ABSTRACT
Sulfated polysaccharides (SPs) have attracted growing interest for various biotechnological applications. We evaluated the efficiency of two methods of drying SPs (M I and II) extracted from Halymenia sp Rhodophyceae in order to compare the yield, purification and anticoagulant activity. The total SPs (TSPs) were first extracted with papain in 100 mM sodium acetate (pH 5.0) containing cysteine and EDTA (5 mM). The TSPs obtained were dried in an oven (M I) or lyophilized (M II) and then examined by ion exchange chromatography (DEAE-cellulose) using the NaCl gradient technique. The fractions were analyzed by 0.5% agarose gel electrophoresis and the in vitro anticoagulant activity was evaluated by the activated partial thromboplastin time test using normal human plasma and compared to heparin (HEP) (193.00 IU mg-1). There was a difference in TSP yield of 19.05% and similar chromatographic SP profiles. Electrophoresis revealed fractions with distinct resolutions. The fractions eluted with 0.75 M of salt (M I and II) were the most active, measuring 27.40 and 72.66 IU mg-1, respectively, when compared to HEP. Therefore, obtaining SP with anticoagulant activity from Halymenia sp. is more efficient by freeze-drying.
Os polissacarídeos sulfatados (PS) têm despertado interesse crescente para diversas aplicações em biotecnologia. Avaliou-se a eficiência de duas metodologias de secagem de PSs (M I e II) extraídos da rodofícea Halymenia sp. a fim de se comparar o rendimento, a purificação e a atividade anticoagulante. Inicialmente, os PS totais (PSTs) foram extraídos com papaína em tampão acetato de sódio 100 mM (pH 5,0) contendo cisteína e EDTA (5 mM). Os PSTs foram secados em estufa (M I) ou liofilizados (M II), seguido por cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose) utilizando um gradiente de NaCl. As frações foram analisadas por eletroforese em gel de agarose a 0,5% e a atividade anticoagulante "in vitro" avaliada por meio do teste do tempo de tromboplastina parcial ativada usando plasma humano normal e comparadas à heparina (HEP) (193.00 UI mg-1). Verificaram-se diferença no rendimento de PSTs (19,05%) e semelhantes perfis cromatográficos de PS, revelando, por eletroforese, frações de PS distintas em grau de resolução entre os métodos. As frações eluídas com 0,75 M de sal (M I e II) foram as mais ativas, com valores de atividade da ordem de 27,40 e 72,66 UI mg-1, respectivamente, em relação à HEP. Portanto, a secagem por liofilização seria uma forma mais eficaz na obtenção de PSs com atividade anticoagulante de Halymenia sp.
Subject(s)
Blood Coagulation , Macromolecular Substances , PolysaccharidesABSTRACT
The drying operation of the seeds is fundamental in the production system because it reduces the tenor of water to allow its physiologic quality preservation during the storage and makes possible the anticipation of the crop avoiding losses of several CAUSE. In the choice of the drying method, the amount seeds factor is limited and, when we need to dry larger amounts the use of artificial drying is indispensable, whose operation costs are related, mainly, with volume, drying speed and temperature of the air. It becomes important that the operators are aware of the drying conditions that they get to provide to the seeds, aiming to maximize the possible benefits or, on the other hand, to minimize to the maximum the inevitable and irreversible losses that happen from the moment that the seeds reach its maximum quality, still in the field.
A operação de secagem das sementes é fundamental no sistema de produção, pois, além de reduzir o teor de água, para permitir a preservação de sua qualidade fisiológica durante o armazenamento, possibilita a antecipação da colheita evitando perdas de natureza diversa. Na escolha do método de secagem, o fator quantidade de sementes é limitante e, quando necessitamos secar grandes quantidades, é imprescindível a utilização de secagem artificial, cujos custos de operação estão relacionados, principalmente, com volume, velocidade de secagem e temperatura do ar. Torna-se importante que os operadores tenham consciência das condições de secagem que conseguem proporcionar às sementes, buscando maximizar os benefícios possíveis ou, por outro lado, minimizar ao máximo as inevitáveis e irreversíveis perdas que ocorrem a partir do momento que as sementes atingem sua máxima qualidade, ainda no campo.
ABSTRACT
The drying operation of the seeds is fundamental in the production system because it reduces the tenor of water to allow its physiologic quality preservation during the storage and makes possible the anticipation of the crop avoiding losses of several CAUSE. In the choice of the drying method, the amount seeds factor is limited and, when we need to dry larger amounts the use of artificial drying is indispensable, whose operation costs are related, mainly, with volume, drying speed and temperature of the air. It becomes important that the operators are aware of the drying conditions that they get to provide to the seeds, aiming to maximize the possible benefits or, on the other hand, to minimize to the maximum the inevitable and irreversible losses that happen from the moment that the seeds reach its maximum quality, still in the field.
A operação de secagem das sementes é fundamental no sistema de produção, pois, além de reduzir o teor de água, para permitir a preservação de sua qualidade fisiológica durante o armazenamento, possibilita a antecipação da colheita evitando perdas de natureza diversa. Na escolha do método de secagem, o fator quantidade de sementes é limitante e, quando necessitamos secar grandes quantidades, é imprescindível a utilização de secagem artificial, cujos custos de operação estão relacionados, principalmente, com volume, velocidade de secagem e temperatura do ar. Torna-se importante que os operadores tenham consciência das condições de secagem que conseguem proporcionar às sementes, buscando maximizar os benefícios possíveis ou, por outro lado, minimizar ao máximo as inevitáveis e irreversíveis perdas que ocorrem a partir do momento que as sementes atingem sua máxima qualidade, ainda no campo.