ABSTRACT
Acute effect of purified mimosine (MiMo) extracted from Leucaena leucocephala on testicular histopathology has been documented with seminal vesicle (SV) atrophy. Since protein phosphorylation and seminal secretions play important roles in sperm physiology, this study aimed to study the alteration of substances including tyrosine phosphorylated (TyrPho) proteins in seminal vesicle treated with MiMo. Male mice were divided into a control and experimental groups treated with purified MiMo at 3 doses of 15, 30, and 60 mg/KgBW, respectively for 35 consecutive days. The morphology and weights of SV were compared among groups. The levels of magnesium and fructosamine in SV fluid were assayed. The profiles of equally SV total proteins were compared using SDS-PAGE. The expression of seminal TyrPho proteins was detected by western blotting. Recent results showed the decreased weights of SV in MiMo treated mice compared to control. However MiMo in all doses did not affect the levels of magnesium and fructosamine in SV fluid. The SV protein expression of 130 and 55 kDas was obviously decreased in a high dose MiMo. In dose-dependent response, the expressions of 72 and 55 kDas TyrPho proteins of SV were increased. In conclusion, MiMo could affect SV morphological size and protein secretions especially TyrPho proteins.
El efecto agudo de la mimosina purificada (MiMo) extraída de Leucaena leucocephala en la histopatología testicular se ha documentado con atrofia de vesícula seminal (VS). Debido a que la fosforilación de proteínas y las secreciones seminales tienen un papel importante en la fisiología de los espermatozoides, este estudio tuvo como objetivo estudiar la alteración de sustancias como la proteína tirosina fosforilada (TyrPho) en vesículas seminales tratadas con MiMo. Los ratones se dividieron en un grupo control y un grupo experimental y se trataron con MiMo purificado en 3 dosis de 15, 30 y 60 mg / KgBW, respectivamente, durante 35 días seguidos. La morfología y los pesos de VS se compararon entre los grupos. Fueron analizados los niveles de magnesio y fructosamina en el fluido VS. Los perfiles de las proteínas totales de VS se compararon utilizando SDS-PAGE. La expresión de la proteína TyrPho en las vesículas seminales se detectó mediante transferencia de Western blot. Los resultados recientes muestran la disminución del peso de las VS en ratones tratados con MiMo, en comparación con el grupo control. Sin embargo, en ninguna de las dosis se vieron afectados por mimosina purificada los niveles de magnesio y fructosamina en el líquido de las VS. La expresión de la proteína en VS de 130 y 55 kDas disminuyó notablemente en una dosis alta de MiMo. En la respuesta dependiente de la dosis, aumentaron las expresiones de 72 y 55 kDas de las proteínas TyrPho en las VS. En conclusión, la mimosina purificada podría afectar el tamaño morfológico de las VS y la expresión de proteínas, especialmente las proteínas TyrPho.
Subject(s)
Animals , Male , Mice , Phosphoproteins/drug effects , Seminal Vesicles/drug effects , Mimosine/administration & dosage , Organ Size , Phosphoproteins/metabolism , Phosphorylation , Seminal Vesicles/pathology , Tyrosine/analogs & derivatives , Blotting, Western , Phosphotyrosine , Electrophoresis, Polyacrylamide Gel , Mice, Inbred ICR , Mimosine/pharmacologyABSTRACT
This study aimed to determine the mimosine level and examine the male reproductive toxicity effects of Leucaena leucocephala (LL) shoot tips plus young leaf extract. Mimosine level in LL extract was determined by thin layer chromatography before administration in animals. Male rats were divided into control and LL (1,500 mg/KgBW) groups (n = 6). After 60 days of experiment, serum sex hormones, sperm quality, and testicular histopathology were assayed and observed. Malondialdehyde (MDA) level and expressions of steroidogenic acute regulatory (StAR) and phosphorylated proteins in testicular lysate were examined by western blotting. Results showed that mimosine levels in LL extract was 17.35 ± 1.12 % of dry weight. LL significantly decreased FSH & LH levels, sperm qualities, and seminiferous tubule diameter compared to the control (p<0.05). Seminiferous tubular atrophies, germ cell sloughing, and degenerations were observed in LL group. In addition, testicular MDA level and StAR protein expression were significantly decreased in LL group. LL extract could increase the expression of a 50 kDa phohorylated protein in testicular lysate. In conclusion, LL extract has mimosine and reproductive toxicity effects on males.
Este trabajo tuvo como objetivo determinar el nivel de mimosina y examinar los efectos de la toxicidad reproductiva de los brotes de Leucaena leucocephala (LL), más el extracto de hojas jóvenes, en ratas macho. El nivel de mimosina en el extracto de LL se determinó mediante cromatografía en capa fina antes de la administración en animales. Las ratas se dividieron en grupos de control y LL (1,500 mg / kgBW) (n = 6). Después de 60 días, se analizaron y observaron las hormonas sexuales séricas, la calidad de los espermatozoides y la histopatología testicular. A través de Western Blot se examinaron el nivel de malondialdehído (MDA), las expresiones de reguladores agudos esteroidogénicos (StAR) y las proteínas fosforiladas en el lisado testicular. Los resultados mostraron que los niveles de mimosina en el extracto de LL fueron 17.35 ± 1.12 % del peso seco. LL disminuyó significativamente los niveles de FSH y LH, la calidad de los espermatozoides y el diámetro de los túbulos seminíferos en comparación con el control (p <0,05). Se observaron atrofias en los túbulos seminíferos, desprendimiento de células germinales y degeneraciones en el grupo LL. Además, el nivel de MDA testicular y la expresión de la proteína StAR se redujeron significativamente en el grupo LL. El extracto de LL podría aumentar la expresión de la proteína fosforilada de 50 kDa en el lisado testicular. En conclusión, el extracto de LL tiene mimosina y efectos de toxicidad reproductiva en los hombres.
Subject(s)
Animals , Male , Rats , Plant Extracts/toxicity , Plant Extracts/chemistry , Genitalia, Male/drug effects , Fabaceae , Mimosine/analysis , Sperm Count , Spermatozoa/drug effects , Testis/drug effects , Blotting, WesternABSTRACT
This study attempted to examine the acute effect of purified minosine extracted from Leucaena leucocephala on male reproductive system. Adults male mice were divided into 4 groups (n =8); control and 3 experimental groups treated with purified mimosine at different doses of 15, 30, and 60 mg/KgBW, respectively for 7 consecutive days. The morphological features and weights of body and reproductive organs including testis, epididymis plus vas deferens, and seminal vesicle were compared among groups. In addition, epididymal sperm concentration and the changes of histopathology of testicular tissues in all groups were observed. The results showed that mimosine in all doses did not affect mice body weights. However, all doses of mimosine could significantly reduce the absolute and relative weights of testis and seminal vesicle but not of epididymis plus vas deferens. Significantly, mimosine at doses of 30, and 60 mg/KgBW could decrease sperm concentration. Moreover, the seminiferous atrophy and degeneration were obviously found in mimosine treated mice as compared to the control. In conclusion, consumption of Leucaena leucocephala edible parts containing mimosine could damage male reproductive organs which may cause acute male subfertility or infertility.
Este estudio intentó examinar el efecto agudo de la mimosina purificada extraída de Leucaena leucocephala en el sistema reproductivo masculino. Se dividieron ratones machos adultos en 4 grupos (n = 8): un grupo control y tres grupos experimentales tratados con mimosina purificada a diferentes dosis de 15, 30 y 60 mg / Kg por peso, respectivamente, durante 7 días consecutivos. Se compararon entre los grupos, las características morfológicas y el peso corporal, los órganos reproductivos, incluyendo los testículos, el epidídimo más conducto deferente y vesícula seminal. Además, se observó la concentración de espermatozoides epididimarios y los cambios de la histopatología de los tejidos testiculares en todos los grupos. Los resultados mostraron que la mimosina no afectó los pesos corporales de los ratones. Sin embargo, todas las dosis de mimosina podrían reducir significativamente los pesos absolutos y relativos de los testículos y las glándulas seminales, pero no así del epidídimo y los conductos deferentes. La mimosina en dosis de 30 y 60 mg / Kg por peso podría disminuir significativamente la concentración de esperma. Además, se observó la atrofia y degeneración seminífera en ratones tratados con mimosina en comparación con el grupo control. En conclusión, el consumo de partes comestibles de Leucaena leucocephala que contienen mimosina podría dañar los órganos reproductivos masculinos, lo que puede causar subfertilidad masculina aguda o infertilidad.
Subject(s)
Animals , Male , Mice , Testis/drug effects , Fabaceae , Mimosine/pharmacology , Organ Size , Seminal Vesicles/drug effects , Mice, Inbred ICRABSTRACT
A Leucaena leucocephala, popularmente conhecida no nosso país como leucena, é uma planta difundida por todo o mundo e utilizada como forrageira por apresentar vários nutrientes; no entanto, seu uso é limitado, uma vez que possui uma fitotoxina cuja natureza química é de um aminoácido não proteico denominado de mimosina. Em ruminantes, principalmente em bovinos, esta substância causa efeitos tóxicos como alopecia, anorexia, redução no ganho de peso ou perda de peso, salivação excessiva, lesões esofágicas, aumento da tireoide e queda nas concentrações de hormônios tireoidianos. Em monogástricos também tem sido descrita toxicidade evidenciada por alterações como alopecia e diminuição do ganho de peso; porém, os efeitos sobre estes animais ainda não foram bem estudados. Assim, nesta pesquisa objetivou-se inicialmente desenvolver procedimentos químicos para a extração de mimosina das sementes da L.leucocephala e, a partir disto, realizar estudos biológicos, em ratos, para avaliar a toxicidade geral desse aminoácido bem como seus efeitos nos sistemas imune, endócrino e reprodutor. Na extração da mimosina, obteve-se o rendimento de 2,3%. Realizou-se a administração da fitotoxina, por via oral, a ratos Wistar adultos, nas doses de 25, 40 e 60mg/Kg p.v./dia, durante um período de 28 dias. Foram avaliados os seguintes parâmetros: ganho de peso, consumo de ração, bioquímica sérica, histopatologia (fígado, rins, tireoide, timo e baço), peso relativo de órgãos (rins, fígado, timo, baço e testículos), imunidade celular por meio da atividade de macrófagos intraperitoneais, imunidade humoral por meio do título de anticorpos anti-SRBC e /"plaque forming cell/", dosagem de hormônios séricos (testosterona, corticosterona, T3 e T4) e comportamento sexual. Os dados obtidos no presente estudo revelaram que, embora não fossem detectadas alterações clínicas que indicassem toxicidade, e/ou diminuição no consumo de ração e do ganho de peso, nos animais expostos às diferentes doses de mimosina, estes apresentaram lesões consistentes na tireoide. Além disto, observou-se diminuição da testosterona sérica dos ratos que receberam 60mg/Kg de mimosina. Ainda, nas doses de 40 e 60mg/Kg, verificou-se, por meio da avaliação do comportamento sexual, a diminuição no número de montas, bem como o aumento do intervalo entre elas; e nestas maiores doses os ratos também apresentaram aumento da intensidade de fagocitose de macrófagos intraperitoneais. Portanto, os estudos aqui realizados permitem sugerir que a mimosina, nas baixas doses aqui empregadas, não possui efeitos imunotóxicos; porém apresenta potencial bociogênico em ratos e provavelmente atua como desregulador endócrino
Leucaena leucocephala is a worldwide plant used as forage; however its use in animal production has been limited since it has a phytotoxin denominated mimosine. It is known that this substance cause toxicity as alopecia, anorexia, reduced weight gain or weight loss, excessive salivation, esophageal lesions, thyroid enlargement and low thyroid hormones in ruminants, mainly in bovines. On the other hand, toxic effects of mimosine have not well studied in monogastric, but alopecia and low weight gain already was also reported. Thus, this study aimed to evaluate in rats the general toxicity of this amino acid as well as its effects on immune, endocrine and reproductive systems. In the first step of the study, it was extracted from seeds of L.leucocephala 2.3% of mimosine that was administrated orally to adult Wistar rats at different doses of 25, 40 and 60mg/kg body weight/ day, for 28 days. It was evaluated the following parameters: weight gain, feed intake, serum enzymes, histopathology (liver, kidney, thyroid, thymus and spleen), relative organs weight (kidney, liver, thymus, spleen and testicles), cellular and humoral immunity, serum hormones (testosterone, corticosterone, T3 and T4) and sexual behavior. No clinical sings of toxicity was observed in animals, but histopathology reveled consistent lesions in the thyroids. Additionally, rats that received 60mg/kg of mimosine presented low serum levels of testosterone, and in rats treated with both doses of mimosine, 40 and 60mg/Kg, it was verified increase in phagocytosis intensity of intraperitoneal macrophages, decrease mounts number and increase in mounts interval. Therefore, our study permits to suggest that although low doses of mimosine does not have immunotoxic effects in rats, it has goitrogenic potential and probably acts as an endocrine disrupter
Subject(s)
Animals , Rats , Mimosine/toxicity , Rats, Wistar/metabolism , Fabaceae/toxicityABSTRACT
Poisoning of a goat by Leucaena leucocephalai (Leg. Mimosoideae) in the State of Rio de Janeiro, Brazil, is described. Fresh leaves of the plant were ingested as the animal's main meal for at least 4 months before it developed total alopecia. At necropsy the thyroid was moderately enlarged. Histological examination revealed a decrease in the number of hair follicles (empty or in telogenic phase), vacuolation of keratinocytes of the epidermis and hair follicles, and superficial and follicular hyperkeratosis. Myxedema was found between skeletal and cardiac muscles fibers, in the kidneys, and in the submucosa/muscular layer of the digestive tract. The thyroid follicles were enlarged and filled with copious amounts of colloid (colloidal goiter). Although L. leucocephala is common in several tropical regions, natural poisoning by this plant in goats seems to be rare. It is the first report about spontaneous poisoning in goats by L. leucocephala in Brazil.(AU)
Este trabalho descreve a intoxicação natural por Leucaena leucocephalai em um caprino, no município de Maricá, RJ. No ano de 1997, o animal ingeriu voluntariamente as folhas da planta fresca como alimentação quase exclusiva, por pelo menos 4 meses, e, aos poucos, foi perdendo os pêlos até tornar-se totalmente alopécico. À necropsia, a tireóide estava moderadamente aumentada. O exame microscópico revelou decréscimo do número de folículos, além de folículos sem pêlos ou em fase telogênica, vacuolização de queratinócitos da epiderme e de folículos e acentuada hiperqueratose superficial e folicular. Havia mixedema entre fibras musculares esqueléticas e cardíacas, no rim e na submucosa, e muscular do trato digestório. Os folículos tireoideanos estavam dilatados e preenchidos por grande quantidade de colóide ("bócio coloidal"). Embora essa planta seja freqüente em várias regiões tropicais, a ocorrência natural dessa intoxicação parece bastante rara e ainda não havia sido descrita em caprinos no Brasil.(AU)
Subject(s)
Animals , Goats , Plant Poisoning/diagnosis , Plant Poisoning/veterinaryABSTRACT
Poisoning of a goat by Leucaena leucocephalai (Leg. Mimosoideae) in the State of Rio de Janeiro, Brazil, is described. Fresh leaves of the plant were ingested as the animal's main meal for at least 4 months before it developed total alopecia. At necropsy the thyroid was moderately enlarged. Histological examination revealed a decrease in the number of hair follicles (empty or in telogenic phase), vacuolation of keratinocytes of the epidermis and hair follicles, and superficial and follicular hyperkeratosis. Myxedema was found between skeletal and cardiac muscles fibers, in the kidneys, and in the submucosa/muscular layer of the digestive tract. The thyroid follicles were enlarged and filled with copious amounts of colloid (colloidal goiter). Although L. leucocephala is common in several tropical regions, natural poisoning by this plant in goats seems to be rare. It is the first report about spontaneous poisoning in goats by L. leucocephala in Brazil.
Este trabalho descreve a intoxicação natural por Leucaena leucocephalai em um caprino, no município de Maricá, RJ. No ano de 1997, o animal ingeriu voluntariamente as folhas da planta fresca como alimentação quase exclusiva, por pelo menos 4 meses, e, aos poucos, foi perdendo os pêlos até tornar-se totalmente alopécico. À necropsia, a tireóide estava moderadamente aumentada. O exame microscópico revelou decréscimo do número de folículos, além de folículos sem pêlos ou em fase telogênica, vacuolização de queratinócitos da epiderme e de folículos e acentuada hiperqueratose superficial e folicular. Havia mixedema entre fibras musculares esqueléticas e cardíacas, no rim e na submucosa, e muscular do trato digestório. Os folículos tireoideanos estavam dilatados e preenchidos por grande quantidade de colóide ("bócio coloidal"). Embora essa planta seja freqüente em várias regiões tropicais, a ocorrência natural dessa intoxicação parece bastante rara e ainda não havia sido descrita em caprinos no Brasil.
ABSTRACT
Allelopathy is the direct or indirect effect of one plant on another through substances liberated into the environment, and occurs widely in natural plant communities. The secondary metabolites or natural products involved in allelopathy are called allelochemicals and can be produced in different parts of the plants. The purpose of this study was to determine the allelopathic potential of the aerial part of Leucaena leucocephala on the weeds Desmodium purpureum, Bidens pilosa and Amaranthus hybridus. Bioassays were carried out in laboratory and in greenhouse with aqueous extracts of the aerial part of leucaena in concentrations of 100, 50, 25, 12.5 % (v v-1). The aqueous extract showed major effect over the weeds when applied to filter paper. The allelopathic potential of leucaena varied with weed species, but B. pilosa and A. hybridus were the most sensible species to the extract in both bioassays. Mimosine was quantified by HPLC in concentrations directly correlated to extract concentrations, indicating this allelochemical as the possible substance involved in effects on weed germination and development.
Alelopatia é o efeito direto ou indireto de uma planta sobre outra, por meio da produção de compostos químicos liberados no ambiente. Os metabólitos secundários ou produtos naturais envolvidos em alelopatia são denominados aleloquímicos e estão presentes nos tecidos de diferentes partes das plantas. O objetivo deste trabalho foi determinar o potencial alelopático da leucena (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit.) sobre as plantas daninhas Desmodium purpureum (desmódio), Bidens pilosa (picão-preto) e Amaranthus hybridus (caruru). Os bioensaios foram conduzidos em laboratório e em casa de vegetação com extratos aquosos da parte aérea da leucena nas concentrações de 100, 50, 25, 12,5 % (v v-1). O extrato apresentou maior efeito quando aplicado em papel filtro. O potencial alelopático da leucena variou com a espécie de planta daninha, sendo o picão-preto e o caruru as espécies mais sensíveis ao extrato em ambos os bioensaios. A mimosina foi quantificada por HPLC em concentrações diretamente correlacionadas à concentração do extrato, indicando ser este aleloquímico o provável responsável pelo efeito sobre a germinação e o desenvolvimento das plantas daninhas.
ABSTRACT
Allelopathy is the direct or indirect effect of one plant on another through substances liberated into the environment, and occurs widely in natural plant communities. The secondary metabolites or natural products involved in allelopathy are called allelochemicals and can be produced in different parts of the plants. The purpose of this study was to determine the allelopathic potential of the aerial part of Leucaena leucocephala on the weeds Desmodium purpureum, Bidens pilosa and Amaranthus hybridus. Bioassays were carried out in laboratory and in greenhouse with aqueous extracts of the aerial part of leucaena in concentrations of 100, 50, 25, 12.5 % (v v-1). The aqueous extract showed major effect over the weeds when applied to filter paper. The allelopathic potential of leucaena varied with weed species, but B. pilosa and A. hybridus were the most sensible species to the extract in both bioassays. Mimosine was quantified by HPLC in concentrations directly correlated to extract concentrations, indicating this allelochemical as the possible substance involved in effects on weed germination and development.
Alelopatia é o efeito direto ou indireto de uma planta sobre outra, por meio da produção de compostos químicos liberados no ambiente. Os metabólitos secundários ou produtos naturais envolvidos em alelopatia são denominados aleloquímicos e estão presentes nos tecidos de diferentes partes das plantas. O objetivo deste trabalho foi determinar o potencial alelopático da leucena (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit.) sobre as plantas daninhas Desmodium purpureum (desmódio), Bidens pilosa (picão-preto) e Amaranthus hybridus (caruru). Os bioensaios foram conduzidos em laboratório e em casa de vegetação com extratos aquosos da parte aérea da leucena nas concentrações de 100, 50, 25, 12,5 % (v v-1). O extrato apresentou maior efeito quando aplicado em papel filtro. O potencial alelopático da leucena variou com a espécie de planta daninha, sendo o picão-preto e o caruru as espécies mais sensíveis ao extrato em ambos os bioensaios. A mimosina foi quantificada por HPLC em concentrações diretamente correlacionadas à concentração do extrato, indicando ser este aleloquímico o provável responsável pelo efeito sobre a germinação e o desenvolvimento das plantas daninhas.
ABSTRACT
The ruminal suspended nylon bags technique was used to study the degradability of crude protein and disintegration of minosin of Leucaena leucocephala in water buffaloes. The experimental desing was in a 4 x 4 Latin square, with variable levels of crude protein (8.8, 10,5, 12,5, and 14.9% of dry matter). The diets did not cause significant differences on the ruminal degradation of crude protein of Leucaena (P > 0.01), that ranged from 30.92 to 71.70% in, respectively, 3 or 48 hours of ruminal exposition. There was observed a clow ruminal protein degradation and a strong desingration of mimosin on the samples of Leucaena exposed in nylon bags to the rumen of water buffaloes
A técnica de sacos de náilon suspensos no rúmen foi utilizada para estudar a degradabilidade da proteína bruta e do desdobramento da mimosina da Leucaena leucocephala em búfalos submetidos a um experimento em quadrado latino (4 x 4) com diferentes níveis de proteína bruta na ração (8,7; 10,5; 12,5 c 14,9% na MS). As rações não promoveram diferenças significativas (P > 0,01) na degradabilidade ruminal da proteína bruta da leucaena, que variou entre 30,92% e 71,70% em 3 e 48 horas de suspensão no rúmen, respectivamente. Houve uma lenta degradação ruminal da proteína e um acentuado desdobramento da mimosina nas amostras de leucaena colocadas dentro dos sacos de náilon no rúmen de búfalos.
ABSTRACT
Two completely randomized trials with sheep we re run to study the feeding Leucaena leucocephala on concentration of rumen ciliate protozoa. In trial 1, ten sheep were subjected to two frequencies (twice or four times daily) being the Leucaena hay fed as sole diet. In trial 2, nine sheep were subjected to three treatments: a) 100% Rhodes grass hay (Chloris gayana kunth); b) 30:70%; c) 50 : 40% Leucaena hay and Rhodes grass hay, respectively. The animals were adapted for 21 day period, and after that, rumen fluid samples were taken from each sheep via stomach tube before first feeding. Increasing the feeding frequencies from 2 to 4 times/ day resulted in a decrease in total and ciffsrental numbe"rs of protozoa, excet for genus Epidinium spp. which was not present. The levels 30% and 60% of Leucaena hay in diet on dry matter bases did not result in a significant change in concentration of rumen ciliate protozoa, excet the genus Dasytrich a spp. which showed significant decrease (P 0,05). Differential protozoa counts revealed that Entodinia species predominanted when sheep were fed only Leucaena (30.0%). From those rindings, it may be made an hypotesis of protozoocid" action of mimosine or DHP "per si" or products of mimosine metabolism, facilitated for feeding frequencies of microrganisms in the rumen with increase in number of bacteria species breacKdown these compounds d
Foram realizadas contagens totais e de cinco principais gêneros de protozoários ciliados do rúmen: Entodinium spp., Diplodinim spp., Epidinium spp., Dasytricha spp. e Isotricha spp., por mL de líquido ruminal em carneiros submetidos a dois experimentos inteiramente casualizados. No Exp. 1, cinco animais receberam apenas feno de leucena [( Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit)] duas vezes ao dia (7:00 e 18:00 horas) e cinco foram alimentados quatro vezes ao dia (7:00; 13:00; 18:00 e 01:00 horas). No Exp. 2, nove destes animais foram sorteados em três tratamentos, com três repetições por tratamento, sendo: a) somente feno de capim de Rhodes (Chloris gayana kunth); b) 30 : 70 % e c) 60 : 40 % de feno de leucena mais feno de Rhodes, respectivamente. O aumento na freqüência de alimentação de duas para quatro vezes ao dia reduziu significativamente o número dos ciliados estudados, exceto para o gênero Epidinium spp., que não foi encontrado em nenhum animal. A substituição parcial do feno de capim de Rhodes pelo feno de leucena nos dois níveis 30 e 80% da M.S. não produziu diferenças significativas nas contagens total e diferencial dos protozoários, exceto para o gênero Dasytricha spp. que mostrou diminuição significativa CP ( 0,05). Houve predominância do gênero Entodinium spp., (cerca de 90,0%) quando os animais receberam exclusivamente feno de leucena. Estes dados permitem levantar
ABSTRACT
Two completely randomized trials with sheep we re run to study the feeding Leucaena leucocephala on concentration of rumen ciliate protozoa. In trial 1, ten sheep were subjected to two frequencies (twice or four times daily) being the Leucaena hay fed as sole diet. In trial 2, nine sheep were subjected to three treatments: a) 100% Rhodes grass hay (Chloris gayana kunth); b) 30:70%; c) 50 : 40% Leucaena hay and Rhodes grass hay, respectively. The animals were adapted for 21 day period, and after that, rumen fluid samples were taken from each sheep via stomach tube before first feeding. Increasing the feeding frequencies from 2 to 4 times/ day resulted in a decrease in total and ciffsrental numbe"rs of protozoa, excet for genus Epidinium spp. which was not present. The levels 30% and 60% of Leucaena hay in diet on dry matter bases did not result in a significant change in concentration of rumen ciliate protozoa, excet the genus Dasytrich a spp. which showed significant decrease (P 0,05). Differential protozoa counts revealed that Entodinia species predominanted when sheep were fed only Leucaena (30.0%). From those rindings, it may be made an hypotesis of protozoocid" action of mimosine or DHP "per si" or products of mimosine metabolism, facilitated for feeding frequencies of microrganisms in the rumen with increase in number of bacteria species breacKdown these compounds d
Foram realizadas contagens totais e de cinco principais gêneros de protozoários ciliados do rúmen: Entodinium spp., Diplodinim spp., Epidinium spp., Dasytricha spp. e Isotricha spp., por mL de líquido ruminal em carneiros submetidos a dois experimentos inteiramente casualizados. No Exp. 1, cinco animais receberam apenas feno de leucena [( Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit)] duas vezes ao dia (7:00 e 18:00 horas) e cinco foram alimentados quatro vezes ao dia (7:00; 13:00; 18:00 e 01:00 horas). No Exp. 2, nove destes animais foram sorteados em três tratamentos, com três repetições por tratamento, sendo: a) somente feno de capim de Rhodes (Chloris gayana kunth); b) 30 : 70 % e c) 60 : 40 % de feno de leucena mais feno de Rhodes, respectivamente. O aumento na freqüência de alimentação de duas para quatro vezes ao dia reduziu significativamente o número dos ciliados estudados, exceto para o gênero Epidinium spp., que não foi encontrado em nenhum animal. A substituição parcial do feno de capim de Rhodes pelo feno de leucena nos dois níveis 30 e 80% da M.S. não produziu diferenças significativas nas contagens total e diferencial dos protozoários, exceto para o gênero Dasytricha spp. que mostrou diminuição significativa CP ( 0,05). Houve predominância do gênero Entodinium spp., (cerca de 90,0%) quando os animais receberam exclusivamente feno de leucena. Estes dados permitem levantar