Morphological alterations and time-kill studies of the essential oil from the leaves of Coriandrum sativum L. on Candida albicans / Alteraciones morfológicas y estudios de letalidad del aceite esencial de las hojas de Coriandrum sativum L. en Candida albicans

The objective of this study was to evaluate the morphological alterations and time-kill of the essential oil of the leaves of C. sativum L. on strains of C. albicans. The essential oil was submitted to gas chromatography-mass spectrometry analysis. The predominant component identified was linalool (39.78 percent). Minimal inhibitory concentration and minimal fungicidal concentration of the essential oil were respectively 512 and 1024 ug.mL-1 for 90 percent of the strains tested. In the time-kill curves, the essential oil showed a concentration-dependent fungicidal effect. In the micromorphology assay it caused a significant reduction in pseudohyphae, an important pathogenic factor of C. albicans.

El objetivo de este estudio fue evaluar las alteraciones morfológicas y de letalidad del aceite esencial de las hojas de C. sativum L. en cepas de C. albicans. El aceite esencial se presentó a gas análisis de espectrometría de cromatografía-masa. El componente predominante identificado fue linalol (39,78 por ciento). Concentración inhibitoria mínima y concentración mínima fungicida del aceite esencial fueron, respectivamente, 512 y 1.024 ìg.mL-1 para 90 por ciento de las cepas probadas. En las curvas el tiempo-matar, el aceite esencial mostró un efecto fungicida dependiente de la concentración. En el ensayo de micromorfología causó una reducción significativa en pseudohifas, un importante factor patógeno de C. albicans.

Diagnóstico microbiológico mejorado de infecciones respiratorias bajas a partir de muestra de esputo / Improved microbiological diagnosis of lower respiratory infections from sputum samples

Se realiza una investigación desarrollada en el laboratorio de Microbiología del Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Guantánamo durante el año 2008, con el objetivo de introducir mejoras tecnológicas en el diagnóstico microbiológico de las infecciones respiratorias bajas a partir de la muestra de esputo, que permitan reducir las limitaciones y controversias relacionadas con este diagnóstico. Se introduce en este nuevo diseño, la toma de muestra modificada para esputo y otras características de esputo, como: aspecto, fetidez, presencia de leucocitos y pseudohifas. Se logra obtener una información integrada y más segura sobre el patógeno aislado y sitio anatómico en que se encuentra, ofreciendo al facultativo las herramientas para decidir la conducta a seguir(AU)

Operational research is developed in the laboratory of Microbiology of the Provincial Center of Hygiene, Epidemiology and Microbiology at Guantanamo in 2008, with the aim of introducing technological improvements in the microbiological diagnosis of lower respiratory infections from the sputum sample, to reduce the limitations and controversies related to this diagnosis. This new design is introduced, the sample changed sputum and other sputum features, such as appearance, fetid, presence of leukocytes and pseudohyphae. It is possible to obtain more secure and integrated information on the isolated pathogen and anatomical site that is offering the physician; s tools to decide what action must be taken

Filamentous growth in Saccharomyces cerevisiae

Fungal dimorphism is a complex phenomenon triggered by a large variety of environmental factors and consists of a reversible alternating pattern of growth between different elliptical and filamentous forms of cells. Understanding the mechanisms that regulate these events is of major interest because of their implications in fungal pathogenesis, cell differentiation and industry. Diploid cells of Saccharomyces cerevisiae transform from budding yeast to pseudohyphae when starved for nitrogen, giving the cells an advantage in food foraging, which is sensed by at least two signal transduction pathways: the MAP kinase (MAPK) and the PKA (cAMP-dependent protein kinase A) pathways. The output of these signalling pathways is the expression of pseudohypha-specific genes, whose expression profiles change and is accompanied by a G2 delay in the cell cycle and a prolonged period of polarized growth. Haploid yeast strains show a similar growth type after prolonged incubation on rich medium plates. The cells form chains and invade the agar on the edge of the colony, but they do not become elongated. This growth type is referred to as haploid invasive growth. Alcohols can also induce filamentous growth in S. cerevisiae, promoting aberrant and elongated morphology. The three forms of filamentous growth are revised in this article and also the pathways involved in sensing, signaling and signal transduction during filamentous growth.

O dimorfismo em fungos é um fenômeno complexo acionado por um grande número de fatores ambientais e consiste num padrão alternante e reversível de crescimento, oscilando entre formas elípticas e filamentosas de células. É de grande importância o entendimento dos mecanismos que regulam esses eventos devido as suas implicações na patogenicidade, diferenciação celular e indústria. Células diplóides de Saccharomyces cerevisiae mudam de células brotantes para pseudohifas quando em condições limitantes de nitrogênio, o que confere às células uma vantagem na procura por alimento. A deficiência de nitrogênio é 'percebida' por pelo menos dois caminhos sinalizadores: 'MAP kinase' (MAPK) e 'PKA' (cAMP-dependent protein kinase A). O resultado dessa sinalização é a expressão de genes específicos para filamentação, cujos perfis de expressão mudam e são acompanhados por um retardo da fase G2 do ciclo celular e um período prolongado de crescimento polarizado. Células haplóides mostram um tipo de crescimento similar após prolongada incubação em meio rico. As células formam cadeias e invadem o ágar na borda da colônia, mas não se tornam alongadas. Esse tipo de crescimento é conhecido como crescimento invasivo haplóide. Os álcoois podem também induzir crescimento filamentoso em S. cerevisiae, ocasionando uma morfologia alongada e aberrante. Nesse artigo revisamos as três formas de crescimento filamentoso incluindo os caminhos envolvidos na percepção, sinalização e transdução do sinal durante o crescimento filamentoso.

Hyphal-like extension and pseudohyphal formation in industrial strains of yeasts induced by isoamyl alcohol

Yeasts can produce pseudohyphae and hyphal-like extensions under certain growth conditions like isoamyl alcohol (IAA) induction, a chief constituent of fusel oil, which is a subproduct from the ethanolic fermentation. The morphology switch from yeast to a filamentous form can be troublesome to the process. In this work it was studied the influence of fusel alcohols, nitrogen sources (ammonium sulphate and leucine) and glifosate (a chemical maturator for sugar cane) added to a complex medium on some industrial strains of yeasts isolated from the fermentative process. Two industrial strains showed transition to hyphal-like extensions or pseudohyphae (clusters of cells) upon addition of IAA from 0.3 to 0.9% /v. The alterations were reversible when the yeasts were reinoculated in YEPD without IAA. Although pseudohyphae are a result of nitrogen-limited medium, we observed them as a result of IAA addition. No influence of the nitrogen source or isopropilic alcohol or glifosate was detected for any strain studied in the concentrations used.

As leveduras podem produzir pseudohifas e extensões semelhantes a hifas sob certas condições de crescimento, como a adição de álcool isoamílico. Esse álcool é o constituinte principal do óleo fusel, um subproduto da fermentação etanólica. A mudança de morfologia da levedura para a forma filamentosa pode causar problemas ao processo fermentativo. Neste trabalho, foi estudada a influência dos álcoois fusel (isoamílico e isopropílico), fontes de nitrogênio (sulfato de amônio e leucina) e glifosate (um maturador químico para cana-de-açúcar) adicionados a um meio complexo sobre linhagens industriais de leveduras isoladas do processo fermentativo. Duas linhagens industriais mostraram transição para pseudohifas (grupos de células) ou extensões semelhantes a hifas após adição de álcool isoamílico, de 0,3% a 0,9% v/v. Todas as alterações foram reversíveis quando as leveduras foram reinoculadas em YEPD sem adição de álcool. Apesar das pseudohifas serem comumente resultantes de meios com limitação de nitrogênio, observou-se que esta morfologia resultou da adição de álcool isoamílico. Não foi detectada nenhuma influência da fonte de nitrogênio ou álcool isopropílico ou glifosate para quaisquer linhagens estudadas.