Lack in introducing a new algorithm of laboratorial tests for detecting HTLV-1 and HTLV-2 infections in at-risk population / Falha na implantação de um novo algoritmo de testes laboratoriais para o diagnóstico de infecção por HTLV-1 e HTLV-2 em população de risco

Taking into account the problems on the human T-cell lymphotropic virus type 1 and 2 (HTLV-1 andHTLV-2) laboratory diagnosis in samples analyzed at Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, it was proposed anew algorithm employing two blood samples serially collected. The first serum sample was for serological screening using two enzyme immunoassays (EIAs), and the second blood sample collected on EDTA was for retesting EIAs and to confirm HTLV-1/2 infection by Western blot (WB) and polymerase chain reaction (PCR). The results obtained on 313 blood samples showed inefficiency of this algorithm as only 25% of EIAs positive samples had a second blood sample collected, and of which the blood were correctly collected on EDTA from three patients only. No feasible data were achieved to compare the actual performance of PCR in relation to WB. Thus, we started to use a simple algorithm (one step) for diagnosing HTLV-1/2 ona single blood sample collected on EDTA for screening and confirmatory assays.

Em vista dos problemas detectados no diagnóstico de infecção pelos vírus linfotrópicos de células T humanas dos tipos 1 e -2 (HTLV-1 e HTLV-2) em casuística encaminhada ao Instituto Adolfo Lutz de São Paulo, foi proposto um novo algoritmo de testes laboratoriais que utiliza duas amostras de sangue seqüenciais. Na primeira o sangue é coletado em tubo seco e feita triagem sorológica com dois ensaios imunoenzimáticos (EIAs). Na segunda, o sangue é coletado em tubo contendo o anticoagulante ácido etilenodiamino tetraacético (EDTA) para a repetição dos EIAs e para os testes confirmatórios de Western blot (WB) e reação em cadeia da polimerase (PCR). Os resultados obtidos com 313 amostras de sangue mostraram ineficiênciado algoritmo, pois nos casos EIA reagentes, apenas 25% tiveram uma segunda amostra de sangue coletada e destas, apenas três em EDTA. Portanto, não foi possível comparar o desempenho da PCR em relação ao WB. Um algoritmo simples, de coleta única de sangue em tubo contendo EDTA foi proposto e vem sendo utilizado para a triagem e para os testes confirmatórios.

Diagnosis of human T-cell lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) and type 2 (HTLV-2) infection in at-risk populations: past, present and future / Diagnóstico de infecção por vírus linfotrópicos de células T humanas dos tipos 1 (HTLV-1) e -2 (HTLV-2) em população de risco: passado, presente e futuro

Brazil presents the major number of human T lymphotropic virus type 1 and type 2 (HTLV-1 and HTLV-2) infections worldwide, with more than 2.5 million infected individuals. In 1993, HTLV serology was considered mandatory in blood banks. HTLV-1 causes adult T-cell leukemia and mielopathy associated with HTLV-1/tropical spastic paraparesis, in addition to other diseases. HTLV-2 has been pointed as the cause of some neurological manifestations and to interfere in HIV/AIDS progression. Commercially available serological assays, which identify specific antibodies, lack in correctly diagnosing, mostly for HTLV-2 infection. Several screening and confirmatory testing algorithm for HTLV-1/2 infections have been proposed, but none of them showed 100% efficiency in diagnosing high-risk individuals. Remarkable number of sera has resulted in indeterminate Western blot, and this could be a consequence of the viruses isolates employed for the kits composition. It has been proposed the use of molecular assays as confirmatory test, but they have not been employed in routine yet. Since 1991, the Immunology Department of Instituto Adolfo Lutz has led to carrying out the serological and molecular studies on HTLV-1/2 infections, and presently it has a challenge for improving the laboratory diagnosis of HTLV-2.

O Brasil é o país com o maior número de pessoas infectadas pelos vírus linfotrópicos de células T humanas dos tipos 1e -2 (HTLV-1 e HTLV2) com mais de 2,5 milhões de indivíduos infectados. Em 1993, a realização de testes sorológicos específicos tornou-se obrigatória em Bancos de Sangue. O HTLV-1 causa leucemia/linfoma de células T do adulto e mielopatia associada ao HTLV-1/paraparesia espástica tropical além de outras doenças, enquanto o HTLV-2 pode causar alguns quadros neurológicos e alterar a evolução de HIV/Aids. Os testes sorológicos que identificam anticorpos específicos disponíveis no mercado têm falhado no diagnóstico, principalmente de infecção por HTLV-2. Vários algoritmos de testes de triagem e confirmatórios têm sido propostos, mas nenhum deles se mostrou 100% eficiente com casuística de alto risco. Muitos soros resultam em padrão indeterminado no Western blot, e os isolados virais utilizados na composição dos kits podem ser a causa desses resultados. As técnicas de biologia molecular têm sido descritas como testes confirmatórios, mas não têm sido empregadas na rotina. Desde 1991, a Seção de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz tem estudado a infecção por HTLV-1/2, contribuindo para o diagnóstico sorológico e molecular, e tem como desafio implantar um teste laboratorial capaz de detectar infecção causada por cepas brasileiras de HTLV-2.