ABSTRACT
ABSTRACT Background: In the definition of the mesh to be used to correct hernias, porosity, amount of absorbable material and polypropylene should be considered in the different stages of healing process. Aim: To evaluate the inflammatory reaction in the use of macro and microporous meshes of high and low weight in the repair of defects in the abdominal wall of rats. Methods: Ninety Wistar rats (Rattus norvegicus albinus) were used. The animals were submitted to similar surgical procedures, with lesion of the ventral abdominal wall, maintaining the integrity of the parietal peritoneum and correction using the studied meshes (Prolene®, Ultrapro® and Bard Soft®). Euthanasia was performed at 30, 60 and 120 days after surgery. The abdominal wall segments were submitted to histological analysis using H&E, Masson's trichrome, immunohistochemistry, picrosirius red and tensiometric evaluation. Results: On the 120th day, the tensiometric analysis was superior with Ultrapro® macroporous mesh. The inflammatory process score showed a significant prevalence of subacute process at the beginning and at the end of the study. Microporous meshes showed block encapsulation and in macroporous predominance of filamentous encapsulation. Conclusion: The Ultrapro® mesh showed better performance than the others in healing process of the abdominal wall.
RESUMO Racional: Na definição da tela a ser utilizada na correção das hérnias deve-se considerar a porosidade, quantidade de material absorvível e polipropileno ou inabsorvível nas diversas fases da cicatrização. Objetivo: Avaliar a reação inflamatória das telas macro e microporosas de alta e baixa gramatura no reparo de defeito da parede abdominal de ratos. Método: Foram utilizados 90 ratos da raça Wistar (Rattus norvegicus albinus). Os animais foram submetidos a procedimentos cirúrgicos semelhantes, com lesão da parede abdominal ventral, mantendo a integridade do peritônio parietal e correção utilizando as telas Prolene®, Ultrapro® e Bard Soft®. Realizou-se a eutanásia aos 30, 60 e 120 dias de pós-operatório. Os segmentos da parede abdominal foram submetidos à análise histológica com H&E, tricômio de Masson, imunoistoquímica, picrosirius red e análise tensiométrica. Resultado: No 120º dia a análise tensiométrica mostrou superioridade da tela macroporosa Ultrapro®. O escore do processo inflamatório demonstrou prevalência significativa de processo subagudo no início e no final do estudo. As telas microporosas mostraram encapsulamento em bloco e as macroporosas encapsulamento predominantemente filamentar. Conclusão: A tela Ultrapro® mostrou melhor desempenho em relação às demais na cicatrização da parede abdominal.
Subject(s)
Animals , Rats , Polypropylenes , Abdominal Wall/surgery , Peritoneum , Surgical Mesh , Rats, WistarABSTRACT
Tissue engineering replaces injured tissues by manipulating cells, making scaffolds, and using molecules that stimulate the tissue. Mesenchymal stem cells (MSCs) are good candidates for tissue engineering, as this is one of the cell types which are recruited to repair injured tissues. Scaffolds are structural devices that allow cell fixation and migration, with polypropylene meshes being an example. This study aims to evaluate the culture of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (ADSCs), isolated from C57Bl/6 GFP + mice, in two types of polypropylene meshes (macroporous and microporous) in conventional culture plates and plates coated with methacrylate, over a period of fifteen days. The objective was to obtain the best interaction protocol between the mesh and the cells. The choice of the best method was based on adherence, maintenance of adherence and viability during culture. The amount of ADSCs adhering was checked daily by counting in a Neubauer Chamber and by using a growth curve performed with the MTT assay. The ADSCs adhering to the meshes were visualized with DAPI, panotic, hematoxylin and eosin, immunohistochemistry (integrin), and immunofluorescence (actin). ADSCs adhere to all forms of culture and to the two types of polypropylene mesh. ADSCs adhered more to the microporous mesh, within the seven day period of culture and in the plates without methacrylate. Thus, polypropylene meshes offer a good scaffold for ADSCs to adhere to.
A engenharia de tecidos substitui tecidos danificados com a manipulação de células, confecção de arcabouços e a utilização de moléculas que estimulem o tecido. As células-tronco mesenquimais (MSCs) são boas candidatas para engenharia de tecido, pois são um dos tipos celulares recrutadas para a reparação de tecidos lesionados. O arcabouço deve ser um dispositivo estrutural que forneça uma estrutura para o crescimento e a diferenciação celular no sítio, sendo a tela de polipropileno um exemplo. O objetivo deste estudo foi avaliar o cultivo de células-tronco mesenquimais de tecido de adiposo (ADSCs), isoladas de camundongos C57Bl/6 GFP+, em dois tipos de telas de polipropileno (macroporosa e microporosa) em placas de cultura convencionais e revestidas com metacrilato, durante quinze dias, para obter o melhor protocolo de interação entre a tela e as células. A escolha do melhor método foi baseada na adesão, manutenção da adesão e viabilidade durante cultivo. A quantidade de ADSCs aderidas foi verificada diariamente em contagem em Câmara de Neubauer e através de uma curva de crescimento realizada através de ensaio de MTT. As ADSCs aderidas nas telas foram visualizadas com a marcação de DAPI, panótico, hematoxilina e eosina, imumo-histoquímica (integrina) e imunofluorescência (actina). Nas duas formas de cultivo e nos dois tipos de telas de polipropileno houve aderência das ADSCs. Houve maior aderência na tela microporosa, no período de sete dias de cultivo e em placas sem metacrilato. Conclui-se que a tela de polipropileno oferece um bom arcabouço para as ADSCs se aderirem.
Subject(s)
Animals , Mice , Polypropylenes/analysis , Tissue Embedding/methods , Tissue Engineering/methods , Tissue Scaffolds , Mesenchymal Stem Cells , MiceABSTRACT
A engenharia de tecidos tem como objetivo substituir tecidos danificados, manipulando células, confecção de arcabouços e a utilização de moléculas que estimulem o tecido. A proposta deste estudo foi avaliar duas técnicas de cultivo de células-tronco mesenquimais (MSC) em diferentes placas de cultura, utilizando dois tipos de telas de polipropileno (macroporoso e microporoso), para obter as melhores condições de interação entre a tela e as células, e definir uma proposta de protético para engenharia de tecidos. As telas de polipropileno foram cultivadas com células-tronco mesenquimais de tecido adiposo (ADSCs) isoladas de camundongos C57B1/6 GFP+ durante quinze dias em placas revestidas com metacrilato ou não revestidas com metacrilato. A quantidade de ADSCs aderidas foram verificadas diariamente em Câmara de Neubauer e através de uma curva de crescimento realizada pelo ensaio MTT. As ADSCs aderidas às malhas foram visualizadas com marcação de DAPI, panóticas, hematoxilina e eosina imuno-histoquímica e imunofluorescência. O melhor protocolo foi na tela microporosa, no o período de sete dias de cultivo e em placas sem metacrilato. Conclui-se que a tela de polipropileno fornece um bom suporte para as ADSCs se aderirem podendo ser utilizada na engenharia de tecidos.
Tissue engineering replaces injured tissues by manipulating cells, making scaffolds, and using molecules that stimulate the tissue. Mesenchymal stem cells (MSCs) are good candidates for tissue engineering, as this is one of the cell types which are recruited to repair injured tissues. Scaffolds are structural devices that allow cell fixation and migration, with polypropylene meshes being an example. This study aims to evaluate the culture of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (ADSCs), isolated from C57Bl/6 GFP + mice, in two types of polypropylene meshes (macroporous and microporous) in conventional culture plates and plates coated with methacrylate, over a period of fifteen days. The objective was to obtain the best interaction protocol between the mesh and the cells. The choice of the best method was based on adherence, maintenance of adherence and viability during culture. The amount of ADSCs adhering was checked daily by counting in a Neubauer Chamber and by using a growth curve performed with the MTT assay. The ADSCs adhering to the meshes were visualized with DAPI, panotic, hematoxylin and eosin, immunohistochemistry (integrin), and immunofluorescence (actin). ADSCs adhere to all forms of culture and to the two types of polypropylene mesh. ADSCs adhered more to the microporous mesh, within the seven day period of culture and in the plates without methacrylate. Thus, polypropylene meshes offer a good scaffold for ADSCs to adhere to.
