MDGC-MS analysis of essential oils from Protium heptaphyllum (Aubl. ) and their antifungal activity against Candida specie / Análise MDGC-MS de óleos essenciais de Protium heptaphyllum (Aubl. ) e sua atividade antifúngica contra espécies de Candida

ABSTRACT Protium heptaphyllum is found in the Amazon region, and in various Brazilian states and South American countries. Also Known as almecega, it produces an oil resin used in traditional medicine as analgesic, anti-inflammatory, cicatrizant and expectorant, it is rich in pentacyclic triterpenes and essential oil. The main objective of this study was to analyze the chemical composition of P. heptaphyllumresin (OEPh) over different extraction times and to evaluate their antifungal activity against Candida species, obtained from gardeners with onychomycosis, using the disk diffusion method. The OEPh was obtained by hydrodistillation and analyzed by Multidimensional Gas Chromatography coupled with Mass Spectrometry (MDGC / MS). Candida species were obtained from lesions on the nails of horticulturist from a community garden in the city of Teresina, Piauí, Brazil. The antifungal activity in concentrations of 1000 µg/L, 500 µg/L and 250 µg/L, PROTOCOL M44-A2 (CLSI 2009) OEPh was tested. The main constituents identified were: l-limonene, α-terpineol, p-cineol, o-cymene and α-phellandrene, however, its composition varies significantly with extraction time. All species, except C. rugosa, were inhibited with halo (≥ 14 mm) at 1000 μg / L. C. krusei is naturally resistant to the drug fluconazole, but when tested with OEPh the clinical species (case 9) demonstrated sensitivity in three dilutions (halo ≤ 10 ≥ 14) and the standard strain was inhibited at concentration of 1000 μg/Lg / L (halo 14mm). A similar situation also occurred with the standard strain of C. parapsilosis (halo ≥ 11mm). OEPh has considerable antifungal activity, which merits further investigation for alternative clinical applications, since this species is widely distributed in our community, and it presents good yields, and also has important therapeutic applications.

RESUMO Protium heptaphyllum é encontrada na região amazônica, em vários estados do Brasil e países da América do Sul. Conhecida como almecega produz uma resina oleosa usada na medicina popular como analgésica, antiinflamatória, cicatrizante e expectorante, é rica em triterpenos pentaciclicos e óleo essencial. O objetivo principal do presente trabalho foi analisar a composição química do óleo essencial da resina P. heptaphyllum (OEPh) em diferentes tempo de extração e avaliarsuaatividade antifúngica contra espécies de Candida, isoladas de horticultores com onicomicoses, por método de disco-difusão. O OEPh foi obtido por hidrodestilação, analisado por Cromatografia Gasosa Multidimensinal Acoplada a Espectrometria de Massas (MDGC/MS). As espécies de Candida foram obtidas de lesões nas unhas de horticultores de uma horta comunitária na cidade de Teresina, Piauí, Brasil. Testou-se a atividade antifúngica do OEPhnas concentrações de 1000 μg/L, 500 μg/L e 250 μg/L, protocolo M44-A2 (CLSI 2009). Os principais constituintes identificados foram l- limoneno, α-terpineol, p-cineol, o-cimeno e α-felandreno, entretanto, sua composição varia significativamente em decorrência do tempo de extração. Todas as espécies, exceto a C. rugosa, foram inibidas com halo ( Χ ≥ 14 mm) na concentração de 1000 μg/L. C. krusei é naturalmente resistente ao fármaco fluconazol, mas quando testado com OEPh,a espécie clínico (caso 9) demonstrou sensibilidade nas três diluições (halo Χ ≤ 10 ≥ 14) e a cepa padrão foi inibida na concentração de 1000 μg/L (halo Χ 14mm). Fato semelhante também ocorreu com a cepa padrão de C. parapsilosis (halo Χ ≥ 11mm). O OEPh possui atividade antifúngica considerável, merecendo uma investigação mais aprofundada para aplicações clínicas alternativas, uma vez que esta espécie é amplamente distribuída em nossa comunidade, apresenta bom rendimento e, ainda, aplicações terapêuticas importantes.

Obtenção de extratos de própolis sob diferentes condições e avaliação de sua atividade antifúngica / Antifungal activity evaluation of different propolis extracts

A própolis é uma resina coletada das árvores pelas abelhas Apis mellifera L., que contém inúmeras substâncias, dentre elas os flavonóides. Devido a grande variedade de sua composição química, apresenta várias ações farmacológicas, destacando-se as ações antiinflamatória, cicatrizante, antitumoral e antimicrobiana, principalmente a antifúngica. Esta ação foi testada frente a leveduras isoladas de onicomicoses, que são infecções de difícil e longo tratamento que causam efeitos indesejáveis ao paciente. A própolis surge como uma eficiente opção de tratamento, pois é de baixa toxicidade e pode ser de uso tópico. Este trabalho objetivou avaliar a otimização do processo extrativo da própolis através de parâmetros físico-químicos e demonstração da atividade antifúngica.

Propolis is a resin collected by the bees Apis mellifera L., which contains several substances including the flavonoids. Due to a diversified chemical composition propolis presents some pharmacological actions, being distinguished the anti-inflammatory, healing, antitumoral and antimicrobial properties and, in particular, its antifungal action. This action has been tested against yeasts obtained from onychomycosis, which are infections of difficult and long treatment and they can manifest intolerable effects on the patient. The propolis appears as an efficient therapy option, as it has low toxicity and should be of dermal use. The aim of the present study was to evaluate the optimization of the propolis extractive process through physiochemical parameters and antifungal activity demonstration.

Ocorrência de onicomicose em Maringá, Estado do Paraná, Brasil / Occurrence of the onychomycosis in Maringá, Paraná State, Brazil

Onicomicoses são infecções fúngicas que atingem as unhas e acometem cerca de 30% da população. Recentemente tem sido relatado aumento dessas infecções e também alterações em sua etiologia. O objetivo deste estudo foi avaliar a freqüência das onicomicoses e perfil dos pacientes acometidos em Maringá, Estado do Paraná, Brasil. Entre janeiro de 1999 a junho de 2003 foram analisadas, no Laboratório de Micologia do Lepac (Laboratório de Ensino e Pesquisa em Análises Clínicas) da Universidade Estadual de Maringá, um total de 435 amostras de pacientes com suspeita clínica de onicomicose. Destas amostras 74,25% (N = 323) foram positivas, sendo 15,48% confirmadas por exame direto (N=50), 20,43% exclusivamente por cultura (N=66) e 64,09% por exame direto e cultura (N=207). As mulheres foram mais afetadas que os homens (72,67% e 27,33%), respectivamente, e a maior prevalência foi em indivíduos com mais de 40 anos. As unhas dos pés foram mais acometidas que as unhas das mãos (65,90% e 34,10%), respectivamente. Os agentes etiológicos mais freqüentes foram as leveduras (52,17%) isoladas especialmente das unhas das mãos. Os fungos filamentosos foram prevalentes nas unhas dos pés, destacando-se...

Onychomycosis are fungal infections that reach the nails and affect about 30% of the population. Recently has been observed increase of these infections and also alterations in its etiology. The objective of this study was to evaluate the frequency of these mycosis and profile of the patients attacked in Maringá, Paraná State, Brazil. Between January 1999 to June 2003 were analyzed at the Mycological Laboratory from the Teaching and Research Laboratory in Clinical Analyses (Lepac) a total of 435 samples of patients with clinical symptoms of onychomycoses. Of those samples 74,25% (N=323), were positive, being 15,48% confirmed by direct examination (N=50), 20,43% by culture exclusively (N=66) and 64,09% by direct examination plus culture (N=207). Females were more affected than males (72,67% and 28,33%) respectively and the higher prevalence was in patients more than 40 years old. Toenails were more frequently infected than fingernails (65,90% and 34,10%) respectively. Yeasts were isolated in 52,17% of nail samples analysed, specially from finger nails. Filamentous fungi were isolated mainly from toenails. The dermatophytes and Non-dermatophytes filamentous fungi (NDFF) were responsible for 33,85% and 13,97% of cases respectively.