of galectin-3 staining depending on melanoma aggressiveness. We observed a decrease in the percentage of cells with cytoplasmic galectin-3 immunolabeling simultaneous to the increased nuclear staining intensity, while there was also a decrease in the percent frequency of nuclear galectin-3 immunolabeled cells according to progression of melanoma, comparing the least to the most aggressive cases. Dogs with melanoma had increased serum levels of galectin-3 when compared to healthy animals, suggesting its potential biomarker of patients with melanoma.(AU)

O melanoma canino é uma neoplasia frequente em cães que apresenta um potencial maligno e metastático. Neste contexto, investigar o microambiente tumoral é fundamental para compreender os mecanismos intercelulares e intracelulares envolvidos no desenvolvimento e progressão da doença. Neste estudo, destacamos as galectinas, proteínas da família das lectinas animais que exibem domínios de reconhecimento à carboidratos; a galectina-1 e a galectina-3 estão associadas a transformação neoplásica, sobrevivência de células neoplásicas, angiogênese, evasão do sistema immune e desenvolvimento de metástases. O objetivo deste estudo foi determinar os padrões de expressão de galectina-1 e galectina-3 em diferentes graus de agressividade do melanoma canino, bem como dosar a concentração sérica de galectina-3 em cães com melanoma e comparar com cães saudáveis. A expressão de galectina-1 e galectina-3 foi analisada em 30 melanomas caninos, seis melanocitomas e nove linfonodos metastáticos. A galectina-3 sérica foi mensurada em 30 cães com melanoma e comparada a 10 cães saudáveis. No melanoma canino a expressão de galectina-1 foi citoplasmática e a expressão de galectina-3 foi variável de acordo com o grau de agressividade. Notou-se uma redução na porcentagem de células com imunomarcação de galectina-3 citoplasmática e um aumento simultâneo da intensidade de imunomarcação nuclear, enquanto houve também uma diminuição na frequência percentual de células com imunomarcação nuclear de acordo com a progressão do melanoma comparando-se os casos menos com os mais agressivos. Cães com melanoma apresentaram níveis séricos aumentados de galectina-3 quando comparados a animais saudáveis, mostrando seu uso potencial como biomarcador em pacientes com melanoma.(AU)

Evaluation of galectins 1 and 3 expression in canine melanoma / Avaliação da expressão das galectinas 1 e 3 no melanoma canino

Canine melanoma is a frequently-occuring neoplasm in dogs and presents as malignant and highly metastatic in this context, studies that contribute to the understanding of the tumor microenvironment in melanoma include the role of galectins. Galectins are proteins of the family of animal lectins that display carbohydrate recognition domains. Galectin-1 and galectin-3 are associated with neoplastic transformation, neoplastic cell survival, angiogenesis, immune system evasion, and metastasis. The goal of this study was to establish a correlation between expression patterns of galectin-1 and galectin-3 and the different degrees of aggressiveness of canine melanoma, as well as to determine serum concentration of galectin-3 in dogs with melanoma. Galectin-1 and galectin-3 expression was analyzed by immunohistochemistry in 30 canine melanomas, six melanocytomas and nine metastatic lymph nodes from patients whose primary tumors were also processed and analyzed. Serum samples from 30 dogs were collected and galectin-3 concentration was determined by ELISA and compared to the samples of 10 healthy dogs. Canine melanoma samples expressed galectin-1 in the cytoplasm and presented a variable pattern of galectin-3 staining depending on melanoma aggressiveness. We observed a decrease in the percentage of cells with cytoplasmic galectin-3 immunolabeling simultaneous to the increased nuclear staining intensity, while there was also a decrease in the percent frequency of nuclear galectin-3 immunolabeled cells according to progression of melanoma, comparing the least to the most aggressive cases. Dogs with melanoma had increased serum levels of galectin-3 when compared to healthy animals, suggesting its potential biomarker of patients with melanoma.(AU)

O melanoma canino é uma neoplasia frequente em cães que apresenta um potencial maligno e metastático. Neste contexto, investigar o microambiente tumoral é fundamental para compreender os mecanismos intercelulares e intracelulares envolvidos no desenvolvimento e progressão da doença. Neste estudo, destacamos as galectinas, proteínas da família das lectinas animais que exibem domínios de reconhecimento à carboidratos; a galectina-1 e a galectina-3 estão associadas a transformação neoplásica, sobrevivência de células neoplásicas, angiogênese, evasão do sistema immune e desenvolvimento de metástases. O objetivo deste estudo foi determinar os padrões de expressão de galectina-1 e galectina-3 em diferentes graus de agressividade do melanoma canino, bem como dosar a concentração sérica de galectina-3 em cães com melanoma e comparar com cães saudáveis. A expressão de galectina-1 e galectina-3 foi analisada em 30 melanomas caninos, seis melanocitomas e nove linfonodos metastáticos. A galectina-3 sérica foi mensurada em 30 cães com melanoma e comparada a 10 cães saudáveis. No melanoma canino a expressão de galectina-1 foi citoplasmática e a expressão de galectina-3 foi variável de acordo com o grau de agressividade. Notou-se uma redução na porcentagem de células com imunomarcação de galectina-3 citoplasmática e um aumento simultâneo da intensidade de imunomarcação nuclear, enquanto houve também uma diminuição na frequência percentual de células com imunomarcação nuclear de acordo com a progressão do melanoma comparando-se os casos menos com os mais agressivos. Cães com melanoma apresentaram níveis séricos aumentados de galectina-3 quando comparados a animais saudáveis, mostrando seu uso potencial como biomarcador em pacientes com melanoma.(AU)

Análise da imunoexpressão de IL-17 e IL-23 em doenças tireoidianas / Analysis of IL-17 and IL-23 immunoexpression in thyroid diseases

A tireoide é uma glândula endócrina que pode ser afetada por diversas lesões, que incluem doenças reativas, autoimunes e neoplásicas. Evidências mostram que a resposta imunológica, a partir da liberação de citocinas inflamatórias por células imunes e não imunes, desempenha um importante papel no desenvolvimento de diversas doenças. Dentre essas citocinas, destacam-se a IL-17 e a IL-23, as quais têm sido associadas à resposta Th17 e patogênese de diversas doenças tireoidianas. Dessa forma, esta pesquisa teve como objetivo avaliar a imunoexpressão das proteínas IL-17 e IL-23 em carcinomas papilíferos de tireoide (CPTs), adenomas foliculares (AFs), bócios coloides (BCs) e tireoidites de Hashimoto (THs) (isoladas e associadas a CPTs ou BCs), com o intuito de compreender melhor a atuação destas citocinas nestas entidades. A amostra foi composta por 30 casos de CPTs, 10 AFs, 15 BCs e 15 THs. A análise da imunoexpressão das proteínas nas células foliculares/tumorais foi realizada semiquantitativamente em toda extensão das lesões, as quais foram classificadas em três escores: 1 (≤ 33%), 2 (> 33% ­ 66%) e 3 (> 66%). Para a avaliação dos linfócitos imunopositivos, foram selecionados cinco campos com maior quantidade de linfócitos positivos, onde foi realizada a contagem. Os dados foram submetidos à análise estatística por meio dos testes de Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) e Spearman (r), com o nível de significância estabelecido em 5% (p < 0,05). Na análise da IL-17 entre as lesões, foi verificada maior imunoexpressão pelos linfócitos nas THs comparado aos AFs e BCs (p=0,041 e p=0,013). Na avaliação da IL-23 foi constatada uma maior imunomarcação das células foliculares/tumorais nas THs em relação aos CPTs (p=0,002), assim como, observou-se uma maior expressão desta citocina nos linfócitos das THs em comparação aos CPTs, AFs e BCs (p=0,001; p=0,023 e p=0,003). Além disso, foram observadas nas THs correlações estatisticamente significativas entre a imunoexpressão da IL-17 e IL-23 tanto nas células foliculares/tumorais, como nos linfócitos (r=0,539; p=0,038 e r=0,522; p=0,046). Sugere-se que a IL-17 e IL-23 influenciam a patogênese destas lesões tireoidianas e que em algumas delas, represente atuação da resposta Th17 (AU).

The thyroid is an endocrine gland that can be affected by several lesions, including reactive, autoimmune and neoplastic diseases. Evidence shows that the immune response, from the release of inflammatory cytokines by immune and non-immune cells, plays an important role in the development of several diseases. Among these cytokines, IL-17 and IL-23 stand out, which have been associated with the Th17 response and pathogenesis of several thyroid diseases. Hence, this research aimed to evaluate the immunoexpression of IL-17 and IL-23 proteins in papillary thyroid carcinomas (PTCs), follicular adenomas (FAs), colloid goiters (CGs) and Hashimoto's thyroiditis (HTs) (isolated and associated with PTCs or GCs), in order to better understand the role of these cytokines in these entities. The sample consisted of 30 cases of PTCs, 10 FAs, 15 CGs and 15 HTs. The analysis of protein immunoexpression in follicular/tumor cells was semiquantitatively performed in all lesions, which were classified into three scores: 1 (≤ 33%), 2 (> 33% - 66%) and 3 (> 66%). For the evaluation of immunopositive lymphocytes, five fields with the greater number of positive lymphocytes were selected, where the count was performed. The data were submitted to statistical analysis using the Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) and Spearman (r) tests, with the significance level set at 5% (p < 0,05). In the analysis of IL-17 between lesions, a higher immunoexpression was verified in the HT lymphocytes compared to FAs and CGs (p=0.041 and p=0.013). In the evaluation of IL-23, a higher immunostaining of follicular/tumor cells in HTs was detected in relation to PTCs (p=0.002), as well as, a greater expression of this cytokine was observed in the lymphocytes of HTs compared to PTCs, FAs and CGs (p=0.001; p=0.023 and p=0.003). In addition, statistically significant correlations between the immunoexpression of IL17 and IL-23 were observed in both follicular/tumor cells and lymphocytes (r=0.539; p=0.038 and r=0.522; p=0.046). It is therefore suggested that IL-17 and IL-23 influence the pathogenesis of these thyroid lesions and that in some of them, they represent the Th17 response (AU).

Avaliação da expressão imuno-histoquímica de NGF e TrkA durante o envelhecimento de glândulas salivares sublinguais humanas

Saliva plays an important role in swallowing, chewing and speaking, and is essential for maintaining proper oral health. The aging process leaves to decrease of saliva production causing a condition called xerostomia, which is a big problem for the elderly. Literature shows that during aging the parenchyma of the salivary glands is replaced by fat and connective tissue. Neural growth factor NGF and NGF receptor TrkA are synthesized and secreted by salivary glands SG; however, the physiological role of these proteins in saliva and maintenance of SG has not been fully elucidated. The aim of this study was evaluate alterations in NGF and TrkA expression in sublingual SG SL during the aging process. The cases were divided into two groups for comparison: adult group, individuals between 30 and 60 years old; and elderly group, individuals over 60 years. NGF and TrkA expression were evaluated by immunohistochemistry. Quantitative analysis was measured by Image J software, Mann Whitney”s Test and Pearson’s Correlation Test. Qualitative data were analyzed by Fisher's Exact Test. Analyzing the SL samples, we observed that NGF expression occurred in serous, mucous and ducts cells. The NGF expression in serous acini was diffuse, granular and cytoplasmatic. In both striated and excretory ducts, NGF was quite expressed in the cytoplasm and had a more diffuse than granular pattern. The NGF expression in mucosal cells was smaller and was predominantly in the cytoplasm, the staining pattern was both diffuse and granular. Fisher's Exact Test showed that there was higher labeling in striatal and excretory duct cell cytoplasm in the adult group compared to the elderly one p 0,037. In addition, the granular expression was higher in the striatal duct cells of adults compared to the elderly p 0,043. Mann Whitney's test demonstrated that there was no difference in NGF expression in the adult group compared to the elderly one p≥0.05. Pearson’s correlation test did not show linear correlation between age and expression of NGF. The TrkA expression was more expressive in mucosal acini and ducts. In mucous cells, TrkA was expressed in the cytoplasm and in peribasal portion diffusely and granularly. In ductal cells, TrkA was expressed in almost all cases and the pattern was citoplasmatic and granular. In serous acini, the labeling was predominant cytoplasmatic and diffuse. Fisher's Exact Test showed that the granular labeling of striated duct cells was higher in the elderly group than in the adult one p 0,03. In contrast, the diffuse pattern was higher in striated duct cell of the adults if compared with the elderly p 0,008. Mann Whitney's test demonstrated that there was no difference in TrkA expression in the adult group compared to the elderly one p0.05. Pearson’s correlation test did not show linear correlation between age and expression of TrkA.

A saliva desempenha um papel importante na deglutição, mastigação e fala, e é essencial para manter a saúde bucal adequada. O processo de envelhecimento diminui a produção de saliva, causando uma condição chamada xerostomia, que é um grande problema para os idosos. A literatura mostra que durante o envelhecimento, o parênquima das glândulas salivares é substituído por gordura e tecido conjuntivo. O fator de crescimento neural (NGF) e o receptor para NGF (TrkA) são sintetizados e secretados pelas glândulas salivares (GS); no entanto, o papel fisiológico dessas proteínas na saliva e na manutenção das GS não foi totalmente elucidado. O objetivo deste estudo foi avaliar alterações na expressão de NGF e TrkA na GS sublingual (SL) durante o processo de envelhecimento. Os casos foram divididos em dois grupos para comparação: grupo de adultos, indivíduos entre 30 e 60 anos; e grupo de idosos, indivíduos acima de 60 anos. A expressão de NGF e TrkA foi avaliada por imunoistoquímica. A análise quantitativa foi mensurada pelo software Image J, pelo teste de Mann Whitney e pelo teste de correlação de Pearson. Os dados qualitativos foram analisados pelo teste exato de Fisher. Analisando as amostras de SL, observamos que a expressão de NGF ocorreu principalmente nas células serosas, nas células mucosas e nos ductos. A expressão de NGF nos ácinos serosos foi difusa, granular e citoplasmática. Nos ductos estriado e excretor, o NGF foi bastante expresso no citoplasma e apresentava um padrão mais difuso do que granular. A expressão de NGF nas células da mucosa foi menor quando comparada com as células serosas e ductais e predominantemente no citoplasma, o padrão de coloração foi difuso e granular. O teste exato de Fisher mostrou que houve maior número de casos marcados, no citoplasma dos ductos excretor e estriado, no grupo adulto em comparação com o idoso (p=0,037). Além disso, a expressão granular foi maior nas células do ducto estriado de adultos em comparação com os idosos (p=0,043). O teste de Mann Whitney demonstrou que não houve diferença na expressão de NGF no grupo adulto comparado ao grupo idoso (p≥0,05) e o teste de Correlação de Pearson, mostrou que não houve correlação linear entre a idade dos indivíduos e a expressão do NGF. A expressão de TrkA foi mais expressiva nos ácinos mucosos e nos ductos. Nas células mucosas, o TrkA foi expresso no citoplasma e na porção peribasal de forma difusa e granular. Nas células ductais, oTrkA foi expresso em quase todos os casos e o padrão foi citoplasmático e granular. Nos ácinos serosos, a marcação foi predominantemente citoplasmática e difusa. O teste exato de Fisher mostrou que a marcação granular das células do ducto estriado era maior no grupo de idosos do que no grupo de adultos (p=0,033). Por outro lado, o padrão difuso foi maior nas células do ducto estriado dos adultos se comparado aos idosos (p= 0,008). O teste de Mann Whitney demonstrou que não houve diferença na expressão de TrkA no grupo adulto comparado ao grupo idoso (p≥0,05) e o teste de Correlação de Pearson, mostrou que não houve correlação linear entre a idade dos indivíduos e a expressão do TrkA.

CD4+, CD8+ and FOXP3+ lymphocytes infiltrating oral leukoplakia: an immunohistochemical analysis / Linfócitos CD4+, CD8+ e FOXP3+ que se infiltram na leucoplasia oral: uma análise imunohistoquimica

Objetivo: Avaliar a infiltraçãdo dos linfócitos CD4+ , CD8 + e FOXP3+ e sua correlação com caracteristicas sociodemográfica, clinicopatologicas e estilo de vida de pacientes com leucoplasias bucais. Pacientes e métodos: Oitenta pacientes com diagnóstico de leucoplasia bucal foram incluidos no estudo. Análises retrospectivas foram realizadas para verificar as características sociodemográficos, clinicopatológicos e estilo de vida dos pacientes. O infiltrado linfocitário foi caracterizado por imunoistoquímica com antígenos contra de CD4+ , CD8 + e FOXP3+ . Resultados: Dos 80 pacientes incluidos neste estudo, (60%) eram homens e a idade variou de 25 a 82 anos com idade média de 58,6 anos.Trinta e oito (47.5%) eram idosos, Trinta e dois (40%) eram adultos de meia idade e apenas dez (10%) adultos jovens. Sessenta e um dos pacientes eram fumantes (76.2%) e quarenta e seis eram etilistas (57.5%). Vinte e sete (35.5%) das lesões apresentaram algum grau de displasia epitelial. O grau de displasia epitelial apresentou correlação positiva com a intensidade do consumo do alcool (p=0.008). Houve correlação positiva entre os linfócitos CD4+ e CD8+ (p=0.005). Conclusão: O infiltrado linfocitário não foi relacionado com nenhuma característica clinicopatológica das lecoplasias bucais. Entretanto, o grau de displasia está relacionado ao estilo de vida dos pacientes(AU)

Objective: To evaluate the infiltration of CD4+ , CD8+ and FOXP3+ lymphocytes and their correlation with sociodemographic, clinicopathological and lifestyle characteristics of patients with oral leukoplakia. Patients and methods: Eighty patients diagnosed with oral leukoplakia were included in the study. Retrospective analyses were performed in order to verify the sociodemographic, clinicopathologic and lifestyle characteristics. The lymphocytic infiltrate characterization was performed by immunohistochemistry with antibodies against CD4+, CD8+, and FOXP3+ markers. Results: Of 80 patients included in the study, 60% were men, and their age ranged from 25 to 82 years, with a mean of 58.6. Thirty-eight patients (47.5%) were elderly, Thirty-two (40%) middle-aged, and only ten (10%) young adults. Sixty-one of the patients were smokers (76.2%) and forty-six were alcoholics (57.5%). Twenty-seven (35.5%) of the lesions presented some degree of dysplasia. The degree of epithelial dysplasia was correlated with the intensity of alcohol consumption (p=0.008). A positive correlation was found between CD4+ and CD8+ lymphocytes (p=0.005). Conclusion: The lymphocytic infiltrate of oral leukoplakia was not correlated with any clinicopathologic characteristic. However, the degree of epithelial dysplasia was correlated with the lifestyle of the patients(AU)

Imunomarcação de TGF-β em próstatas caninas normais e com lesões proliferativas / Immunoexpression of TGF-β in normal canine prostates and with proliferative lesions

O fator de crescimento transformador-β (TGF-β), um mediador do crescimento prostático, induz a angiogênese e inibe a proliferação celular. Neste estudo, esse marcador foi utilizado com o objetivo de avaliar sua imunomarcação no tecido normal e com lesões proliferativas benignas, pré-neoplásicas e neoplásicas da próstata canina. Para isso, foram selecionadas 54 glândulas com histomorfologia normal, hiperplasia prostática benigna (HPB) epitelial, HPB estromal, atrofia inflamatória proliferativa (PIA), neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e carcinoma, utilizadas para a confecção de um bloco de microarranjo tecidual (Tissue Microarray - TMA). As lâminas de TMA foram submetidas à técnica de imunoistoquímica com o anticorpo anti-TGF-β, sendo avaliada a intensidade de imunomarcação nas células epiteliais e estromais. Houve imunomarcação de TGF-β no tecido normal e naqueles com lesões proliferativas. Maior imunomarcação de TGF-β foi constatada nas células do tecido prostático normal e com HPB, enquanto as células prostáticas com PIA, PIN e carcinoma exibiram menor imunomarcação dessa citocina, o que sugere a ação do TGF-β na manutenção da homeostase do tecido normal e com lesão proliferativa benigna e na progressão das lesões proliferativas pré-malignas e malignas da próstata canina.(AU)

The transforming growth factor-β (TGF-β), a mediator of prostatic growth induces angiogenesis and inhibits cell proliferation. It was used in this study in order to evaluate its expression in normal prostatic tissue and those with benign proliferative lesions, pre-malignant and malignant prostatic diseases. A total of 54 glands with normal histomorphology, epithelial benign prostatic hyperplasia (BPH), stromal BPH, prostatic inflammatory atrophy (PIA), prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), and adenocarcinoma were selected and used in the tissue microarray block (TMA). The TMA slides were subjected to the immunohistochemistry with anti-TGF-β and its staining intensity in epithelial and stromal cells was evaluated. There was TGF-β immunostaining by both normal tissues and those with proliferative lesions. Higher TGF-β immunostaining was observed in cells from normal prostatic tissues and with HPB, whereas prostatic cells with PIA, PIN and carcinoma exhibited lower immunostaining of this cytokine, suggesting the action of TGF-β in the maintenance of normal tissue homeostasis and with benign proliferative lesion and in the progression of pre-malignant and malignant proliferative lesions of the canine prostate.(AU)

Avaliação da imunomarcação da proteína c-kit (CD-117) em tumores mamários caninos / Evaluation of c-kit protein (CD-117) immunostaining in canine mammary tumors

As neoplasias mamárias em cadelas têm uma significativa relevância na rotina clínica veterinária e a busca de novos fatores associados na sua etiopatogenia e terapêutica faz-se necessária para possibilitar o estudo de novas terapias mais eficazes. Objetivou-se com o presente estudo avaliar a imunomarcação do c-kit em tumores amários caninos benignos e malignos pela técnica de imunohistoquímica. As amostras foram avaliadas quanto a sua intensidade de marcação e porcentagem de células marcadas para obtenção do escore final. Como controle positivo foi utilizada uma amostra de mastocitoma. Foram avaliadas 32 amostras previamente diagnosticadas de carcinomas mamários e cinco amostras de tumores mamários benignos. Todos os tumores apresentaram imunomarcação pelo c-kit com padrão citoplasmático. Dezesseis carcinomas apresentaram escore baixo de imunomarcação e 16 apresentaram escore alto. Em relação aos tumores mamários benignos, todos apresentaram escore de imunomarcação alto. A imunomarcação pelo c-kit foi maior nos tumores benignos quando comparados aos tumores malignos. Os carcinomas anaplásicos apresentaram escore final alto e grau III, sugerindo uma maior expressão neste tipo tumoral.(AU)

Mammary neoplasms in dogs have a significant relevance in the veterinary clinical routine and the search for new associated factors in its etiopathogenesis and therapy is necessary to enable the study of new more effective therapies. This study aimed to evaluate the behavior of c-kit expression in benign and malignant canine mammary tumors by immunohistochemistry. The samples were evaluated for intensity staining, percentage of labeled cells, to obtain the final score. For the positive control was used a positivemastocytoma sample for c-kit expression. 32 samples of breast carcinomas and five samples of benign breast tumors were used. All tumors express c-kit, with cytoplasmic pattern. Sixteen carcinomas showed a low score of immunostaining and 16 had high scores. All benign breast tumors had high immunostaining score. Expression of c-kit was greater in tumors compared to benign malignant tumors. The anaplastic carcinomas showed high final score and grade III. suggesting greater expression in this tumor type.(AU)

Avaliação da imunomarcação da proteína c-kit (CD-117) em tumores mamários caninos / Evaluation of c-kit protein (CD-117) immunostaining in canine mammary tumors

As neoplasias mamárias em cadelas têm uma significativa relevância na rotina clínica veterinária e a busca de novos fatores associados na sua etiopatogenia e terapêutica faz-se necessária para possibilitar o estudo de novas terapias mais eficazes. Objetivou-se com o presente estudo avaliar a imunomarcação do c-kit em tumores amários caninos benignos e malignos pela técnica de imunohistoquímica. As amostras foram avaliadas quanto a sua intensidade de marcação e porcentagem de células marcadas para obtenção do escore final. Como controle positivo foi utilizada uma amostra de mastocitoma. Foram avaliadas 32 amostras previamente diagnosticadas de carcinomas mamários e cinco amostras de tumores mamários benignos. Todos os tumores apresentaram imunomarcação pelo c-kit com padrão citoplasmático. Dezesseis carcinomas apresentaram escore baixo de imunomarcação e 16 apresentaram escore alto. Em relação aos tumores mamários benignos, todos apresentaram escore de imunomarcação alto. A imunomarcação pelo c-kit foi maior nos tumores benignos quando comparados aos tumores malignos. Os carcinomas anaplásicos apresentaram escore final alto e grau III, sugerindo uma maior expressão neste tipo tumoral.

Mammary neoplasms in dogs have a significant relevance in the veterinary clinical routine and the search for new associated factors in its etiopathogenesis and therapy is necessary to enable the study of new more effective therapies. This study aimed to evaluate the behavior of c-kit expression in benign and malignant canine mammary tumors by immunohistochemistry. The samples were evaluated for intensity staining, percentage of labeled cells, to obtain the final score. For the positive control was used a positivemastocytoma sample for c-kit expression. 32 samples of breast carcinomas and five samples of benign breast tumors were used. All tumors express c-kit, with cytoplasmic pattern. Sixteen carcinomas showed a low score of immunostaining and 16 had high scores. All benign breast tumors had high immunostaining score. Expression of c-kit was greater in tumors compared to benign malignant tumors. The anaplastic carcinomas showed high final score and grade III. suggesting greater expression in this tumor type.

Imunomarcação de TGF-β em próstatas caninas normais e com lesões proliferativas / Immunoexpression of TGF-β in normal canine prostates and with proliferative lesions

O fator de crescimento transformador-β (TGF-β), um mediador do crescimento prostático, induz a angiogênese e inibe a proliferação celular. Neste estudo, esse marcador foi utilizado com o objetivo de avaliar sua imunomarcação no tecido normal e com lesões proliferativas benignas, pré-neoplásicas e neoplásicas da próstata canina. Para isso, foram selecionadas 54 glândulas com histomorfologia normal, hiperplasia prostática benigna (HPB) epitelial, HPB estromal, atrofia inflamatória proliferativa (PIA), neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e carcinoma, utilizadas para a confecção de um bloco de microarranjo tecidual (Tissue Microarray - TMA). As lâminas de TMA foram submetidas à técnica de imunoistoquímica com o anticorpo anti-TGF-β, sendo avaliada a intensidade de imunomarcação nas células epiteliais e estromais. Houve imunomarcação de TGF-β no tecido normal e naqueles com lesões proliferativas. Maior imunomarcação de TGF-β foi constatada nas células do tecido prostático normal e com HPB, enquanto as células prostáticas com PIA, PIN e carcinoma exibiram menor imunomarcação dessa citocina, o que sugere a ação do TGF-β na manutenção da homeostase do tecido normal e com lesão proliferativa benigna e na progressão das lesões proliferativas pré-malignas e malignas da próstata canina.

The transforming growth factor-β (TGF-β), a mediator of prostatic growth induces angiogenesis and inhibits cell proliferation. It was used in this study in order to evaluate its expression in normal prostatic tissue and those with benign proliferative lesions, pre-malignant and malignant prostatic diseases. A total of 54 glands with normal histomorphology, epithelial benign prostatic hyperplasia (BPH), stromal BPH, prostatic inflammatory atrophy (PIA), prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), and adenocarcinoma were selected and used in the tissue microarray block (TMA). The TMA slides were subjected to the immunohistochemistry with anti-TGF-β and its staining intensity in epithelial and stromal cells was evaluated. There was TGF-β immunostaining by both normal tissues and those with proliferative lesions. Higher TGF-β immunostaining was observed in cells from normal prostatic tissues and with HPB, whereas prostatic cells with PIA, PIN and carcinoma exhibited lower immunostaining of this cytokine, suggesting the action of TGF-β in the maintenance of normal tissue homeostasis and with benign proliferative lesion and in the progression of pre-malignant and malignant proliferative lesions of the canine prostate.

The canonical wnt pathway in gastric carcinoma / Via canônica do wnt no carcinoma gástrico

ABSTRACT Background : It is believed that the Wnt pathway is one of the most important signaling involved in gastric carcinogenesis. Aim : To analyze the protein expression of canonical and non-canonical Wnt pathways in gastric carcinoma. Method : The immunohistochemistry was performed in 72 specimens of gastric carcinomas for evaluating the expression of Wnt-5a, FZD5, GSK3β, axin, CK1, ubiquitin, cyclin D1 and c-myc. Results : There were significant differences for cytoplasm and nucleus ubiquitin for moderately and well differentiated tumors (p=0.03) and for those of the intestinal type of the Lauren classification (p=0.03). The absence of c-myc was related to Lauren's intestinal tumors (p=0.03). Expression of CK1 in the cytoplasm was related to compromised margin (p=0.03). Expression of cyclin D1 protein was more intense in male patients (p=0.03) There was no relation of the positive or negative expression of the Wnt-5a, FZD5, GSK3 and Axin with any clinicopathological variables. Conclusion: The canonical WNT pathway is involved in gastric carcinoma.

RESUMO Racional : Acredita-se que a via Wnt é uma das mais importantes da sinalização envolvidas na carcinogênese gástrica. Objetivos : Analisar a expressão das proteínas das vias Wnt canônicas e não-canônicas no carcinoma gástrico e relacionar sua expressão com as variáveisclinicopatológicas. Método : Foram coletadas 72 amostras de carcinoma gástrico, e áreas representativas do tumor foram selecionadas para o Tissue Microarray. Imunoistoquímica foi realizada para avaliar a expressão de Wnt-5a, FZD5, GSK3β, axina, CK1, ubiquitina, ciclina D1 e c-myc. Resultados : Houve diferenças significativas para a expressão de ubiquitina no citoplasma e núcleo para tumores moderadamente e bem diferenciados (p=0,03) e para aqueles do tipo intestinal da classificação de Lauren (p=0,03). A expressão negativa da proteína c-myc no citoplasma foi relacionada aos tumores intestinais de Lauren (p=0,028). A expressão positiva de CK1 no citoplasma das células neoplásicas foi relacionada a tumores com margens cirúrgicas livre de envolvimento neoplásico (p=0,03). A expressão positiva da proteína ciclina D1 foi maior nos tumores dos homens (p=0,03). Não houve relação da expressão positiva ou negativa das proteínas Wnt-5a e FZD5 no citoplasma ou núcleo com quaisquer variáveis clinicopatológicas. O mesmo foi observado para GSK3β e Axin. Conclusões : A relação da expressão das proteínas da via canônica com as variáveis epidemiológicas e tumorais sugere sua participação na carcinogênese gástrica. Por outro lado, a ausência da relação das expressões das proteínas da via não-canônica sugere sua não participação na carcinogênese gástrica.