ABSTRACT
Introducción: El agrandamiento gingival inducido por tratamiento de ortodoncia es un aumento progresivo, localizado o generalizado del tejido gingival. Objetivo: Determinar aspectos morfológicos en la membrana basal del tejido gingival de pacientes con agrandamiento gingival inducido por tratamiento de ortodoncia. Métodos: Estudio descriptivo de corte transversal, donde se analizaron tejidos gingivales de pacientes con agrandamiento gingival inducido por tratamiento de ortodoncia (grupo test: n=5) e individuos sanos (grupo control: n=5) mediante análisis histológicos e inmunohistoquímico con anticuerpo policlonal anti-citoqueratina 14. Las interrupciones de la membrana basal grado 1 y grado 2 fueron identificadas. Fue utilizado el programa estadístico R versión 4.0.2 para Windows. Se declaró significancia si p <0,05. Resultados: Se constató la presencia de rupturas de la membrana basal en todos los pacientes del grupo test. Estos individuos presentaron una mayor cantidad de cambios morfológicos en el tejido gingival. Exponiendo así, valores estadísticamente significativos de rupturas de la membrana basal (Grado I) y rupturas rodeadas de células epiteliales y/o fibroblastos gingivales (Grado II) en comparación con el grupo control (p <0,001). Conclusión: El tejido epitelial de pacientes con agrandamiento gingival inducido por tratamiento de ortodoncia presenta una evidente pérdida en la integridad de la membrana basal. Estas discontinuidades sugieren un aumento considerable de la plasticidad del epitelio en pacientes con agrandamiento gingival inducido por tratamiento de ortodoncia.
Introduction: Orthodontic treatment-induced gingival enlargement is a progressive, localized or generalized increase in gingival tissue. Objective: To determine morphologic aspects in the basal membrane of the gingival tissue in patients with orthodontic treatment-induced gingival enlargement. Methods: A descriptive and cross-sectional study was carried out, in which gingival tissues of patients with orthodontic treatment-induced gingival enlargement (test group: n=5) and healthy individuals (control group: n=5) were analyzed by histological and immunohistochemical analysis with the polyclonal antibody anticytokeratin 14. Grade 1 and grade 2 disrupted basal membrane were identified. The statistical program R (version 4.0.2) for Windows was used. Significance was declared if p was greater than 0.05. Results: The presence of disrupted basal membranes was observed in all the patients from the test group. These individuals presented a greater number of morphological changes in the gingival tissue. Compared to the control group (p < 0.001), statistically significant values were observed for cases of disrupted basal membrane (grade I) and disruptions surrounded by epithelial cells or gingival fibroblasts (grade II). Conclusion: The epithelial tissue of patients with orthodontic treatment-induced gingival enlargement shows an evident loss of the basal membrane integrity. These discontinuities are suggestive of a considerable increase in epithelial plasticity in patients with orthodontic treatment-induced gingival enlargement.
Subject(s)
Humans , Basement Membrane , Epidemiology, DescriptiveABSTRACT
SUMMARY: To investigate changes of MMP-9 in the rat spleen and hypoxia-induced microvascular basement membrane under high altitude hypoxia. Thirty male specific pathogen-free Sprague Dawley rats were randomly divided into control and hypoxia groups, with 15 rats in each group. The rats in the control group were placed in Dingxi City, Gansu Province (2080 m above sea level) for 30 days. Rats in the hypoxia group were raised in a hypoxic environment in Maduo County, Qinghai Province (4300 m above sea level), for 30 days to establish a hypoxic rat model. Routine blood tests, MMP-9 mRNA, MMP-9 protein, and the spleen microvascular basement membrane were detected. (1) Compared with the control group, the red blood cell count, hemoglobin, and hematocrit levels of the rats in the hypoxia group were all increased; thus, a hypoxia model was successfully established. (2) Compared with the control group, the expression of MMP-9 mRNA and protein was significantly higher in the spleen of rats in the hypoxic group, and the difference was statistically significant (P <0.05). (3) Compared with the control group, the blood vessel basement membrane in the spleen of the hypoxia group was degraded. Under natural low air pressure and high altitude conditions, the expression of MMP-9 in rat spleen tissue increases and participates in the degradation of the microvascular basement membrane.
El objetivo de este trabajo fue investigar los cambios de la MMP-9 en el bazo de la rata y la membrana basal microvascular inducida bajo hipoxia a gran altura. Treinta ratas macho Sprague Dawley, libres de patógenos específicos, se dividieron aleatoriamente en dos grupos de 15 ratas cada uno, un grupo control y un grupo hipoxia. Durante 30 días las ratas del grupo control estuvieron en la ciudad de Dingxi, provincia de Gansu (2080 m sobre el nivel del mar). Las ratas del grupo de hipoxia se criaron en un entorno hipóxico en el condado de Maduo, provincia de Qinghai (4300 m sobre el nivel del mar), durante 30 días para establecer un modelo de rata hipóxica. Se realizaron análisis de sangre de rutina, ARNm de MMP-9, proteína MMP-9 y de la membrana basal microvascular del bazo. En comparación con el grupo control, el recuento de glóbulos rojos, la hemoglobina y los niveles de hematocrito de las ratas del grupo de hipoxia aumentaron; por lo tanto, se estableció con éxito un modelo de hipoxia. En comparación con el grupo control, la expresión de ARNm y proteína de MMP-9 fue significativamente mayor en el bazo de las ratas del grupo hipóxico, siendo la diferencia estadísticamente significativa (P <0,05). En comparación con el grupo control, la membrana basal de los vasos sanguíneos estaba degradada en el bazo del grupo hipoxia. En condiciones naturales de baja presión atmosférica y gran altitud, la expresión de MMP-9 en el tejido del bazo de la rata aumenta y participa en la degradación de la membrana basal microvascular.
Subject(s)
Animals , Male , Rats , Spleen/pathology , Basement Membrane/pathology , Matrix Metalloproteinase 9 , Altitude Sickness , Blotting, Western , Rats, Sprague-Dawley , Microscopy, Electron, Transmission , Disease Models, AnimalABSTRACT
ABSTRACT: Hybrid verrucous carcinoma (HVC) is defined as a rare neoplasm in which there is histopathological evidence of verrucous carcinoma and microscopic foci of squamous cell carcinoma, synchronously in the same site, affecting behavior and prognosis. This study aimed to present a new case of HVC in the mouth, and critically and comparatively analyze the cases reported in literature, to better understand the biological behavior and contribute to diagnostic precision. A review was performed using six databases, and the gray literature. Twenty-two articles were selected, with a total of 280 cases. The most frequent clinical appearance was verrucous carcinoma which included benign lesions. This implies that the potential for aggressive behavior can be detected microscopically, in the form of a ruptured basement membrane, which visualization can be facilitated by the use of some immunohistochemical markers discussed here. This is important for the diagnosis of HVC and adequate treatment. Hybrid verrucous carcinoma is what can be thought of as "a wolf in sheep's clothing." When analyzing cases with clinical suspicion of verrucous carcinoma microscopically, great attention is recommended, since they may be HVC and can recur, metastasize, and lead to death.
RESUMEN: El carcinoma verrugoso híbrido (CVH) se define como una neoplasia poco frecuente en la que existe evidencia histopatológica de carcinoma verrugoso y focos microscópicos de carcinoma de células escamosas, sincrónicamente en el mismo sitio, que afectan el comportamiento y el pronóstico. Este estudio tuvo como objetivo presentar un nuevo caso de CVH en la cavidad oral, y analizar crítica y comparativamente los casos reportados en la literatura, para comprender mejor el comportamiento biológico y contribuir a la precisión diagnóstica. Se realizó una revisión utilizando seis bases de datos y la literatura gris. Se seleccionaron veintidós artículos, con un total de 280 casos. La aparición clínica más frecuente fue el carcinoma verrugoso que incluyó lesiones benignas. Esto implica que el potencial de comportamiento agresivo puede detectarse microscópicamente, en forma de una membrana basal rota, cuya visualización puede ser facilitada por el uso de algunos marcadores inmunohistoquímicos discutidos aquí. Esto es importante para el diagnóstico de CVH y el tratamiento adecuado. El CVH es lo que se puede considerar como "un lobo con piel de oveja". Al analizar microscópicamente casos con sospecha clínica de carcinoma verrugoso, se recomienda una atención inmediata debido a que pueden ser CVH y pueden recurrir, metastatizar y conducir a la muerte.
ABSTRACT
El síndrome de Alport es una entidad hereditaria que se produce principalmente por una mutación en los genes que codifican el colágeno tipo IV. Por otro lado, la glomerulonefritis C3 es una entidad rara que presenta un patrón de glomerulonefritis membranoproliferativa y su etiología se basa en un control anormal de la activación de la vía alternativa del complemento. A continuación se describe un caso de un paciente, de sexo masculino, que cursa con un síndrome nefrótico corticorresistente en el que se documenta un patrón de glomerulonefritis membranoproliferativa en la biopsia renal con depósitos de C3 en la inmunofluorescencia, asociada a una deleción heterocigota en el gen CFHR1 en el estudio genético de las proteínas reguladoras del complemento. Además, en el panel genético realizado por corticorresistencia se encuentra una variante COL4A5 asociada al síndrome de Alport ligado al X. Estas entidades pueden presentarse con un curso clínico diverso, pero al estar asociadas pueden acelerar la progresión a enfermedad renal crónica, por lo que se hace necesario hacer un seguimiento clínico más estricto.
Alport Syndrome is a hereditary entity that occurs mainly due to a mutation in the genes that encode type IV collagen. C3 glomerulonephritis is a rare entity with a pattern of membranoproliferative glomerulonephritis and its etiology is based on abnormal control of the activation of the alternative complement pathway. We describe a case of a male patient who presents with a corticosteroid nephrotic syndrome in which a pattern of membranoproliferative glomerulonephritis is documented in the renal biopsy with C3 deposits in the immunofluorescence, associated with a heterozygous deletion in the gene CFHR1 in the genetic study of complement regulatory proteins. Furthermore, a variant COL4A5 associated with X-linked Alport syndrome is found in the genetic panel for corticosteroid resistance. These entities can present with a diverse clinical course, but when associated they can accelerate progression to chronic kidney disease, which is why makes it necessary to do a more strict clinical follow-up.
ABSTRACT
RESUMEN El síndrome de Alport es una enfermedad renal hereditaria de curso progresivo, que ocurre por defectos genéticos en los genes responsables de la constitución de la membrana basal glomerular. Las mutacionespatogénicas en los genes para el colágeno tipo IV (COL 4A3/4/5) producen una alteración en el arreglo correcto de la membrana basal a nivel glomerular.La presentación clínica puede variar dependiendo de la mutación que presente el paciente. Luego de confirmar el diagnóstico,con estudios genéticoso mediante biopsia, se hace necesaria la correlación genotipo-fenotipo para determinar pronóstico y tratamiento. La reducción de la proteinuria, según sugieren las guías de manejo, ha resultado en un retraso en la progresión a enfermedad renal crónica, mientras se concluyen los estudios con medicamentos innovadores dirigidos a receptores específicos.
ABSTRACT Alportsyndromeis a renal hereditarydisease of progressivecourse, causedby geneticdefects in the genes responsible for the constitution of the glomerular basementmembrane. Mutation in genes fortype IV collagen occurs at COL 4A3/4/5, whichproducesinterference in thecorrectmembranearrangement. Clinicalpresentationmayvarydependingonmutationtype. Afterconfirming diagnosis, withgenetic studiesorbiopsies, managementincludesidentification of risk and treatment. Reduction of proteinuria, as managementguidelinessuggest, has resulted in delay in progressiontochronickidneydisease. In themeantime, studiesfor new treatmentdevelopments are in progress, directedtospecificreceptors.
ABSTRACT
RESUMEN Una vez más en medicina interna no podemos, aún, prescindir de los métodos invasivos para alcanzar un diagnóstico. Los avances diarios en el hallazgo de nuevas herramientas paraclínicas no permiten reemplazar aquellos métodos de certeza como la anatomía patológica. El caso presentado es una muestra de ello. Se trata de una mujer de 27 años de edad, con antecedente de tiroiditis de Hashimoto que consulta por presentar severo deterioro de la función renal asociado a oligoanuria. Realizamos una revisión del tratamiento de las glomerulonefritis rápidamente progresivas por anticuerpos antimembrana basal glomerular, serológicamente negativas.
ABSTRACT Once again in internal medicine we cannot do a diagnosis without invasive methods. Daily advances in the finding of new paraclinical tools do not allow the replacement of certain methods such as pathological anatomy. The case presented is a sample of this. This is a 27-year-old woman with a history of Hashimoto's thyroiditis who consults for presenting severe impairment of kidney function associated with oligoanuria. We performed a review of the treatment of the rapidly progressive glomerulonephritis for serologically negative anti-GBM antibodies.
ABSTRACT
Abstract Introduction The extent of epithelial lesion in allergic and non-allergic rhinitis and its association with inflammatory changes in nasal lavage has not been clarified. Objective To verify the association between the inflammatory cells in the nasal lavage, epithelial lesion extent and basement membrane thickness, in the nasal mucosa of patients with rhinitis; to determine the cutoff point of the percentage of eosinophils in the nasal lavage associated with the atopic patients. Methods Patients with rhinitis and indication for septoplasty and (or) turbinectomy for turbinate hypertrophy were selected, and were submitted to allergy skin tests, nasal lavage with measurement of albumin and interleukin-8 levels, total and differential counting of cells, and mucosal histopathological analysis to determine the extent of epithelial lesion, and degree of basement membrane thickening. Results Fifty-six patients with a median age of 24.5 years and a diagnosis of allergic rhinitis (n = 36) and non-allergic rhinitis (n = 20) were studied. In atopic subjects, allergy skin tests were positive for Dermatophagoides pteronyssinus in 35 (97.0%) and Lolium perenne in 18 (50.0%). Atopic subjects showed a higher clinical score index of rhinitis compared to non-atopic ones. The total count of cells, neutrophils, and levels of albumin and IL-8 were not different in the nasal lavage of atopic and non-atopic subjects. The cutoff point for eosinophil count in nasal fluid for the distinction between allergic rhinitis and non-allergic rhinitis was 4%. Some degree of epithelial lesion was more frequent in allergic rhinitis (94%) than in non-allergic rhinitis (65%) patients. In the presence of basement membrane thickness, as a marker of remodeling, there was no difference in the nasal lavage of patients with allergic rhinitis and non-allergic rhinitis. Conclusion In this series, 4% was the cutoff point for the number of eosinophils in the nasal lavage, for atopy differentiation. Upper airway remodeling accessed by basement membrane thickness showed similar inflammatory cell infiltrate in the nasal lavage, regardless of the presence of atopy.
Resumo Introdução A extensão da lesão epitelial na rinite alérgica e não alérgica e sua associação com alterações inflamatórias no lavado nasal ainda não estão esclarecidas. Objetivo Verificar a relação entre o processo inflamatório no lavado nasal, extensão da lesão epitelial e espessamento da membrana basal na mucosa nasal de pacientes com rinite; determinar o ponto de corte do percentual de eosinófilos no lavado nasal associado à presença de atopia. Método Foram selecionados pacientes com rinite e indicação de septoplastia e (ou) turbinectomia por hipertrofia de conchas nasais, os quais foram submetidos aos testes cutâneos alérgicos, lavado nasal com determinação das concentrações de albumina, interleucina-8 (IL-8), contagem total e diferencial de células, análise da extensão da lesão epitelial, e grau de espessamento da membrana basal por meio de histopatologia da mucosa. Resultado Foram estudados 56 pacientes, mediana de 24,5 anos com diagnóstico de rinite alérgica (n = 36) e rinite não alérgica (n = 20). Nos atópicos os testes cutâneos alérgicos foram positivos para D. pteronyssinus em 35 (97,0%) e L. perenne em 18 (50,0%). Atópicos apresentaram maior índice de escore clínico para rinite em comparação a não atópicos. A contagem total de células, neutrófilos e níveis de albumina e IL-8 não foi diferente entre o lavado nasal de atópicos e não atópicos. O ponto de corte da contagem de eosinófilos no fluido nasal para a distinção de rinite alérgica e rinite não alérgica foi de 4%. Algum grau de lesão epitelial foi mais frequente em pacientes com rinite alérgica (94%) do que em pacientes com rinite não alérgica (65%). Na presença de espessamento da membrana basal, como marcador de remodelamento, não houve diferença no lavado nasal entre pacientes com rinite alérgica e não alérgica. Conclusão Nesta casuística, 4% foi o ponto de corte do número de eosinófilos no lavado nasal, para diferenciação de atopia. Remodelamento da via aérea superior pelo espessamento da membrana basal revelou infiltrado semelhante de células inflamatórias no lavado nasal, independentemente da presença de atopia.
Subject(s)
Humans , Young Adult , Rhinitis , Eosinophils , Nasal Lavage , Nasal MucosaABSTRACT
INTRODUCTION: The extent of epithelial lesion in allergic and non-allergic rhinitis and its association with inflammatory changes in nasal lavage has not been clarified. OBJECTIVE: To verify the association between the inflammatory cells in the nasal lavage, epithelial lesion extent and basement membrane thickness, in the nasal mucosa of patients with rhinitis; to determine the cutoff point of the percentage of eosinophils in the nasal lavage associated with the atopic patients. METHODS: Patients with rhinitis and indication for septoplasty and (or) turbinectomy for turbinate hypertrophy were selected, and were submitted to allergy skin tests, nasal lavage with measurement of albumin and interleukin-8 levels, total and differential counting of cells, and mucosal histopathological analysis to determine the extent of epithelial lesion, and degree of basement membrane thickening. RESULTS: Fifty-six patients with a median age of 24.5 years and a diagnosis of allergic rhinitis (n=36) and non-allergic rhinitis (n=20) were studied. In atopic subjects, allergy skin tests were positive for Dermatophagoides pteronyssinus in 35 (97.0%) and Lolium perenne in 18 (50.0%). Atopic subjects showed a higher clinical score index of rhinitis compared to non-atopic ones. The total count of cells, neutrophils, and levels of albumin and IL-8 were not different in the nasal lavage of atopic and non-atopic subjects. The cutoff point for eosinophil count in nasal fluid for the distinction between allergic rhinitis and non-allergic rhinitis was 4%. Some degree of epithelial lesion was more frequent in allergic rhinitis (94%) than in non-allergic rhinitis (65%) patients. In the presence of basement membrane thickness, as a marker of remodeling, there was no difference in the nasal lavage of patients with allergic rhinitis and non-allergic rhinitis. CONCLUSION: In this series, 4% was the cutoff point for the number of eosinophils in the nasal lavage, for atopy differentiation. Upper airway remodeling accessed by basement membrane thickness showed similar inflammatory cell infiltrate in the nasal lavage, regardless of the presence of atopy.
Subject(s)
Rhinitis , Eosinophils , Humans , Nasal Lavage , Nasal Mucosa , Young AdultABSTRACT
Snake venom metalloproteases (SVMPs) are key toxins in local and systemic effects observed in victims of snakebites. The mechanisms involved in SVMPs action are related to the hydrolysis of blood vessels basement membrane components (BM), well as their direct action on platelets, endothelial and inflammatory cell receptors, and coagulation factors. Some evidence suggests that endogenous factors derived from BM hydrolysis increase the local effects induced by SVMPs and, consequently, the severity of snakebites. In this study we evaluated the role of two SVMPs of class P-I and P-III named Atroxlysin-Ia (ATXL) and Batroxrhagin (BATXH), respectively, isolated from the Bothrops atrox venom, and its hydrolysis products on Matrigel in experimental models of inflammation. Both toxins induced inflammatory reactions in mice models. The edema formed in the mice paws after the injection of different doses of SVMPs did not indicate a statistical difference between the tested doses or between the toxins. The lesions were similar despite the ATXL having a lower molecular mass than BATXH. In the kinetics tests of edema and accumulation of peritoneal leukocytes, a dose of 2 µg / animal was used. Both toxins induced the formation of an edema peak between 30 min and 1 h, with a 70% increase in the size of the paws. ATXL and BATXH induced an increase in leukocyte influx 4 h after intraperitoneal injection. For the evaluation of possible inflammatory mediators involved in these reactions, we stimulated Murine Peritoneal Adherent Cells (MPACs) with 40 µg / mL of the SVMPs or B. atrox venom in different time´s period. The cytokine TNF-α was identified in the supernatant of cells stimulated with BATXH or with B. atrox. The venom peaked between 2 h and 6 h with levels of 800 pg/mL, and BATXH induces secretion of 200 pg/mL in 4 h. The same was not observed with ATXL. To test the hypothesis that peptides resulting from MB hydrolysis by SVMPs could participate in the inflammatory process, Matrigel was incubated with the toxins for 1 h at 37 ° C, and the hydrolysis products were identified by LC-MS/MS. In parallel, peptides resulting from this incubation were isolated on centrifugal filters with a 10 kDa cut off. The reaction generated different fragments, mainly Laminin peptides. Isolated peptides in the filters induced the formation of edema with a 30% increase in the size of the paws and promoted leukocyte accumulation in the peritoneal cavity (4-5 x 106 cells/mL). Thus, the results suggest that ATXL and BATXH, together with peptides resulting from Matrigel´s hydrolysis, play an important role in inflammatory reaction observed in envenoming by B. atrox. Generally, envenoming causes irreversible local injuries, even after the administration of antivenom. In this context, we present tests with two inhibitors derived from the Jararhagin pro-domain that were able to neutralize the catalytic, fibrinolytic and hemorrhagic activity induced by SVMP, indicating a possible complementary treatment with antibotropic serum.
Metaloproteases do veneno de serpentes (SVMPs) são toxinas chave nos efeitos locais e sistêmicos observados em vítimas de acidentes ofídicos. Os mecanismos envolvidos na ação das SVMPs estão relacionados à hidrólise dos componentes da membrana basal (MB) dos vasos sanguíneos, bem como à sua ação direta sobre plaquetas, receptores de células endoteliais e inflamatórias, e fatores de coagulação. Algumas evidências sugerem que fatores endógenos derivados da hidrólise de MB aumentam os efeitos locais induzidos pelas SVMPs e, consequentemente, a gravidade dos acidentes ofídicos. Neste trabalho avaliamos o papel de duas SVMPs de classe P-I e P-III nomeadas Atroxlisina-Ia (ATXL) e Batroxragina (BATXH), respectivamente, isoladas do veneno de Bothrops atrox, e seus produtos de hidrólise sobre o Matrigel em modelos experimentais de inflamação. As duas toxinas induziram reação inflamatória em modelos murinos. O edema formado nas patas de camundongos após a injeção de diferentes doses das SVMPs não indicou diferença estatística entre as doses testadas nem entre as toxinas. As lesões foram semelhantes apesar da ATXL possuir massa molecular menor que BATXH. Nos testes de cinética do edema e acúmulo de leucócitos peritoneais foi utilizada a dose de 2 µg/animal. Ambas as toxinas induziram a formação de um pico de edema entre 30 min e 1 h, com aumento de 70% no tamanho das patas. ATXL e BATXH induziram aumento do influxo leucocitário a partir de 4 h após injeção intraperitoneal. Para a avaliação de possíveis mediadores inflamatórios envolvidos nestas reações, estimulamos Células Aderentes Peritoneais Murinas (MPACs) com 40 µg/mL das SVMPs ou veneno de B. atrox em diferentes períodos de tempo. A citocina TNF-α foi identificada no sobrenadante de células estimuladas com BATXH ou com veneno de B. atrox. O veneno atingiu um pico entre 2 h e 6 h com níveis de 800 pg/mL, e BATXH induziu secreção de 200 pg/mL em 4 h. O mesmo não foi observado com ATXL. Para testar a hipótese de que os peptídeos resultantes da hidrólise de MB pelas SVMPs poderiam participar do processo inflamatório, Matrigel foi incubado com as toxinas durante 1 h a 37 °C, e os produtos de hidrólise foram identificados por LC-MS/MS. Paralelamente, peptídeos resultantes desta incubação foram isolados em filtros centrífugos com corte de 10 kDa. A reação gerou diferentes fragmentos, principalmente peptídeos da Laminina. Peptídeos isolados por filtração induziram a formação de edema com aumento no tamanho das patas de 30%, e promoveram o acúmulo leucocitário na cavidade peritoneal (4-5 x 106 células/mL). Assim, os resultados sugerem que ATXL e BATXH, juntamente com peptídeos resultantes da hidrólise do Matrigel por essas proteases desempenham um papel importante na reação inflamatória observada no envenenamento por B. atrox. Geralmente, o envenenamento causa lesões locais irreversíveis, mesmo após a administração do antiveneneno. Neste contexto, apresentamos testes com dois inibidores derivados do pró-domínio da Jararagina que foram capazes de neutralizar a atividade catalítica, fibrinolítica e hemorrágica induzidas pela SVMP, indicando um possível tratamento complementar com soro antibotrópico.
ABSTRACT
Snake venom metalloproteases (SVMPs) are key toxins in local and systemic effects observed in victims of snakebites. The mechanisms involved in SVMPs action are related to the hydrolysis of blood vessels basement membrane components (BM), well as their direct action on platelets, endothelial and inflammatory cell receptors, and coagulation factors. Some evidence suggests that endogenous factors derived from BM hydrolysis increase the local effects induced by SVMPs and, consequently, the severity of snakebites. In this study we evaluated the role of two SVMPs of class P-I and P-III named Atroxlysin-Ia (ATXL) and Batroxrhagin (BATXH), respectively, isolated from the Bothrops atrox venom, and its hydrolysis products on Matrigel in experimental models of inflammation. Both toxins induced inflammatory reactions in mice models. The edema formed in the mice paws after the injection of different doses of SVMPs did not indicate a statistical difference between the tested doses or between the toxins. The lesions were similar despite the ATXL having a lower molecular mass than BATXH. In the kinetics tests of edema and accumulation of peritoneal leukocytes, a dose of 2 µg / animal was used. Both toxins induced the formation of an edema peak between 30 min and 1 h, with a 70% increase in the size of the paws. ATXL and BATXH induced an increase in leukocyte influx 4 h after intraperitoneal injection. For the evaluation of possible inflammatory mediators involved in these reactions, we stimulated Murine Peritoneal Adherent Cells (MPACs) with 40 µg / mL of the SVMPs or B. atrox venom in different time´s period. The cytokine TNF-α was identified in the supernatant of cells stimulated with BATXH or with B. atrox. The venom peaked between 2 h and 6 h with levels of 800 pg/mL, and BATXH induces secretion of 200 pg/mL in 4 h. The same was not observed with ATXL. To test the hypothesis that peptides resulting from MB hydrolysis by SVMPs could participate in the inflammatory process, Matrigel was incubated with the toxins for 1 h at 37 ° C, and the hydrolysis products were identified by LC-MS/MS. In parallel, peptides resulting from this incubation were isolated on centrifugal filters with a 10 kDa cut off. The reaction generated different fragments, mainly Laminin peptides. Isolated peptides in the filters induced the formation of edema with a 30% increase in the size of the paws and promoted leukocyte accumulation in the peritoneal cavity (4-5 x 106 cells/mL). Thus, the results suggest that ATXL and BATXH, together with peptides resulting from Matrigel´s hydrolysis, play an important role in inflammatory reaction observed in envenoming by B. atrox. Generally, envenoming causes irreversible local injuries, even after the administration of antivenom. In this context, we present tests with two inhibitors derived from the Jararhagin pro-domain that were able to neutralize the catalytic, fibrinolytic and hemorrhagic activity induced by SVMP, indicating a possible complementary treatment with antibotropic serum.
Metaloproteases do veneno de serpentes (SVMPs) são toxinas chave nos efeitos locais e sistêmicos observados em vítimas de acidentes ofídicos. Os mecanismos envolvidos na ação das SVMPs estão relacionados à hidrólise dos componentes da membrana basal (MB) dos vasos sanguíneos, bem como à sua ação direta sobre plaquetas, receptores de células endoteliais e inflamatórias, e fatores de coagulação. Algumas evidências sugerem que fatores endógenos derivados da hidrólise de MB aumentam os efeitos locais induzidos pelas SVMPs e, consequentemente, a gravidade dos acidentes ofídicos. Neste trabalho avaliamos o papel de duas SVMPs de classe P-I e P-III nomeadas Atroxlisina-Ia (ATXL) e Batroxragina (BATXH), respectivamente, isoladas do veneno de Bothrops atrox, e seus produtos de hidrólise sobre o Matrigel em modelos experimentais de inflamação. As duas toxinas induziram reação inflamatória em modelos murinos. O edema formado nas patas de camundongos após a injeção de diferentes doses das SVMPs não indicou diferença estatística entre as doses testadas nem entre as toxinas. As lesões foram semelhantes apesar da ATXL possuir massa molecular menor que BATXH. Nos testes de cinética do edema e acúmulo de leucócitos peritoneais foi utilizada a dose de 2 µg/animal. Ambas as toxinas induziram a formação de um pico de edema entre 30 min e 1 h, com aumento de 70% no tamanho das patas. ATXL e BATXH induziram aumento do influxo leucocitário a partir de 4 h após injeção intraperitoneal. Para a avaliação de possíveis mediadores inflamatórios envolvidos nestas reações, estimulamos Células Aderentes Peritoneais Murinas (MPACs) com 40 µg/mL das SVMPs ou veneno de B. atrox em diferentes períodos de tempo. A citocina TNF-α foi identificada no sobrenadante de células estimuladas com BATXH ou com veneno de B. atrox. O veneno atingiu um pico entre 2 h e 6 h com níveis de 800 pg/mL, e BATXH induziu secreção de 200 pg/mL em 4 h. O mesmo não foi observado com ATXL. Para testar a hipótese de que os peptídeos resultantes da hidrólise de MB pelas SVMPs poderiam participar do processo inflamatório, Matrigel foi incubado com as toxinas durante 1 h a 37 °C, e os produtos de hidrólise foram identificados por LC-MS/MS. Paralelamente, peptídeos resultantes desta incubação foram isolados em filtros centrífugos com corte de 10 kDa. A reação gerou diferentes fragmentos, principalmente peptídeos da Laminina. Peptídeos isolados por filtração induziram a formação de edema com aumento no tamanho das patas de 30%, e promoveram o acúmulo leucocitário na cavidade peritoneal (4-5 x 106 células/mL). Assim, os resultados sugerem que ATXL e BATXH, juntamente com peptídeos resultantes da hidrólise do Matrigel por essas proteases desempenham um papel importante na reação inflamatória observada no envenenamento por B. atrox. Geralmente, o envenenamento causa lesões locais irreversíveis, mesmo após a administração do antiveneneno. Neste contexto, apresentamos testes com dois inibidores derivados do pró-domínio da Jararagina que foram capazes de neutralizar a atividade catalítica, fibrinolítica e hemorrágica induzidas pela SVMP, indicando um possível tratamento complementar com soro antibotrópico.
ABSTRACT
Introducción: El síndrome de Goodpasture es una rara enfermedad autoinmune que forma parte del espectro de síndrome pulmón-riñón Objetivo: Presentar un paciente pediátrico con síndrome de Goodpasture atípico. Presentación del caso: Paciente de seis años seguida por el servicio de nefrología; ingresó a los cuatro años de edad por presentar hematuria macroscópica asociada a manifestaciones respiratorias y antecedente de títulos elevados de anticuerpos antimembrana basal glomerular. Fue motivo de investigación y se diagnosticó el síndrome de Goodpasture. Después de tratamiento inmunosupresor con ciclofosfamida y metilprednisolona seguido de prednisona oral, la paciente presentó descenso de los títulos de anticuerpos antimembrana basal glomerular, así como mejoría de los síntomas respiratorios, sin embargo, la proteinuria se mantuvo con incremento en los últimos meses. Para el diagnóstico se tuvieron en cuenta las manifestaciones clínicas en la niña, título elevado de anticuerpos antimembrana basal glomerular y la confirmación por biopsia renal de glomerulopatía. El tratamiento fue rápidamente efectivo con una disminución inmediata en los títulos de anticuerpos antimembrana basal y mejoría evidente de la condición clínica de la paciente. Se trata del primer caso pediátrico con síndrome de Goodpasture publicado en Cuba. Conclusiones: Por tratarse de una entidad rara en pediatría se requiere un diagnóstico temprano y tratamiento agresivo para mejorar el pronóstico del paciente. En su seguimiento son necesarias una terapia farmacológica prolongada, una adecuada adherencia al tratamiento propuesto y un estrecho monitoreo clínico y analítico de lo cual dependerá la progresión de la injuria renal y pulmonar(AU)
Introduction: Goodpasture´s syndrome is a rare autoimmune disease that is part of the lung-kidney syndrome's sprectrum. Objective: To present the case of a pediatric patient with an atypical Goodpasture´s syndrome. Case presentation: Six years old female patient under follow-up in the Nephrology service. She was admitted when she was four years old by presenting macroscopic hematuria, respiratory symptoms and a history of high titers of anti-glomerular basement membrane antibodies. She was under research and was diagnosed with the Goodpasture´s symdrome. After being under immunosupressive treatment with cyclophosphamide and methylprednisolone followed by oral prednisone, the patient presented a decrease in the titers of anti-glomerular basement membrane antibodies, and an improvement of the respiratory symptoms; however, proteinuria kept increasing in the last months. For the diagnosis, there were taken into account the clinical manifestations of the girl, the high titers of anti-glomerular basement membrane antibodies and the confirmations of glumerulopathy by renal biopsy. The treatment was effective quickly with an inmmediate decrease of the titers of anti-glomerular basement membrane antibodies and an evident improvement of the clinical condition of the patient. This is the first pediatric case presenting Goodpasture´s syndrome that has been published in Cuba. Conclusions: As this is a rare entity in Pediatrics, it is required an early diagnosis and an aggressive treatment to improve the patient's prognosis. In the follow-up are needed a prolonged pharmacological therapy, an adequate adherence to the proposed treatment and a close clinical and analytic monitoring from which will depend the progression of the lung and renal injury(AU)
Subject(s)
Humans , Female , Child, Preschool , Child , Anti-Glomerular Basement Membrane Disease/diagnosis , Anti-Glomerular Basement Membrane Disease/epidemiologyABSTRACT
A sinalização da matriz extracelular (MEC) é essencial para a determinação do destino e comportamento de células epiteliais da glândula mamária. Entretanto, pouco é conhecido sobre os mecanismos moleculares envolvidos nesse processo. A via Hippo, uma cascata de sinalização que participa da regulação de diversos comportamentos celulares, incluindo o tamanho de órgãos, parece ser uma importante candidata a mediadora sinalização da MEC. Resultados preliminares do laboratório indicam que a arquitetura tecidual e a membrana basal, componente da MEC de epitélios e outros tecidos, influenciam a localização, concentração e atividade de YAP, uma proteína efetora da via Hippo, em células epiteliais mamárias. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi identificar as proteínas que interagem com Yap (ortólogo de YAP em camundongo) nas células epiteliais da glândula mamária em resposta à membrana basal. Foram utilizadas células EpH4, uma linhagem mamária não-tumoral murina, como modelo de diferenciação funcional e formação de ácinos em um ensaio de cultura tridimensional (3D). O tratamento de estruturas multicelulares 3D pré-formadas em placas nãoadesiva com uma matriz rica em laminina (lrECM) alterou a localização e o padrão subcelular de Yap, assim como a expressão gênica de membros da via Hippo e dos alvos de Yap, mas não alterou a expressão das proteínas da via em nível de proteína. O ensaio de co-imunoprecipitação (CoIP) seguida de análise por espectrometria de massas identificou um conjunto diferencial de proteínas que interagem com Yap na fração citoplasmática de células EpH4 cultivadas na ausência ou na presença de lrECM em um modelo de ECM-overlay. Uma análise realizada junto à database KEGG Pathways revelou que os possíveis interagentes Yap nas células cultivadas não-tratadas com lrECM participam de processos relacionados à proteólise mediada por ubiquitina, enquanto nas células expostas à lrECM os possíveis interagentes estão associados a processos metabólicos e são especialmente proteínas-chave do metabolismo de lipídios. A busca na plataforma de redes de interação STRING não identificou trabalhos que destaquem a interação de Yap com estas proteínas. A plataforma Vizit indica a participação de Yap em processos relacionados à síntese e atividade de lipídios e hormônios, o que reforça as evidências de que está pode ser uma nova função de Yap ainda não explorada em detalhes. A fim de se obter resultados complementares à CoIP, padronizamos o ensaio de identificação por biotinilação dependente de proximidade (BioID) em células embrionárias de rim humano da linhagem 293FT. As proteínas isoladas por pulldown foram identificadas por espectrometria de massas e uma análise junto à database Gene Ontology indicou que os possíveis interagentes de Yap nestas células são em sua maioria proteínas relacionadas à via Hippo, o que reforça a robustez do ensaio. Nós pretendemos transpor este sistema para as células EpH4. A expectativa é que, em conjunto, estes resultados nos orientem em projetos futuros para compreender os mecanismos de sinalização da MEC na morfogênese e diferenciação da glândula mamária
Extracellular matrix (ECM)-signaling is crucial for determination of epithelial cell fate and behavior in the mammary gland. However, little is known about the molecular mechanisms involved in these processes. The Hippo pathway, a signaling cascade involved in the regulation of several cellular processes, including organ size, seems to be an important candidate as a mediator of this signaling. Our preliminary results indicate that the tissue architecture and the basement membrane, an ECM component of epithelia and other tissues, influence the location, level and activity of YAP, an effector of the Hippo pathway. In this context, the goal of this work was to identify the proteins that interact with Yap (ortholog of YAP in mouse) in mammary epithelial cells in response to the basement membrane. We used EpH4 cells, a nontumoral murine mammary cell, in a functional differentiation and acini-forming in tridimensional (3D) culture assay. Treatment of 3D multicellular structures pre-formed on nonadhesive plates with a laminin-rich extracellular matrix (lrECM) altered the subcellular localization and pattern of Yap, as well as gene expression of Hippo pathway proteins and Yap targets, but did not altered the expression of the pathway members at the protein level. Coimmunoprecipitation (CoIP) followed by mass spectrometry analysis identified a differential set of proteins interacting with Yap in cytoplasmic fractions of EpH4 cells in the absence or presence of lrECM in an ECM-overlay culture model. An analysis performed with the KEGG Pathways database revealed that putative Yap interactors in non-treated cells participate in processes related to ubiquitin-mediated proteolysis, whereas in cells exposed to lrECM Yap interactors are associated to metabolic processes and are mainly key-proteins of metabolism of lipids and carbohydrates. A search in interaction networks platform STRING did not identify previous works that showing the interaction of Yap with these proteins. Vizit platform indicated the participation of Yap in processes related to the synthesis and activity of lipids and hormones, which reinforces the evidences that Yap can play a novel poorly explored role. To obtain complementary results to CoIP, we devised the proximity-dependent biotinylation identification (BioID) assay on embryonic renal cells of 293FT cell line. Pulldown-isolated proteins were identified by mass spectrometry and an analysis performed with Gene Ontology database revealed that putative Yap interactors are Hippo pathway-related proteins, which reinforces the robustness of the assay. We intend to transpose this system to the EpH4 cells. We expect that, together, these results will guide us in future projects to understand the signaling mechanisms of ECM in mammary gland morphogenesis and differentiation
Subject(s)
Animals , Male , Female , Mammary Glands, Human , Epithelial Cells/classification , Extracellular Matrix/chemistry , Mass Spectrometry/methods , Basement Membrane/anatomy & histology , Laminin/adverse effectsABSTRACT
ABSTRACT Epidermolysis bullosa describes a group of skin conditions caused by mutations in genes encoding proteins related to dermal-epidermal adhesion. In the United States, 50 cases of epidermolysis bullosa per 1 million live births are estimated, 92% of which classified as simplex, 5% dystrophic, 1% junctional and 2% non-classified. Dystrophic epidermolysis bullosa is associated with autosomal, dominant and recessive inheritance. Epidermolysis bullosa causes severe psychological, economic and social impacts, and there is currently no curative therapy, only symptom control. Embryonic selection is available for epidermolysis bullosa patients in order to prevent perpetuation of the condition in their offspring.
RESUMO O termo "epidermólise bolhosa" descreve um grupo de afecções cutâneas causadas por mutações em genes que codificam proteínas relacionadas à aderência dermoepidérmica. Nos Estados Unidos, estima-se a ocorrência de 50 casos de epidermólise bolhosa por 1 milhão de nascidos vivos, sendo 92% deles da forma simples, 5% da forma distrófica, 1% da forma juncional e 2% não classificados. A epidermólise bolhosa do tipo distrófica foi associada a padrões autossômicos, dominante e recessivo. A epidermólise bolhosa causa sérios impactos psicológicos, econômicos e sociais, e não há tratamento curativo atualmente − apenas controle dos sintomas. A seleção embrionária é disponível para portadores de epidermólise bolhosa, a fim de evitar a perpetuação da condição em seus descendentes.
Subject(s)
Humans , Female , Adult , Epidermolysis Bullosa Dystrophica/genetics , Genetic Counseling/methods , Mutation , Polymerase Chain Reaction , Collagen Type VII/genetics , Inheritance Patterns/geneticsABSTRACT
ABSTRACT We report the case of a patient with dystrophic epidermolysis bullosa (DEB) diagnosed by transmission electron microscopy (TEM), emphasizing the applications and importance of this technique in the health area. The patient was a male, the only child of young and non-consanguineous parents without similar cases in the family. The patient underwent a cutaneous biopsy in which TEM revealed sub-basal membrane involvement, confirming the diagnosis of DEB. Despite technological advances, TEM continues to play an important role in diagnosis and clinical research and is considered the best option for confirmation of diagnosis and subtypes of diseases such as epidermolysis bullosa (EB).
RESUMO Relatamos o caso de um paciente com epidermólise bolhosa distrófica (EBD) diagnosticado por microscopia eletrônica de transmissão (MET), destacando aplicações e importância desta técnica na área da saúde. Paciente do sexo masculino, filho único de pais jovens não consanguíneos, sem histórico de caso familial. O paciente foi submetido à biópsia cutânea, na qual a MET revelou comprometimento da membrana sub-basal, confirmando o diagnóstico de EBD. Apesar dos avanços tecnológicos, a MET continua tendo papel importante no diagnóstico e na pesquisa clínica, sendo considerada a melhor opção para a confirmação do diagnóstico e dos subtipos de doenças como a epidermólise bolhosa (EB).
ABSTRACT
Se realizó un estudio descriptivo y transversal de 25 pacientes, adictos al tabaco, con carcinoma in situ en la mucosa bucal, atendidos en la consulta estomatológica del Policlínico de Especialidades perteneciente al Hospital Provincial Docente Clinicoquirúrgico "Saturnino Lora Torres" de Santiago de Cuba, desde abril del 2008 hasta igual periodo del 2013, a fin de evaluar los resultados del diagnóstico clínico e histopatológico de esta neoplasia. Mediante la técnica clásica de inclusión en parafina se confirmó la existencia de cambios celulares. En la casuística prevalecieron el sexo masculino y la ausencia de síntomas subjetivos en la forma leucoplásica. El sitio anatómico más susceptible correspondió al borde lateral de la lengua. Entre las alteraciones hísticas más comunes figuraron: hipercromatismo nuclear, membrana basal intacta, pérdida de la polaridad, así como pleomorfismo nuclear y celular...
A descriptive and cross-sectional study of 25 patients, with tobacco addition and carcinoma in situ of the oral mucous, assisted in the stomatological department of the Specialties Polyclinic belonging to "Saturnino Lora Torres" Teaching Provincial Clinical Surgical Hospital in Santiago de Cuba was carried out from April, 2008 to same period of the 2013, in order to evaluate the results of the clinical, histological and pathological diagnosis of this neoplasia. By means of the classic technique of inclusion in paraffin the existence of cellular changes was confirmed. The male sex and the absence of subjective symptoms prevailed in the leucoplasic form in the case material. The most susceptible anatomical site corresponded to the lateral border of the tongue. Among the most common tissue alterations there were: nuclear hyperchromatism, intact basal membrane, loss of the polarity, as well as nuclear and cellular pleomorphism...
Subject(s)
Carcinoma in Situ/diagnosis , Mouth Mucosa , Basement Membrane , Secondary CareABSTRACT
Los productos finales de glicación (AGEs) son un grupo heterogéneo de moléculas generadas por medio de reacciones no enzimáticas de glicación y de oxidación de proteínas, lípidos y ácidos nucleicos. La formación aumentada de AGEs ocurre en condiciones tales como la diabetes mellitus y el envejecimiento. AGEs median sus efectos a través de tres mecanismos principales: 1) entrecruzamiento con proteínas de la matriz extracelular, afectando las propiedades mecánicas de los tejidos, 2) entrecruzamiento con proteínas intracelulares alterando sus funciones fisiológicas y 3) unión a sus receptores de superficie RAGE para inducir múltiples cascadas de señales intracelulares. La acumulación de AGEs en las proteínas tisulares ha sido implicada en las complicaciones vasculares diabéticas, tales como la retinopatía, la nefropatía y la neuropatía. En la nefropatía diabética los AGEs contribuyen al desarrollo y progresión de esta enfermedad renal.
Advanced glycation end products (AGEs) are a heterogenous group of molecules that are generated through nonenzimatic glycation and oxidation of proteins, lipids and nucleic acids. Enhanced formation and accumulation of AGEs has been reported to occur in conditions such as diabetes mellitus as well as in natural aging. AGEs mediate their effects through three main mechanism: 1) cross linking extracellular (matrix) proteins thereby affecting tissue mechanical properties, 2) cross linking intracellular proteins thus altering their physiological functios and 3) binding to their cell surface receptor RAGE to inducing multiple intracellular signalling cascades. The accumulation of AGEs in tissue proteins has been implicated in diabetic vascular complications, such as retinopathy, nephropathy and neuropathy. In the diabetic nephropathy AGEs contribute to the development and progression of this renal disease.
Subject(s)
Humans , Male , Adult , Diabetes Complications , Glomerular Basement Membrane , Maillard ReactionABSTRACT
INTRODUÇÃO: Embora seja reconhecida a existência do espessamento da membrana basal e da fibrose da concha nasal na rinite alérgica, não há estudos descritivos do comportamento da mucosa nasal nos pacientes com rinite idiopática. O propósito desse estudo é descrever possíveis alterações na membrana basal e na lâmina própria da concha nasal inferior em pacientes com rinite alérgica ou idiopática, além do estudo quantitativo das fibras colágenas nesta localização. MÉTODOS: Analisou-se na concha nasal inferior obtida através de turbinectomia bilateral em 28 pacientes - 14 com rinite alérgica e 14 com rinite idiopática - a área ocupada pelo colágeno, a espessura da membrana basal e o diâmetro das fibrilas de colágeno através do uso de microscopia óptica (coloração Hematoxilina-eosina e Picrossírius-hematoxilina), microscopia eletrônica e imunoistoquímica para laminina e colágeno IV. RESULTADOS: 1) pacientes com rinite alérgica apresentaram significantemente maior área da concha nasal ocupada por colágeno do que o grupo com rinite idiopática. 2) a membrana basal de pacientes com rinite alérgica foi significantemente mais espessa. 3) a lâmina reticular da membrana basal dos pacientes com rinite alérgica apresentaram fibrilas de colágeno com menor diâmetro que os pacientes com rinite idiopática. 4) não houve diferenças significativas entre os grupos na distribuição de laminina e de colágeno IV. CONCLUSÕES: Alterações na mucosa nasal ocorrem na rinite alérgica, sendo caracterizadas pelo aumento da espessura da membrana basal e por fibrose. Na rinite idiopática, observou-se uma mucosa com aspecto estrutural semelhante aos pacientes normais...
INTRODUCTION: Despite our knowledge about nasal conchae fibrosis and basement membrane thickening in allergic rhinitis, there are no descriptive studies on nasal mucosa behavior in patients with idiopathic rhinitis. The aim of our study was to describe possible changes in the basement membrane and lamina propria of the inferior concha in patients with idiopathic or allergic rhinitis, in addition to a quantitative study of collagen fibers in this site. METHODS: The inferior nasal concha obtained from 28 patients submitted to bilateral turbinectomy was examined - 14 with allergic rhinitis and 14 with idiopathic rhinitis; analyzing the collagen area, the basement membrane thickness and the collagen fibrils diameter using optical microscopy (Hematoxylin-eosin and Picrosirius-hematoxylin staining), electron microscopy and immunohistochemistry for laminin and collagen IV. RESULTS: 1) patients with allergic rhinitis had a significantly larger area of the nasal concha occupied by collagen than the group with idiopathic rhinitis. 2) the basement membrane of patients with allergic rhinitis was significantly thicker. 3) the reticular lamina of the basement membrane of patients with allergic rhinitis had collagen fibrils with diameters which were smaller than those from patients with idiopathic rhinitis. 4) there were no significant differences between the groups concerning the distribution of laminin and collagen IV. CONCLUSIONS: Alterations to the nasal mucosa that happen in allergic rhinitis are characterized by basement membrane thickening and fibrosis. In idiopathic rhinitis the patients' mucosae were structurally similar to those from normal patients...
Subject(s)
Humans , Male , Female , Adult , Middle Aged , Airway Remodeling , Basement Membrane , Collagen , Nasal Mucosa , RhinitisABSTRACT
In dystrophic epidermolysis bullosa the genetic defect of anchoring fibrils leads to cleavage beneath the basement membrane, with its consequent loss. We performed scanning electron microscopy of an inverted blister roof of a case of dystrophic epidermolysis bullosa, confirmed by immunomapping and gene sequencing. With a magnification of 2000 times a net attached to the blister roof could be easily identified. This net was composed of intertwined flat fibers. With higher magnifications, different fiber sizes could be observed, some thin fibers measuring around 80 nm and thicker ones measuring between 200 and 300 nm.
Na epidermólise bolhosa distrófica, o defeito genético das fibrilas ancorantes leva à clivagem abaixo da membrana basal, com sua consequente perda. Realizamos microscopia eletrônica de varredura do teto invertido de uma bolha de um caso de epidermólise bolhosa distrófica, cujo diagnóstico foi confirmado com imunomapeamento e com sequenciamento gênico. Com uma ampliação de 2.000 vezes, pôde ser facilmente identificada uma rede ligada ao teto da bolha. Essa rede era composta por fibras achatadas e entrelaçadas. Com grandes aumentos, fibras de diferentes tamanhos puderam ser observadas: algumas finas, medindo cerca de 80 nm, e outras mais largas, medindo entre 200 nm e 300 nm.
Subject(s)
Humans , Blister/pathology , Epidermolysis Bullosa Dystrophica/pathology , Basement Membrane , Blister/genetics , Collagen Type IV/ultrastructure , Collagen Type VII/ultrastructure , Epidermolysis Bullosa Dystrophica/genetics , Microscopy, Electron, Scanning , Skin/ultrastructureABSTRACT
Linear immunoglobulin A dermatosis is a rare autoimmune bullous disease, but the most common autoimmune bullous dermatosis in children. We report a typical exuberant case of linear IgA dermatosis in a ten-month old child, who showed good response to treatment with corticosteroids and dapsone.
A dermatose por imunoglobulina A (IgA) linear é doença bolhosa autoimune rara, porém a mais comum das dermatoses bolhosas autoimunes da infância. Relatamos caso típico e exuberante de dermatose por IgA linear em uma criança de 10 meses, que apresentou boa evolução com o tratamento com corticóide e dapsona.
Subject(s)
Humans , Infant , Male , Linear IgA Bullous Dermatosis/pathology , Rare Diseases/pathology , Adrenal Cortex Hormones/therapeutic use , Anti-Infective Agents/therapeutic use , Dapsone/therapeutic use , Linear IgA Bullous Dermatosis/drug therapy , Rare Diseases/drug therapy , Skin/pathology , Treatment OutcomeABSTRACT
Esta tese inclui três artigos sobre epidermólise bolhosa (EB) em animais, uma doença hereditária, cuja principal característica é a formação de bolhas e erosões na pele e mucosas em resposta ao mínimo trauma. O primeiro capítulo é um artigo de revisão que abrange o diagnóstico, a classificação, a epidemiologia, o modo de herança, a clínica, a patologia e as alterações ultraestruturais e moleculares da EB em animais. Baseado no nível ultraestrutural de separação do tecido, a EB é dividida em três tipos: simples, juncional e distrófica. Em humanos estima-se que a EB afeta 1 em 17.000 nascidos vivos, mas em animais a frequência de EB não é estimada. Os achados clínicos e patológicos são semelhantes em todos os tipos de EB, variando apenas na intensidade. A EB é causada por mutações nos genes que expressam as proteínas do citoesqueleto dos queratinócitos ou da zona da membrana basal (ZMB). No segundo capítulo foram descritos em caprinos os achados clínicos, histopatológicos e ultraestruturais da EB distrófica transmitida por um gene autossômico recessivo. Os caprinos apresentaram exungulação, erosões, crostas e cicatrizes na pele e úlceras na cavidade oral. Histologicamente, a pele apresentava uma separação subepidérmica preenchida com fluido eosinofílico claro, restos celulares ou neutrófilos. Ultraestruturalmente, o local de separação foi abaixo da lâmina densa na ZMB. Na pele com formação de bolhas e na pele não envolvida clinicamente, a lâmina basal foi preservada, mas as fibrilas de ancoragem eram escassas e rudimentares. Sugere-se que a doença é similar a EB distrófica recessiva generalizada e severa observada em humanos. No terceiro capítulo é descrito um caso de EB em um bezerro. [...] Os hemidesmossomos apresentavam-se pequenos, pobremente definidos e sem demarcação clara. Os achados clínicos, histológicos e ultraestruturais encontrados no bezerro são característicos da EB juncional.
This thesis includes three papers on epidermolysis bullosa (EB) in animals, which is an hereditary disease, characterized by the formation of blisters and erosions on the skin and mucous in response to minor mechanical trauma. The first paper reviews the diagnosis, classification, epidemiology, mode of inheritance, clinical, pathology, and ultrastructural and molecular changes of EB reported in animals. Based on the ultrastructural level of tissue separations EB is divided into three types: simplex, junctional, and dystrophic. In humans it is estimated that EB affect 1 in 17000 live births, but in animal the frequency of EB is not estimated. The clinical and pathological findings are similar in all types of EB, varying only in intensity. EB is due to mutations in genes that express the protein constituent the cytoskeleton of the basal keratinocytes or of the basement membrane zone (BMZ). In the second paper, clinical, histopathological, and ultrastructural findings of dystrophic EB in goats transmitted by an autosomal recessive gene are reported. The goats presented with exungulation, erosions, crusts and scars on the skin and ulcers in the oral cavity. Histologically, the skin showed subepidermal separation, with clefts filled with clear eosinophilic fluid, cellular debris or neutrophils. Ultrastructurally, the site of blister formation was the sub-lamina densa in the BMZ. In skin with blister formation and in clinically uninvolved skin, the basal lamina was preserved, but the anchoring fibrils were scarce and rudimentary. It is suggested that the disease is similar to human severe generalized recessive dystrophic EB. In the third paper, a case of EB in a calf is reported. It was presented exungulation of all hooves, widespread erosions and crusts on the skin, and ulcers in the oral cavity. [...] The hemidesmosomes were poorly defined and small. The clinical, histological and ultrastructural findings are characteristic of junctional EB.