Fluoroquinolonas en aves, huevos, alimentos avícolas y su impacto en la microbiota intestinal de aves / Fluoroquinolone in birds, eggs, poultry feeds and their impact on the intestinal microbiota

Se detectó la presencia de fluoroquinolonas en varios alimentos (huevos, alimentos para aves y pechuga de pollo), así como determinar el perfil de susceptibilidad de ácido nalidíxico y ciprofloxacina de las enterobacterias aisladas del contenido intestinal de pollos de Cumaná. Se estudiaron alimentos iniciadores y de engorde (de cinco marcas comerciales) y uno para gallinas ponedoras, así como pechugas de pollos nacionales y de Brasil. I-2 y E-1 fueron los que tuvieron las concentraciones más altas de enrofloxacina. El alimento para las gallinas ponedoras (AP 2,35 µg/mg) tuvo más enrofloxacina que los de los pollos. En los huevos, la mayor acumulación se vio en las yemas. Los pollos nacionales (0,43-0,56 µg/mg) acumularon más ciprofloxacina que los pollos de Brasil (0,14 µg/mg). De los hisopados rectales de los pollos, E. coli fue la principal especie aislada. Por antibiograma, 48% de las cepas fueron resistentes a las quinolonas probadas (ácido nalidíxico y ciprofloxacina). Cuando se determinó la concentración mínima inhibitoria a ciprofloxacina, todas las cepas fueron resistentes (8-128 µg/ml). Todos los alimentos muestreados exceden los límites máximos de fluoroquinolonas permitidos en humanos, lo cual ejerce una presión selectiva importante en las bacterias de la microbiota intestinal de los pollos

To detect the presence of fluoroquinolones in several foods (eggs, poultry food and chicken breast), as well as to determine the susceptibility profile of nalidixic acid and ciprofloxacin of strains of enterobacterias from chicken's intestinal content from Cumaná. Starter and fattening foods (of five commercial marks), and one for laying hens, were studied, as well as domestic chicken's breast (and Brazil. I-2 and E-1 were the ones with the highest concentrations of enrofloxacin. The food for laying hens (AP 2,35 µg/mg) had more enrofloxacin than those for chickens. In eggs, greatest accumulation was seen in the yolks. Domestic chickens (0,43-0,56 µg/mg) accumulated more ciprofloxacin than Brazilian ones (0,14 µg/mg). E. coli was the main specie from chicken rectal swabs. By antimicrobial susceptibility testing, 48% were resistant to both quinolones (nalidixic acid and ciprofloxacin). When the minimum inhibitory concentration of ciprofloxacin was determined, all strains were resistant (8-128 µg/ml). All sampled foods exceeded the maximum limits of fluoroquinolones allowed in humans, which puts significant selective pressure on the bacteria in the chicken gut microbiota

Detection of efflux pump CmeABC in enrofloxacin resistant Campylobacter spp. strains isolated from broiler chickens (Gallus gallus domesticus) in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Detecção da bomba de efluxo CmeABC em cepas de Campylobacter spp. resistentes à enrofloxacina isoladas de frangos de corte (Gallus gallus domesticus) no Estado do Rio de Janeiro, Brasil

Fowls are the main reservoirs of the highly important food-originating pathogen called Campylobacter spp. and broilers' meat and byproducts are the main vehicles of this microorganism. Increasing of Campylobacter spp. resistant strains to fluorquinolones, an antimicrobial class often employed in poultry farming and in human medicine has become a great concern to poultry breeders. In fact, several studies evaluated increasing bacterial resistance against these antimicrobial agents. The role of CmeABC efflux system has been underscored among the resistance mechanisms in Campylobacter spp. to fluorquinolones. This study investigated the occurrence of CmeABC efflux pump in 81 and 78 enrofloxacin resistant strains of Campylobacter jejuni and C. coli respectively, isolated from broilers collected from six abattoirs situated at São José do Vale do Rio Preto/RJ poultry center and from two commercial abattoirs situated at Metropolitan Region of Rio de Janeiro, from 2013 to 2016. The resistance to enrofloxacin was assessed by agar dilution to determine minimum inhibitory concentration (MIC). The CmeABC efflux system was investigated through the detection of genes genes cmeA, cmeB and cmeC by PCR. The activity of CmeABC efflux pump was investigated in 20 strains by using the efflux pump inhibitor Phenylalanine-Arginine ß-Naphthylamide (PAßN). The three genes cmeA, cmeB and cmeC were detected in 94.3% of the strains (C. jejuni = 80 and C. coli = 70), whereas the system was absent or incomplete in 5.7% of strains (C. jejuni = 1 and C. coli = 8). MIC varied between 0.5µg/ml and 64µg/ml, and 88.7% of strains were enrofloxacin resistant and 11.3% featuring intermediate resistance. The inhibition of the efflux pump by PAßN reduced the MIC to enrofloxacin up to eight times in fifteen strains (75%). These results indicate that this system is frequent and active in Campylobacter spp. Resistant strains in the presence of enrofloxacin.(AU)

As aves são os principais reservatórios de Campylobacter spp., importante patógeno de origem alimentar e a carne de frango e produtos derivados são os principais veículos desse microrganismo. O aumento de cepas de Campylobacter spp. resistentes às fluorquinolonas, uma classe antimicrobiana frequentemente empregada na avicultura e na medicina humana, tornou-se uma grande preocupação para os produtores de aves e vários estudos avaliaram o aumento da resistência bacteriana a esses antimicrobianos. O papel do sistema de efluxo CmeABC tem sido enfatizado entre os mecanismos de resistência em Campylobacter spp. à fluorquinolonas. O presente estudo investigou a ocorrência da bomba de efluxo CmeABC em 81 cepas de Campylobacter jejuni e 78 cepas de Campylobacter coli resistentes à enrofloxacina, isoladas de frangos de corte coletados em seis abatedouros situados no polo avícola de São José do Rio Preto/RJ e de dois abatedouros comerciais situados na Região Metropolitana do Rio de Janeiro, de 2013 a 2016. A resistência à enrofloxacina foi avaliada pelo método de diluição em ágar para determinar a concentração inibitória mínima (CIM). O sistema de efluxo CmeABC foi investigado através da detecção dos genes cmeA, cmeB e cmeC por PCR. A atividade da bomba de efluxo CmeABC foi investigada em 20 cepas utilizando o inibidor da bomba de efluxo Phenylalanine-Arginine ß-Naftilamida (PAßN). Os três genes cmeA, cmeB e cmeC foram detectados em 94,3% das cepas (C. jejuni = 80 e C. coli = 70), enquanto o sistema estava ausente ou incompleto em 5,7% das cepas (C. jejuni = 1 e C coli = 8). A CIM variou entre 0,5µg/ml e 64µg/ml e 88,7% das cepas foram resistentes à enrofloxacina, enquanto 11,3% apresentaram resistência intermediária. A inibição da bomba de efluxo pelo PAßN reduziu a CIM da enrofloxacina até oito vezes em quinze cepas (75%). Estes resultados indicam que este sistema é frequente e ativo em cepas resistentes de Campylobacter spp. na presença de enrofloxacina.(AU)

Detection of efflux pump CmeABC in enrofloxacin resistant Campylobacter spp. strains isolated from broiler chickens (Gallus gallus domesticus) in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Detecção da bomba de efluxo CmeABC em cepas de Campylobacter spp. resistentes à enrofloxacina isoladas de frangos de corte (Gallus gallus domesticus) no Estado do Rio de Janeiro, Brasil

Fowls are the main reservoirs of the highly important food-originating pathogen called Campylobacter spp. and broilers' meat and byproducts are the main vehicles of this microorganism. Increasing of Campylobacter spp. resistant strains to fluorquinolones, an antimicrobial class often employed in poultry farming and in human medicine has become a great concern to poultry breeders. In fact, several studies evaluated increasing bacterial resistance against these antimicrobial agents. The role of CmeABC efflux system has been underscored among the resistance mechanisms in Campylobacter spp. to fluorquinolones. This study investigated the occurrence of CmeABC efflux pump in 81 and 78 enrofloxacin resistant strains of Campylobacter jejuni and C. coli respectively, isolated from broilers collected from six abattoirs situated at São José do Vale do Rio Preto/RJ poultry center and from two commercial abattoirs situated at Metropolitan Region of Rio de Janeiro, from 2013 to 2016. The resistance to enrofloxacin was assessed by agar dilution to determine minimum inhibitory concentration (MIC). The CmeABC efflux system was investigated through the detection of genes genes cmeA, cmeB and cmeC by PCR. The activity of CmeABC efflux pump was investigated in 20 strains by using the efflux pump inhibitor Phenylalanine-Arginine ß-Naphthylamide (PAßN). The three genes cmeA, cmeB and cmeC were detected in 94.3% of the strains (C. jejuni = 80 and C. coli = 70), whereas the system was absent or incomplete in 5.7% of strains (C. jejuni = 1 and C. coli = 8). MIC varied between 0.5µg/ml and 64µg/ml, and 88.7% of strains were enrofloxacin resistant and 11.3% featuring intermediate resistance. The inhibition of the efflux pump by PAßN reduced the MIC to enrofloxacin up to eight times in fifteen strains (75%). These results indicate that this system is frequent and active in Campylobacter spp. Resistant strains in the presence of enrofloxacin.(AU)

As aves são os principais reservatórios de Campylobacter spp., importante patógeno de origem alimentar e a carne de frango e produtos derivados são os principais veículos desse microrganismo. O aumento de cepas de Campylobacter spp. resistentes às fluorquinolonas, uma classe antimicrobiana frequentemente empregada na avicultura e na medicina humana, tornou-se uma grande preocupação para os produtores de aves e vários estudos avaliaram o aumento da resistência bacteriana a esses antimicrobianos. O papel do sistema de efluxo CmeABC tem sido enfatizado entre os mecanismos de resistência em Campylobacter spp. à fluorquinolonas. O presente estudo investigou a ocorrência da bomba de efluxo CmeABC em 81 cepas de Campylobacter jejuni e 78 cepas de Campylobacter coli resistentes à enrofloxacina, isoladas de frangos de corte coletados em seis abatedouros situados no polo avícola de São José do Rio Preto/RJ e de dois abatedouros comerciais situados na Região Metropolitana do Rio de Janeiro, de 2013 a 2016. A resistência à enrofloxacina foi avaliada pelo método de diluição em ágar para determinar a concentração inibitória mínima (CIM). O sistema de efluxo CmeABC foi investigado através da detecção dos genes cmeA, cmeB e cmeC por PCR. A atividade da bomba de efluxo CmeABC foi investigada em 20 cepas utilizando o inibidor da bomba de efluxo Phenylalanine-Arginine ß-Naftilamida (PAßN). Os três genes cmeA, cmeB e cmeC foram detectados em 94,3% das cepas (C. jejuni = 80 e C. coli = 70), enquanto o sistema estava ausente ou incompleto em 5,7% das cepas (C. jejuni = 1 e C coli = 8). A CIM variou entre 0,5µg/ml e 64µg/ml e 88,7% das cepas foram resistentes à enrofloxacina, enquanto 11,3% apresentaram resistência intermediária. A inibição da bomba de efluxo pelo PAßN reduziu a CIM da enrofloxacina até oito vezes em quinze cepas (75%). Estes resultados indicam que este sistema é frequente e ativo em cepas resistentes de Campylobacter spp. na presença de enrofloxacina.(AU)

Degeneração retiniana em felinos secundária ao uso de enrofloxacina: relato de 3 casos / Retinal degeneration in felines secondary to the use of enrofloxacin: three cases report / Degeneración retiniana en felinos a causa del uso de enrofloxacino: relato de tres casos

A enrofloxacina faz parte do grupo das fluorquinolonas de segunda geração, um antimicrobiano de amplo espectro, de amplo uso na medicina veterinária, para tratamento de diversas afecções. Em 1997 a tendência a uma aplicação de dose única fez com que o fabricante alterasse sua indicação de 2,5 mg/kg diários a cada 12h para uma dose de 5 a 20 mg/kg a cada 12h ou 24h. Em 2000, diversos relatos de efeitos adversos relacionados a visão em gatos devido a altas doses de enrofloxacina, fizeram com que a dosagem original fosse restabelecida. A degeneração retiniana geralmente é aguda e irreversível. O exame oftalmoscópico revela degeneração difusa da retina, hiperreflexividade tapetal e atenuação dos vasos sanguíneos da retina. O mecanismo de ação da enrofloxacina que leva a essa degeneração da retina ainda não é claro, mas alguns fatores que podem contribuir para o mecanismo de ação são: altas doses, administração por via endovenosa, longo período de tratamento, senilidade, insuficiência renal, insuficiência hepática, exposição prolongada à luz solar durante o tratamento, interações medicamentosas. Este trabalho descreve três casos atendidos na região de Campo Belo, SP, nos anos de 2016 e 2017, nos quais a administração de enrofloxacina promoveu cegueira reversível em dois gatos e irreversível em um gato.

Enrofloxacin is part of the second generation fluoroquinolones group, a broad-spectrum antimicrobial widely used in veterinary medicine for the treatment of various conditions. In 1997 the trend towards a single dose application caused the manufacturer to change his indication from 2.5 mg/kg daily every 12h to a dose of 5 to 20 mg/kg every 12h ou 24h. In 2000, several reports of adverse effects related to vision in cats due to high doses of enrofloxacin caused the original dosage to be restored. Retinal degeneration is usually acute and irreversible. Ophthalmoscopic examination reveals diffuse retinal degeneration, tapetal hyperreflexivity and attenuation of the retinal blood vessels. The mechanism of action of enrofloxacin leading to this retinal degeneration is not yet clear, but some factors that may contribute to the mechanism of action are: high doses, intravenous administration, long treatment period, senility, renal insufficiency, hepatic insufficiency, prolonged esposure to sunlight during treatment, drug interactions. This study describes three cases treated in Campo Belo-SP, in the years 2016 and 2017, in which the administration of enrofloxacin promoted reversible blindness in two cats and irreversible in one cat.

El enrofloxacino forma parte del grupo de las fluoroquinolonas de segunda generación, un antimicrobiano de amplio espectro y uso en la medicina veterinaria, para tratamiento de distintas afecciones. En 1997, la tendencia a una aplicación de dosis única hizo el fabricante cambiar su indicación de 2,5 mg/kg diarios, cada 12 h, para una dosis de 5 a 20 mg/kg, cada 12 h o 24 h. En el ano 2000, distintos relatos de efectos adversos relacionados a la visión en gatos, debido a altas dosis de enrofloxacino, hicieron que la dosificación original fuera restablecida. La degeneración retiniana generalmente es aguda e irreversible. Una oftalmoscopia revela la degeneración difusa de la retina, hiperreflexividad tapetal y atenuación de los vasos sanguíneos de la retina. El mecanismo de acción del enrofloxacino que lleva a esa degeneración de la retina todavía no es claro, pero se identifica algunos factores que pueden contribuir para el mecanismo de acción, tales como: altas dosis, administración por vía endovenosa, largo período de tratamiento, senilidad, insuficiencia renal, insuficiencia hepática, exposición prolongada a la luz solar durante el tratamiento, interacciones medicamentosas. Este trabajo describe tres casos atendidos en la región de Campo Belo, São Paulo, en los años de 2016 y 2017, en los cuales la administración de enrofloxacino promovió ceguera reversible en dos gatos e irreversible en uno.

Degeneração retiniana em felinos secundária ao uso de enrofloxacina: relato de 3 casos / Retinal degeneration in felines secondary to the use of enrofloxacin: three cases report / Degeneración retiniana en felinos a causa del uso de enrofloxacino: relato de tres casos

A enrofloxacina faz parte do grupo das fluorquinolonas de segunda geração, um antimicrobiano de amplo espectro, de amplo uso na medicina veterinária, para tratamento de diversas afecções. Em 1997 a tendência a uma aplicação de dose única fez com que o fabricante alterasse sua indicação de 2,5 mg/kg diários a cada 12h para uma dose de 5 a 20 mg/kg a cada 12h ou 24h. Em 2000, diversos relatos de efeitos adversos relacionados a visão em gatos devido a altas doses de enrofloxacina, fizeram com que a dosagem original fosse restabelecida. A degeneração retiniana geralmente é aguda e irreversível. O exame oftalmoscópico revela degeneração difusa da retina, hiperreflexividade tapetal e atenuação dos vasos sanguíneos da retina. O mecanismo de ação da enrofloxacina que leva a essa degeneração da retina ainda não é claro, mas alguns fatores que podem contribuir para o mecanismo de ação são: altas doses, administração por via endovenosa, longo período de tratamento, senilidade, insuficiência renal, insuficiência hepática, exposição prolongada à luz solar durante o tratamento, interações medicamentosas. Este trabalho descreve três casos atendidos na região de Campo Belo, SP, nos anos de 2016 e 2017, nos quais a administração de enrofloxacina promoveu cegueira reversível em dois gatos e irreversível em um gato.(AU)

Enrofloxacin is part of the second generation fluoroquinolones group, a broad-spectrum antimicrobial widely used in veterinary medicine for the treatment of various conditions. In 1997 the trend towards a single dose application caused the manufacturer to change his indication from 2.5 mg/kg daily every 12h to a dose of 5 to 20 mg/kg every 12h ou 24h. In 2000, several reports of adverse effects related to vision in cats due to high doses of enrofloxacin caused the original dosage to be restored. Retinal degeneration is usually acute and irreversible. Ophthalmoscopic examination reveals diffuse retinal degeneration, tapetal hyperreflexivity and attenuation of the retinal blood vessels. The mechanism of action of enrofloxacin leading to this retinal degeneration is not yet clear, but some factors that may contribute to the mechanism of action are: high doses, intravenous administration, long treatment period, senility, renal insufficiency, hepatic insufficiency, prolonged esposure to sunlight during treatment, drug interactions. This study describes three cases treated in Campo Belo-SP, in the years 2016 and 2017, in which the administration of enrofloxacin promoted reversible blindness in two cats and irreversible in one cat.(AU)

El enrofloxacino forma parte del grupo de las fluoroquinolonas de segunda generación, un antimicrobiano de amplio espectro y uso en la medicina veterinaria, para tratamiento de distintas afecciones. En 1997, la tendencia a una aplicación de dosis única hizo el fabricante cambiar su indicación de 2,5 mg/kg diarios, cada 12 h, para una dosis de 5 a 20 mg/kg, cada 12 h o 24 h. En el ano 2000, distintos relatos de efectos adversos relacionados a la visión en gatos, debido a altas dosis de enrofloxacino, hicieron que la dosificación original fuera restablecida. La degeneración retiniana generalmente es aguda e irreversible. Una oftalmoscopia revela la degeneración difusa de la retina, hiperreflexividad tapetal y atenuación de los vasos sanguíneos de la retina. El mecanismo de acción del enrofloxacino que lleva a esa degeneración de la retina todavía no es claro, pero se identifica algunos factores que pueden contribuir para el mecanismo de acción, tales como: altas dosis, administración por vía endovenosa, largo período de tratamiento, senilidad, insuficiencia renal, insuficiencia hepática, exposición prolongada a la luz solar durante el tratamiento, interacciones medicamentosas. Este trabajo describe tres casos atendidos en la región de Campo Belo, São Paulo, en los años de 2016 y 2017, en los cuales la administración de enrofloxacino promovió ceguera reversible en dos gatos e irreversible en uno.(AU)

Perfil farmacocinético da enrofloxacina na forma de comprimido administrado em cães e sua correlação com a Concentração Inibitória Mínima (CIM) para bactérias de importância clínica / Pharmacokinetic profile of enrofloxacin in tablet form administered in dogs and their correlation with the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for bacterial of clinical importance / Perfil farmacocinetico de la enrofloxacina en la forma de comprimido administrado en perros y su Correlación Inhibitaria Minima (CIM) para bacterias de importancia clinica

No presente estudo foi avaliada a relação entre as concentrações plasmáticas obtidas após o tratamento em doses múltiplas, via oral do antibiótico* à base de Enrofloxacina em cães, pela correlação farmacocinética da Enrofloxacina+Ciprofloxacina e os valores da CIM obtidas em estudo in vitro com a Enrofloxacina para vários agentes de importância clínica veterinária. A concentração máxima (Cmax) alcançada no plasma dos cães foi de 0,96 µg/mL a um tempo máximo (Tmax) de 1,25 horas. Por meio dos modelos preditivos de eficácia (Cmax, relação ASC/CIM e o tempo acima da CIM) para os micro-organismos estudados, considerou-se para a Enrofloxacina testada o valor de T>CIM necessário para comprovação de eficácia de 9,6h. Para estabelecer a relação farmacocinética e da CIM, as concentrações calculadas com a CIM foram de 0,03; 0,06; 0,25; 0,5; 1 e 8 µg/mL. No parâmetro Alcance da CIM, todos os animais estudados atingiram as CIMs acima de 0,5 µg/mL, apenas 42% dos animais alcançaram a CIM de 1 µg/mL e nenhum animal alcançou a CIM de 8 µg/mL. No parâmetro tempo considerado para intervalo de dose (24 horas) acima da CIM, na média os cães permaneceram 45,83% do intervalo acima da CIM de 0,03 µg/mL, 43,75% do intervalo acima da CIM de 0,06 µg/mL, 22,92% acima para o intervalo da CIM de 0,25 µg/mL, 12,5% dos animais acima do intervalo para a CIM de 0,5 µg/mL, e nenhum alcançou a CIM de 8 µg/mL. Para os parâmetros relação Cmax/CIM e relação ASC/CIM, as concentrações necessárias para inibir o crescimento bacteriano foram alcançados desde 0,03 µg/mL a 1 µg/mL. Pelos resultados encontrados conclui-se que a Enrofloxacina testada na dose e intervalo de doses preconizado foi eficaz para todos os micro-organismos estudados, exceto para a Pseudomonas aeruginosa.

In the present study, the relationship between plasma concentrations obtained after multiple oral doses of an Enrofloxacin-based antibiotic* in dogs was evaluated by the correlation of Enrofloxacin + Ciprofloxacin pharmacokinetic (PK) parameters and the minimal inhibitory concentration (MIC) values obtained in an in vitro study using the Enrofloxacin against several pathogenic microorganisms of veterinary clinical importance. The peak concentration (Cmax) was 0.96 and the time when the maximum concentration reached (Tmax) was 1.25 h. Using predictive models of efficacy (Cmax, the area under the concentration-time curve -AUC/MIC ratio and T> MIC) for the microorganisms studied, the value of T> MIC necessary for the Enrofloxacin tested efficacy was 9.6 h. To establish a PK and MIC relationship, MIC concentrations calculated were 0.03, 0.06, 0.25, 0.5, 1 and 8 µg/mL. For the MIC parameter, all animals achieved MIC values over 0.5 µg/mL, only 42% of animals achieved MIC values of 1 µg/mL and no animal achieved MIC values of 8 µg/mL. For the time parameter considered for dose interval (24h) over the MIC, dogs remained 45.83% of the dose interval above the MIC value of 0.03 µg/mL, 43,75% of the dose interval above the MIC value of 0.06 µg/mL, 22.92% of the dose interval above the MIC value of 0,25 µg/mL, 12.5% of the dose interval above the MIC value of 0.5 µg/mL and none achieved the MIC value of 8 µg/mL. For Cmax/MIC and AUC/MIC ratios, the concentrations necessary to inhibit bacteria growth were achieved from 0.03 µg/mL to 1 µg/mL. Based on the results, it was concluded that the enrofloxacin studied used at the recommended dosage and dose interval was effective against all microorganisms studied, except for Pseudomonas aeruginosa.

En el presente estudio se evaluó la relación entre las concentraciones plasmáticas obtenidas después del tratamiento con dosis múltiples, por vía oral del antibiótico* a base de Enrofloxacina en perros por la correlación farmacocinética de la Enrofloxacina+Ciprofloxacino y los valores de la CIM obtenidos en estudio in vitro con la Enrofloxacina testada de prueba para varios agentes de importancia clínica veterinaria. La concentración máxima (Cmax) alcanzada en el plasma de los perros fue de 0,96 µg/mL a un tiempo máximo (Tmax) de 1,25 horas. Por medio de los modelos predictivos de eficacia (Cmax, relación ASC/CIM y el tiempo por encima de la CIM) para los microorganismos estudiados, se consideró para el producto probado el valor de T>CIM necesario paracomprobación de eficacia de 9,6 h. Para establecer la relación farmacocinética y de la CIM, las concentraciones calculadas con la CIM fueron de 0,03; 0,06; 0,25; 0,5; 1 y 8 µg/mL. En el parámetro de alcance de la CIM, todos los animales estudiados alcanzaron las CIM por encima de 0,5 µg/mL, sólo el 42% de los animales alcanzaron la CIM de 1 µg/mL y ningún animal alcanzó la CIM de 8 µg/mL. En el parámetro tiempo considerado para el intervalo de dosis (24 hs) por encima de la CIM, en promedio los perros permanecieron 45,83% del intervalo por encima de la CIM de 0,03 µg/mL, 43,75% del intervalo por encima de la CIM de 0,06 µg/mL, 22,92% por encima de la CIM de 0,25 µg/mL, 12,5% de los animales por encima del intervalo para la CIM de 0,5 µg/mL y ninguno alcanzo una CIM de 8 µg/mL. Para los parámetros relación Cmax/CIM y relación ASC/CIM, las concentraciones necesarias para inhibir el crecimiento bacteriano fueron alcanzadas desde 0,03 µg/mL a 1 µg/mL. Por los resultados encontrados se concluye que la Enrofloxacina provada en la dosis e intervalo de dosis recomendado fue eficaz para todos los microorganismos estudiados, excepto para la Pseudomonas aeruginosa.

Perfil farmacocinético da enrofloxacina na forma de comprimido administrado em cães e sua correlação com a Concentração Inibitória Mínima (CIM) para bactérias de importância clínica / Pharmacokinetic profile of enrofloxacin in tablet form administered in dogs and their correlation with the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for bacterial of clinical importance / Perfil farmacocinetico de la enrofloxacina en la forma de comprimido administrado en perros y su Correlación Inhibitaria Minima (CIM) para bacterias de importancia clinica

No presente estudo foi avaliada a relação entre as concentrações plasmáticas obtidas após o tratamento em doses múltiplas, via oral do antibiótico* à base de Enrofloxacina em cães, pela correlação farmacocinética da Enrofloxacina+Ciprofloxacina e os valores da CIM obtidas em estudo in vitro com a Enrofloxacina para vários agentes de importância clínica veterinária. A concentração máxima (Cmax) alcançada no plasma dos cães foi de 0,96 µg/mL a um tempo máximo (Tmax) de 1,25 horas. Por meio dos modelos preditivos de eficácia (Cmax, relação ASC/CIM e o tempo acima da CIM) para os micro-organismos estudados, considerou-se para a Enrofloxacina testada o valor de T>CIM necessário para comprovação de eficácia de 9,6h. Para estabelecer a relação farmacocinética e da CIM, as concentrações calculadas com a CIM foram de 0,03; 0,06; 0,25; 0,5; 1 e 8 µg/mL. No parâmetro Alcance da CIM, todos os animais estudados atingiram as CIMs acima de 0,5 µg/mL, apenas 42% dos animais alcançaram a CIM de 1 µg/mL e nenhum animal alcançou a CIM de 8 µg/mL. No parâmetro tempo considerado para intervalo de dose (24 horas) acima da CIM, na média os cães permaneceram 45,83% do intervalo acima da CIM de 0,03 µg/mL, 43,75% do intervalo acima da CIM de 0,06 µg/mL, 22,92% acima para o intervalo da CIM de 0,25 µg/mL, 12,5% dos animais acima do intervalo para a CIM de 0,5 µg/mL, e nenhum alcançou a CIM de 8 µg/mL. Para os parâmetros relação Cmax/CIM e relação ASC/CIM, as concentrações necessárias para inibir o crescimento bacteriano foram alcançados desde 0,03 µg/mL a 1 µg/mL. Pelos resultados encontrados conclui-se que a Enrofloxacina testada na dose e intervalo de doses preconizado foi eficaz para todos os micro-organismos estudados, exceto para a Pseudomonas aeruginosa.(AU)

In the present study, the relationship between plasma concentrations obtained after multiple oral doses of an Enrofloxacin-based antibiotic* in dogs was evaluated by the correlation of Enrofloxacin + Ciprofloxacin pharmacokinetic (PK) parameters and the minimal inhibitory concentration (MIC) values obtained in an in vitro study using the Enrofloxacin against several pathogenic microorganisms of veterinary clinical importance. The peak concentration (Cmax) was 0.96 and the time when the maximum concentration reached (Tmax) was 1.25 h. Using predictive models of efficacy (Cmax, the area under the concentration-time curve -AUC/MIC ratio and T> MIC) for the microorganisms studied, the value of T> MIC necessary for the Enrofloxacin tested efficacy was 9.6 h. To establish a PK and MIC relationship, MIC concentrations calculated were 0.03, 0.06, 0.25, 0.5, 1 and 8 µg/mL. For the MIC parameter, all animals achieved MIC values over 0.5 µg/mL, only 42% of animals achieved MIC values of 1 µg/mL and no animal achieved MIC values of 8 µg/mL. For the time parameter considered for dose interval (24h) over the MIC, dogs remained 45.83% of the dose interval above the MIC value of 0.03 µg/mL, 43,75% of the dose interval above the MIC value of 0.06 µg/mL, 22.92% of the dose interval above the MIC value of 0,25 µg/mL, 12.5% of the dose interval above the MIC value of 0.5 µg/mL and none achieved the MIC value of 8 µg/mL. For Cmax/MIC and AUC/MIC ratios, the concentrations necessary to inhibit bacteria growth were achieved from 0.03 µg/mL to 1 µg/mL. Based on the results, it was concluded that the enrofloxacin studied used at the recommended dosage and dose interval was effective against all microorganisms studied, except for Pseudomonas aeruginosa.(AU)

En el presente estudio se evaluó la relación entre las concentraciones plasmáticas obtenidas después del tratamiento con dosis múltiples, por vía oral del antibiótico* a base de Enrofloxacina en perros por la correlación farmacocinética de la Enrofloxacina+Ciprofloxacino y los valores de la CIM obtenidos en estudio in vitro con la Enrofloxacina testada de prueba para varios agentes de importancia clínica veterinaria. La concentración máxima (Cmax) alcanzada en el plasma de los perros fue de 0,96 µg/mL a un tiempo máximo (Tmax) de 1,25 horas. Por medio de los modelos predictivos de eficacia (Cmax, relación ASC/CIM y el tiempo por encima de la CIM) para los microorganismos estudiados, se consideró para el producto probado el valor de T>CIM necesario paracomprobación de eficacia de 9,6 h. Para establecer la relación farmacocinética y de la CIM, las concentraciones calculadas con la CIM fueron de 0,03; 0,06; 0,25; 0,5; 1 y 8 µg/mL. En el parámetro de alcance de la CIM, todos los animales estudiados alcanzaron las CIM por encima de 0,5 µg/mL, sólo el 42% de los animales alcanzaron la CIM de 1 µg/mL y ningún animal alcanzó la CIM de 8 µg/mL. En el parámetro tiempo considerado para el intervalo de dosis (24 hs) por encima de la CIM, en promedio los perros permanecieron 45,83% del intervalo por encima de la CIM de 0,03 µg/mL, 43,75% del intervalo por encima de la CIM de 0,06 µg/mL, 22,92% por encima de la CIM de 0,25 µg/mL, 12,5% de los animales por encima del intervalo para la CIM de 0,5 µg/mL y ninguno alcanzo una CIM de 8 µg/mL. Para los parámetros relación Cmax/CIM y relación ASC/CIM, las concentraciones necesarias para inhibir el crecimiento bacteriano fueron alcanzadas desde 0,03 µg/mL a 1 µg/mL. Por los resultados encontrados se concluye que la Enrofloxacina provada en la dosis e intervalo de dosis recomendado fue eficaz para todos los microorganismos estudiados, excepto para la Pseudomonas aeruginosa.(AU)

Detection of efflux pump CmeABC in enrofloxacin resistant Campylobacter spp. strains isolated from broiler chickens (Gallus gallus domesticus) in the state of Rio de Janeiro, Brazil

ABSTRACT: Fowls are the main reservoirs of the highly important food-originating pathogen called Campylobacter spp. and broilers meat and byproducts are the main vehicles of this microorganism. Increasing of Campylobacter spp. resistant strains to fluorquinolones, an antimicrobial class often employed in poultry farming and in human medicine has become a great concern to poultry breeders. In fact, several studies evaluated increasing bacterial resistance against these antimicrobial agents. The role of CmeABC efflux system has been underscored among the resistance mechanisms in Campylobacter spp. to fluorquinolones. This study investigated the occurrence of CmeABC efflux pump in 81 and 78 enrofloxacin resistant strains of Campylobacter jejuni and C. coli respectively, isolated from broilers collected from six abattoirs situated at São José do Vale do Rio Preto/RJ poultry center and from two commercial abattoirs situated at Metropolitan Region of Rio de Janeiro, from 2013 to 2016. The resistance to enrofloxacin was assessed by agar dilution to determine minimum inhibitory concentration (MIC). The CmeABC efflux system was investigated through the detection of genes genes cmeA, cmeB and cmeC by PCR. The activity of CmeABC efflux pump was investigated in 20 strains by using the efflux pump inhibitor Phenylalanine-Arginine -Naphthylamide (PAN). The three genes cmeA, cmeB and cmeC were detected in 94.3% of the strains (C. jejuni = 80 and C. coli = 70), whereas the system was absent or incomplete in 5.7% of strains (C. jejuni = 1 and C. coli = 8). MIC varied between 0.5g/ml and 64g/ml, and 88.7% of strains were enrofloxacin resistant and 11.3% featuring intermediate resistance. The inhibition of the efflux pump by PAN reduced the MIC to enrofloxacin up to eight times in fifteen strains (75%). These results indicate that this system is frequent and active in Campylobacter spp. Resistant strains in the presence of enrofloxacin.

RESUMO: As aves são os principais reservatórios de Campylobacter spp., importante patógeno de origem alimentar e a carne de frango e produtos derivados são os principais veículos desse microrganismo. O aumento de cepas de Campylobacter spp. resistentes às fluorquinolonas, uma classe antimicrobiana frequentemente empregada na avicultura e na medicina humana, tornou-se uma grande preocupação para os produtores de aves e vários estudos avaliaram o aumento da resistência bacteriana a esses antimicrobianos. O papel do sistema de efluxo CmeABC tem sido enfatizado entre os mecanismos de resistência em Campylobacter spp. à fluorquinolonas. O presente estudo investigou a ocorrência da bomba de efluxo CmeABC em 81 cepas de Campylobacter jejuni e 78 cepas de Campylobacter coli resistentes à enrofloxacina, isoladas de frangos de corte coletados em seis abatedouros situados no polo avícola de São José do Rio Preto/RJ e de dois abatedouros comerciais situados na Região Metropolitana do Rio de Janeiro, de 2013 a 2016. A resistência à enrofloxacina foi avaliada pelo método de diluição em ágar para determinar a concentração inibitória mínima (CIM). O sistema de efluxo CmeABC foi investigado através da detecção dos genes cmeA, cmeB e cmeC por PCR. A atividade da bomba de efluxo CmeABC foi investigada em 20 cepas utilizando o inibidor da bomba de efluxo Phenylalanine-Arginine -Naftilamida (PAN). Os três genes cmeA, cmeB e cmeC foram detectados em 94,3% das cepas (C. jejuni = 80 e C. coli = 70), enquanto o sistema estava ausente ou incompleto em 5,7% das cepas (C. jejuni = 1 e C coli = 8). A CIM variou entre 0,5g/ml e 64g/ml e 88,7% das cepas foram resistentes à enrofloxacina, enquanto 11,3% apresentaram resistência intermediária. A inibição da bomba de efluxo pelo PAN reduziu a CIM da enrofloxacina até oito vezes em quinze cepas (75%). Estes resultados indicam que este sistema é frequente e ativo em cepas resistentes de Campylobacter spp. na presença de enrofloxacina.

Detection of fluoroquinolone resistance by mutation ingyrA gene of Campylobacterspp. isolates from broiler and laying (Gallus gallus domesticus) hens,from Rio de Janeiro State, Brazil / Detecção de resistência às fluoroquinolonas através da mutação no gene gyrA em Campylobacter spp. isolados de frangos de corte e galinhas (Gallus gallus domesticus) poedeiras, no Estado do Rio de Janeiro, Brasil

Poultry are considered to be the main reservoir of Campylobacterspp. bacteria, an important pathogen for humans. Many studies have reported a rapid selection of fluoroquinolone-resistant strains following the widespread use of these antimicrobials in poultry production and human medicine. The main mechanism of fluoroquinolone resistance in Campylobacteris a mutation in the Quinolone Resistance Determinant Region (QRDR) in the gyrA gene, which codes for the subunit of the enzyme DNA gyrase, the target for fluoroquinolone. The aim of this study was to investigate the mutation in QRDR in the gyrA gene of Campylobacterstrains previously isolated from broiler carcasses and feces of laying hens. Thirty-eight strains of C. jejuniand 19 C. colistrains (n=57), previously characterized as resistant to ciprofloxacin and enrofloxacin by the disk diffusion method and minimum inhibitory concentration (MIC), were selected. For detection of the mutation, a fragment of 454pb QRDR in the gyrA gene was used for direct sequencing. All strains presented the QRDR mutation in the gyrA gene at codon 86 (Thr-86-Ile), which confers resistance to fluoroquinolones. Other known silent mutations were observed. This genotypic characterization of fluoroquinolone resistance inCampylobacterstrains has confirmed the prior phenotypic detection of the resistance. The Thr-86-Ile mutation was observed in all samples confirming that this is the predominant mutation in enrofloxacin and ciprofloxacin resistant strains of C. jejuniand C. coli.

As aves são consideradas o principal reservatório deCampylobacterspp., um importante patógeno para humanos e muitos estudos têm relatado uma rápida seleção de cepas resistentes às fluoroquinolonas após o uso destes antimicrobianos na produção avícola e na medicina humana. O principal mecanismo de resistência às fluoroquinolonas em Campylobacterconsiste na mutação na Região Determinantes de Resistência às Quinolonas (RDRQ) do gene gyrA, que codifica para a subunidade A da enzima DNA girase, alvo das fluoroquinolonas. O objetivo deste estudo foi investigar a mutação na RDRQ do gene gyrA em cepas de Campylobacterpreviamente isolados de carcaças de frangos de corte e fezes de galinhas poedeiras. Foram selecionadas 38 cepas de C. jejunie 19 cepas de C. coli(n=57), previamente caracterizadas como resistentes à ciprofloxacina e enrofloxacina, pelo método da difusão em disco e pela determinação da concentração inibitória mínima. Para detecção da mutação, foi utilizado sequenciamento direto de um fragmento de 454pb da RDRQ do gene gyrA gerado por PCR. Todas as cepas apresentaram a mutação na RDRQ do gene gyrA no códon 86 (Tre-86-Ile), que confere resistência às fluoroquinolonas e outras mutações silenciosas foram observadas. A caracterização genotípica da resistência às fluoroquinolonas em Campylobacterconfirmou a prévia detecção fenotípica dessa resistência e a mutação Tre-86-Ile foi observada na totalidade das amostras, comprovando ser esta a mutação predominante em cepas de C. jejunie C. coliresistentes à enrofloxacina e ciprofloxacina.

Detection of fluoroquinolone resistance by mutation in gyrA gene of Campylobacter spp. isolates from broiler and laying (Gallus gallus domesticus) hens,from Rio de Janeiro state, Brazil / Detecção de resistência às fluoroquinolonas através da mutação no gene gyrA em Campylobacter spp. isolados de frangos de corte e galinhas (Gallus gallus domesticus) poedeiras, no estado do Rio de Janeiro, Brasil

As aves são consideradas o principal reservatório de Campylobacter spp., um importante patógeno para humanos e muitos estudos têm relatado uma rápida seleção de cepas resistentes às fluoroquinolonas após o uso destes antimicrobianos na produção avícola e na medicina humana. O principal mecanismo de resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter consiste na mutação na Região Determinantes de Resistência às Quinolonas (RDRQ) do gene gyrA, que codifica para a subunidade A da enzima DNA girase, alvo das fluoroquinolonas. O objetivo deste estudo foi investigar a mutação na RDRQ do gene gyrA em cepas de Campylobacter previamente isolados de carcaças de frangos de corte e fezes de galinhas poedeiras. Foram selecionadas 38 cepas de C. jejuni e 19 cepas de C. coli (n=57), previamente caracterizadas como resistentes à ciprofloxacina e enrofloxacina, pelo método da difusão em disco e pela determinação da concentração inibitória mínima. Para detecção da mutação, foi utilizado sequenciamento direto de um fragmento de 454pb da RDRQ do gene gyrA gerado por PCR. Todas as cepas apresentaram a mutação na RDRQ do gene gyrA no códon 86 (Tre-86-Ile), que confere resistência às fluoroquinolonas e outras mutações silenciosas foram observadas. A caracterização genotípica da resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter confirmou a prévia detecção fenotípica dessa resistência e a mutação Tre-86-Ile foi observada na totalidade das amostras, comprovando ser esta a mutação predominante em cepas de C. jejuni e C. coli resistentes à enrofloxacina e ciprofloxacina.(AU)

Poultry are considered to be the main reservoir of Campylobacter spp. bacteria, an important pathogen for humans. Many studies have reported a rapid selection of fluoroquinolone-resistant strains following the widespread use of these antimicrobials in poultry production and human medicine. The main mechanism of fluoroquinolone resistance in Campylobacter is a mutation in the Quinolone Resistance Determinant Region (QRDR) in the gyrA gene, which codes for the subunit of the enzyme DNA gyrase, the target for fluoroquinolone. The aim of this study was to investigate the mutation in QRDR in the gyrA gene of Campylobacter strains previously isolated from broiler carcasses and feces of laying hens. Thirty-eight strains of C. jejuni and 19 C. coli strains (n=57), previously characterized as resistant to ciprofloxacin and enrofloxacin by the disk diffusion method and minimum inhibitory concentration (MIC), were selected. For detection of the mutation, a fragment of 454pb QRDR in the gyrA gene was used for direct sequencing. All strains presented the QRDR mutation in the gyrA gene at codon 86 (Thr-86-Ile), which confers resistance to fluoroquinolones. Other known silent mutations were observed. This genotypic characterization of fluoroquinolone resistance in Campylobacter strains has confirmed the prior phenotypic detection of the resistance. The Thr-86-Ile mutation was observed in all samples confirming that this is the predominant mutation in enrofloxacin and ciprofloxacin resistant strains of C. jejuni and C. coli.(AU)

Uso de óleos essenciais no controle dos sinais clínicos das diarreias neonatais em leitões nascidos de fêmeas com diferentes ordens de parto / Use of essential oils in the control of clinical signs of neonatal diarrhea in piglets born to sows with different parturition orders

This study evaluated the liquid emulsion of oregano and rosemary essential oils in the control of neonatal diarrhea in piglets. We monitored 1334 piglets with average weight of 1.5 kg regarding the clinical signs of neonatal diarrhea. The design was completely randomized with three treatments (T): (T1) control (saline), (T2) essential oils and (T3) enrofloxacin. T1 showed characteristic clinical signs of diarrhea differing (P 0.01) from other treatments. The cure rate of diarrhea was not different (P>0.01) between piglets receiving essential oils or antibiotic, regardless of the order of parturition of the sows. On the other hand, piglets with clinical signs of diarrhea born to sows with order of parturition less than three had a higher cure rate (74.6%) compared with diarrheal piglets born to sows with order of parturition between three and five (68.2%) and more than five (56.4%). The counting of heterotrophic bacteria colony, Escherichia coli and Clostridium perfringens, and histological analyzes of the ileal epithelium showed no differences (P>0.01) among treatments. The emulsion with essential oils of oregano and rosemary (2mL kg-1), for piglets between zero and eight days of age, might replace the enrofloxacin in controlling clinical signs of neonatal diarrhea.

Este estudo avaliou a emulsão líquida de óleos essenciais de orégano (Origanum vulgare) e alecrim (Rosmarinus officinalis labiatae) no controle dos sinais clínicos da diarreia neonatal em leitões. Foram monitorados 1.334 leitões lactentes, com peso vivo médio inicial de 1,5kg, quanto aos sinais clínicos de diarreia neonatal. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado e com três tratamentos (T): (T1) controle (solução fisiológica), (T2) mescla dos óleos essenciais e (T3) enrofloxacina. Os animais que receberam o T1 apresentaram sinais clínicos característicos de diarreia diferindo (P 0,01) dos demais tratamentos. O percentual de cura da diarreia dos leitões não diferiu (P>0,01) entre os tratamentos, independente da ordem de partos (OP) das mães. Já leitões com sinais clínicos de diarreia, nascidos de fêmeas com OP inferior a três apresentaram maior percentual de cura (74,6%), se comparados aos leitões diarreicos de fêmeas com OP entre três e cinco (68,2%) e superior a cinco (56,4%). As análises microbiológicas das fezes e histológicas do epitélio ileal não apresentaram diferenças (P>0,01) entre os tratamentos. A emulsão com óleos essenciais de orégano e alecrim (2mL kg-1), para leitões entre zero e o oito dias de vida, pode vir a substituir a enrofloxacina no controle dos sinais clínicos das diarreias neonatais.

Uso de óleos essenciais no controle dos sinais clínicos das diarreias neonatais em leitões nascidos de fêmeas com diferentes ordens de parto / Use of essential oils in the control of clinical signs of neonatal diarrhea in piglets born to sows with different parturition orders

This study evaluated the liquid emulsion of oregano and rosemary essential oils in the control of neonatal diarrhea in piglets. We monitored 1334 piglets with average weight of 1.5 kg regarding the clinical signs of neonatal diarrhea. The design was completely randomized with three treatments (T): (T1) control (saline), (T2) essential oils and (T3) enrofloxacin. T1 showed characteristic clinical signs of diarrhea differing (P 0.01) from other treatments. The cure rate of diarrhea was not different (P>0.01) between piglets receiving essential oils or antibiotic, regardless of the order of parturition of the sows. On the other hand, piglets with clinical signs of diarrhea born to sows with order of parturition less than three had a higher cure rate (74.6%) compared with diarrheal piglets born to sows with order of parturition between three and five (68.2%) and more than five (56.4%). The counting of heterotrophic bacteria colony, Escherichia coli and Clostridium perfringens, and histological analyzes of the ileal epithelium showed no differences (P>0.01) among treatments. The emulsion with essential oils of oregano and rosemary (2mL kg-1), for piglets between zero and eight days of age, might replace the enrofloxacin in controlling clinical signs of neonatal diarrhea.(AU)

Este estudo avaliou a emulsão líquida de óleos essenciais de orégano (Origanum vulgare) e alecrim (Rosmarinus officinalis labiatae) no controle dos sinais clínicos da diarreia neonatal em leitões. Foram monitorados 1.334 leitões lactentes, com peso vivo médio inicial de 1,5kg, quanto aos sinais clínicos de diarreia neonatal. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado e com três tratamentos (T): (T1) controle (solução fisiológica), (T2) mescla dos óleos essenciais e (T3) enrofloxacina. Os animais que receberam o T1 apresentaram sinais clínicos característicos de diarreia diferindo (P 0,01) dos demais tratamentos. O percentual de cura da diarreia dos leitões não diferiu (P>0,01) entre os tratamentos, independente da ordem de partos (OP) das mães. Já leitões com sinais clínicos de diarreia, nascidos de fêmeas com OP inferior a três apresentaram maior percentual de cura (74,6%), se comparados aos leitões diarreicos de fêmeas com OP entre três e cinco (68,2%) e superior a cinco (56,4%). As análises microbiológicas das fezes e histológicas do epitélio ileal não apresentaram diferenças (P>0,01) entre os tratamentos. A emulsão com óleos essenciais de orégano e alecrim (2mL kg-1), para leitões entre zero e o oito dias de vida, pode vir a substituir a enrofloxacina no controle dos sinais clínicos das diarreias neonatais.(AU)

USO DE ÓLEOS ESSENCIAIS NO CONTROLE DOS SINAIS CLÍNICOS DAS DIARREIAS NEONATAIS EM LEITÕES NASCIDOS DE FÊMEAS COM DIFERENTES ORDENS DE PARTO

This study evaluated the liquid emulsion of oregano and rosemary essential oils in the control of neonatal diarrhea in piglets. We monitored 1334 piglets with average weight of 1.5 kg regarding the clinical signs of neonatal diarrhea. The design was completely randomized with three treatments (T): (T1) control (saline), (T2) essential oils and (T3) enrofloxacin. T1 showed characteristic clinical signs of diarrh between piglets receiving essential oils or antibiotic, regardless of the order of parturition of the sows. On the other hand, piglets with clinical signs of diarrhea born to sows with order of parturition less than three had a higher cure rate (74.6%) compared with diarrheal piglets born to sows with order of parturition between three and five 68.2%) and more than five (56.4%). The counting of heterotrophic bacteria colony, Escherichia coli and Clostridium perfringens, and histological analyzes of the ileal epithelium showed no differences (P>0.01) among treatments. The emulsion with essential oils of oregano and rosemary (2mL kg-1), for piglets between zero and eight days of age, might replace the enrofloxacin in controlling clinical signs of neonatal diarrhea.

Este estudo avaliou a emulsão líquida de óleos essenciais de orégano (Origanum vulgare) e alecrim (Rosmarinus officinalis labiatae) no controle dos sinais clínicos da diarreia neonatal em leitões. Foram monitorados 1.334 leitões lactentes, com peso vivo médio inicial de 1,5kg, quanto aos sinais clínicos de diarreia neonatal. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado e com três tratamentos (T): (T1) controle (solução fisiológica), (T2) mescla dos óleos essenciais e (T3) enrofloxacina. Os animais que receberam o T1 apresentaram sinais clínicos característicos de diarreia diferindo (P 0,01) dos demais tratamentos. O percentual de cura da diarreia dos leitões não diferiu (P>0,01) entre os tratamentos, independente da ordem de partos (OP) das mães. Já leitões com sinais clínicos de diarreia, nascidos de fêmeas com OP inferior a três apresentaram maior percentual de cura (74,6%), se comparados aos leitões diarreicos de fêmeas com OP entre três e cinco (68,2%) e superior a cinco (56,4%). As análises microbiológicas das fezes e histológicas do epitélio ileal não apresentaram diferenças (P>0,01) entre os tratamentos. A emulsão com óleos essenciais de orégano e alecrim (2mL kg-1), para leitões entre zero e o oito dias de vida, pode vir a substituir a enrofloxacina no controle dos sinais clínicos das diarreias neonatais.

Detecção de resíduos de enrofloxacina por ensaio imunoenzimático e cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em ovos comerciais de galinha após tratamento / Investigation of enrofloxacin residues through enzyme-linked immunosorbent assay and liquid cromatography-tandem mass spectrometry in eggs from laying hens after treatment

A enrofloxacina é um dos antimicrobianos mais utilizados na avicultura industrial, e a deposição de resíduos em produtos avícolas, como os ovos, são de grande importância para a saúde pública. Na legislação brasileira não existe padronização do período de carência para o seu uso na produção avícola e não há Limite Máximo de Resíduo (LMR) fixado para enrofloxacina em ovos. Neste estudo, foi utilizado o kit de ELISA comercial (Bioo Scientific(r)) e a LC-MS/MS na pesquisa de enrofloxacina em ovos de 30 galinhas tratadas previamente via água de bebida, com 10mg/kg de enrofloxacina, durante cinco dias. Seis ovos foram coletados diariamente e analisados durante o tratamento e após a sua suspensão, durante 15 dias. A deposição de resíduos obteve níveis máximos no quinto dia de tratamento das aves, declinando gradativamente até não ser detectada a partir do nono dia de suspensão do tratamento. Considerando como base o LMR de 100µg/kg fixado pelo Brasil para tecidos comestíveis de aves e pela União Europeia para músculo, gordura e pele, após seis dias de suspensão do tratamento, os níveis de resíduos foram inferiores a esse limite, tendo como médias 37,43µg/kg na LC-MS/MS e 14,731µg/kg no ELISA. Dentro das condições deste estudo, um período de carência de seis dias seria mais adequado para utilização dos ovos para consumo humano. Foram detectados valores de resíduos nos ovos menores no ELISA em relação à LC-MS/MS para a mesma amostra, mas os dois métodos apresentaram concordância estatística entre si. A LC-MS/MS é o teste recomendado pela legislação brasileira para a análise de resíduos em alimentos; entretanto, pelos resultados obtidos, o kit de ELISA utilizado também pode ser aplicado na detecção de resíduos de enrofloxacina em ovos, com as vantagens de rapidez e simplicidade...

Enrofloxacin is one of the most used antibiotics in the poultry industry and the deposition of residues in poultry products, such as eggs, are of great concern to public health. In Brazilian law there is no standard withdrawal period for enrofloxacin in eggs and there is no Maximum Residue Limit (MRL) established for this antimicrobial in eggs. In this study, (Bioo Scientific(r)) commercial ELISA kit and LC-MS/MS were used to investigate enrofloxacin in eggs of 30 hens pretreated via drinking water at 10mg/kg of enrofloxacin for five days. Six eggs were collected daily and analyzed during treatment and after the end of treatment, for 15 days. Residues obtained maximum levels on the fifth day of treatment, declined gradually and were no longer detected from the ninth day to the end of treatment. Based on the MRL of 100mg/kg established for edible tissues of poultry by Brazillian law and for muscle, fat and skin, by the European Union, after six days of treatment withdrawal, the residue levels were below that limit, with the average of 37.43mg/kg in LC-MS/MS and 14.731mg/kg in ELISA. Within the conditions of this study, a withdrawal period of six days would be more appropriate to use the eggs for human consumption. The values obtained by ELISA for residues in eggs were lower than those obtained in LC-MS/MS for the same sample, however both methods showed statistical agreement. LC-MS/MS is the recommended method by Brazilian legislation for analysis of residues in food, however, according to the results the ELISA kit used can also be applied to the detection of enrofloxacin residues in eggs, with the advantages of speed and simplicity...

Detecção de resíduos de enrofloxacina por ensaio imunoenzimático e cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em ovos comerciais de galinha após tratamento / Investigation of enrofloxacin residues through enzyme-linked immunosorbent assay and liquid cromatography-tandem mass spectrometry in eggs from laying hens after treatment

A enrofloxacina é um dos antimicrobianos mais utilizados na avicultura industrial, e a deposição de resíduos em produtos avícolas, como os ovos, são de grande importância para a saúde pública. Na legislação brasileira não existe padronização do período de carência para o seu uso na produção avícola e não há Limite Máximo de Resíduo (LMR) fixado para enrofloxacina em ovos. Neste estudo, foi utilizado o kit de ELISA comercial (Bioo Scientific(r)) e a LC-MS/MS na pesquisa de enrofloxacina em ovos de 30 galinhas tratadas previamente via água de bebida, com 10mg/kg de enrofloxacina, durante cinco dias. Seis ovos foram coletados diariamente e analisados durante o tratamento e após a sua suspensão, durante 15 dias. A deposição de resíduos obteve níveis máximos no quinto dia de tratamento das aves, declinando gradativamente até não ser detectada a partir do nono dia de suspensão do tratamento. Considerando como base o LMR de 100µg/kg fixado pelo Brasil para tecidos comestíveis de aves e pela União Europeia para músculo, gordura e pele, após seis dias de suspensão do tratamento, os níveis de resíduos foram inferiores a esse limite, tendo como médias 37,43µg/kg na LC-MS/MS e 14,731µg/kg no ELISA. Dentro das condições deste estudo, um período de carência de seis dias seria mais adequado para utilização dos ovos para consumo humano. Foram detectados valores de resíduos nos ovos menores no ELISA em relação à LC-MS/MS para a mesma amostra, mas os dois métodos apresentaram concordância estatística entre si. A LC-MS/MS é o teste recomendado pela legislação brasileira para a análise de resíduos em alimentos; entretanto, pelos resultados obtidos, o kit de ELISA utilizado também pode ser aplicado na detecção de resíduos de enrofloxacina em ovos, com as vantagens de rapidez e simplicidade.(AU)

Enrofloxacin is one of the most used antibiotics in the poultry industry and the deposition of residues in poultry products, such as eggs, are of great concern to public health. In Brazilian law there is no standard withdrawal period for enrofloxacin in eggs and there is no Maximum Residue Limit (MRL) established for this antimicrobial in eggs. In this study, (Bioo Scientific(r)) commercial ELISA kit and LC-MS/MS were used to investigate enrofloxacin in eggs of 30 hens pretreated via drinking water at 10mg/kg of enrofloxacin for five days. Six eggs were collected daily and analyzed during treatment and after the end of treatment, for 15 days. Residues obtained maximum levels on the fifth day of treatment, declined gradually and were no longer detected from the ninth day to the end of treatment. Based on the MRL of 100mg/kg established for edible tissues of poultry by Brazillian law and for muscle, fat and skin, by the European Union, after six days of treatment withdrawal, the residue levels were below that limit, with the average of 37.43mg/kg in LC-MS/MS and 14.731mg/kg in ELISA. Within the conditions of this study, a withdrawal period of six days would be more appropriate to use the eggs for human consumption. The values obtained by ELISA for residues in eggs were lower than those obtained in LC-MS/MS for the same sample, however both methods showed statistical agreement. LC-MS/MS is the recommended method by Brazilian legislation for analysis of residues in food, however, according to the results the ELISA kit used can also be applied to the detection of enrofloxacin residues in eggs, with the advantages of speed and simplicity.(AU)

Efeito da enrofloxacina sobre a interação blastocisto endométrio e seu reflexo no desenvolvimento placentário e fetal em ratas / Effect of enrofloxacin on the blastocyst endometrial interactions and their impact on placental and fetal development in rats

Estudos têm mostrado efeitos tóxicos da enrofloxacina em diversos tecidos. Assim, testou-se a hipótese de que a enrofloxacina pode interferir no desenvolvimento placentário e gerar efeitos adversos ao feto. A enrofloxacina (Baytril(r)) foi administrada em ratas, na dose de 5mg/kg, diariamente, IM, durante toda a gestação. As placentas foram analisadas morfologicamente, morfometricamente e imuno-histoquimicamente aos sete, 14 e 21 dias de prenhez. Os resultados mostraram que a enrofloxacina reduziu o número de sítios de implantação, o peso e a área total do disco placentário aos 14 e 21 dias de desenvolvimento, além dos elementos constituintes da placenta. A análise histoquímica não revelou alterações significativas no teor de fibras colágenas, elásticas e reticulares. O teste de Tunel mostrou atividade apoptótica apenas nas placentas com 14 dias de desenvolvimento de ambos os grupos, sendo mais intensa no grupo tratado. Não foi observado nenhum indício de malformação na cabeça, no tronco e nos membros dos neonatos. No entanto, houve uma redução significativa no número e no peso dos neonatos no grupo tratado, porém sem afetar o seu comprimento. Assim, concluiu-se que a enrofloxacina administrada na dosagem de 5mg/kg durante prenhez em ratas interfere no número de embriões implantados e no desenvolvimento placentário. Isto sugere cautela na administração da enrofloxacina durante a gestação, pois a exposição contínua a esse antibiótico pode ter reflexos na redução do número e do peso da prole...

Some studies have shown the toxic effects of enrofloxacin in various tissues. Thus, the hypothesis that enrofloxacin could interfere with placental development and generate adverse effects to the fetus was tested in this study. Enrofloxacin (Baytril(r)) was administered in the dose of 5mg/kg daily, i.m., throughout gestation in rats. The placentas were analyzed morphologically, morphometrically, and immunohistochemically on the 7, 14, and 20th days of pregnancy. The results showed that enrofloxacin reduced the number of implantation sites, weight, and placental disk total area at 14 and 20 days of development, in addition to the element components of the placenta. The histochemical analysis did not reveal significant changes in the content of collagen, reticular, and elastic fibers. The TUNEL test showed apoptosis only in placenta development at 14 days in both groups and more intense in the treated group. Head, trunk, and limb malformations were not observed in the neonates. A significant reduction in the number and weight of neonates were observed in the treated group, however, without affecting their length. Thus, it was concluded that the administration of enrofloxacin, at the dosage of 5 mg/kg during pregnancy in rats, interferes in the number of implanted embryos and placental development. This suggests caution in the administration of enrofloxacin during pregnancy because continuous exposure to this antibiotic may have adverse effects, reducing the number and weight of the offspring...

Efeito da enrofloxacina sobre a interação blastocisto endométrio e seu reflexo no desenvolvimento placentário e fetal em ratas / Effect of enrofloxacin on the blastocyst endometrial interactions and their impact on placental and fetal development in rats

Estudos têm mostrado efeitos tóxicos da enrofloxacina em diversos tecidos. Assim, testou-se a hipótese de que a enrofloxacina pode interferir no desenvolvimento placentário e gerar efeitos adversos ao feto. A enrofloxacina (Baytril(r)) foi administrada em ratas, na dose de 5mg/kg, diariamente, IM, durante toda a gestação. As placentas foram analisadas morfologicamente, morfometricamente e imuno-histoquimicamente aos sete, 14 e 21 dias de prenhez. Os resultados mostraram que a enrofloxacina reduziu o número de sítios de implantação, o peso e a área total do disco placentário aos 14 e 21 dias de desenvolvimento, além dos elementos constituintes da placenta. A análise histoquímica não revelou alterações significativas no teor de fibras colágenas, elásticas e reticulares. O teste de Tunel mostrou atividade apoptótica apenas nas placentas com 14 dias de desenvolvimento de ambos os grupos, sendo mais intensa no grupo tratado. Não foi observado nenhum indício de malformação na cabeça, no tronco e nos membros dos neonatos. No entanto, houve uma redução significativa no número e no peso dos neonatos no grupo tratado, porém sem afetar o seu comprimento. Assim, concluiu-se que a enrofloxacina administrada na dosagem de 5mg/kg durante prenhez em ratas interfere no número de embriões implantados e no desenvolvimento placentário. Isto sugere cautela na administração da enrofloxacina durante a gestação, pois a exposição contínua a esse antibiótico pode ter reflexos na redução do número e do peso da prole.(AU)

Some studies have shown the toxic effects of enrofloxacin in various tissues. Thus, the hypothesis that enrofloxacin could interfere with placental development and generate adverse effects to the fetus was tested in this study. Enrofloxacin (Baytril(r)) was administered in the dose of 5mg/kg daily, i.m., throughout gestation in rats. The placentas were analyzed morphologically, morphometrically, and immunohistochemically on the 7, 14, and 20th days of pregnancy. The results showed that enrofloxacin reduced the number of implantation sites, weight, and placental disk total area at 14 and 20 days of development, in addition to the element components of the placenta. The histochemical analysis did not reveal significant changes in the content of collagen, reticular, and elastic fibers. The TUNEL test showed apoptosis only in placenta development at 14 days in both groups and more intense in the treated group. Head, trunk, and limb malformations were not observed in the neonates. A significant reduction in the number and weight of neonates were observed in the treated group, however, without affecting their length. Thus, it was concluded that the administration of enrofloxacin, at the dosage of 5 mg/kg during pregnancy in rats, interferes in the number of implanted embryos and placental development. This suggests caution in the administration of enrofloxacin during pregnancy because continuous exposure to this antibiotic may have adverse effects, reducing the number and weight of the offspring.(AU)

Effectiveness of enrofloxacin for the treatment of experimentally-induced bovine anaplasmosis / Eficácia da enrofloxacina no tratamento da anaplasmose bovina experimental

Four groups of six Holstein calves were inoculated with 3.6 × 10(7) erythrocytes parasitized with Anaplasma marginale. The criteria for treatment of calves were increasing A. marginale rickettsemia and 30% reduction of baseline packed cell volume (PCV) of each animal. Group 1 (G1) received 7.5 mg.kg-1 of enrofloxacin in a single dose; Group 2 (G2) 7.5 mg.kg-1 of enrofloxacin twice every three days; Group 3 (G3) 20 mg.kg-1 of long-acting oxytetracycline in a single dose; and Group 4 (G4) a single dose of PBS. Physical examinations, blood smears and PCV were performed daily. On day treatment, G1, G2 and G3 animals had a mean rickettsemia of 17, 23 and 12%, respectively. At 2 days after treatment (DAT) G1 and G2 animals showed a significant reduction of rickettsemia (p < 0.05) compared to G3. G3 animals had high rates of rickettsemia in the first 2 DAT and a slow decrease until stabilization on 9 DAT. The mean PCV in G1 and G2 increased and stabilized after 7 and 8 DAT, respectively. PCV stabilization was achieved in G3 at 13 DAT. Both enrofloxacin and oxytetracycline were effective for the treatment of anaplasmosis, but enrofloxacin was faster reduction of rickettsemia and PCV recuperation (p < 0.05) compared to oxytetracycline.

Quatro grupos de seis bezerros da raça Holandesa foram inoculados com 3,6 × 10(7) eritrócitos parasitados com Anaplasma marginale. Os critérios para o tratamento dos bezerros foram aumento da rickettsemia do A. marginale e redução de 30% do valor basal de volume globular (VG) de cada animal. O Grupo 1 (G1) recebeu 7,5 mg.kg-1 de enrofloxacina em dose única; o Grupo 2 (G2), 7,5 mg.kg-1 de enrofloxacina duas vezes a cada três dias; o Grupo 3 (G3), 20 mg.kg-1 de oxitetraciclina de longa ação em dose única; e o Grupo 4 (G4) uma única dose de PBS. Exames físicos, esfregaço sanguíneo e VG foram realizadas diariamente. No dia do tratamento, os animais G1, G2 e G3 apresentaram rickettsemia média de 17, 23 e 12%, respectivamente. Nos primeiros 2 dias após o tratamento (DAT) os animais do G1 e G2 mostraram uma redução significativa de rickettsemia (p < 0,05) em relação ao G3. Animais do G3 tiveram altas taxas de rickettsemia nos 2 DAT e uma diminuição lenta até à estabilização em 9 de DAT. O VG médio no G1 e G2 aumentou e estabilizou após 7 e 8 DAT, respectivamente. A estabilização do VG do G3 foi aos 13 DAT. A enrofloxacina e a oxitetraciclina foram efetivas no tratamento da anaplasmose, mas a enrofloxacina apresentou redução da rickettsemia e recuperação do VG (p < 0,05) mais rápida em comparação com oxitetraciclina.

Effectiveness of enrofloxacin for the treatment of experimentally-induced bovine anaplasmosis / Eficácia da enrofloxacina no tratamento da anaplasmose bovina experimental

Four groups of six Holstein calves were inoculated with 3.6 × 10(7) erythrocytes parasitized with Anaplasma marginale. The criteria for treatment of calves were increasing A. marginale rickettsemia and 30% reduction of baseline packed cell volume (PCV) of each animal. Group 1 (G1) received 7.5 mg.kg-1 of enrofloxacin in a single dose; Group 2 (G2) 7.5 mg.kg-1 of enrofloxacin twice every three days; Group 3 (G3) 20 mg.kg-1 of long-acting oxytetracycline in a single dose; and Group 4 (G4) a single dose of PBS. Physical examinations, blood smears and PCV were performed daily. On day treatment, G1, G2 and G3 animals had a mean rickettsemia of 17, 23 and 12%, respectively. At 2 days after treatment (DAT) G1 and G2 animals showed a significant reduction of rickettsemia (p < 0.05) compared to G3. G3 animals had high rates of rickettsemia in the first 2 DAT and a slow decrease until stabilization on 9 DAT. The mean PCV in G1 and G2 increased and stabilized after 7 and 8 DAT, respectively. PCV stabilization was achieved in G3 at 13 DAT. Both enrofloxacin and oxytetracycline were effective for the treatment of anaplasmosis, but enrofloxacin was faster reduction of rickettsemia and PCV recuperation (p < 0.05) compared to oxytetracycline.(AU)

Quatro grupos de seis bezerros da raça Holandesa foram inoculados com 3,6 × 10(7) eritrócitos parasitados com Anaplasma marginale. Os critérios para o tratamento dos bezerros foram aumento da rickettsemia do A. marginale e redução de 30% do valor basal de volume globular (VG) de cada animal. O Grupo 1 (G1) recebeu 7,5 mg.kg-1 de enrofloxacina em dose única; o Grupo 2 (G2), 7,5 mg.kg-1 de enrofloxacina duas vezes a cada três dias; o Grupo 3 (G3), 20 mg.kg-1 de oxitetraciclina de longa ação em dose única; e o Grupo 4 (G4) uma única dose de PBS. Exames físicos, esfregaço sanguíneo e VG foram realizadas diariamente. No dia do tratamento, os animais G1, G2 e G3 apresentaram rickettsemia média de 17, 23 e 12%, respectivamente. Nos primeiros 2 dias após o tratamento (DAT) os animais do G1 e G2 mostraram uma redução significativa de rickettsemia (p < 0,05) em relação ao G3. Animais do G3 tiveram altas taxas de rickettsemia nos 2 DAT e uma diminuição lenta até à estabilização em 9 de DAT. O VG médio no G1 e G2 aumentou e estabilizou após 7 e 8 DAT, respectivamente. A estabilização do VG do G3 foi aos 13 DAT. A enrofloxacina e a oxitetraciclina foram efetivas no tratamento da anaplasmose, mas a enrofloxacina apresentou redução da rickettsemia e recuperação do VG (p < 0,05) mais rápida em comparação com oxitetraciclina.(AU)

Artritis séptica en equinos: reporte de 11 casos (2000-2004) / Equine septicarthritis: 11 cases report (2000-2004)

Se presentan las principales características clínicas y paraclínicas de 11 casos de artritis séptica en equinos admitidos en la Clínica de Grandes Animales de la Universidad Nacional de Colombia entre 2000 y 2004. En general, los resultados son similares a los reportados por la literatura en estudios análogos, aunque se encontró una alta presencia de animales jóvenes en este estudio. Las herramientas paraclínicas más útiles para el diagnóstico fueron el recuento celular y el valor de proteína total en el líquido sinovial, en tanto que la ausencia de bacterias en los extendidos citológicos o los cultivos negativos no descartan la entidad. El uso de enrofloxacina sistémica en estos casos se ha mostrado de valor para la eliminación de la infección articular, a pesar de los riesgos teóricos de su uso en pacientes jóvenes. La artritis séptica debe ser considerada en todos los equinos que desarrollen inflamación y claudicación severas de manera súbita.

The main clinical and paraclinical characteristics of 11 cases of septic arthritis in equine patients admitted to the Large Animal Clinic at the Universidad Nacional de Colombia between 2000 and 2004 are presented. In general terms, the results are close to those reported in similar studies, although an elevated presence of young animals was found in this study. The most useful paraclinical tools for the diagnosis were the white blood cell count and the total protein value in the synovial fluid, whereas the absence of bacteria on direct smears or in culture does not rule out infection as a diagnosis. The use of systemic enrofloxacin in these cases was of value for the removal of the infection, although a theoretical concern exists about the effects of this antibiotic in young animals. Septic arthritis should be considered in every equine patient who develops a sudden swelling and lameness, with or without history of contamination.