ABSTRACT
ABSTRACT: Marine algae are natural sources of macromolecules known as sulfated polysaccharides. This class of compounds has attracted the interest of Pharmaceutical Sciences due to its pharmacological anticoagulant, antiplatelet and antithrombotic properties. Therefore, this study evaluated the anticoagulant potential of sulfated polysaccharides extracted from the algae Penicillus capitatus. The extracted sulfated polysaccharides were purified, partially characterized and their anticoagulant activity was evaluated. The extraction process followed by ethanol precipitation resulted in five fractions. Among the analyzed fractions, F44 contained highest concentration of sulfated polysaccharides. After the purified fraction F23, F44 displayed in vitro anticoagulant activity in a time testing for activated partial thromboplastin time and prothrombin time. The preferential mechanism effect was based on interactions between thrombin and factor Xa. Additional studies on structure pharmacological are required to test the viability of the use of sulfated polysaccharides as therapeutic agents.
RESUMO: As algas marinhas são fontes naturais de macromoléculas conhecidas como polissacarídeos sulfatados. Esta classe de compostos atraiu o interesse das Ciências Farmacêuticas devido às suas propriedades farmacológicas como anticoagulante, antiplaquetária e antitrombótica. Portanto, este estudo tem como objetivo avaliar o potencial anticoagulante de polissacarídeos sulfatados extraídos de algas de Penicillus capitatus. Os polissacarídeos sulfatados extraídos foram purificados, parcialmente caracterizados e sua atividade anticoagulante foi avaliada. O processo de extração seguido pela precipitação com etanol resultou em cinco frações. Entre as frações analisadas, F44 foi a maior concentração de polissacarídeos sulfatados. Após a purificação, as frações F23 e F44 mostraram atividade anticoagulante in vitro em um teste de tempo de tromboplastina parcialmente ativada e tempo de protrombina. Seu mecanismo preferencial é baseado nas interações entre trombina e fator Xa. Estudos adicionais sobre a estrutura farmacológica são necessários para testar a viabilidade do uso como agente terapêutico.
ABSTRACT
Alternative sources of anticoagulants have arisen as a result of the increasing demand for safer anticoagulant clinical therapy, and the sulfated polysaccharides of seaweeds have gained attention in biomedicine. In this study, crude sulfated polysaccharide fractions (denominated Hf1, Hf2 and Hf3) were obtained from the red marine alga Halymenia floresia and the anticoagulant properties of a soluble crude polysaccharide fraction (Hf2s) were assayed. The three differential extractions yielded 38.6%. The polysaccharides are composed mainly of galactose, with small amounts of xylose and glucose. The anticoagulant properties of Hf2s containing 53.8% sulfate and 3% protein was also compared to those of heparin (193.0 IU mg-1) by assays of activated partial thromboplastin time (APTT) and thrombin time (TT) using normal human plasma. Hf2s showed a higher anticoagulant activity (68.4 IU mg-1) than those of Hf1s and Hf3s, whose activities were 37.6 and 36.6 IU mg-1, respectively. The compound was less active than heparin, but its anticoagulant mechanism suggested that it is dependent on cofactor heparin II to inhibit thrombin activity, but not on cofactors VIII and IX. Therefore, the polysaccharide from H. floresia interfered on coagulation cascade.
O aumento da demanda por anticoagulantes para a terapia clínica tem motivado a busca por fontes alternativas de anticoagulantes mais seguros e os polissacarídeos sulfatados de algas marinhas têm ganhado atenção na biomedicina. Objetivou-se obter frações de polissacarídeos sulfatados brutos (denominadas Hf1; Hf2 e Hf3) da alga marinha vermelha Halymenia floresia e para avaliar as propriedades anticoagulantes de uma fração polissacarídica bruta solúvel anticoagulante (Hf2s). As três extrações diferenciais renderam 38,60%. Os polissacarídeos são principalmente compostos de galactose com pequenas quantidades de xilose e glucose. As propriedades anticoagulantes da Hf2s, contendo 53,80% de sulfato e 3% de proteínas, foram também comparadas com a heparina (193,00 UI mg-1) pelo ensaio do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e tempo de trombina (TT), usando plasma humano normal. A Hf2s apresentou maior atividade anticoagulante (68,40 UI mg-1) que Hf1s a Hf3s, cujas atividades foram 37,60 e 36,60 UI mg-1, respectivamente. O composto foi menos ativo que a heparina, mas sugere-se que o mecanismo anticoagulante seja dependente do cofator II da heparina para inibição da atividade da trombina, exceto pelos cofatores VIII a IX. Portanto, o polissacarídeo de H. floresia interferiu na cascata de coagulação.
