ABSTRACT
Final oocyte maturation (FOM) is a process involving a complex set of genetical, biochemical, and morphological mechanisms. FOM involves the shift of a post-vitellogenic follicle to a pre-ovulated oocyte, which is necessary for fertilization by spermatozoan to occur. This process is regulated by a maturation-inducing steroid (MIS) at the follicular level. In other species of scienids fish the MIS, a hydroxilated derivatives of progestagen 17, 20beta, 21-trihydroxy-4-pregnen-3-one (20beta-S), was identified. Although Micropogonias furnieri is the second fishery resource of Uruguay, basic knowledge about its endocrine process is very scarce. The aim of this work was to investigate what steroids are synthesized in vitro by the oocyte follicle of M. furnieri during the maturation process. Fragments of ovary (1 g) in three stages: post-vitellogenic (PV), maturing (Mtg), and mature (M) were incubated with 1 mug.g-1 of tritiated progesterone (P) at 30, 60, and 180 min. After extraction with ethanol and dichloromethane, steroid metabolites were purified by TLC and rpHPLC. Two progesterone derivatives with identical chromatographic properties of 20beta-S and 17,20beta-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20beta-P) were purified. In other Teleost fish these steroids are biologically activ as MIS. The 17,20beta-P was clearly detected in Mtg and M stages and confirmed by enzymatic oxidation with enzyme 20beta-HSD. The 20beta-S was strongly detected in all Mtg oocytes. The results do not corroborate 20beta-S as a major hormone synthesized in the ovary in FOM as occurs in other scienid fish. A differential steroid synthesis in the advanced oocyte stages suggests that the 20beta-S is acting as a MIS in M. furnieri.
A maturação ovocitária final (FOM) é um processo complexo que envolve mecanismos genéticos, bioquímicos e morfológicos que conduzem à transformação de um ovócito pós-vitelogênico em um ovócito apto a ser fertilizado. Esse processo está regulado pelo hormônio esteróide indutor da maturação ovocitária final (MIS), o qual é sintetizado no folículo. Em outras espécies de Sciaenidae, o MIS foi identificado como um derivado hidroxilado da progesterona 17, 20beta, 21-trihydroxy-4-pregnen-3-one (20beta-S). Micropogonias furnieri é um recurso superexplorado na costa uruguaia, contudo, seus processos endócrinos são pouco conhecidos. O objetivo deste trabalho foi pesquisar quais esteróides são sintetizados in vitro pelos folículos em maturação de M. furnieri. Fragmentos de ovários (1 g) foram incubados em três estágios diferentes: pós-vitelogênese (PV), em maturação (Mtg) e maduros (M) com 1 mig/g de progesterona tritriada (P) durante 30, 60 e 180 min. Depois da extração dos esteróides com etanol e diclorometano, esses foram purificados e identificados utilizando-se TLC, rpHPLC e oxidação enzimática. Foram identificados dois derivados de progesterona com idênticas propriedades cromatográficas ao 20beta-S e 17,20beta-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20beta-P), os quais, em outras espécies de peixes, apresentam atividade biológica como o MIS. A 17,20beta-P foi observada claramente nos estágios Mtg e M e confirmada pela oxidação com a enzima 20beta-HSD. A 20beta-S foi claramente observada nos ovários em maturação (Mtg). Os resultados não permitiram confirmar que 20beta-S é o hormônio mais sintetizado nos estágios estudados, como ocorre em outras espécies de ciaenídeos, mas a presença de uma síntese diferencial no estágio de maturação sugere que 20beta-S esteja atuando como o MIS em M. furnieri.