Relación del equivalente de hemoglobina reticulocitaria (Ret-He) con diferentes categorías según la concentración de hemoglobina en candidatos a donar sangre

Objetivo: determinar la relación entre el Ret-He con diferentes categorías según la concentración de hemoglobina en candidatos a donar sangre. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio transversal a partir de la revisión de 227 historias clínicas de candidatos a donar sangre durante el mes de diciembre del 2021 en el Servicio de Banco de Sangre y Hemoterapia del Hospital Cayetano Heredia. Se categorizó en 3 grupos según los niveles de hemoglobina: Grupo 1: ≥12,5 g/dl (mujeres) - ≥13,5 g/dl (varones). Grupo 2: 12 g/dl ≥ mujeres <12.5 g/dl y 13 g/dl ≥ varones<13.5 g/dl. Grupo 3: <12 g/dl (mujeres) - <13 g/dl (varones). Se tomaron datos de hematocrito, hemoglobina, VCM, HCM, CHCM y Ret-He. Para el análisis bivariado se utilizó el análisis de varianza (ANOVA) y se consideró un nivel de significancia del 5 %. Resultados: La mediana de Ret-He fue mayor en el grupo 1 que en el grupo 2 (33.5 frente a 32.5; p=0.002) y en el grupo 3 (33.5 frente a 27.8; p<0.001). Se encontró relación estadísticamente significativa entre los grupos estudiados y Ret-He (p<0.001), además de una correlación positiva moderada fuerte entre Ret-He y los índices eritrocitarios. Conclusiones: Se encontró una asociación significativa entre los grupos basados en categorías de hemoglobina y la Ret-He en candidatos a donar sangre.

Objective: to determine the relationship between Ret-He with different categories according to hemoglobin concentration in candidates for blood donation. Methods: A cross-sectional study was carried out based on the review of 227 medical records of candidates to donate blood during the month of December 2021 in the Blood Bank and Hemotherapy Service of the Cayetano Heredia Hospital. They were categorized into 3 groups according to hemoglobin levels: Group 1: ≥12.5 g/dl (females) - ≥13.5 g/dl (males). Group 2: 12 g/dl ≥ females <12.5 g/dl and 13 g/dl ≥ males<13.5 g/dl. Group 3: <12 g/dl (females) - <13 g/dl (males). Hematocrit, hemoglobin, VCM, HCM, CHCM and Ret-He data were collected. For the bivariate analysis, analysis of variance (ANOVA) was used and a significance level of 5% was considered. Results: The median Ret-He was higher in group 1 than in group 2 (33.5 vs. 32.5; p=0.002) and in group 3 (33.5 vs. 27.8; p<0.001). A statistically significant relationship was found between the groups studied and Ret-He (p<0.001), in addition to a moderate-strong positive correlation between Ret-He and erythrocyte indices. Conclusions: An association was found between groups based on hemoglobin categories and Ret-He in blood donation candidates.

Hemoglobin analysis after overload training in athletes / Análise de hemoglobina após treinamento de sobrecarga em atletas / Análisis de la hemoglobina tras el entrenamiento de sobrecarga en atletas

ABSTRACT Introduction: The cardiovascular system provides athletes with the proper conditions for blood circulation, ensuring the stability and normal metabolism of the body's internal environment during exercise. Objective: Investigate the effect of overload training on the hemoglobin of male taekwondo athletes. Methods: Twenty-one male taekwondo athletes (level 2 or higher) were selected and trained for four weeks, five days per week, with an initial load intensity of 60% of the maximum heart rate and a weekly intensity increase of 10%. Before training and on every weekend during training, hemoglobin (Hb), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), reticulocyte count (Ret) were checked, RBC volume distribution width (RDW), hemoglobin content distribution width (HDW), mean reticulocyte volume (MCVr), mean reticulocyte hemoglobin concentration (CHCMr), serum iron (Fe) and ferritin (Fer). Results: After four weeks of increasing load training, athletes showed a progressive and significant decrease in Hb (P<0.01), manifested as exercise-induced hypohemoglobin, and MCV, MCH, MCHC, CHCMr, HDW, and serum ferritin were significantly or extremely decreased(P<0.) 05, P<0.01); RDW increased significantly (P<0.05); Changes in Ret and serum iron showed no statistical significance (P>0.05). Correlation analysis found that hemoglobin concentration had the highest correlation with MCHC and CHCMr. Conclusion: Four-week incremental load training can induce exercise-induced hypohemoglobin in male taekwondo athletes, its changes being most correlated with MCHC and CHCMr, but without significant correlation with serum Fe, RDW, HDW, and MCV. Level of Evidence: Therapeutic Studies -Investigation of Outcomes.

RESUMO Introdução: O sistema cardiovascular fornece aos atletas as condições propícias para a circulação sanguínea, garantindo a estabilidade e o metabolismo normal do ambiente interno corporal durante o exercício. Objetivo: Investigar o efeito do treinamento em sobrecarga sobre a hemoglobina dos atletas masculinos de Taekwondo. Métodos: Vinte e um atletas masculinos de taekwondo (nível 2 ou superior) foram selecionados e treinados durante 4 semanas, 5 dias por semana, com uma intensidade de carga inicial de 60% da frequência cardíaca máxima e um aumento de intensidade semanal de 10%. Antes do treinamento e em todos os fins de semana durante o treinamento, foi verificada a hemoglobina (Hb), volume corpuscular médio (MCV), hemoglobina corpuscular média (MCH), concentração corpuscular média de hemoglobina (MCHC), contagem de reticulócitos (Ret), largura de distribuição do volume de hemácias (RDW), largura de distribuição do conteúdo de hemoglobina (HDW), volume médio de reticulócitos (MCVr), concentração média de hemoglobina reticulócitos (CHCMr), ferro sérico (Fe) e ferritina (Fer). Resultados: Após 4 semanas em treinamento de carga crescente, os atletas mostraram uma diminuição progressiva e significativa em Hb(P<0,01), manifestada como hipohemoglobina induzida por exercício, e MCV, MCH, MCHC, CHCMr, HDW, e ferritina sérica foram significativamente ou extremamente diminuídos(P<0). 05, P<0,01); RDW aumentou significativamente (P<0,05); Alterações de Ret e ferro sérico não apresentaram significância estatística (P>0,05). A análise de correlação constatou que a concentração de hemoglobina teve a maior correlação com MCHC e CHCMr. Conclusão: O treinamento de carga incremental de quatro semanas pode induzir hipohemoglobina induzida por exercício em atletas taekwondo masculinos, sendo suas alterações mais correlacionadas com MCHC e CHCMr, mas sem correlação significativa com Fe sérico, RDW, HDW e MCV. Nível de evidência: Estudos Terapêuticos -Investigação dos Resultados.

RESUMEN Introducción: El sistema cardiovascular proporciona a los deportistas las condiciones propicias para la circulación sanguínea, garantizando la estabilidad y el metabolismo normal del medio corporal interno durante el ejercicio. Objetivo: Investigar el efecto del entrenamiento de sobrecarga en la hemoglobina de los atletas masculinos de taekwondo. Métodos: Se seleccionaron 21 atletas masculinos de taekwondo (de nivel 2 o superior) y se entrenaron durante 4 semanas, 5 días a la semana, con una intensidad de carga inicial del 60% de la frecuencia cardíaca máxima y un aumento semanal de la intensidad del 10%. Antes del entrenamiento y cada fin de semana durante el mismo, se comprobó la hemoglobina (Hb), el volumen corpuscular medio (MCV), la hemoglobina corpuscular media (HCM), la concentración de hemoglobina corpuscular media (MCH) y el recuento de reticulocitos (Ret), Anchura de distribución del volumen de glóbulos rojos (RDW), anchura de distribución del contenido de hemoglobina (HDW), volumen reticulocitario medio (MCVr), concentración media de hemoglobina reticulocitaria (CHCMr), hierro sérico (Fe) y ferritina (Fer). Resultados: Después de 4 semanas de entrenamiento con carga creciente, los atletas mostraron una disminución progresiva y significativa de la Hb (P<0,01), que se manifestó como hipohemoglobina inducida por el ejercicio, y el MCV, el MCH, el MCHC, el CHCMr, el HDW y la ferritina sérica disminuyeron de forma significativa o extrema (P<0,01). 05, P<0,01); el ADE aumentó significativamente (P<0,05); los cambios en el Ret y el hierro sérico no mostraron significación estadística (P>0,05). El análisis de correlación encontró que la concentración de hemoglobina tenía la mayor correlación con MCHC y CHCMr. Conclusión: El entrenamiento de carga incremental de cuatro semanas puede inducir hipohemoglobina inducida por el ejercicio en atletas masculinos de taekwondo, siendo sus cambios los más correlacionados con MCHC y CHCMr, pero sin correlación significativa con el Fe sérico, RDW, HDW y MCV. Nivel de evidencia: Estudios terapéuticos - Investigación de resultados.

Enfermedades frecuentes durante el período neonatal. Resultados del hemograma, frotis de sangre periférica, conteo de reticulocitos y conteo de plaquetas

RESUMEN El hemograma, el frotis de sangre periférica, el conteo de reticulocitos y el conteo de plaquetas en el período neonatal son exámenes fundamentales en el diagnóstico y seguimiento de algunas enfermedades más frecuentes en esta fase de la vida como la anemia y las infecciones, las cuales, en ocasiones, pueden causar gran morbilidad y mortalidad en el neonato. Se efectúa una revisión bibliográfica de los resultados del hemograma, lámina periférica, conteo de reticulocitos y conteo de plaquetas en el neonato a término y pretérmino describiendo las variaciones de estos parámetros en el síndrome anémico y la sepsis del recién nacido.

ABSTRACT The complete blood count, the peripheral blood smear, the reticulocyte count and the platelet count in the pathological neonatal period are fundamental tests in the diagnosis and follow-up of some of the most frequent diseases in this phase of life, such as anemia and infections, which can sometimes cause great morbidity and mortality in the newborn. A bibliographic review of the results of the hemogram, peripheral lamina, reticulocyte count and platelet count in term and preterm neonates is carried out, describing the variations of these parameters in the anemia syndrome and sepsis of the newborn.

Hemograma, frotis de sangre periférica, conteo de plaquetas y conteo de reticulocitos en el recién nacido normal y sus variaciones fisiológicas

RESUMEN Se define recién nacido normal a aquel niño con peso superior a 2500 gramos e inferior a 4000 gramos, a término, y que no presenta afección ni presente ni probable en el momento del nacimiento. Los valores del hemograma, la morfología del frotis de sangre periférica, el conteo de reticulocitos y de plaquetas en el recién nacido normal varían según su tiempo de vida y son efecto de diferentes causas fisiológicas; aunque también existen numerosas alteraciones patológicas en estos exámenes de laboratorio en caso de determinadas enfermedades que pueden aparecer en esta etapa de la vida. En los recién nacidos pre término estas cambios son más evidentes. Se realizó una revisión bibliográfica sobre el hemograma, lámina periférica, conteo de plaquetas y conteo de reticulocitos en el recién nacido normal donde se exponen los resultados de estos estudios según su tiempo de nacimiento. Se realizan conclusiones.

ABSTRACT A normal newborn is defined as a child weighing more than 2500 grams and less than 4000 grams, at term, and who does not present affection or possible affection at the time of birth. The values of the hemogram, the morphology of the peripheral blood smear, the reticulocyte and platelet count in the normal newborn vary according to their life span and are the effect of different physiological causes; although there are also numerous pathological alterations in these laboratory tests in the case of certain diseases that may appear at this stage of life. In preterm newborns these changes are more evident. A bibliographic review was carried out on the hemogram, peripheral lamina, platelet count and reticulocyte count in the normal newborn where the results of these studies are presented according to their time of birth. Conclusions are made.

Reticulocyte parameters for monitoring anemia in patients with chronic kidney disease on peritoneal dialysis / Parâmetros reticulocitários para monitoramento de anemia em pacientes com doença renal crônica em diálise peritoneal

ABSTRACT Introduction: Anemia is a complication with impact on morbidity and mortality in chronic kidney disease (CKD) patients. Current markers for the diagnosis and monitoring of anemia in CKD are limited by the interrelation between erythropoiesis, iron stores, inflammation, and the resistance to treatment with erythropoiesis stimulant agents (ESA). Objective: The aim of this study was to analyze the role of immature reticulocyte fraction (IRF) and hemoglobin concentration in reticulocytes (RET-He) by the hematology analyser Sysmex XN-5000 in the monitoring of CKD anemia in peritoneal dialysis patients. Methods: This was a prospective, observational multicenter study which compared IRF and RET-He with parameters recommended by the guidelines. Inflammatory biomarkers were analyzed by the Luminex® Multiplexing Instruments system. Thirty-five patients (59 ± 13 years old; 51% men) were included in the analysis. Results: Hemoglobin was 12.2 ± 2 g/dl; 87% had resistance to ESA. Patients with erythropoietin resistance index (ERI) in the upper quartile presented a significantly higher of IRF and a lower percentage of iron deficiency (12%) compared to ferritin (82%) and transferrin saturation index (STI) (51%). Interleukin-6 (IL-6) levels correlated with the percentage of medium fluorescence reticulocyte (MFR) (r = 0.45, p < 0.03). Hemoglobin values after 60 and 180 days were consistently higher in the group of patients with a IRF% lower than 10.5. Conclusion: IRF and RET-He may add value in the iron deficiency investigation, as well as in the identification of patients with ERI. Due to the restricted number of patients analyzed in this study, future studies should be encouraged in larger populations and with prospective follow-up, to validate our findings.

RESUMEN Introducción: La anemia es una complicación con impacto en la morbimortalidad en pacientes con enfermedad renal crónica (ERC). Los biomarcadores usados para el diagnóstico y seguimiento de la anemia en la ERC están limitados por la interrelación entre eritropoyesis, depósitos de hierro, inflamación y resistencia al tratamiento con agentes estimulantes de la eritropoyesis (AEE). Objetivo: El objetivo de este estudio fue analizar el papel de la fracción de reticulocitos inmaduros (IRF) y el equivalente de hemoglobina en reticulocitos (RET-He) mediante el analizador hematológico Sysmex XN-5000 en el seguimiento de la anemia por ERC en pacientes en diálisis peritoneal. Métodos: Estudio prospectivo, observacional multicéntrico que comparó IRF y RET-He con los parámetros recomendados por las guías. Los biomarcadores inflamatorios fueron analizados por el sistema Luminex® Multiplexing Instruments. Este estudio incluyó a 35 pacientes (59 ± 13 años; 51% hombres). Resultados: La hemoglobina fue de 12,2 ± 2 g/dl; el 87% tenía resistencia a AEE. Los pacientes con índice de resistencia a la eritropoyetina (IRE) en el cuartil superior tenían un IRF significativamente más alto y un porcentaje más bajo de deficiencia de hierro (12%) en comparación con la ferritina (82%) y las ITS (51%). Los niveles de interleucina-6 (IL-6) se correlacionaron con el porcentaje de reticulocitos de fluorescencia media (MFR) (r = 0,45, p < 0,03). Los valores de hemoglobina después de 60 y 180 días, fueron consistentemente más altos en el grupo de pacientes con IRF% inferior a 10,5. Conclusión: IRF y RET-He pueden agregar valor en la investigación de ferropenia, así como en la identificación de pacientes con ERI. Debido al número limitado de pacientes analizados en este estudio, se deben impulsar estudios futuros en poblaciones más grandes y con seguimiento prospectivo, para validar nuestros hallazgos.

RESUMO Introdução: Anemia é uma complicação com impacto na morbidade e na mortalidade de pacientes com doença renal crônica (DRC). Os biomarcadores utilizados no diagnóstico e no monitoramento de anemia na DRC são limitados devido à inter-relação entre eritropoiese, estoque de ferro, inflamação e resistência à terapêutica com agentes estimuladores da eritropoiese (AEE). Objetivo: O objetivo deste estudo foi analisar o papel dos marcadores fração de reticulócitos imaturos (IRF) e concentração de hemoglobina nos reticulócitos (RET-He) do analisador hematológico Sysmex XN 5000 no monitoramento da anemia em pacientes em diálise peritoneal. Métodos: Estudo prospectivo, observacional e multicêntrico que comparou IRF e RET-He com parâmetros laboratoriais recomendados pelos guidelines. Biomarcadores inflamatórios foram analisados pelo sistema Luminex® Multiplexing Instruments. Este estudo incluiu 35 pacientes (59 ± 13 anos; 51% homens). Resultados: Os valores de hemoglobina foram 12,2 ± 2 g/dl; 87% apresentaram resistência a AEE. Pacientes com índice de resistência à eritropoietina (IRE) no quartil superior apresentaram valores significativamente maiores de IRF e menor porcentagem de deficiência de ferro (12%) em comparação com pacientes com ferritina (82%) e índice de saturação de transferrina (IST) (51%). Os níveis de interleucina 6 (IL-6) correlacionaram-se com a porcentagem de reticulócitos de fluorescência média (MFR) (r = 0,45, p < 0,03). Valores de hemoglobina após 60 e 180 dias foram consistentemente mais altos no grupo de pacientes com IRF% menor que 10,5. Conclusão: IRF e RET-He podem agregar valor na investigação da deficiência de ferro, bem como na identificação do índice de existência à eritropoietina (ERI). Devido ao número restrito de pacientes analisados neste trabalho, estudos futuros devem ser estimulados em populações maiores e com acompanhamento prospectivo, para validação dos nossos achados.

Diagnóstico diferencial de las anemias hemolíticas / Differential diagnosis of hemolytic anemias

Introducción: El término hemólisis hace referencia a la destrucción de los eritrocitos y ocurre en un amplio rango de condiciones clínicas fisiológicas y patológicas. Es empleado para definir situaciones en la que la vida media de los eritrocitos está disminuida por causas mecánicas, tóxicas, autoinmunes o infecciosas. Objetivo: Describir los principales marcadores de hemólisis que se encuentran variablemente alterados en las diferentes formas de anemias hemolíticas. Métodos: Se realizó una revisión de la literatura, en inglés y español, a través del sitio web PubMed y el motor de búsqueda Google Académico de artículos publicados en los últimos 10 años. Se hizo un análisis y resumen de la información. Análisis y síntesis de la información: La hemoglobina es el marcador más directo de la gravedad clínica en las enfermedades hemolíticas. Sus valores pueden estar muy próximos a los valores de referencia en las formas ligeras (Hb > 100 g/L) o significativamente reducidos en las moderadas (Hb entre 80-100 g/L), graves (Hb entre 60-80 g/L) y muy graves (Hb < 60 g/L). Sin embargo, existen otros marcadores esenciales para diferenciar las formas de presentación aguda y crónica, la hemólisis extravascular de la intravascular y la presencia de signos extrahematológicos tales como: los reticulocitos y esquistocitos, la deshidrogenasa láctica, la haptoglobina, la bilirrubina, la ferritina y la hemosiderinuria. Conclusiones: Los parámetros hemolíticos pueden estar diferencialmente alterados en varias condiciones lo cual ayuda en la realización del diagnóstico diferencial de las anemias hemolíticas(AU)

Introduction: The term hemolysis refers to the destruction of erythrocytes, a process occurring in a wide range of physiological and pathological clinical conditions. The term is used to define situations in which mean erythrocyte lifespan is reduced due to mechanical, toxic, autoimmune or infectious causes. Objective: Describe the main markers of hemolysis found to be variably altered in the different forms of hemolytic anemias. Methods: A review was conducted of the literature about the topic published in English and Spanish in the website PubMed and the search engine Google Scholar in the last 10 years. Data were analyzed and summarized. Data analysis and synthesis: Hemoglobin is the most direct marker of clinical severity in hemolytic diseases. Its values may be very close to reference levels in mild disease (Hb > 100 g/l), whereas they will be significantly reduced in moderate (Hb 80-100 g/l), severe (Hb 60-80 g/l) and very severe disease (Hb < 60 g/l). However, other markers are also essential to distinguish acute from chronic presentation, extravascular from intravascular hemolysis, and the presence of extrahematological signs such as reticulocytes and schistocytes, lactate dehydrogenase, haptoglobin, bilirubin, ferritin and hemosiderinuria. Conclusions: Differentially altered hemolytic parameters may be found in several conditions, which makes them useful for the differential diagnosis of hemolytic anemias(AU)

Avaliação do conteúdo de hemoglobina do reticulócito em pacientes anêmicos sob tratamento dialítico / Evaluation of the reticulocyte hemoglobin content in anemic patients in dialytic treatment

A anemia é uma complicação importante na doença renal crônica (DRC), culminando com o aumento da morbidade e mortalidade, tornando-se fundamental a busca de marcadores hematológicos que permitam seu diagnóstico precoce. Este artigo teve como objetivo revisar na literatura estudos que investigaram a associação entre o conteúdo de hemoglobina contida nos reticulócitos com a anemia em pacientes com DRC em tratamento dialítico e gerar evidências de sua importância na prática clínica. Foi realizada a busca nas bases de dados eletrônicas: Medline e Web of Science. O período de busca definido foi de janeiro de 1997 a dezembro de 2017. O conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos avalia a hemoglobina contida nos reticulócitos, sendo que estes, após liberação da medula óssea, permanecem no sangue periférico de um a quatro dias antes de completar sua maturação, conferindo-lhe maior especificidade em refletir a disponibilidade de ferro aos precursores hematopoiéticos, além de fornecer uma avaliação precoce da resposta eritropoética frente ao tratamento de ferro IV. Os artigos selecionados nessa revisão demonstraram que o conteúdo de hemoglobina do reticulócito, além de refletir precocemente a disponibilidade de ferro aos precursores hematopoiéticos, o mesmo não sofre interferência de citocinas inflamatórias, tornando-o um marcador eficaz no monitoramento da cinética do ferro em pacientes em diálise.

Anemia is an important complication in chronic kidney disease (CKD), culminating with the increase in morbidity and mortality, making it fundamental to search for hematological markers that allow its early diagnosis. This review aimed to review in the literature studies that investigated the association between hemoglobin content in reticulocytes and anemia in patients with CKD in dialysis and to generate evidence of its importance in clinical practice. The hemoglobin content of the reticulocytes evaluates the hemoglobin contained in the reticulocytes, which, after release of the bone marrow, remain in the peripheral blood 1 to 4 days before their maturation completes, giving it greater specificity in reflecting the availability of iron to the reticulocytes. Hematopoietic precursors, in addition to providing an early assessment of the erythropoietic response to IV iron treatment. The articles selected in this review have demonstrated that the reticulocyte hemoglobin content in addition to early reflection of the availability of iron to the hematopoietic precursors does not suffer interference from inflammatory cytokines, making it an effective marker in the monitoring of iron kinetics in dialysis patients.

Correlação entre as contagens de reticulócitos manual e automática em amostras de felinos anêmicos / Correlation between manual and automatized values of reticulocyte count in anemic feline samples

O objetivo do presente estudo foi correlacionar os valores de reticulócitos pontilhados e agregados obtidos por metodologia manual com a metodologia automática de contagem de reticulócitos totais em amostras de sangue de gatos anêmicos, analisados em um contador hematológico com citometria de fluxo. Para isso, 40 amostras de sangue de pacientes felinos anêmicos, independentemente de idade e sexo, foram utilizadas para a determinação das contagens absolutas de reticulócitos totais pela metodologia automatizada por citometria de fluxo fluorescente e pela técnica manual com corante supravital, em duplicata. Na contagem manual, houve a discriminação entre reticulócitos pontilhados e agregados. Para a correlação entre os métodos, foi realizada a análise de regressão de Passing-Bablok. A média do hematócrito dos gatos foi de 15,25%, tendo a maioria dos gatos (32,5%) apresentado anemia moderada (hematócrito = 17,81%). Como resultados, a análise de regressão demonstrou que a correlação entre a contagem absoluta total automática foi superior à contagem manual de reticulócitos agregados (rho= 0,71; P<0,001) do que a contagem absoluta de reticulócitos pontilhados (rho= 0,68; P<0,001). Os resultados apresentados sugerem que a contagem de reticulócitos total absoluta realizada pelo analisador hematológico ProCyte Dx em gatos anêmicos se refere à contagem absoluta de reticulócitos. Dessa maneira, recomenda-se que os valores possam ser utilizados para a avaliação imediata da condição hematológica de gatos anêmicos.(AU)

The aim of this study was to correlate the punctate and aggregated reticulocytes values obtained by manual methodology and the automatic reticulocyte count in 40 blood samples from anemic cats. Total reticulocyte absolute counts were determined by automated fluorescence flow cytometry and manual methods in 40 blood samples obtained from anemic cats. The manual count was obtained by supravital stain in duplicate to each sample and the reticulocyte morphology were discriminated between punctate and aggregates reticulocytes. Passing-Bablok regression analysis was utilized to compare the methods. Most samples were from anemic cat (15,25%) and the hematocrit mean was 17,81%. Regression analysis showed that the correlation between the absolute total automatic counts is higher with aggregated reticulocytes (rho= 0,71; P< 0,001) than with absolute punctate reticulocytes counts (rho= 0, 68, P< 0.001). Results suggest that the ProCyte Dx reticulocytes count in anemic cats is correlated with aggregate reticulocyte count. Thus, the greater amount of RNA and organelles in aggregate reticulocytes generates a cellular complexity and, therefore, greater impregnation of the dye in an automatic count. Thus, the values obtained by the hematologic instrument can be used for the immediate evaluation of the hematological condition in anemic cats.(AU)

Correlação entre as contagens de reticulócitos manual e automática em amostras de felinos anêmicos / Correlation between manual and automatized values of reticulocyte count in anemic feline samples

O objetivo do presente estudo foi correlacionar os valores de reticulócitos pontilhados e agregados obtidos por metodologia manual com a metodologia automática de contagem de reticulócitos totais em amostras de sangue de gatos anêmicos, analisados em um contador hematológico com citometria de fluxo. Para isso, 40 amostras de sangue de pacientes felinos anêmicos, independentemente de idade e sexo, foram utilizadas para a determinação das contagens absolutas de reticulócitos totais pela metodologia automatizada por citometria de fluxo fluorescente e pela técnica manual com corante supravital, em duplicata. Na contagem manual, houve a discriminação entre reticulócitos pontilhados e agregados. Para a correlação entre os métodos, foi realizada a análise de regressão de Passing-Bablok. A média do hematócrito dos gatos foi de 15,25%, tendo a maioria dos gatos (32,5%) apresentado anemia moderada (hematócrito = 17,81%). Como resultados, a análise de regressão demonstrou que a correlação entre a contagem absoluta total automática foi superior à contagem manual de reticulócitos agregados (rho= 0,71; P<0,001) do que a contagem absoluta de reticulócitos pontilhados (rho= 0,68; P<0,001). Os resultados apresentados sugerem que a contagem de reticulócitos total absoluta realizada pelo analisador hematológico ProCyte Dx em gatos anêmicos se refere à contagem absoluta de reticulócitos. Dessa maneira, recomenda-se que os valores possam ser utilizados para a avaliação imediata da condição hematológica de gatos anêmicos.(AU)

The aim of this study was to correlate the punctate and aggregated reticulocytes values obtained by manual methodology and the automatic reticulocyte count in 40 blood samples from anemic cats. Total reticulocyte absolute counts were determined by automated fluorescence flow cytometry and manual methods in 40 blood samples obtained from anemic cats. The manual count was obtained by supravital stain in duplicate to each sample and the reticulocyte morphology were discriminated between punctate and aggregates reticulocytes. Passing-Bablok regression analysis was utilized to compare the methods. Most samples were from anemic cat (15,25%) and the hematocrit mean was 17,81%. Regression analysis showed that the correlation between the absolute total automatic counts is higher with aggregated reticulocytes (rho= 0,71; P< 0,001) than with absolute punctate reticulocytes counts (rho= 0, 68, P< 0.001). Results suggest that the ProCyte Dx reticulocytes count in anemic cats is correlated with aggregate reticulocyte count. Thus, the greater amount of RNA and organelles in aggregate reticulocytes generates a cellular complexity and, therefore, greater impregnation of the dye in an automatic count. Thus, the values obtained by the hematologic instrument can be used for the immediate evaluation of the hematological condition in anemic cats.(AU)

Contagem de Reticulócitos na Prática Clínica: um Exame Pouco Utilizado / Reticulocytes Counting in Clinical Practice: a Little Examination Used

Objetivo: Estimar o percentual de contagem de reticulócitos em relação aos hemogramas realizados nos laboratórios de análises clínicas de Divinópolis/MG. Métodos: Trata-se de um estudo descritivo realizado nos laboratórios de análises clínicas do município de Divinópolis/MG inscritos no Cadastro Nacional de Estabelecimento de Saúde (CNES). Foi realizada uma entrevista através de questionário a fim de obter as informações dos números de hemogramas e contagens de reticulócitos realizados durante os últimos 12 meses, do atendimento (ambulatorial ou hospitalar), da instituição (pública ou privada), do porte (pequeno, médio ou grande) e de quais os métodos eram utilizados para realização dos exames. Resultados: Dos 15 laboratórios inscritos no CNES, 11 foram entrevistados (73%). Foram realizados 276.666 hemogramas e 4.248 contagens de reticulócitos nos últimos 12 meses em todos os laboratórios, o que significa o percentual de 1,5% de contagem de reticulócitos em relação aos hemogramas realizados. A maioria dos laboratórios é privado (81%), de médio porte (54%) e realizam atendimento ambulatorial (54%). Para realizar o hemograma, a maioria (81%) utiliza a técnica citometria de fluxo e para a contagem de reticulócitos todos realizam a técnica manual com o reagente azul de cresil brilhante. Conclusão: O percentual de contagem de reticulócitos em relação aos hemogramas realizados em laboratórios do município de Divinópolis/MG é baixo, mesmo sendo o primeiro exame complementar para o diagnóstico diferencial da anemia. Essa baixa solicitação pode estar relacionada com a desvalorização do exame no meio clínico ou pela falta de acurácia e pobre reprodutibilidade dos resultados encontrados. (AU)

Objective: To estimate the percentage of reticulocyte counts in relation to blood count performed in the clinical analysis laboratories in Divinópolis / MG. Methods: This is a descriptive study carried out in the clinical analysis laboratories of Divinópolis/MG registered in the National Register of Health Establishment (CNES). A questionnaire interview was conducted in order to obtain information on the number of blood counts and reticulocyte counts performed during the last twelve months. The questionnaire also aimed to identify whether the institution was public or private, whether it was outpatient or hospital care and which methods were used to perform the tests. Results: Of the 15 laboratories registered in the CNES, 11 were interviewed (73%). 276,666 blood counts and 4,248 reticulocyte counts were performed in the last 12 months in all laboratories, which means the percentage of reticulocyte count of 1.5% in relation to the blood counts performed. Most of the laboratories are private (81%), medium-sized (54%) and carry out outpatient care (54%). To perform the blood count, most (81%) use the flow cytometry technique and for reticulocyte counting all perform the manual technique with the bright blue cresyl reagent. Conclusions: The percentage of reticulocyte counts in relation to blood counts performed in laboratories in the city of Divinópolis/MG is low, even though it is the first complementary exam for the differential diagnosis of anemia. This low request may be related to the devaluation of the reticulocyte in the clinical environment or the lack of accuracy and poor reproducibility of the results found. (AU)

Hemoglobina de reticulocito y su importancia en el diagnóstico temprano de anemia ferropénica / Reticulocyte hemoglobin and its importance in early diagnosis of iron deficiency anemia

Resumen Introducción: El contenido de hemoglobina de reticulocitos (CHr), es un parámetro en la biometría hematológica automatizada que proporciona información sobre el contenido de hierro, por ello se ha utilizado como un marcador de la biodisponibilidad del hierro en la eritropoyesis, permite su detección en una etapa temprana de la anemia ferropénica y otras patologías como inflamación crónica, enfermedad renal crónica; además realizar monitoreo de terapias con eritropoyetina y hierro. Objetivo: Exponer la aplicabilidad de la CHr como un parámetro en el diagnóstico precoz de la anemia por deficiencia de hierro, así como su medición e interpretación. Materiales y métodos: Se realizó la revisión de artículos científicos en inglés y español en las bases de datos PubMed, ScienceDirect, LILACS y Medline, usando descriptores validados en Medical Subject Headings (MeSH), considerando periodo de publicabilidad del 80% inferior a 5 años. Resultados: Se describe la importancia, aplicabilidad, determinación e interpretación de este parámetro como biomarcador específico hemático temprano en el diagnóstico de deficiencia de hierro antes de presentarse cambios morfológicos eritroides. Conclusiones: La CHr es un parámetro de gran utilidad en el diagnóstico temprano de anemia ferropénica y otras patologías como deficiencia funcional de hierro, estados de inflamación crónica y enfermedad renal crónica.

Abstract Introduction: The reticulocyte hemoglobin content (CHr) is a parameter in automated hematological biometrics, which can provide information on the iron content. So it has been used as a marker of the bioavailability of iron in the erythropoiesis, it allows its detection at an early stage of iron deficiency anemia and other pathologies such as chronic inflammation, chronic kidney disease; in addition to monitoring therapy with erythropoietin and iron. Objective: To expose the applicability of CHr as a parameter in the early diagnosis of iron deficiency anemia, as well as its measurement and interpretation. Materials and methods: The review of scientific articles in English and Spanish was carried out in the PubMed, ScienceDirect, LILACS and Medline databases, using descriptors validated in Medical Subject Headings (MeSH), considering the publication period of 80% less than 5 years. Results: The importance, applicability, determination and interpretation of this parameter is described as an early specific biomarker in the blood in the diagnosis of iron deficiency before presenting morphological changes occurring during terminal erythroid differentiation. Conclusions: CHr is a very useful parameter in the early diagnosis of iron deficiency anemia and other pathologies such as functional deficiency, chronic inflammation states and chronic renal disease.

Citometría de flujo en reticulocitos de sangre periférica como indicador de inestabilidad cromosómica en pacientes con gliomas de alto grado / Flow cytometry in peripheral blood reticulocytes as a marker of chromosome instability in highgrade glioma patients

Resumen Introducción. La cuantificación de la inestabilidad cromosómica es un parámetro importante para evaluar la genotoxicidad y la radiosensibilidad. Las técnicas convencionales requieren cultivos celulares o laboriosos análisis microscópicos de cromosomas o núcleos. La citometría de flujo en reticulocitos ha surgido como una alternativa para los estudios in vivo, ya que reduce los tiempos de análisis e incrementa hasta en 20 veces el número de células analizables. Objetivos. Estandarizar los parámetros de citometría de flujo requeridos para seleccionar y cuantificar reticulocitos micronucleados (RET-MN) a partir de muestras de sangre periférica, y cuantificar la frecuencia de esta subpoblación anormal como medida de inestabilidad citogenética en sendas poblaciones de voluntarios sanos (n=25) y pacientes (n=25) recién diagnosticados con gliomas de alto grado antes de iniciar el tratamiento. Materiales y métodos. Las células sanguíneas se marcaron con anti-CD71-PE para reticulocitos, anti- CD61-FITC para la exclusión de plaquetas y yoduro de propidio para detectar el ADN en reticulocitos. La fracción celular MN-RETCD71+ se seleccionó y se cuantificó con un citómetro de flujo automático. Resultados. Se describió detalladamente la estandarización de los parámetros citométricos, con énfasis en la selección y la cuantificación de la subpoblación celular MN-RETCD71+. Se establecieron los niveles basales de MN-RETCD71+ en la población de control y en los pacientes se encontró un incremento de 5,2 veces antes de iniciar el tratamiento (p<0,05). Conclusión. Los resultados evidenciaron la utilidad de la citometría de flujo acoplada a la marcación de las células RETCD71+ como método eficiente para cuantificar la inestabilidad cromosómica in vivo. Se sugieren posibles razones del incremento de micronúcleos en células RETCD71+ de pacientes con gliomas.

Abstract Introduction: The quantification of chromosomal instability is an important parameter to assess genotoxicity and radiosensitivity. Most conventional techniques require cell cultures or laborious microscopic analyses of chromosomes or nuclei. However, a flow cytometry that selects the reticulocytes has been developed as an alternative for in vivo studies, which expedites the analytical procedures and increases up to 20 times the number of target cells to be analyzed. Objectives: To standardize the flow cytometry parameters for selecting and quantifying the micronucleated reticulocytesCD71+ (MN-RET) from freshly drawn peripheral blood and to quantify the frequency of this abnormal cell subpopulation as a measure of cytogenetic instability in populations of healthy volunteers (n =25), and patients (n=25), recently diagnosed with high-grade gliomas before the onset of treatment. Materials and methods: Blood cells were methanol-fixed and labeled with anti-CD-71-PE for reticulocytes, antiCD-61-FITC for platelet exclusion, and propidium iodide for DNA detection in reticulocytes. The MN-RETCD71+ cell fraction was selected and quantified with an automatic flow cytometer. Results: The standardization of cytometry parameters was described in detail, emphasizing the selection and quantification of the MN-RETCD71+ cellular fraction. The micronuclei basal level was established in healthy controls. In patients, a 5.2-fold increase before the onset of treatment was observed (p <0.05). Conclusion: The data showed the usefulness of flow cytometry coupled with anti-CD-71-PE and anti- CD-61-FITC labeling in circulating reticulocytes as an efficient and high resolution method to quantify chromosome instability in vivo. Finally, possible reasons for the higher average of micronuclei in RETCD71+ cells from untreated high-grade glioma patients were discussed.

Niveles de eritropoyetina y reticulocitos en residentes de bajas alturas migrantes a medianas alturas / Erythropoietin and reticulocyte levels in lowland residents migrating to middle altitudes

RESUMEN Introducción: La eritropoyetina es una alfa globulina glicosilada con producción renal en más del 90% en la vida adulta. Es la principal hormona en el mantenimiento constante de la masa eritrocitaria, aunque existen modificaciones en sus niveles asociados con el tabaquismo, anemias, EPOC y la migración de bajas a medianas o altas alturas. Esto último desencadena un proceso hipóxico que puede llegar a producir mal agudo de montaña. Objetivo: Describir el comportamiento de la eritropoyetina, el recuento de reticulocitos y su influencia, en procesos de adaptación a la altura. Metodología: Estudio descriptivo de corte transversal que incluyó 11 participantes provenientes de bajas alturas a quienes se les determinó la concentración sérica de eritropoyetina y el recuento de reticulocitos en un periodo de 28 días. Resultados: Ocho de los participantes presentaron un ascenso progresivo en los niveles séricos de eritropoyetina, uno mantuvo una curva plana y dos presentaron comportamiento atípico respecto a lo reportado en la literatura. Conclusión: La eritropoyetina es un factor fundamental que marca el comienzo de la eritropoyesis, cuya finalidad es mejorar el aporte de oxígeno en procesos de adaptación a la altura. Además, la hipoxia es un factor determinante en el inicio y desarrollo del mal agudo de montaña. El recuento de reticulocitos depende del estímulo proliferativo y anti-apoptótico de la eritropoyetina, así como de las concentraciones séricas de vitamina B12, hierro y ácido fólico.

ABSTRACT Introduction: EPO is a glycosylated alpha globulin produced in more than 90% by kidneys through adult life, being a key hormone that regulated the erythrocytic mass. However, there are some modifications in the levels of this hormone that may be related to smoking, anemia, EPOC and migration to from low to higher altitudes, inducing hypoxic processes. Depending on the individual, it may produced the disease named as acute mountain sickness. Objective: To describe erythropoietin level modifications, reticulocytes count and its influence, on the adaptive process to altitude. Methodology: This is a transversal descriptive study including 11 participants from low altitudes places, whose EPO serum concentration and reticulocytes count was determined during 28 days. Results: Eight participants presented a progressive increase in EPO serum levels, one participant exhibited a constant level and two more showed atypical results according to previous literature. Conclusion: EPO is a key factor for determining the erythropoiesis beginning, as its objective is to improve the oxygen provision during altitude adaptation processes by increasing its concentration in blood due to hypoxic stimulus. Besides, hypoxia is a determinant factor in the beginning and development of acute mountain sickness. The reticulocytes count depends also on the EPO proliferative and anti-apoptotic stimulus, and on the serum concentrations of B12 vitamin, iron and folic acid.

Evaluation of the interference of platelets in reticulocyte counting by flow cytometry using thiazole orange / Avaliação da interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por citometria de fluxo, utilizando laranja de tiazol

ABSTRACT Introduction: The reticulocyte count by flow cytometry (FC) - an automated counting method - can present errors due to the presence of interfering factors, contributing to a slight increase in results. However, automated methods have large advantages over the manual method, taken as reference, what justifies efforts to improve their quality. Objective: Evaluate platelet interference with the reticulocyte count by FC, using thiazole orange (TO) (FC/TO). Materials and methods: The method of reticulocyte count by FC/TO and a modified automated equivalent method, which excluded CD61-positive cells (platelets) from analysis (FC/TO/MOD), were compared to the manual method. Conclusion: Results were analyzed according to the recommendations of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) to assess interchangeability between the methods, by linear regression analysis and paired t-test. The exclusion of interfering fragments from result analysis by the modified method produced results in closer proximity to those of the reference method.

RESUMO Introdução: A contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) - um método de contagem automatizada - pode apresentar erros devido à presença de interferentes, contribuindo para uma ligeira elevação dos resultados. No entanto, os métodos automatizados possuem grandes vantagens em relação ao manual, tido como referência, o que justifica esforços para a melhoria de sua qualidade. Objetivo: Avaliar a interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por CF, utilizando laranja de tiazol (thiazole orange [TO]) (CF/TO). Materiais e métodos: O método de contagem de reticulócitos por CF/TO e um método equivalente automatizado modificado, no qual se excluíram células CD61-positivas (plaquetas) da análise (CF/TO/MOD), foram comparados com o método manual. Conclusão: Os resultados foram analisados de acordo com as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e do teste t pareado. A exclusão de interferentes da análise dos resultados pelo método modificado demonstrou maior proximidade dos resultados com aqueles do método de referência.

El conteo automático de reticulocitos: una herramienta de uso diagnóstico, clínico e investigativo / Automated reticulocyte count: a tool for diagnostic, clinical and research use

Se revisan los antecedentes históricos del conteo de reticulocitos como determinación indispensable en el laboratorio de hematología para la evaluación de la actividad eritropoyética durante la clasificación, diagnóstico y monitoreo de la respuesta terapéutica en distintos trastornos y situaciones clínicas, principalmente en casos de anemias. Se describe el tránsito del tradicional método de conteo de reticulocitos manual al método automatizado y la integración de los parámetros reticulocitarios al hemograma automatizado actual; además, se analizan las desventajas del método de recuento manual y las ventajas del método automatizado, así como los principios de detección en que se basa el conteo electrónico de reticulocitos. Con relación a los parámetros reticulocitarios, se describe su medición, cálculo y unidades de medida; también se resalta la importancia de la fracción de reticulocitos inmaduros y del contenido de hemoglobina reticulocitaria como variables de mayor uso clínico e investigativo en la evaluación de la respuesta medular ante diversos trastornos clínicos y protocolos terapéuticos. Por último, se alude a la necesidad del conocimiento y empleo de las variables reticulocitarias en la práctica clínica de rutina por parte de los clínicos y especialistas en hematología.

The historical background of reticulocyte count is reviewed as an essential determination in the laboratory of hematology for the evaluation of erythropoietic activity during classification, diagnosis and monitoring of therapeutic response of different conditions and clinical situations are also reviewed, especially in anemia The transition from traditional manual reticulocyte counting method to automated method and integration of the reticulocyte parameters to current automated complete blood count are described. The disadvantages of manual method and the advantages of automated methods are cited, as well as detection principles in which electronic reticulocyte count is based. Regarding reticulocyte parameters, measurement, calculation and units are described. The importance of immature reticulocyte fraction and reticulocyte hemoglobin content as variables most clinical and research use in evaluating bone marrow response to various clinical disorders and therapeutic protocols are highlighted. Finally, the need for knowledge and use of reticulocyte variables in routine clinical practice by clinicians and hematologist is referred.

New red blood cell and reticulocyte parameters and reference values for healthy individuals and in chronic kidney disease / Novos parâmetros e valores de referência eritrocitários e reticulocitários normais e na doença renal crônica

Introduction: The importance of local references values has been well described in the literature; this is because the characteristics of the population may influence the laboratory tests. Objective: To establish the reference range for traditional and extended red blood cell parameters and reticulocyte indices in order to investigate its application in patients with chronic kidney disease (CKD). Materials and methods: 249 blood donors (125 males and 124 females) were selected to establish the reference values. The hemodialysis sample consisted of 62 patients with terminal CKD (48 male and 14 female). All analyzes were performed using the Sysmex XE-5000 automated hematology analyzer. Results: Differences between reference values was observed in relation to gender: red blood cells (RBC), hemoglobin (HGB), hematocrit (HCT), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), percentage of hyperchromic red blood cells (%HYPER), percentage of microcytosis (%MICRO), percentage of macrocytosis (%MACRO), absolute reticulocyte count (RET), reticulocyte hemoglobin content (RET-He), immature reticulocyte fraction (IFR), low fluorescence reticulocytes (LFR), medium fluorescence reticulocytes (MFR), and high fluorescence reticulocytes (HFR). Individuals with CKD presented RBC, HGB, HCT, MCHC, red cell distribution width expressed as coefficient of variation (RDW-CV), percentage of hypochromic red blood cells (%HYPO), percentage of reticulocytes (RET%), RET (female group), IFR, LFR, MFR, and HFR results compatible with the anemic state, which can be observed in 91.8% of patients. All studied parameters were in the area under the curve (AUC) > 0.4. In male group, %HYPO (AUC: 0.806) and IFR (AUC: 0.762) presented higher AUC values, while female group presented %HYPO (AUC: 0.806), %HYPER (AUC: 0.815), and IFR (AUC: 0.660). Conclusion: The medical advancement, the development of new techniques and hematological parameters have revealed important information ...

Introdução: A importância dos valores de referências locais tem sido bastante descrita na literatura, isso porque características da população podem influenciar os testes laboratoriais. Objetivos: Estabelecer o intervalo de referência para parâmetros eritrocitários tradicionais e estendidos e índices reticulocitários a fim de investigar sua aplicação em pacientes com doença renal crônica (DRC). Materiais e métodos: Dos doadores de sangue, 249 pacientes foram selecionados para estabelecimento dos valores de referência (125 homens e 124 mulheres); dos pacientes em hemodiálise, a amostra foi composta por 62 indivíduos com DRC terminal (48 homens e 14 mulheres). Todas as análises foram realizadas no avaliador hematológico Sysmex XE-5000. Resultados: Foi observada uma distinção entre os valores de referência em relação ao gênero: células vermelhas do sangue (RBC), hemoglobina (HGB), hematócrito (HCT), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), porcentagem de eritrócitos hiper-hemoglobinizados (%HIPER), porcentagem de microcitose (%MICRO), porcentagem de macrocitose (%MACRO), contagem absoluta de reticulócitos (RET), contagem relativa de reticulócitos (RET-He), fração de reticulócitos imaturos (IFR), reticulócitos de baixa fluorescência (LFR), reticulócitos de média fluorescência (MFR) e reticulócitos de alta fluorescência (HFR). Os indivíduos com DRC apresentaram resultados de RBC, HGB, HCT, CHCM, coeficiente de variação do tamanho dos eritrócitos (RDW-CV), %HIPO, RET%, RET (grupo das mulheres), IFR, LFR, MFR e HFR compatíveis com o estado anêmico, que pode ser observado em 91,8%. Todos os parâmetros estudados apresentaram área sob a curva (AUC) > 0,4. Para o grupo dos homens, a %HIPO (AUC: 0,806) e a IFR (AUC: 0,762) apresentaram melhores valores de AUC; já para o grupo das mulheres foram a %HIPO (AUC: 0,806), a %HIPER (AUC: 0,815) e a IFR (AUC: 0,660). Conclusão: Avanço da medicina e surgimento de novas técnicas e parâmetros ...

Número de policromatófilos na diferenciação das anemias não regenerativas de regenerativas em cães / Polycromatophilic cell count in differentiation of non regenerative anemia from regenerative anemia in dogs

O método de quantificação de eritrócitos policromatófilos é utilizado na rotina dos laboratórios clínicos veterinários para identificar a resposta da medula óssea. Entretanto, não há padronização desse método em relação ao número absoluto de reticulócitos. No presente estudo foram avaliadas amostras sanguíneas de 135 cães anêmicos e de 21 cães saudáveis de um total de 1875 cães atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Paraná, entre o período de 01 de julho de 2011 a 18 de outubro de 2012. Foram realizados hemogramas e quantificações de eritrócitos policromatófilos e reticulócitos. Os valores de policromatófilos por campo e a contagem absoluta de reticulócitos foram comparados por análises estatísticas para determinar se há correlação entre os dois métodos. Os valores da sensibilidade, especificidade, acurácia e teste Kappa do número de policromatófilos foram, respectivamente, de 86,11%, 87,5%, 87,12% e 71%. O coeficiente de correlação de Pearson (r) foi de 0,8125 e o coeficiente de determinação da equação (R2) foi de 0,6603, entre o número de policromatófilos e de reticulócitos. A presença de dois policromatófilos por campo diferenciou a anemia não regenerativa da regenerativa, mas não foi possível associar o número de reticulócitos ao número de policromatófilos e nem classificar a anemia quanto à intensidade de regeneração.(AU)

The method of quantitation of polychromatophilic cell is routinely used in veterinary clinical laboratories to identify the bone marrow response. However, there is no standardization of this approach over the absolute reticulocyte count. The present study evaluated blood samples from 135 anemic dogs and 21 healthy dogs. CBC and quantification of reticulocytes and polychromatophilic cell were performed. The sensitivity, specificity, accuracy and Kappa of the polychromatophilic cell count were, respectively, 86.11%, 87.5%, 87.12% and 71%. The Pearson correlation coefficient (r) was 0.8125 and the coefficient of determination equation (R2) was 0.6603, between the number of polychromatophilic cell and reticulocytes. The identification of two polychromatophilic cells per field could allow a differentiation between regenerative and nonregenerative anemia, but it was not possible to associate it to the absolute reticulocyte count and classify the intensity of regeneration of anemia.(AU)

Reticulocyte count: comparison among methods / Contagem de reticulócitos: comparação entre métodos

Introduction: The automated counting of reticulocytes has some advantages over the manual method routinely used in clinical laboratories. Technological innovations provide more statistically reliable results, while optimizing the time to perform this test. However, the cost for implementing the automated procedure in laboratory routines still constitutes a barrier to its use in small- and medium-size Brazilian laboratories. Objective: This study evaluated the performance of a new laboratory protocol for reticulocyte counting by flow cytometry using acridine orange (FC/AO), compared with the manual method and with another automated one by flow cytometry using the commercial kit BD Retic-Count (FC/RC) Conclusion: The results showed that, besides being comparable to the manual method, still considered standard, the evaluated new protocol is economically more advantageous than the automated methods currently available, and its cost is comparable to that of the manual method for laboratories that already have appropriate equipment and infrastructure. .

Introdução: A contagem automatizada de reticulócitos apresenta vantagens em relação ao método manual, rotineiramente utilizado em laboratórios clínicos. Inovações tecnológicas permitem resultados estatisticamente mais confiáveis, além de otimizarem o tempo para realização desse exame. No entanto, o custo para aplicação do procedimento automatizado em rotinas laboratoriais ainda constitui uma barreira para sua implementação em laboratórios brasileiros de pequeno e médio porte. Objetivo: O presente estudo avaliou o desempenho de um protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo utilizando acridine orange (CF/AO), comparando-o com o método manual e o automatizado por citometria de fluxo utilizando o kit comercial BD Retic-Count (CF/RC). Conclusão: Os resultados mostraram que, além de ser comparável com o método manual, ainda considerado padrão, o protocolo avaliado é economicamente mais vantajoso do que os métodos automatizados atualmente disponíveis, sendo o seu custo comparável com o do método manual para laboratórios que já apresentam aparelhagem e infraestrutura adequadas. .

Hierro corporal en donantes habituales de un banco de sangre de Medellín-Colombia / Body iron in repetitive donors of a blood bank from Medellìn-Colombia

Introducción: en donantes de sangre es importante conocer el hierro circulante, almacenado y funcional; tradicionalmente solo se incluye la medición de hemoglobina. Objetivo: describir el comportamiento del estado del hierro en donantes habituales según las características demográficas e ingesta de hierro y su relación con la ferritina, la hemoglobina y la hemoglobina reticulocitaria. Métodos: estudio descriptivo transversal que incluyó 70 donantes habituales del Banco de Sangre de la Universidad de Antioquia, seleccionados al azar. Se evaluaron la ferritina, el eritrograma, la hemoglobina reticulocitaria, el estudio coprológico, la actividad física y el consumo de hierro. Se calcularon medidas de resumen, frecuencias y se utilizaron las siguientes pruebas estadísticas t Student, U de Mann Withney, H de Kruskal Wallis, Anova y correlaciones, con un nivel de significación de p<0.05. Resultados: el 60 % de los donantes fueron mujeres y la edad promedio fue 33 años. El promedio de los parámetros eritrocitarios evaluados estuvo dentro de los valores de referencia; 14,3 % (n=10) presentaron ferropenia y 76,9 % (n=50) bajo consumo de hierro/día. Los hombres evidenciaron valores más altos para recuento de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, constantes corpusculares y ferritina. Los adolescentes (18-20 años) tuvieron valores más bajos de ingesta, reticulocitos y ancho de distribución eritrocitaria. La ferritina se correlacionó con la hemoglobina, hemoglobina corpuscular media, concentración de hemoglobina corpuscular media, ancho de distribución eritrocitaria y hemoglobina reticulocitaria. Conclusiones : se evidenciaron adecuados mecanismos reguladores del metabolismo del hierro con eritropoyesis eficiente y se sugieren estudios para evaluar aspectos nutricionales en los donantes y factibilidad de la determinación de ferritina en donantes habituales para verificar reservas adecuadas que compensen las pérdidas de sangre por la donación.

Introduction: in blood donors it is important to determine circulated, stored and functional iron; traditionally hemoglobin is the unique measurement included. Objective: we intended to describe the behavior of iron in repetitive donors according to demographic characteristics as well as iron intake, and its relation to ferritin, hemoglobin and reticulocyte hemoglobin. Methods: cross-sectional study of 70 repetitive donors at the University of Antioquía Blood Bank, selected at random. Ferritin, eritrogram, reticulocyte hemoglobin, stool, physical activity and iron dietary were evaluated. Summary measures and frequencies were calculated and the following tests were used: T Student, U of Mann Whitney, H of Kruskal Wallis, Anova and correlations in SPSS. Results: 60% of donors were women and the mean age was 33 years old. The median of the erythrocyte parameters evaluated was within reference values; 14,3 % (n = 10) showed iron deficiency and 76,9 % (n = 50) had low iron intake/day. Men got higher values for erythrocyte count, hemoglobin, hematocrit, corpuscular constants and ferritin. Teenagers (18 - 20 years old) had lower values in intake, reticulocytes and red blood cell distribution width. Ferritin correlated to hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin concentration, red blood cell distribution width and reticulocyte hemoglobin. Conclusion: adequate regulatory mechanisms of iron metabolism with efficient erythropoiesis were evident and we suggest further studies to evaluate nutritional aspects of the blood donors and the feasibility of ferritin determination in regular donors in order to verify adequate reserves to compensate blood caused by donation.

Contagem de reticulócitos por citometria de fluxo utilizando acridine orange: validação de um novo protocolo / Flow cytometry reticulocyte counting using acridine orange: validation of a new protocol

Introduction: Currently, the reticulocyte counting is a challenge for clinical laboratories in Brazil, mainly for the ordinary ones, which still use the manual method. This method has some limitations, since it consists of a laborious method, time consuming, with low accuracy. Objectives: This study has developed and evaluated the performance of a New Laboratory Protocol for flow cytometry (FC) reticulocytes counting using acridine orange (AO) as dye, aiming to standardize a more precise, easy, fast implementation, and low cost protocol. After standardization of the New Protocol (FC/AO), it was compared with the manual method. The results were analyzed according to the recommendations of the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), now known as Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), to evaluate the interchangeability of methods in linear regression analysis and paired t test, besides other quality control tests. Conclusion: Based on these results concerning to the correlation between the methods and the tests related to quality control, we can admit that FC/AO for reticulocyte counting shows undeniable advantages when compared to the preexisting manual method...

Introdução: Atualmente, a contagem de reticulócitos representa um desafio para os laboratórios clínicos no Brasil, principalmente os de pequeno e médio porte, nos quais ainda se utiliza o método manual. Este método apresenta algumas limitações, classificando-se como tedioso, demorado e de baixa precisão. Objetivos: O presente estudo desenvolveu e avaliou o desempenho de um novo protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) utilizando acridine orange (AO) como corante, visando padronizar um protocolo preciso, de fácil e rápida execução e custo acessível. Após a padronização do novo protocolo desenvolvido (CF/AO), fez-se a comparação com o método manual. Os resultados foram analisados de acordo com recomendações do National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), atualmente Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e teste t pareado, além de outros testes de controle de qualidade. Conclusão: Diante dos resultados obtidos referentes à correlação entre os métodos e os testes voltados ao controle de qualidade, pode-se admitir que o CF/AO estabelecido para contagem de reticulócitos possui vantagens inegáveis quando comparado com o método manual...