In vitro PHYTOTHERAPY OF VECTOR SNAILS BY BINARY COMBINATIONS OF LARVICIDAL ACTIVE COMPONENTS IN EFFECTIVE CONTROL OF FASCIOLIASIS / Fitoterapia in vitro de caramujos vetores por combinações binárias de componentes ativos larvicidas como controle efetivo de fasciolíase

SUMMARY A food-borne trematode infection fascioliasis is one among common public health problems worldwide. It caused a great economic loss for the human race. Control of snail population below a certain threshold level is one of the important methods in the campaign to reduce the incidence of fascioliasis. The life cycle of the parasite can be interrupted by killing the snail or Fasciola larva redia and cercaria inside of the snail Lymnaea acuminata. In vitro toxicity of different binary combinations (1:1 ratio) of plant-derived larvicidal active components such as citral, ferulic acid, umbelliferone, azadirachtin and allicin against Fasciola redia and cercaria were tested. The mortality of larvae was observed at 2h, 4h, 6h and 8h of treatment. In in vitro condition azadirachtin + allicin (1:1 ratio) was highly toxic against redia and cercaria (8h LC50 0.006 and 0.005 mg/L). Toxicity of citral + ferulic acid was lowest against redia and cercaria larvae. .

RESUMO A infecção alimentar pelo trematóide da fasciolíase é uma dentre os mais comuns problemas de saúde pública mundiais, causando grande prejuízo econômico para a humanidade. Controle da população de caramujos abaixo de determinado nível é um dos métodos no campo mais importantes para a redução da incidência da fasciolíase. O ciclo de vida do parasita pode ser interrompido pela morte do caramujo ou da larva redia e cercária da Fasciola dentro da Lymnaea acuminata. Foi testada a toxicidade in vitro das diferentes combinações binárias (relação 1:1) entre os vários componentes larvicidas ativos da planta tais como citral, ácido ferúlico, umbeliferone, azadiractina, e alicina contra a Fasciola redia e a cercária. A mortalidade das larvas foi observada após duas, quatro, seis e oito horas de tratamento. A condição in vitro azadiractina + alicina (relação 1:1) foi altamente tóxica contra redia e cercária (8h LC50 0,006 e 0,005 mg/L). Toxicidade do citral + ácido ferúlico foi a mais baixa contra redia e larvas de cercária. .

CHARACTERIZATION OF MOLLUSCICIDAL COMPONENT OF Moringa oleifera LEAF AND Momordica charantia FRUITS AND THEIR MODES OF ACTION IN SNAIL Lymnaea acuminata / Caracterização do componente moluscicida das folhas da Moringa oleifera e das frutas da Momordica charantia e seus modos de ação sobre o caramujo Lymnaea acuminata

SUMMARY The molluscicidal activity of the leaf powder of Moringa oleifera and lyophilized fruit powder of Momordica charantia against the snail Lymnaea acuminata was time and concentration dependent. M. oleifera leaf powder (96 h LC50: 197.59 ppm) was more toxic than M. charantia lyophilized fruit powder (96 h LC50: 318.29 ppm). The ethanolic extracts of M. oleifera leaf powder and Momordica charantia lyophilized fruit powder were more toxic than other organic solvent extracts. The 96 h LC50 of the column purified fraction of M. oleifera leaf powder was 22.52 ppm, while that of M. charantia lyophilized fruit powder was 6.21 ppm. Column, thin layer and high performance liquid chromatography analysis show that the active molluscicidal components in M. oleifera leaf powder and lyophilized fruit of M. charantia are benzylamine (96 h LC50: 2.3 ppm) and momordicine (96 h LC50: 1.2 ppm), respectively. Benzylamine and momordicine significantly inhibited, in vivo and in vitro, the acetylcholinesterase (AChE), acid and alkaline phosphatase (ACP/ALP) activities in the nervous tissues of L. acuminata. Inhibition of AChE, ACP and ALP activity in the nervous tissues of L. acuminata by benzylamine and momordicine may be responsible for the molluscicidal activity of M. oleifera and M. charantia fruits, respectively. .

RESUMO A atividade moluscicida do pó das folhas de Moringa oleifera e do pó liofilizado das frutas da Momordica charantia contra o caramujo Lymnaea acuminata é dependente do tempo e da sua concentração. O pó da folha da M. oleifera (96 h LC50: 197.59 ppm) foi mais tóxico do que o pó liofilizado da fruta da M. charantia (96 h LC50: 318.29 ppm). Os extratos etanólicos do pó de folha da M. oleifera e do pó liofilizado da fruta da M. charantia foram mais tóxicos do que outros extratos orgânicos solventes. O 96 h LC50 da fração purificada por coluna do pó das folhas da M. oleifera foi 22.52 ppm enquanto que o pó liofilizado do fruto da M. charantia foi 6.21 ppm. Coluna, camada fina e a alta performance da análise da cromatografia líquida mostram que os componentes ativos moluscicidas do pó da folha da M. oleifera e do liofiliizado da fruta da M. charantia são a benzilamina (96 h LC50: 22.3 ppm) e a momordicina (96 h LC50: 1.2 ppm), respectivamente. A benzilamina e a momordicina inibiram de maneira significante in vivo e in vitro a acetilcolinesterase (AChE), as atividades das fosfatases alcalina e ácida (ACP/ALP) nos tecidos nervosos da L. acuminata. A inibição da atividade da AChE, ACP e ALP nos tecidos nervosos da L. acuminata pela benzilamina e momordicina podem ser responsáveis pela atividade moluscicida da M. oleifera e dos frutos da M. charantia, respectivamente. .

Characterization of the molluscicidal activity of Bauhinia variegata and Mimusops elengi plant extracts against the fasciola vector lymnaea acuminata / Caracterização da atividade moluscicida dos extratos das plantas Bauhinia variegata e Mimusops elengi contra o vetor da Fasciola, Lymnaea acuminata

The molluscicidal activity of Bauhinia variegata leaf and Mimusops elengi bark was studied against vector snail Lymnaea acuminata. The toxicity of both plants was time and concentration-dependent. Among organic extracts, ethanol extracts of both plants were more toxic. Toxicity of B. variegata leaf ethanolic extract (96h LC50- 14.4 mg/L) was more pronounced than M. elengi bark ethanolic extract (96h LC50-15.0 mg/L). The 24h LC50 of column purified fraction of B. variegata and M. elengi bark were 20.3 mg/L and 18.3 mg/L, respectively. Saponin and quercetin were characterized and identified as active molluscicidal component. Co-migration of saponin (Rf 0.48) and quercetin (Rf 0.52) with column purified bark of M. elengi and leaf of B. variegata on thin layer chromatography demonstrate same Rf value i.e. 0.48 and 0.52, respectively. The present study clearly indicates the possibility of using M. elengi and/or B. variegata as potent molluscicide.

A atividade moluscicida das folhas da Bauhinia variegata e da casca do Mimusops elengi foi testada contra o vetor caracol, Limnaea acuminata. A toxicidade de ambas as plantas é dependente do tempo e da concentração. Entre os extratos orgânicos, os extratos de etanol de ambas as plantas foi mais tóxico. A toxicidade do extrato etanólico da folha da B. variegata (96 h LC50 - 14,4 mg/L) foi mais pronunciada do que o extrato etanólico da casca do M. elengi (96h - LC50 - 15,0 mg/L). As frações purificadas em coluna durante 24 h LC50 do B. variegata e da casca do M. elengi foram 20,3 mg/L e 18,3 mg/L, respectivamente. A saponina e a quercentina foram caracterizadas e identificadas como os componentes ativos moluscicidas. A co-migração da saponina (Rf 0,48) e da quercentina (Rf 0,52) com a casca purificada por coluna do M. elengi e as folhas da B. variegata na cromatografia demonstraram o mesmo valor Rf isto é, 0,48 e 0,52 respectivamente. O presente estudo indica claramente a possibilidade de usar M. elengi e/ou B. variegata como moluscicidas potentes.

Impact of Taraxerol in combination with extract of Euphorbia tirucalli plant on biological parameters of Lymnaea acuminata / Impacto do Taraxerol em combinação com o extrato da planta de Euphorbia tirucalli nos parâmetros biológicos da Lymnaea acuminata

The present work was carried out to evaluate the molluscicidal activity of active ingredient Taraxerol with the acetone extract of Euphorbia tirucalli against Lymnaea acuminata snail. The (fecundity, hatchability and survivability) of snail L. acuminata exposed to this extract was studied. The effects of the tested extracts on life-history traits of harmful snail L. acuminata have also been evaluated, and this study also expounds the inhibitory effects of these extracts singly as well as in binary combination (1:1 ratio). It concluded that these herbal products act as a potential source of molluscicides, and that they would also have the advantage of easy availability, low cost, biodegradability and greater acceptance amongst users than synthetic pesticide.

O presente trabalho foi levado a efeito para avaliar a atividade moluscicida do ingrediente ativo Taraxerol junto com o extrato de acetona da Euphorbia tirucalli contra o caramujo Lymnaea acuminata. Foram estudados a fecundidade, o desenvolvimento e sobrevivência do caramujo Lymnaea acuminata exposto a estes extratos. Os efeitos danosos destes extratos testados na vida do caramujo L. acuminata foram também avaliados e este estudo demonstra os efeitos inibidores destes extratos isolados ou em combinação binária (relação l:1). Concluiu-se que estes produtos vegetais agem como fontes potenciais de moluscicidas e que eles também têm a vantagem de obtenção fácil, baixo custo, biodegradabilidade e maior aceitação entre os usuários do que os pesticidas sintéticos.

Bait formulations of molluscicides and their effects on biochemical changes in the ovotestis of snail Lymnaea acuminata (Mollusca; Gastropoda:Lymnaeidae) / Formulações de iscas de moluscicidas e seus efeitos sobre as alterações bioquímicas no ovoteste do caramujo Lymnaea acuminata (Mollusca;Gastropoda:Lymnaeidae)

The effect of sub-lethal feeding of bait formulations containing molluscicidal component of Ferula asafoetida (ferulic acid, umbelliferone), Syzygium aromaticum (eugenol) and Carum carvi (limonene) on biochemical changes in the ovotestis of snail Lymnaea acuminata were studied. Bait formulations feeding to L. acuminata were studied in clear glass aquaria having diameter of 30 cm. Baits were prepared from different binary combinations of attractant amino acid (valine, aspartic acid, lysine and alanine 10 mM) in 100 mL of 2 percent agar solution + sub-lethal (20 percent and 60 percent of 24h LC50) doses of different molluscicides (ferulic acid, umbelliferone, eugenol and limonene). These baits caused maximum significant reduction in free amino acid, protein, DNA, RNA levels i.e. 41.37, 23.56, 48.36 and 14.29 percent of control in the ovotestis of the snail, respectively. Discontinuation of feeding after treatment of 60 percent of 96h LC50 of molluscicide containing bait for next 72h caused a significant recovery in free amino acid, protein, DNA and RNA levels in the ovotestis of L. acuminata.

Foi estudado o efeito subletal das iscas usadas para alimentação contendo componentes moluscicidas de Ferula asafoetida (ácido ferúlico, umbeliferone), Syzygium aromaticum (eugenol) e Carum carvi (limonene) nas alterações bioquímicas do ovoteste do caramujo Lymnaea acuminata. A formulação das iscas usadas para alimentar L. acuminata foi estudada em aquários de vidros transparentes de diâmetro de 30 cm. As iscas foram preparadas por combinações diferentes binárias de aminoácidos (valina, ácido aspártico, lisina e alanina 10 mM) em 100 mL de solução de agar a 2 por cento + doses subletais (20 por cento e 60 por cento durante 24 horas LC50) de diferentes moluscicidas (ácido ferúlico, umbeliferone, eugenol e limonene). Estas iscas causaram redução significante máxima em aminoácidos livres, proteínas, níveis de DNA e RNA isto é 41,37 por cento, 23,56 por cento, 48,36 por cento e 14,29 por cento de controle no ovoteste do caramujo, respectivamente. Discontinuação da alimentação depois do tratamento de 60 por cento de 96 horas de LC50 do moluscicida contendo a isca para as subsequentes 72 horas causou significante recuperação dos níveis de aminoácidos livres, proteína, DNA e RNA no ovoteste da L. acuminata.

Efficacy of euphorbia hirta latex as plant derived molluscicides against freshwater snails / Eficácia do látex da Euphorbia hirta como moluscicida vegetal contra caramujos de água doce

The toxic effect of binary and tertiary combinations of Euphorbia hirta Linn latex powder with other plant molluscicidal compounds, were evaluated against the freshwater snails Lymnaea (Radix) acuminata and Indoplanorbis exustus in pond. These combinations showed significant time and dose dependent effect against both the snails. These compounds at higher doses were also lethal to freshwater fish Channa punctatus (Bloch) (Channidae {Ophicephalidae}), which shares the habitat with these snails, but the LC90 (24h) doses of snails have no apparent killing properties in fish populations when treated in mixed population of snails and fish.

Os efeitos tóxicos das combinações binárias e terciárias do pó de látex da Euphorbia hirta Linn assim como outros compostos vegetais moluscicidas foram avaliados em sua ação sobre caramujos de água doce Lymnaea (Radix) acuminata e Indoplanorbis exustus em represas. Estas combinações mostraram significante efeito dose e tempo dependente contra ambos os caramujos. Estes compostos em doses altas foram também letais para peixes de água doce Channa punctatus (Bloch) (Channidae {Ophicephalidae}), que compartilham o ambiente com estes caramujos mas a dose LC90 (24h) para caramujos aparentemente não tem propriedade de matar as populações de peixes quando uma população mista de peixes e caramujos são tratadas.