Humanistic Value Development Through Extracurricular Activities in Anatomical Education

SUMMARY: Human Anatomy is the first medical specialization course for students of clinical medicine and cultivates the virtues of medical students, helping them to establish the humanitarian values. Therefore, integrating humanistic values education into the course of human anatomy is crucial. In anatomy courses for clinical students, online previews, group-based clinical problem- based learning, and theoretical lectures are used in anatomical education which is integrated with extracurricular activities for the education of human values, such as classical medical stories, group-based humanistic value cultivation, a memorial ceremony for "silent mentors", the morphological drawing and basic experimental skills competitions, and public welfare activities. After a year of implementation and investigation analysis, it was shown that students had a higher willingness to participate in the curriculum activities in this blended learning system, and these activities could stimulate students' interest in learning, which is beneficial to the cultivation of professional and humanistic values.

Anatomía Humana es el primer curso de especialización médica para estudiantes de medicina clínica y cultiva las virtudes de los estudiantes de medicina, ayudándolos a establecer los valores humanitarios. Por lo tanto, es crucial integrar la educación en valores humanísticos en el curso de anatomía humana. En los cursos de anatomía para estudiantes clínicos se utilizan avances en línea, aprendizaje grupal basado en problemas clínicos y conferencias teóricas en la educación anatómica que se integra con actividades extracurriculares para la educación de los valores humanos, como historias médicas clásicas, humanísticas grupales, cultivo de valores, una ceremonia en memoria de los "mentores silenciosos", concursos de dibujo morfológico y habilidades experimentales básicas, y actividades de bienestar público. Después de un año de implementación y análisis de investigación, se demostró que los estudiantes tenían una mayor disposición a participar en las actividades curriculares en este sistema de aprendizaje combinado, y estas actividades podrían estimular el interés de los estudiantes en el aprendizaje, lo que es beneficioso para el cultivo de habilidades profesionales y valores humanistas.

The association of bacterial biofilm and middle ear mucosa in patients with mucosal chronic suppurative otitis media.

OBJECTIVES: To evaluate the bacterial biofilm's role in mucosal chronic suppurative otitis media (CSOM) utilizing scanning electron microscopy (SEM). METHODS: This study involved 123 participating patients with active and inactive mucosal CSOM who underwent tympanomastoid surgery. SEM was used to examine middle ear mucosa biopsies for the development of biofilms. Middle ear discharge or mucosal swabs from patients were cultured to detect any bacterial growth. The biofilm formation was correlated to the culture results. RESULTS: The biofilm was present in 69.9 % of patients (59% of them were with active mucosal CSOM) and absent in 30.1% of the patients (70% of them were with inactive mucosal CSOM), being more statistically significant in active mucosal CSOM (p-value = 0.003). A correlation that was statistically significant was found between active mucosal CSOM and higher grades (3 and 4) of biofilms (p-value <0.05). The mucosal CSOM type and the results of the culture had a relationship that was statistically significant (p-value <0.001). 60% of patients had positive culture (70% of them were with active mucosal CSOM). There was a statistically significant relation between Pseudomonas aeruginosa bacterial growth and active mucosal CSOM (p-value = 0.004) as well as higher grades of biofilms in mucosal CSOM. CONCLUSION: Mucosal CSOM, especially the active type, is a biofilm-related disease. There is a significant relation between the state of mucosal CSOM (active or inactive) and culture results with predominance of Pseudomonas aeruginosa bacterial growth in active mucosal CSOM and in higher grades of biofilms in mucosal CSOM.

Identification of microorganisms in wet coffee fermentation Coffea arabica Var Catimor and Castillo in Jardín, Antioquia-Colombia, using culture-dependent methods / Identificación de microorganismos en fermentación húmeda de café Coffea arabica Var Catimor y Castillo en Jardín, Antioquia-Colombia, usando métodos cultivo-dependientes

Background: Mild Colombian coffees are recognized worldwide for their high-quality coffee cup. However, there have been some failures in post-harvest practices, such as coffee grain fermentation. These failures could occasionally lead to defects and inconsistencies in quality products and economic losses for coffee farmers. In Colombia, one of the fermentation methods most used by coffee growers is wet fermentation, conducted by submerging the de-pulped coffee beans for enough time in water tanks to remove the mucilage. Objectives: We evaluated the effect of the water (g)/de-pulped coffee (g) ratio (I: 0/25, II: 10/25, III: 20/25) and final fermentation time (24, 48, and 72 hours) on the total number of microbial groups. We also identified microorganisms of interest as starter cultures. Methods: We used a completely randomized experimental design with two factors; the effect of the water (g)/de-pulped coffee (g) ratio (I: 0/25, II: 10/25, III: 20/25) and final fermentation time (24, 48, and 72 hours), for 9 treatments with two replicates. During the coffee fermentation (1,950 g), the pH and °Brix were monitored. Total counts of different microbial groups (mesophiles, coliforms, lactic-acid bacteria, acetic-acid bacteria, and yeasts) were performed. Various isolates of microorganisms of interest as starter cultures (lactic-acid bacteria and yeasts) were identified using molecular sequencing techniques. Results: 21 lactic-acid bacteria (LAB) isolates and 22 yeasts were obtained from the different mini-batch fermentation systems. The most abundant lactic-acid bacteria species found were Lactiplantibacillus plantarum (46%) and Levilactobacillus brevis (31%). Pichia kluivery (39%) and Torulaspora delbrueckii (22%) were the most abundant yeast species. Conclusion The studied factors did not have effect over the microorganism's development. The identified bacterial and yeasts species have potential as starter cultures for better-quality coffees and in fermentation-related applications.

Antecedentes: Los cafés suaves lavados colombianos son reconocidos a nivel mundial por su buena puntuación sensorial; sin embargo, se han detectado fallas en las prácticas de postcosecha, como lo es la fermentación de los granos de café. Dichas fallas pueden causar defectos y carecer de consistencia en la calidad del producto, ocasionando pérdidas económicas para los caficultores. En Colombia, uno de los métodos más usados por los caficultores es la fermentación húmeda, la cual consiste en sumergir los granos de café despulpado en tanques con agua por un período de tiempo que permita la remoción del mucílago. Objetivos: La presente investigación evaluó la incidencia que tienen la proporción agua/granos despulpados de café (I: 0/25, II: 10/25, III: 20/25) y el tiempo final de fermentación (24, 48 y 72 horas) en el recuento final de grupos microbianos. Por otra parte, se identificaron taxonómicamente microorganismos de interés para su uso como cultivos iniciadores. Métodos: Mini-lotes consistieron en café despulpado (1950 g) puesto en recipientes de plástico abiertos y sumergidos en agua. Se aplicó un diseño experimental completamente aleatorizado de dos factores (proporción agua/ granos de café despulpado y tiempo) a tres niveles, para un total de nueve tratamientos con dos replicas. Durante las fermentaciones de café (1,950 g), el pH y los grados ºBrix, fueron monitoreados. Se realizaron los recuentos totales de los diferentes grupos microbianos: mesófilos, coliformes, bacterias ácido-lácticas, bacterias ácido-acéticas y levaduras. Se identificaron molecularmente diferentes aislados con potencial para ser usados como cultivos iniciadores (bacterias ácido-lácticas y levaduras). Resultados: Los resultados obtenidos mostraron que no hubo diferencia estádisticamente significativa entre los tratamientos aplicados y el recuento final de microorganismos. Un total de 21 aislados de bacterias ácido-lácticas (BAL) y 22 levaduras lograron obtenerse a partir de los diferentes sistemas de fermentación en mini-lote. Las especies de bacterias ácido-lácticas con mayor porcentaje acorde a su identificación taxonómica, corresponden a Lactiplantibacillus plantarum (46%), Levilactobacillus brevis (31%). Las especies de levaduras con mayor porcentaje acorde a su identificación taxonómica corresponden a Pichia kluivery (39%) y Torulaspora delbrueckii (22%). Conclusión Los factores estudiados no afectaron el crecimiento de ninguno de los grupos microbianos presentes en la fermentacion del café. Las especies de microorganismos identificados tienen potencial para se usados como cultivos starter o en aplicaciones dentro de las ciencias de fermentación.

Comparison of techniques for corneal epithelium cell culture for the collection of conditioned medium / Comparação das técnicas de cultivo de células epiteliais da córnea para a coleta de meio condicionado

ABSTRACT Purposes: To determine the best protocol in obtaining the higher yield of conditioned culture medium to be used for the bone marrow mesenchymal stem cell differentiation into corneal epithelial cells, five techniques for the primary culture of human corneal epithelial cells were evaluated. Methods: The studied culture techniques of corneal epithelial cells were: explants in culture flasks with and without hydrophilic surface treatment, on amniotic membrane, with enzymatic digestion, and by corneal scraping. The conditioned culture medium collected from these cultures was used to differentiate human bone marrow mesenchymal stem cells into corneal epithelial cells, which were characterized using flow cytometry with pan-cytokeratin and the corneal-specific markers, cytokeratin 3 and cytokeratin 12. Results: The culture technique using flasks with hydrophilic surface treatment resulted in the highest yield of conditioned culture medium. Flasks without surface treatment resulted to a very low success rate. Enzymatic digestion and corneal scraping showed contamination with corneal fibroblasts. The culture on amniotic membranes only allowed the collection of culture medium during the 1st cell confluence. The effectiveness of cell differentiation was confirmed by cytometry analysis using the collected conditioned culture medium, as demonstrated by the expressions of cytokeratin 3 (95.3%), cytokeratin 12 (93.4%), and pan-cytokeratin (95.3%). Conclusion: The culture of corneal epithelial cell explants in flasks with hydrophilic surface treatment is the best technique for collecting a higher yield of conditioned culture medium to be used to differentiate mesenchymal stem cells.

RESUMO Objetivos: Foram estudadas cinco técnicas de cultivo primário de células epiteliais de córnea humana para se determinar o melhor protocolo para a obtenção do maior rendimento de meio de cultivo condicionado para ser utilizado na diferenciação de células tronco mesenquimais para células epiteliais de córnea. Métodos: As técnicas de cultivo estudadas foram: explantes em frascos de cultivo com e sem tratamento hidrofílico de superfície, sobre membrana amniótica, com digestão enzimática e por raspado de córnea. O meio de cultivo condicionado foi coletado e as células tronco mesenquimais induzidas a se diferenciarem em células epiteliais da córnea utilizando o meio de cultivo condicionado. As células foram caracterizadas por citometria de fluxo com pan-citoqueratina e com os marcadores específicos da córnea, citoqueratina 3 e citoqueratina 12. Resultados: A técnica utilizando frascos com o tratamento de superfície apresentou o maior rendimento de meio de cultivo condicionado. Os frascos sem tratamento de superfície levaram a uma taxa de sucesso muito baixa. A digestão enzimática e a raspagem da córnea mostraram contaminação das culturas com fibroblastos de córnea. A cultura sobre membranas amnióticas só permitiu a coleta do meio de cultivo condicionado durante a 1ª confluência celular. A análise de citometria de fluxo confirmou o sucesso da diferenciação celular utilizando o meio de cultivo condicionado coletado, demonstrada pela expressão de citoqueratina 3 (95,3%), citoqueratina 12 (93,4%) e pan-citoqueratina (95,3%). Conclusão: O cultivo de explantes de células tronco mesenquimais em frascos com tratamento hidrofílico de superfície é a melhor técnica para a obtenção de um alto rendimento de meio de cultivo condicionado.

Effect of icariin on the transformation efficiency of induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro / Estudio de los efectos de icariina en la eficiencia de la transformación de espermatozoides extrovertidos inducidos en cuerpos multicompetentes

Objective: To investigate the effect of icariin on the transformation efficiency of germ cell-like cells from mouse induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro. Methods: Firstly, mouse induced pluripotent stem cells were induced and cultured to transform into germ cell-like cells, and the primordial germ cell-like cells were identified by Western blot and RT-PCR. Then, different concentrations of icariin (0.1μg/mL, 1μg/mL, 10μg/mL and 100μg/mL) were added into the culture medium, and the obtained primitive germ cell-like cells were cultured, Western blot and RT-PCR were used to identify the obtained sperm cells, the transformation efficiency was compared. Results: The primordium germ cell-like cells obtained from mouse induced pluripotent stem cells in vitro specially expressed Oct-4 protein, C-kit protein, Mvh mRNA, Fragilis mRNA and Stella mRNA. The sperm cells were specially expressed VASA, SCP3 and γH2AX proteins. RT-PCR showed that the sperm cells were specially expressed Ddx4, Tp2 and Prm1 mRNA. Compared with the control group, the expression level of VASA protein (1.744±0.283, 2.882±0.373, 6.489±0.460), SCP3 protein (2.250±0.306, 7.058±0.521, 8.654±0.804), γH2AX protein (4.304±0.433, 5.713±0.339, 9.268±0.545), Ddx4 mRNA (1.374±0.145, 2.846±0.194, 4.021±0.154), Tp2 mRNA (1.358±0.130, 3.623±0.326, 5.811±0.390) and Prm1 mRNA (1.326±0.162, 3.487±0.237, 4.666±0.307) in 0.1μg/mL, 1μg/mL, 10μg/mL icariin experimental groups were all lower than that of VASA protein (10.560±0.413), SCP3 protein (13.804±0.642), γH2AX protein (11.874±0.464), Ddx4 mRNA (6.4005±0.361), Tp2 mRNA (7.314±0.256) and Prm1 mRNA (7.334±0.390) in 100μg/mL icariin experimental group. (AU)

Objetivo: Investigar el efecto de icariina en la eficiencia de la conversión in vitro inducida en espermatozoides de cultivos de células germinativas derivadas de la transformación de células madre pluripotentes inducidas de ratón. Métodos: Primero se indujeron y cultivaron células madre pluripotentes inducidas de ratón para transformarlas en células similares a las células germinales, y las células similares a las células germinales primordiales se identificaron mediante Western blot y RT-PCR. A continuación, se añadieron diferentes concentraciones de icariina (0,1μg/mL, 1μg/mL, 10μg/mL and 100μg/mL) al medio de cultivo, y se cultivaron las células primitivas similares a células germinales obtenidas, se utilizaron Western blot y RT-PCR para identificar las células espermáticas obtenidas, y se comparó la eficacia de la transformación. Resultados: Las células germinales primitivas obtenidas in vitro a partir de células madre pluripotentes inducidas de ratón expresaron especialmente la proteína Oct-4, la proteína C-kit, el ARNm de Mvh, el ARNm de Fragilis y el ARNm de Stella. Los espermatozoides expresaban especialmente las proteínas VASA, SCP3 y γH2AX. La RT-PCR mostró que los espermatozoides expresaban especialmente los ARNm Ddx4, Tp2 y Prm1. En comparación con el grupo de control, el nivel de expresión de la proteína VASA (1,744±0,283; 2,882±0,373; 6,489±0,460), la proteína SCP3 (2,250±0,306; 7,058± 0,521; 8,654±0,804), proteína γH2AX (4,304±0,433; 5,713±0,339; 9,268±0,545), ARNm Ddx4 (1,374±0,145; 2,846±0,194; 4,021±0,154), ARNm Tp2 (1,358±0,130; 3,623±0,326; 5,811±0,390) y ARNm Prm1 (1,326±0,162; 3,487±0,237; 4,666±0,307) en grupos experimentales de 0,1μg/mL, 1μg/mL, 10μg/mL de icariina fueron todos más bajos que los de la proteína VASA (10,560±0,413), proteína SCP3 (13,804±0,642), proteína γH2AX (11,874±0,464), ARNm Ddx4 (6,4005±0,361), ARNm Tp2 (7,314±0,256) y ARNm Prm1 (7,334±0,390) en 100μg/mL icariina grupo experimental. (AU)

High frequency of larval abnormalities of the toad Rhinella arenarum (Anura: Bufonidae) in an Argentinian agroecosystem

Introduction: The frequent use of pesticides is currently considered a cause of environmental pollution due to the high rate of entry of these substances into agroecosystems. This constitutes a risk for the species that inhabit these ecosystems, in particular anurans whose characteristics make them prone to exposure to and interaction with environmental pollutants. Objective: To report the occurrence of abnormalities in larvae of the common toad Rhinella arenarum inhabiting ponds surrounded by agroecosystems. Methods: In two consecutive springs (2015 and 2016), reproductive events of common toads were monitored in temporary pond systems in agricultural and non-agricultural areas, located near the city of La Plata (Buenos Aires, Argentina). The physicochemical parameters of the ponds were measured, and the stage of each reproductive event was recorded, such as the numbers of adult toads, amplexus and clutches. In the laboratory, the larvae were measured and photographed, their stage of development was recorded, and their morphology was examined under a stereomicroscope. Representative samples (normal and abnormal) from each pond studied were processed for histopathological analysis. Results: In the field studies carried out on a population of R. arenarum collected in an agroecosystem, a lower number of reproductive adults and clutches were observed in relation to the population of a non-agricultural pond. A total of 1 910 larvae were collected: 529 and 1 381 larvae from ponds located in non-agricultural and agricultural areas, respectively. Larvae from the agroecosystem showed two types of abnormalities: severe tail flexure and abdominal bloating. In addition, five degrees of severity could be determined in relation to abdominal bloating. Conclusions: This work reports the high frequency and severity of abnormalities observed in the early stages of R. arenarum larvae living within an agroecosystem, providing evidence of the negative impact that agricultural activities cause on aquatic ecosystems surrounded by farming areas.

Introducción: El uso frecuente de plaguicidas es considerado actualmente una causa de contaminación ambiental debido a las altas tasas de ingreso de estas sustancias a los agroecosistemas. Esta situación es un riesgo para las especies que habitan en estos ecosistemas, en particular los anuros cuyas características los hacen propensos a la exposición e interacción con contaminantes ambientales. Objetivo: Informar la presencia de anormalidades en larvas del sapo común Rhinella arenarum que habitan en estanques rodeados por un agroecosistema. Métodos: En dos primaveras consecutivas (2015 y 2016), se monitorearon los eventos reproductivos del sapo común proveniente de sistemas de estanques temporales ubicados en zonas agrícolas y no agrícolas, cerca de la ciudad de La Plata (Buenos Aires, Argentina). Se midieron los parámetros fisicoquímicos de los estanques y se registraron las etapas de cada evento reproductivo como el número de sapos adultos, amplexos y nidadas. En el laboratorio, las larvas fueron medidas y fotografiadas, se registró su estado de desarrollo y se examinó la morfología de cada una bajo microscopio estereoscópico. Se procesaron muestras representativas (normales y anormales) de cada estanque estudiado para análisis histopatológico. Resultados: En la población de R. arenarum que vive dentro de un agroecosistema, se observó un menor número de adultos reproductores y puestas en relación con la del estanque en la zona no agrícola. Se recolectaron un total de 1 910 larvas: 529 y 1 381 larvas de estanques ubicados en zonas no agrícolas y agrícolas, respectivamente. Las larvas del agroecosistema mostraron dos tipos de anormalidades: severa flexión de la cola y distensión abdominal. Además, se pudo determinar cinco grados de gravedad en relación con la distensión abdominal. Conclusiones: Una alta frecuencia y severidad de anormalidades en los estadios tempranos de larvas de R. arenarum que viven dentro de un agroecosistema proporciona evidencia del impacto negativo que las actividades agrícolas causan en los ecosistemas acuáticos rodeados por áreas de cultivo.

Efecto del nitrato de plata (AgNO3) en el crecimiento in vitro de brotes de Anthurium magnificum Linden

Anthurium magnificum Linden es una importante planta ornamental perteneciente a la familia Araceae. Esta especie es muy demandada como planta de maceta para la decoración de interiores y jardines, así como follaje de corte. Los métodos de propagación tradicionales en esta especie presentan ciertas desventajas por lo que no permiten satisfacer la creciente demanda. Estas limitantes convierten al cultivo de tejidos vegetales en el método más eficiente para propagar plantas de Anthurium magnificum a un ritmo más rápido que los métodos de propagación convencionales. En el cultivo de tejidos vegetales el nitrato de plata adicionado a los medios de cultivo actúa como un inhibidor de la acción del etileno y desempeña un papel crucial en la regulación de procesos fisiológicos esenciales de las plantas. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar el efecto de diferentes concentraciones de nitrato de plata en el crecimiento in vitro de brotes de Anthurium magnificum. Para ello, se cultivaron brotes in vitro de Anthurium magnificum en medios de cultivo enriquecidos con diferentes concentraciones de nitrato de plata. Los resultados mostraron que los mayores valores en las variables altura de la planta, número de raíces y longitud de las raíces se obtuvieron en un medio de cultivo con 1,0 mg L-1 de nitrato de plata. En la variable área foliar de la planta los mayores valores se presentaron en los medios de cultivo que contenían nitrato de plata independientemente de la concentración empleada.

Anthurium magnificum Linden is an important ornamental plant belonging to the Araceae family. This species is in great demand as a pot plant for interior and garden decoration, as well as cut foliage. The traditional propagation methods in this species have certain disadvantages, which is why they cannot satisfy the growing demand. These limitations make plant tissue culture the most efficient method to propagate Anthurium magnificum plants at a faster rate than conventional propagation methods. In the culture of plant tissues, silver nitrate added to the culture media acts as an inhibitor of the action of ethylene and plays a crucial role in the regulation of essential physiological processes in plants. The objective of this work was to determine the effect of different concentrations of silver nitrate on the in vitro growth of Anthurium magnificum shoots. For this, in vitro shoots of Anthurium magnificum were cultivated in culture media enriched with different concentrations of silver nitrate. The results showed that the highest values in the variables plant height, number of roots and length of the roots were obtained in a culture medium with 1.0 mg L-1 of silver nitrate. In the variable leaf area of the plant, the highest values were presented in the culture media that contained silver nitrate, regardless of the concentration used.

Implante endoscópico de mioblastos autólogos en el tratamiento de la incontinencia urinaria de esfuerzo y evaluación de su eficacia en conejos sometidos a esfinterotomía / Endoscopic implantation of autologous myoblasts for stress urinary incontinence and evaluation of its efficacy in sphincterotomized rabbits

Introducción La incontinencia urinaria de esfuerzo (IUE) constituye uno de los problemas de salud con mayor impacto en la vida de las personas. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar una terapia para IUE dentro de la ingeniería de tejidos mediante aislamiento y cultivo de mioblastos autólogos (MAC), su implante endoscópico y el estudio de su eficacia en un modelo de incontinencia por esfinterotomía desarrollado en conejos. Materiales y métodos Se utilizaron conejos Nueva Zelanda, machos, sanos. Los animales fueron primero sangrados para obtención del plasma pobre en plaquetas (PPP) y biopsiados para el aislamiento de mioblastos. Posesfinterotomía, fueron divididos en dos grupos: grupo tratado (representado por aquellos animales que recibieron MAC resuspendidos en PPP) y grupo control (representado por aquellos animales que recibieron solo PPP). Se utilizó el punto de presión de pérdida (LPP) para medir la continencia de ambos grupos en diferentes instancias. Los resultados se evaluaron con modelos de regresión lineal jerárquica. Se efectuaron también estudios histológicos sobre los esfínteres de los conejos una vez finalizado el seguimiento. Resultados No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los valores basales de LPP de cada grupo. Los valores posesfinterotomía de ambos grupos estuvieron por debajo del 50% del valor basal, condición necesaria para considerarlos sujetos incontinentes. Los valores posimplante del grupo tratado fueron superiores al 50% del valor basal, permitiendo suponer una recuperación de la continencia. Se observó una diferencia estadísticamente significativa en los valores de LPP entre los dos grupos de tratamiento (p=0,003). El estudio histológico en el grupo tratado reveló islas interconectadas formadas por fibras musculares, mientras que en el grupo control se observó tejido conectivo periférico a la luz de la uretra e infiltrado inflamatorio. Discusión y conclusiones ... (AU)

Introduction Stress urinary incontinence (SUI) is one of the health problems with more impact on patients’ lives. The aim of the present work was to develop a therapy for SUI using tissue engineering by isolation and culture of autologous myoblasts (CAM) followed by endoscopic implantation. We also evaluated the efficacy of this therapy in a rabbit model of incontinence after sphincterotomy. Materials and methods We used healthy male New Zealand rabbits. The animals were first bled to obtain platelet-poor plasma (PPP) and biopsied for myoblast isolation. Post-sphincterotomy, they were divided into two groups: the treatment group (including animals that received CAM resuspended in PPP) and the control group (including animals receiving only PPP). The leak-point pressure (LPP) was used to measure continence in both groups at different time points. The results were evaluated with hierarchical linear regression models. Histological evaluation of the rabbits’ sphincters was also performed at the end of follow-up. Results No statistically significant differences were observed between the baseline LPP values of each group. The post-sphincterotomy values of both groups were below 50% of the baseline value, which was a mandatory condition for incontinence. The post-implantation values of the treatment group were higher than 50% of the baseline value, which led us to assume continence recovery. A statistically significant difference was observed in the LPP values between the two treatment groups (p=0.003). Histological study revealed interconnected islands formed by muscle fibers in the treatment group, and connective tissue surrounding the urethral lumen and inflammatory infiltrate in the control group. Discussion and conclusions The implantation of CAM significantly improved LPP values in the treatment group, and the improvement remained throughout the evaluation period. ... (AU)

Identificación de hongos fitopatógenos asociados a Brassica oleracea var. Capitata en la granja la Arandela de Armenia, Quindío. / Identification of phytopathogenic fungi associated with Brassica oleracea var. Capitata in the Armenia city, Quindío.

Introducción. Se ha informado que los hongos fitopatógenos representan las principales pérdidas económicas a nivel global en diferentes tipos de cultivos, entre los que se encuentran hortalizas como Brassica Oleracea var. capitata. Objetivos. Identificar los posibles hongos fitopatógenos asociados a Brassica, los signos y síntomas que estos pueden causar, su posible mecanismo de transmisión y comparar cualitativamente el crecimiento de estos en diferentes medios de cultivo. Materiales y métodos. Se aislaron hojas con y sin síntomas, junto con muestras de suelo. En cuanto a la microscopia se visualizaron las partes reproductivas de los hongos para su clasificación taxonómica. Resultados. Se aislaron un total de 17 morfotipos hasta nivel de género, siendo Botritis y Fusarium los que se encontraron con mayor presencia en las muestras de hojas asintomáticas y con síntomas. Para las muestras de suelo, el género más frecuente fue Penicillium. Conclusiones. De los tres medios evaluados, el agar extracto Sabouraud mostró los mejores resultados para el crecimiento de la mayoría de los hongos. Se establecieron mecanismos de transmisión probables para cada uno de los hongos encontrados en asociación a B. Oleracea var. capitata y se estableció que Botrytis sp. es el posible agente patógeno causante de la sintomatología observada en las muestras.

Introduction. Phytopathogenic fungi represent the main economic losses worldwide in different types of crops, including vegetables such as Brassica Oleracea var. capitata. Objectives. Identify the possible phytopathogenic fungi associated with Brassica, the signs and symptoms they may cause, their possible transmission mechanism, and to qualitatively compare their growth in different culture media. Materials and methods. Leaves with and without symptoms were isolated, together with soil samples to elaborate serial dilutions. As for microscopy, the reproductive parts of the fungi were visualized for taxonomic classification. Results. A total of 17 morphotypes were isolated up to genus level, being Botrytis and Fusarium, the genera found with the highest presence in asymptomatic and symptomatic leaf samples. For soil samples, the most frequent genus was Penicillium. Conclusions. Of the three media evaluated, Sabouraud's extract agar showed the best results for the growth of most fungi. Probable transmission mechanisms were established for each of the fungi found in association with B. oleracea var. capitata and Botrytis sp. was established as the possible pathogen causing the symptoms observed in the samples.

The Comparative Anatomy of the Upper Digestive System in 26 Species of Zoophagous-Polyphagous Palearctic Birds / Anatomía Comparada del Sistema Digestivo Superior en 26 Especies de Aves Paleárticas Zoófagas-Polífagas

SUMMARY: Birds are the most diversified organisms on Earth, with species covering various niches in each major biome, being essential to understand the modern ecosystem. This study concentrates on the diversification of the anatomical structure of the upper digestive tract for 26 species of zoophage-polyphagous birds and the anatomical differences in the digestive system to reveal aspects related to their evolution and diversification. The trophic spectrum of the selected birds includes several categories of food, or, as in the case of strictly carnivorous birds, to a single food category. After performing the dissections, the digestive tract was separated from the carcass and each digestive segment was measured and analysed. In this study, it was demonstrated that the birds' feeding behaviour influence the macroscopic particularities of the digestive system, more visible in the cranial portion (oropharyngeal cavity, esophagus, proventriculus and gizzard), with little descriptive information in the literature. The tongue is poorly developed and immobile in piscivorous birds, while the tongue of insectivorous birds is long and moves considerably away from the tip of the bill. The esophagus was stretchable and presents longitudinal folds on its entire surface in piscivorous species and not extensible in insectivorous birds.

Las aves son los organismos más diversificados de la Tierra, con especies que cubren varios nichos en cada bioma principal, siendo esenciales para comprender el ecosistema moderno. Este estudio se concentra en la diversificación de la estructura anatómica del tracto digestivo superior para 26 especies de aves zoófago-polífagas y las diferencias anatómicas en el sistema digestivo para revelar aspectos relacionados con su evolución y diversificación. El espectro trófico de las aves seleccionadas incluye varias categorías de alimentos o, como en el caso de las aves estrictamente carnívoras, una sola categoría de alimentos. Después de realizar las disecciones, se separó el tracto digestivo de la canal y se midió y analizó cada segmento digestivo. En este estudio se demostró que el comportamiento alimentario de las aves influye en las particularidades macroscópicas del sistema digestivo, más visibles en la porción craneal (cavidad orofaríngea, esófago, proventrículo y molleja), con poca información descriptiva en la literatura. En las aves piscívoras, la lengua está poco desarrollada e inmóvil, mientras que la lengua de las aves insectívoras es larga y se aleja considerablemente de la punta del pico. El esófago era estirable y presentaba pliegues longitudinales en toda su superficie en especies piscívoras y no extensible en aves insectívoras.

Utilidad diagnóstica de los tiempos de positividad de hemocultivos para distinguir verdaderas bacteriemias de contaminantes en base a un sistema automatizado / Diagnostic performance of the time to positivity of blood cultures to distinguish true bacteremia from contaminants based on an automated system

RESUMEN Objetivo. Determinar la utilidad diagnóstica de los tiempos de positividad de hemocultivos para distinguir verdaderas bacteriemias de contaminantes en el sistema automatizado «BACT/ALERT®¼. Materiales y métodos. Se realizó un estudio transversal de tipo pruebas diagnósticas, a partir de una base de datos de muestras de hemocultivos procesadas entre enero del 2016 y agosto del 2021. Se incluyeron todas las muestras de hemocultivos de pacientes con sospecha de bacteriemia, las muestras de hemocultivos fueron ingresadas al sistema «BACT/ALERT®¼ para diferenciar verdaderas bacteriemias de contaminantes. Resultados. Se analizó un total de 33 951 frascos de hemocultivos y se obtuvieron 3875 frascos positivos. El 75,2% (n=2913) del total de hemocultivos positivos fueron verdaderas bacteriemias y 24,8% (n=962) fueron contaminantes. La mediana de tiempo de positividad en los hemocultivos con verdaderas bacteriemias fue significativamente menor (16,3 horas; RIC: 11,2 - 24,9) que la mediana de tiempo de positividad de hemocultivos con contaminantes (22,5 horas; RIC: 18,4 - 31,8; p<0,001). El tiempo de positividad demostró capacidad discriminante para diferenciar verdaderas bacteriemias de contaminantes, con un AUC-ROC de 0,73 (IC95%: 0,71 - 0,75), con 85% y 63% de sensibilidad y especificidad respectivamente para el diagnóstico de contaminantes cuando el tiempo de positividad supera las 16,5 horas. La administración de antibióticos previos a la toma retrasó el tiempo de positividad, en cambio, haber presentado fiebre antes de la toma de muestra acortó el tiempo de positividad. Conclusiones. Nuestros resultados muestran un buen desempeño de los tiempos de positividad de hemocultivos para diferenciar verdaderas bacteriemias de contaminantes utilizando el sistema «BACT/ALERT®¼ cuando el tiempo de positividad fue superior a 16,5 horas.

ABSTRACT Objective. To determine the diagnostic performance of blood culture positivity times for distinguishing true bacteremia from contaminants in the automated "BACT/ALERT®" system. Materials and methods. A cross-sectional, diagnostic test-type study was conducted from a database of blood culture samples processed between January 2016 and August 2021. All blood culture samples from patients with suspected bacteremia were included; blood culture samples were entered into the "BACT/ALERT®" system to differentiate true bacteremia from contaminants. Results. We obtained 33,951 blood cultures samples, of which 3875 were positive. Of the total number of positive blood cultures, 75.2% (n=2913) were true bacteremia and 24.8% (n=962) were contaminants. The median time to positivity in blood cultures with true bacteremia was significantly shorter (16.3 hours; IQR: 11.2 - 24.9) than the median time to positivity of blood cultures with contaminants (22.5 hours; IQR: 18.4 - 31.8; p<0.001). The positivity time showed the capacity to differentiate true bacteremia from contaminants, with an AUC-ROC of 0.73 (95%CI: 0.71 - 0.75), with 85% and 63% sensitivity and specificity respectively for the diagnosis of contaminants when the positivity time exceeds 16.5 hours. The use of antibiotics prior to sampling delayed the time to positivity, while having fever before sampling shortened the time to positivity. Conclusions. Our results show good diagnostic performance of blood culture positivity times to differentiate true bacteremia from contaminants using the "BACT/ALERT®" system when the positivity time was longer than 16.5 hours.

Cultivo de Acanthamoeba spp. en agua apirógena / Acanthamoeba spp. culture in pyrogen-free water / Cultura de Acanthamoeba spp. em água apirogênica

Resumen El objetivo de este estudio fue evaluar el cultivo de cepas de Acanthamoeba spp. en agua destilada estéril apirógena de uso farmacéutico. Se utilizaron dos cepas de genotipo T4 [un aislamiento de encefalitis granulomatosa amebiana (EGA) y una ambiental] y cepas correspondientes a los genotipos T5 y T15. Los quistes de cada una de las cepas se sembraron en placas de Petri con agar no nutritivo con diferentes soluciones (agua destilada estéril apirógena uso médico para preparaciones inyectables, agua destilada filtrada, medio Page) y combinados con suspensiones de Escherichia coli. Las placas se incubaron a 37 °C y se monitorearon diariamente durante 15 días para la detección de trofozoítos. El crecimiento se evaluó mediante examen microscópico directo. Cada cultivo contó con cuatro repeticiones para cada una de las cepas (n=96). En conclusión, se hallaron diferencias estadísticamente significativas en el crecimiento de las cepas por día. Las cepas T5 y T4 (encefalitis amebiana granulomatosa) desarrollaron mayor cantidad de trofozoítos en el primer día respecto de la cepa T15 (H=16,42; p=0,001). En el agua apirógena con E. coli se obtuvo un crecimiento igual a la solución de Page con E. coli (H=24,64; p=0,0001). No se hallaron diferencias estadísticamente significativas en la cantidad de trofozoítos obtenidos en agua apirógena con E. coli y solución de Page con E. coli en la cepa T4 (EGA) (U=4; p<0,05) pero sí en la cepa T4 ambiental (U=0; p<0,05).

Abstract The objective of this study was to evaluate the culture of strains of Acanthamoeba spp. in sterile apyrogenic distilled water for pharmaceutical use. Two T4 genotype strains [one isolate of granulomatous amebic encephalitis (GAE) and one environmental], a T5 and T15 genotype strains were used. The cysts of each of the strains were seeded in Petri dishes with non-nutritive agar with different solutions (pyrogenic sterile distilled water for medical use for injectable preparations, filtered distilled water, Page medium) and combined with Escherichia coli suspensions. Plates were incubated at 37 °C and monitored daily for 15 days for the detection of trophozoites. Growth was assessed by direct microscopic examination. Each medium culture counted four replicates for each of the strains (n=96). Concluding, statistically significant differences were found in the growth of the strains per day. Strains T5 and T4 (granulomatous amebic encephalitis) developed a greater number of trophozoites on the first day compared to strain T15 (H=16.42; p=0.001). In apyrogenic water with E. coli, a growth equal to Page's solution with E. coli was obtained (H=24.64; p=0.0001). No statistically significant differences were found in the amount of trophozoites obtained in apyrogenic water with E. coli and Page's solution with E. coli in strain T4 (GAE) (U=4; p<0.05), but significant differences were found in the environmental T4 strain (U=0; p<0.05).

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar o cultivo de cepas Acanthamoeba spp. em água destilada apirogênica estéril para uso farmacêutico. Foram utilizadas duas cepas de genótipo T4 [um isolamento de encefalite granulomatosa amebiana (EGA) e uma ambiental], e cepas correspondentes aos genótipos T5 e T15. Os cistos de cada uma das cepas foram semeados em placas de Petri com ágar não nutritivo com diferentes soluções (água destilada estéril apirogênica para uso médico para preparações injetáveis, água destilada filtrada, meio Page) e combinados com suspensões de Escherichia coli. As placas foram incubadas a 37 °C e monitoradas diariamente durante 15 dias para detecção de trofozoítos. O crescimento foi avaliado através de exame microscópico direto. Cada cultura contou com quatro réplicas para cada uma das cepas (n=96). Em conclusão, diferenças estatisticamente significativas foram encontradas no crescimento das cepas por dia. As cepas T5 e T4 (encefalite amebiana granulomatosa) desenvolveram maior número de trofozoítos no primeiro dia em relação à cepa T15 (H=16,42; p=0,001). Em água apirogênica com E. coli, foi obtido crescimento igual ao da solução de Page com E. coli (H=24,64, p=0,0001). Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas na quantidade de trofozoítos obtidos em água apirogênica com E. coli e solução de Page com E. coli na cepa T4 (EGA) (U=4; p%<0,05), mas sim na cepa T4 ambiental (U=0; p<0,05).

Conocimiento y uso de plantas medicinales en Calpan, Puebla, México: percepción de varios sectores sociales / Knowledge and use of medicinal plants in Calpan, Puebla, Mexico: the perception of various social sectors

Medicinal plants (HMS) have been part of everyday life in Mexico, despite being popular, little has been documented about their knowledge and use. A diagnosis was made to know the perception of the general public, housewives, doctors, teachers and people dedicated to herbalism about medicinal plants (HMS). The instruments of the poll (100), the survey (130), the census (37) and the interview (6) were used in the sectors of the population mentioned above. Descriptive statistics and measures of central tendency were used. It is a transgenerational knowledge, transmitted verbally and is part of everyday life. Its use is through infusions (tea) fordiseases considered mild. This knowledge has been relegated to the elderly and people with less purchasing power. However, 100% of the surveyed population knows and/or has used HMS. As empirical knowledge becomes scientific, it will be possible to know its effects on human health, therefore, it is important to carry out experimental studies on the biological effects of plants. In this way, its use could be further expanded through appropriate public policies.

Las plantas medicinales (HMS) han formado parte de la vida cotidiana en México, a pesar de ser de uso popular poco se ha documentado sobre su conocimiento y uso. Se realizó un diagnóstico para conocer la percepción del público en general, amas de casa, médicos, profesores y personas dedicadas a la herbolaria sobre las HMS. Se ocuparon instrumentos de sondeo (100), encuestas (130), censo (37) y entrevistas (6) en los sectores de la población antes mencionado. Se utilizó estadística descriptiva y medidas de tendencia central para la presentación de los resultados. El uso de HMS viene de un conocimiento transgeneracional, transmitido de manera verbal y forma parte de la vida cotidiana. Su uso es a través de infusiones (té) para enfermedades consideradas como leves. Este conocimiento se ha relegado para personas de la tercera edad y con menor poder adquisitivo. Sin embargo, el 100% de población encuestada sabe y/o ha usado HMS. Conforme el saber empírico se transforme en científico se podrá conocer sus efectos en la salud humana, por lo que es importante realizar estudios experimentales sobre los efectos biológicos de las plantas. De esta forma se podría expandir más su uso a través de políticas públicas adecuadas.

Effect of icariin on the transformation efficiency of induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro.

OBJECTIVE: To investigate the effect of icariin on the transformation efficiency of germ cell-like cells from mouse induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro. METHODS: Firstly, mouse induced pluripotent stem cells were induced and cultured to transform into germ cell-like cells, and the primordial germ cell-like cells were identified by Western blot and RT-PCR. Then, different concentrations of icariin (0.1µg/mL, 1µg/mL, 10µg/mL and 100µg/mL) were added into the culture medium, and the obtained primitive germ cell-like cells were cultured, Western blot and RT-PCR were used to identify the obtained sperm cells, the transformation efficiency was compared. RESULTS: The primordium germ cell-like cells obtained from mouse induced pluripotent stem cells in vitro specially expressed Oct-4 protein, C-kit protein, Mvh mRNA, Fragilis mRNA and Stella mRNA. The sperm cells were specially expressed VASA, SCP3 and γH2AX proteins. RT-PCR showed that the sperm cells were specially expressed Ddx4, Tp2 and Prm1 mRNA. Compared with the control group, the expression level of VASA protein (1.744±0.283, 2.882±0.373, 6.489±0.460), SCP3 protein (2.250±0.306, 7.058±0.521, 8.654±0.804), γH2AX protein (4.304±0.433, 5.713±0.339, 9.268±0.545), Ddx4 mRNA (1.374±0.145, 2.846±0.194, 4.021±0.154), Tp2 mRNA (1.358±0.130, 3.623±0.326, 5.811±0.390) and Prm1 mRNA (1.326±0.162, 3.487±0.237, 4.666±0.307) in 0.1µg/mL, 1µg/mL, 10µg/mL icariin experimental groups were all lower than that of VASA protein (10.560±0.413), SCP3 protein (13.804±0.642), γH2AX protein (11.874±0.464), Ddx4 mRNA (6.4005±0.361), Tp2 mRNA (7.314±0.256) and Prm1 mRNA (7.334±0.390) in 100µg/mL icariin experimental group. CONCLUSIONS: Icariin can promote the transformation of mouse induced pluripotent stem cells into sperm cells in vitro, and it is concentration-dependent manner in a certain concentration range.

Desarrollo y validación de un método de suspensión basado en células Vero para la detección del virus Zika / Development and validation of a vero cell-based suspension method for the detection of Zika virus

Objetivo . Desarrollar y validar un método de suspensión celular utilizando células Vero 76 para el cultivo del virus Zika (ZIKV) basado en la infección de células recién sembradas no adheridas. Material y métodos . Se utilizaron tres multiplicidades de infección diferentes del ZIKV para desarrollar y comparar este novedoso método con el método estándar de monocapa de células confluentes. Además, validamos preliminarmente el método de suspensión utilizando muestras clínicas caracterizadas como positivas o negativas para el ZIKV. El método estándar de monocapa se utilizó como método de referencia, y el aislamiento viral se confirmó mediante un RT-PCR específico del ZIKV. Se estimó la sensibilidad e intervalos de confianza del 95% para el método de suspensión. Asimismo, se realizó una comparación técnica del método de suspensión contra el método de monocapa. Resultados . Nuestros hallazgos sugieren que tanto la carga viral como la replicación del ZIKV fueron comparables entre los métodos de infección en monocapa y en suspensión. Aunque ambos métodos fueron adecuados para cultivar y aislar el ZIKV, el método de suspensión se caracterizó por ser más fácil, barato y rápido, así como una técnica de aislamiento sensible. En comparación con el método de monocapa, el método de suspensión fue cuatro veces más sensible en la detección del ZIKV en casos inconclusos por RT-PCR. Conclusiones . El método de suspensión tiene el potencial de ser un método eficaz para cultivar y aislar el ZIKV y su uso es potencialmente útil tanto en la investigación como en entornos clínicos.

Objective. To develop and validate a cell suspension method using Vero 76 cells for culturing Zika virus (ZIKV) based on infection of detached freshly seeded cells. Material and methods. Three different multiplicities of infection of ZIKV were used to develop and compare this novel method to the standard confluent cell monolayer method. In addition, we preliminary validated the cell suspension method using well-characterized ZIKV positive and negative clinical samples. The standard confluent cell monolayer method was used as the reference method, and viral isolation was confirmed by a ZIKV-specific RT-PCR. The sensitivity and its 95% confidence intervals for the cell suspension method were estimated. Also, a technical comparison of the cell suspension method against the cell monolayer method was performed. Results. Our findings suggested that both the viral load and replication of ZIKV were comparable between both monolayer- and suspension-infection methods. Although both methods were suitable for culturing and isolating ZIKV, the cell suspension method was easier, cheaper, and quicker as well as a sensitive isolation technique. The cell suspension method was significantly more sensitive in detecting Zika in inconclusive cases by RT-PCR, with a fourfold increase compared to the confluent cell monolayer method. Conclusion. The cell suspension method has the potential to be an effective method for cultivating and isolating ZIKV and its application is potentially useful in both research and clinical settings.

Endoscopic implantation of autologous myoblasts for stress urinary incontinence and evaluation of its efficacy in sphincterotomized rabbits.

INTRODUCTION: Stress urinary incontinence (SUI) is one of the health problems with more impact on patients' lives. The aim of the present work was to develop a therapy for SUI using tissue engineering by isolation and culture of autologous myoblasts (CAM) followed by endoscopic implantation. We also evaluated the efficacy of this therapy in a rabbit model of incontinence after sphincterotomy. MATERIALS AND METHODS: We used healthy male New Zealand rabbits. The animals were first bled to obtain platelet-poor plasma (PPP) and biopsied for myoblast isolation. Post-sphincterotomy, they were divided into two groups: the treatment group (including animals that received CAM resuspended in PPP) and the control group (including animals receiving only PPP). The leak-point pressure (LPP) was used to measure continence in both groups at different time points. The results were evaluated with hierarchical linear regression models. Histological evaluation of the rabbits' sphincters was also performed at the end of follow-up. RESULTS: No statistically significant differences were observed between the baseline LPP values of each group. The post-sphincterotomy values of both groups were below 50% of the baseline value, which was a mandatory condition for incontinence. The post-implantation values of the treatment group were higher than 50% of the baseline value, which led us to assume continence recovery. A statistically significant difference was observed in the LPP values between the two treatment groups (p=0.003). Histological study revealed interconnected islands formed by muscle fibers in the treatment group, and connective tissue surrounding the urethral lumen and inflammatory infiltrate in the control group. DISCUSSION AND CONCLUSIONS: The implantation of CAM significantly improved LPP values in the treatment group, and the improvement remained throughout the evaluation period. It may be associated with the consistency of the implant and its stability at the injection site. Longer follow-up studies and human clinical investigations are required to consider CAM implantation as an alternative treatment for stress urinary incontinence.

Introducción a cultivo de vitroplantas de "Peperina de las Lomas" (Hedeoma multiflora Benth) como contribución para su conservación ex situ / Field establishment of vitroplants of "Peperina de las Lomas" (Hedeoma multiflora Benth) as a contribution to its ex situ conservation

Hedeoma multiflora Benth. (Lamiaceae) is an aromatic-medicinal species native to Argentina, Uruguay and southern Brazil that is in a state of vulnerability due to overexploitation. It is used in the preparation of flavored yerba mate and in popular medicine, mainly in abdominal conditions. The objective of this work was to adjust the micropropagation technique, study the field behavior of vitroplants, compare the seeds generated and close their cultivation cycle. Different concentrations of growth regulators were evaluated on Murashige-Skoog medium. The implantation was successful. There are no differences between the evaluated plants. It was possible to efficiently close the complete cycle in vitro, with 100% survival, flowering and production of viable seeds. This methodology will serve for its introduction to the field, subsequent domestication, reintroduction into its natural environment and mitigate the process of degradation of the populations.

Hedeoma multiflora Benth. (Lamiaceae) es una especie aromatico-medicinal nativa de Argentina, Uruguay y sur de Brasil que se encuentra en estado de vulnerabilidad debido a la sobreexplotación. Es utilizada en la elaboración de yerba mate saborizada y en medicina popular, principalmente en afecciones abdominales. El objetivo de este trabajo fue ajustar la técnica de micropropagación, estudiar el comportamiento a campo de vitroplantas, comparar las semillas generadas y cerrar su ciclo de cultivo. Se evaluaron diferentes concentraciones de reguladores de crecimiento sobre medio de cultivo Murashige-Skoog. La implantación se realizó exitosamente, sin deterioro ni muerte de las plantas. No existen diferencias entre las plantas evaluadas. Se logró cerrar eficientemente el ciclo completo in vitro, con un 100% de supervivencia, floración y producción de semillas viables. Esta metodología servirá para su introducción a campo, posterior domesticación, reintroducción en su ambiente natural y mitigar el proceso de degradación de las poblaciones.

Ex situ culture of coral species Porites lobata (Scleractinia: Poritidae) and Pocillopora damicornis (Scleractinia: Pocilloporidae), Costa Rica: first assessment and implications

Introduction: Coral reefs worldwide decline has prompted coral restoration as a viable strategy to rewild vulnerable, foundational coral species. Stony corals are now propagated by thousands in both in-water and ex situ (land-based) coral nurseries, the latter being unexplored in Costa Rica, despite their potential benefits as a reef management tool. Objective: To analyze the viability of ex situ culturing of the Pacific reef-building corals Porites lobata and Pocillopora damicornis at Parque Marino del Pacífico (PMP), Puntarenas, Costa Rica, aquaculture facilities. Methods: From May to October 2018 a total of 180 coral fragments were kept in an aquaculture recirculated system. Survival, growth, and fragment yield in relation to culture medium (physicochemical parameters) were recorded. Results: Survival and growth rate varied between species and culture tanks. On average, surviving P. lobata fragments (68.89 %) placed in Tank 1 (T1) grew 216 %, while fragments placed in Tank 2 (T2) had a survival rate of 71.11 % and an increase of 277 % in live tissue area. P. damicornis fragments survival, basal and crown area percentage increase were: 71.11 %, 980 % and 366 % in T1, and 100 %, 976 % and 287 % in T2. Although fragments survival and growth were net positive, the yield in terms of culture was low, due to culture conditions in the tanks not meeting coral culture optimal requirements. Conclusions: Survival and growth of both species varied depending on the tank in which they were placed. Survival was similar to that found in other ex situ studies and growth was similar to those reported in the wild, however culture performance in terms of yield was low. Aquaculture systems at PMP constitute a good base for the cultivation of corals, however for the culture effort to achieve maximum yield, current systems must be optimized according to the requirements of the target coral species.

Introducción: El declive mundial de los arrecifes de coral, ha impulsado a la restauración coralina como una estrategia viable para recuperar especies de coral fundacionales, en estado vulnerable. Los corales pétreos se propagan por miles, tanto en viveros subacuáticos como ex situ (en tierra). Siendo el segundo método poco explorado en Costa Rica, a pesar de sus potenciales beneficios como medida como herramienta de manejo arrecifal. Objetivo: Analizar la viabilidad del cultivo ex situ de las especies de coral constructoras de arrecifes Porites lobata y Pocillopora damicornis en el módulo de acuicultura del Parque Marino del Pacífico (PMP), Puntarenas, Costa Rica. Métodos: Desde el 17 de mayo hasta el 17 de octubre de 2018, se mantuvieron un total de 180 fragmentos de coral en un sistema de recirculación de acuicultura. Se registraron la supervivencia, el crecimiento y el rendimiento de los fragmentos en relación con el medio de cultivo (parámetros fisicoquímicos). Resultados: La tasa de supervivencia y crecimiento varió entre especies y tanques de cultivo. En promedio, los fragmentos de P. lobata supervivientes (68.89 %) colocados en el tanque 1 (T1) crecieron un 216 %. En contraste con los fragmentos colocados en el tanque 2 (T2) que mostraron una tasa de supervivencia del 71.11 % y un aumento del 277 % en el área de tejido vivo. En el caso de P. damicornis, los porcentajes de supervivencia, de aumento del área basal y del área de la corona fueron: 71.11 %, 980 %, y 366 %, y 100 %, 976 %, y 287 % para los fragmentos colocados en T1 y T2, respectivamente. Aunque la supervivencia y el crecimiento de los fragmentos fueron positivos, el rendimiento en términos de cultivo fue bajo, debido a que las condiciones en los tanques no cumplían con las condiciones ideales para el cultivo de corales. Conclusiones: La supervivencia y el crecimiento de ambas especies variaron en función del tanque en el que se colocaron. La supervivencia fue similar a la observada en otros estudios ex situ y el crecimiento fue similar al reportado en la naturaleza, pero el rendimiento del cultivo fue bajo. Los sistemas de acuicultura del PMP constituyen una buena base para el cultivo de corales, sin embargo, para que el esfuerzo de cultivo alcance un máximo de rendimiento, los sistemas actuales deben optimizarse en función de los requisitos de las especies de coral objetivo.

Bloodstream infections and antibiotic resistance at a regional hospital, Colombia, 2019-2021 / Infecciones del torrente sanguíneo y resistencia a los antibióticos en un hospital regional en Colombia, 2019-2021 / Infecções de corrente sanguínea e resistência a antibióticos em um hospital regional, Colômbia, 2019-2021

ABSTRACT Objectives. To assess antibiotic susceptibility of World Health Organization (WHO) priority bacteria (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, and Streptococcus pneumoniae) in blood cultures at the Orinoquía regional hospital in Colombia. Methods. This was cross-sectional study using routine laboratory data for the period 2019-2021. Data on blood samples from patients suspected of a bloodstream infection were examined. We determined: the total number of blood cultures done and the proportion with culture yield; the characteristics of patients with priority bacteria; and the type of bacteria isolated and antibiotic resistance patterns. Results. Of 25 469 blood cultures done, 1628 (6%) yielded bacteria; 774 (48%) of these bacteria were WHO priority pathogens. Most of the priority bacteria isolated (558; 72%) were gram-negative and 216 (28%) were gram-positive organisms. Most patients with priority bacteria (666; 86%) were hospitalized in wards other than the intensive care unit, 427 (55%) were male, and 321 (42%) were ≥ 60 years of age. Of the 216 gram-positive bacteria isolated, 205 (95%) were Staphylococcus aureus. Of the 558 gram-negative priority bacteria isolated, the three most common were Escherichia coli (34%), Klebsiella pneumoniae (28%), and Acinetobacter baumannii (20%). The highest resistance of Staphylococcus aureus was to oxacillin (41%). For gram-negative bacteria, resistance to antibiotics ranged from 4% (amikacin) to 72% (ampicillin). Conclusions. Bacterial yield from blood cultures was low and could be improved. WHO priority bacteria were found in all hospital wards. This calls for rigorous infection prevention and control standards and continued surveillance of antibiotic resistance.

RESUMEN Objetivos. Evaluar la sensibilidad a los antibióticos de las bacterias incluidas en la lista prioritaria de la Organización Mundial de la Salud (OMS) (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae) en hemocultivos en el Hospital Regional de la Orinoquía en Colombia. Métodos. Se trata de un estudio transversal que empleó datos rutinarios de laboratorio del período comprendido entre los años 2019 y 2021. Se examinaron datos de muestras de sangre de pacientes con presunción clínica de infección del torrente sanguíneo. Se determinó el número total de hemocultivos realizados y la proporción cultivos con resultados, las características de los pacientes con bacterias prioritarias, así como el tipo de bacterias aisladas y los patrones de resistencia a los antibióticos. Resultados. De 25 469 hemocultivos realizados, se aislaron bacterias en 1628 (6%); 774 (48%) con agentes patógenos prioritarios de la OMS. La mayoría de las cepas bacterianas prioritarias aisladas (558; 72%) eran gramnegativas y 216 (28%), organismos grampositivos. La mayoría de los pacientes con bacterias prioritarias (666; 86%) fueron hospitalizados en salas distintas de la unidad de cuidados intensivos, 427 (55%) eran varones y 321 (42%) tenían 60 años o más. De las 216 bacterias grampositivas aisladas, 205 (95%) eran Staphylococcus aureus. De las 558 bacterias prioritarias gramnegativas aisladas, las tres más comunes fueron Escherichia coli (34%), Klebsiella pneumoniae (28%) y Acinetobacter baumannii (20%). La mayor resistencia de Staphylococcus aureus fue a la oxacilina (41%). Entre las bacterias gramnegativas, la resistencia a los antibióticos varió del 4% (amikacina) al 72% (ampicilina). Conclusiones. El aislamiento de bacterias en los hemocultivos fue bajo y podría mejorarse. Se encontraron bacterias de la lista prioritaria de la OMS en todas las salas del hospital, por lo que es necesario aplicar rigurosas normas de prevención y control de infecciones y realizar una vigilancia continua de la resistencia a los antibióticos.

RESUMO Objetivos. Avaliar a suscetibilidade a antibióticos das bactérias consideradas prioritárias pela Organização Mundial da Saúde (OMS) (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Staphylococcus aureus e Streptococcus pneumoniae) em hemoculturas coletadas no hospital regional de Orinoquía na Colômbia. Métodos. Estudo transversal utilizando dados laboratoriais de rotina do período 2019-2021. Foram examinados os dados de amostras de sangue de pacientes com suspeita de infecção de corrente sanguínea. Determinamos o número total de hemoculturas realizadas e a proporção de culturas com rendimento, as características dos pacientes com bactérias prioritárias, e o tipo de bactéria isolada e padrões de resistência a antibióticos. Resultados. Das 25.469 hemoculturas realizadas, 1.628 (6%) foram positivas para bactérias, sendo que 774 (48%) dessas bactérias eram da lista de agentes patogênicos prioritários da OMS. A maioria das bactérias prioritárias isoladas (558; 72%) eram gram-negativas e 216 (28%) eram gram-positivas. A maioria dos pacientes com bactérias prioritárias (666; 86%) estava internada em enfermaria, e não em unidade de terapia intensiva. 427 (55%) eram homens e 321 (42%) tinham ≥ 60 anos de idade. Das 216 bactérias gram-positivas isoladas, 205 (95%) eram Staphylococcus aureus. Das 558 bactérias gram-negativas prioritárias isoladas, as três mais frequentes foram Escherichia coli (34%), Klebsiella pneumoniae (28%) e Acinetobacter baumannii (20%). O Staphylococcus aureus apresentou maior resistência à oxacilina (41%). Entre as bactérias gram-negativas, a resistência aos antibióticos variou entre 4% (amicacina) e 72% (ampicilina). Conclusões. O rendimento bacteriano das hemoculturas foi baixo e pode ser melhorado. As bactérias consideradas prioritárias pela OMS foram encontradas em todas as enfermarias do hospital. Os achados exigem normas rigorosas de prevenção e controle de infecção, e vigilância contínua da resistência bacteriana a antibióticos.

Control de la calidad y ensayos de rendimiento de CromoCen® SALM según la norma ISO 11133:2014/Amd. 1: 2018 / Quality control and performance testing of CromoCen® SALM according to ISO 11133: 2014 / Amd.1: 2018

Introducción: En Cuba, se desarrolló un medio de cultivo cromogénico y fluorogénico, para la detección, aislamiento y diferenciación de Salmonella de otras bacterias Gram negativas. El método que emplea el medio fue validado y su uso se adoptó en una norma cubana. El aseguramiento de la calidad y el control del rendimiento de los medios garantizan la confiabilidad de los resultados analíticos. La norma ISO 11133 establece criterios mínimos y métodos para evaluarlos. Objetivo: Evaluar los criterios de control de la calidad y de rendimiento de CromoCen® SALM, establecidos en la ISO 11133:2014/Amd.1:2018, para demostrar su fiabilidad para el análisis microbiológico de los alimentos de consumo humano. Métodos: Se evaluaron los indicadores de calidad físico-químicos de tres lotes y se definió un conjunto de ellos que caracteriza la calidad del medio antes y después de terminado, así como la consistencia entre lotes. Para el ensayo de rendimiento se seleccionaron 10 cepas de diferentes géneros. Se determinó la relación de productividad, el factor de selectividad y la electividad de CromoCen® SALM, según la ISO 11133. Resultados: La evaluación físico-química mostró una consistencia entre lotes en color, homogeneidad, apariencia del polvo y del medio preparado. Los valores de contenido de humedad y pH se encontraron dentro de los valores establecidos para este producto. La relación de productividad de CromoCen® SALM con respecto al agar triptona soya, fue superior al 50 por ciento, mientras que el factor de selectividad resultó de 4. Se demostró que en el medio de cultivo se puede diferenciar un grupo representativo de géneros microbianos de Salmonella. Conclusiones: CromoCen® SALM cumple con los requisitos de calidad establecidos para este tipo de productos, según la ISO 11133 vigente. La correcta formulación de los lotes, así como el cumplimiento de los requisitos de calidad aseguran el funcionamiento adecuado para lo que fue diseñado(AU)

Introduction: In Cuba, a new chromogenic and fluorogenic culture medium was developed for the detection, isolation and differentiation of Salmonella from other Gram negative bacteria. The method and medium were validated and their use was adopted as a Cuban standard. Quality assurance and control of media is essential and mandatory to ensure the reliability of the results of the analysis in which they are used. ISO 11133 establishes minimum criteria and methods to evaluate them. Objective: To evaluate the quality and performance criteria of CromoCen® SALM, as recommended in ISO 11133:2014/Amd.1:2018 to demonstrate its reliability for the microbiological analysis of food for human consumption. Methods: The physical-chemical quality indicators of three batches were evaluated and a group of them was defined to characterize its quality before and after finishing, as well to evaluate the consistency between batches. For the performance test, 12 strains of different genera were selected. The productivity ratio, the selectivity factor and the electivity of CromoCen® SALM were determined. Results: The physico-chemical evaluation showed a consistency between batches in color, homogeneity, appearance of the powder and of the prepared medium. The moisture content and pH values ranged within the established values for this product. The productivity ratio of CromoCen® SALM with respect to tryptone soy agar was greater than 50 percent, while the selectivity factor was 4. It was shown that in the culture medium a representative group of Salmonella microbial genera can be differentiated. Conclusions: CromoCen® SALM meets the quality requirements established for this type of products, according to the current ISO 11133 standard. The correct formulation of the batches, as well as the fulfillment of the quality requirements ensure the proper functionality and match the design purpose(AU)