Flushing folicular: uma nova alternativa para melhorar a obtenção de oócitos por aspiração ovariana em bovinos / Follicular flushing: a new alternative to improve oocyte recovery by ovarian aspiration in cattle

A lavagem folicular (flushing) associado à aspiração folicular, ou também chamado deflushing folicular (FF) é uma técnica bastante utilizada para a recuperação de oócitos em mulheres. Em animais, já foi empregado para a aspiração folicular transvaginal em equinose na aspiração de ovários bovinos de abatedouros. A recuperação do maior número possível de oócitos é o propósito desse método, pois corresponde a uma ou mais lavagens do folículo puncionado imediatamente após a aspiração folicular. Este trabalho objetivou comparar ouso do FF associado à aspiração folicular (AF) em ovários bovinos de frigoríficos, quanto às taxas de recuperação de oócitos (TRO) e a morfologia dos oócitos. Na AF utilizou-se agulha 18G acoplada a seringa. No FF foi elaborado um sistema manual no laboratório INVITRO/CEBRAN, utilizando equipo, torneira de 3 vias, agulha, seringa, tubo e bomba de vácuo. Neste trabalho, ocorreu apenas uma lavagem intrafolicular. Os oócitos foram classificados de A (COC) a F (Desnudos), conforme o número de camada de células do cumulus, grau de compactação, coloração e uniformidade do citoplasma. Na taxa de obtenção de oócitos por ovário não houve diferença estatística (FF 11±3,12 vs. AF11,63±3,74; p>0,05); porém existiu diferenças na TRO por folículo aspirado (FF88,13%±16,44 vs. AF 71,50%±14,47; p<0,05) e na taxa de recuperação de oócitos grau A(FF 27%±10,98 vs. AF 12,75%±8,56; p<0,05). Além disso, o FF aumentou o tempo de colheita dos oócitos devido a lavagem extra (p<0,01). Com os dados obtidos pode-se observar que o flushing folicular melhorou a TRO em ovários bovinos, favorecendo maior recuperação de COCs.

Follicular lavage (flushing) associated with follicular aspiration, or also called follicular flushing (FF) is a technique widely used for the oocyte recovery in women. In animals, it has already been used by transvaginal follicular aspiration in horses and aspiration of bovine ovaries from slaughterhouses. The recovery of the largest possible number of oocytes is the purpose of this method, as it corresponds to one or more washes of the punctured follicle immediately after follicular aspiration. This study aimed to compare the use of FF associated with follicular aspiration (FA) in bovine ovaries from slaughterhouses, in terms of oocyte recovery rates (ORT) and oocyte morphology. In FA, an 18G needle attached to a syringe was used. In the FF a manual system was elaborated in the INVITRO / CEBRAN laboratory, using parenteral infusion equipment, 3-way stopcock, needle, syringe, tube and vacuum pump. In this study, there was only an intra-follicular lavage. Oocytes were classified from A (COC) to F (Denudes), according to the number of cumulus cell layers, degree of compaction, staining and uniformity of the cytoplasm. There was no statistical difference in the oocytes rate obtained by ovary (FF 11±3.12 vs. FA 11.63±3.74; p> 0.05); however, there were differences in ORT per aspirated follicle (FF 88.13%±16.44 vs. FA 71.50%±14.47;p<0.05) and in the recovery rate of grade A oocytes (FF 27%±10.98 vs. AF 12.75%±8.56;p<0.05). In addition, the FF increased the time to harvest the oocytes due to extra washing(p<0.01). With the data obtained, it can be seen that follicular flushing improved ORT in bovine ovaries, favoring greater recovery of COCs.

Flushing folicular: uma nova alternativa para melhorar a obtenção de oócitos por aspiração ovariana em bovinos / Follicular flushing: a new alternative to improve oocyte recovery by ovarian aspiration in cattle

A lavagem folicular (flushing) associado à aspiração folicular, ou também chamado deflushing folicular (FF) é uma técnica bastante utilizada para a recuperação de oócitos em mulheres. Em animais, já foi empregado para a aspiração folicular transvaginal em equinose na aspiração de ovários bovinos de abatedouros. A recuperação do maior número possível de oócitos é o propósito desse método, pois corresponde a uma ou mais lavagens do folículo puncionado imediatamente após a aspiração folicular. Este trabalho objetivou comparar ouso do FF associado à aspiração folicular (AF) em ovários bovinos de frigoríficos, quanto às taxas de recuperação de oócitos (TRO) e a morfologia dos oócitos. Na AF utilizou-se agulha 18G acoplada a seringa. No FF foi elaborado um sistema manual no laboratório INVITRO/CEBRAN, utilizando equipo, torneira de 3 vias, agulha, seringa, tubo e bomba de vácuo. Neste trabalho, ocorreu apenas uma lavagem intrafolicular. Os oócitos foram classificados de A (COC) a F (Desnudos), conforme o número de camada de células do cumulus, grau de compactação, coloração e uniformidade do citoplasma. Na taxa de obtenção de oócitos por ovário não houve diferença estatística (FF 11±3,12 vs. AF11,63±3,74; p>0,05); porém existiu diferenças na TRO por folículo aspirado (FF88,13%±16,44 vs. AF 71,50%±14,47; p<0,05) e na taxa de recuperação de oócitos grau A(FF 27%±10,98 vs. AF 12,75%±8,56; p<0,05). Além disso, o FF aumentou o tempo de colheita dos oócitos devido a lavagem extra (p<0,01). Com os dados obtidos pode-se observar que o flushing folicular melhorou a TRO em ovários bovinos, favorecendo maior recuperação de COCs.(AU)

Follicular lavage (flushing) associated with follicular aspiration, or also called follicular flushing (FF) is a technique widely used for the oocyte recovery in women. In animals, it has already been used by transvaginal follicular aspiration in horses and aspiration of bovine ovaries from slaughterhouses. The recovery of the largest possible number of oocytes is the purpose of this method, as it corresponds to one or more washes of the punctured follicle immediately after follicular aspiration. This study aimed to compare the use of FF associated with follicular aspiration (FA) in bovine ovaries from slaughterhouses, in terms of oocyte recovery rates (ORT) and oocyte morphology. In FA, an 18G needle attached to a syringe was used. In the FF a manual system was elaborated in the INVITRO / CEBRAN laboratory, using parenteral infusion equipment, 3-way stopcock, needle, syringe, tube and vacuum pump. In this study, there was only an intra-follicular lavage. Oocytes were classified from A (COC) to F (Denudes), according to the number of cumulus cell layers, degree of compaction, staining and uniformity of the cytoplasm. There was no statistical difference in the oocytes rate obtained by ovary (FF 11±3.12 vs. FA 11.63±3.74; p> 0.05); however, there were differences in ORT per aspirated follicle (FF 88.13%±16.44 vs. FA 71.50%±14.47;p<0.05) and in the recovery rate of grade A oocytes (FF 27%±10.98 vs. AF 12.75%±8.56;p<0.05). In addition, the FF increased the time to harvest the oocytes due to extra washing(p<0.01). With the data obtained, it can be seen that follicular flushing improved ORT in bovine ovaries, favoring greater recovery of COCs.(AU)

Punção folicular guiada por ultra-sonografia em éguas tratadas com FSH no estroma ovariano: avaliação da taxa de recuperação dos ovócitos

Um dos maiores problemas observados na eqüinotecnia se refere à otimização no número e precocidade de descendentesque uma égua pode produzir durante sua vida reprodutiva. A transferência de embriões em eqüinos associada às modernastécnicas de reprodução tais como: inseminação artificial com sêmen congelado, congelamento de embriões, punção deovócitos in vivo e fertilização in vitro, possui grande potencial e aplicação prática para redução do intervalo entre gerações deeqüinos com pedigree de alto valor genético, além de permitir a multiplicação e conservação de espécies ameaçadas deextinção. Diante desta premissa, no intuito de contribuir com os estudos nesta área, utilizou-se neste experimento a técnica depunção folicular com uso de uma guia de biópsia e monitoramento ultra-sonográfico. Foi inoculado no estroma ovariano emum grupo de éguas (n=10), 3 mg armour de hormônio folículo estimulante (FSH- 1,5 ml de Folltropin), e no grupo controle(n=10) 1,5 ml de solução salina. Após 24 horas os folículos ³ 15 mm foram puncionados in vitro, obtendo-se um incremento nataxa de recuperação ovocitária significativo para os ovários tratados com FSH (36,36%) quando comparados com os ováriostratados com solução salina (10,52%). A técnica foi reproduzida in vivo e os resultados não foram os mesmos. Acredita-se queo aprimoramento da técnica com relação à realização de lavagens e o incremento d

Punção folicular guiada por ultra-sonografia em éguas tratadas com FSH no estroma ovariano: avaliação da taxa de recuperação dos ovócitos

Um dos maiores problemas observados na eqüinotecnia se refere à otimização no número e precocidade de descendentesque uma égua pode produzir durante sua vida reprodutiva. A transferência de embriões em eqüinos associada às modernastécnicas de reprodução tais como: inseminação artificial com sêmen congelado, congelamento de embriões, punção deovócitos in vivo e fertilização in vitro, possui grande potencial e aplicação prática para redução do intervalo entre gerações deeqüinos com pedigree de alto valor genético, além de permitir a multiplicação e conservação de espécies ameaçadas deextinção. Diante desta premissa, no intuito de contribuir com os estudos nesta área, utilizou-se neste experimento a técnica depunção folicular com uso de uma guia de biópsia e monitoramento ultra-sonográfico. Foi inoculado no estroma ovariano emum grupo de éguas (n=10), 3 mg armour de hormônio folículo estimulante (FSH- 1,5 ml de Folltropin), e no grupo controle(n=10) 1,5 ml de solução salina. Após 24 horas os folículos ³ 15 mm foram puncionados in vitro, obtendo-se um incremento nataxa de recuperação ovocitária significativo para os ovários tratados com FSH (36,36%) quando comparados com os ováriostratados com solução salina (10,52%). A técnica foi reproduzida in vivo e os resultados não foram os mesmos. Acredita-se queo aprimoramento da técnica com relação à realização de lavagens e o incremento d