ABSTRACT
Naja kaouthia, Ophiophagus hannah, Bungarus fasciatus and Calloselasma rhodostoma are four venomous snakes indigenous to Malaysia. In the present study, their proteomic profile by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) have been separated and compared.
Subject(s)
Animals , Alismatales/classification , Spectrum Analysis/methods , Cobra Neurotoxin Proteins/analysis , Snake Bites , Poisons/analysisABSTRACT
Naja kaouthia, Ophiophagus hannah, Bungarus fasciatus and Calloselasma rhodostoma are four venomous snakes indigenous to Malaysia. In the present study, their proteomic profile by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) have been separated and compared.
Subject(s)
Animals , Alismatales/classification , Spectrum Analysis/methods , Snake Bites , Cobra Neurotoxin Proteins/analysis , Poisons/analysisABSTRACT
Naja kaouthia, Ophiophagus hannah, Bungarus fasciatus and Calloselasma rhodostoma are four venomous snakes indigenous to Malaysia. In the present study, their proteomic profile by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) have been separated and compared.(AU)
Subject(s)
Animals , Alismatales/classification , Poisons/analysis , Snake Bites , Cobra Neurotoxin Proteins/analysis , Spectrum Analysis/methodsABSTRACT
Snake neurotoxins (NTX) have proven to be valuable tools for the characterisation of muscular nicotinic acetylcholine receptor structure and function. It is very likely that they could also be utilised to identify subtypes of neuronal nicotinic receptors controlling specific functions within the central nervous system. In this study we examined the effects of long alpha NTX (alpha-bungarotoxin, alpha-Bgt, and alpha-cobratoxin, alpha-Cbt) and short alpha NTX (alpha-erabutoxin a, alpha-Ebt) as well as the anticholinesterase toxin fasciculin-2 (FAS), on the nicotine-evoked release of dopamine (DA) in the striatum, using the in vivo push-pull technique. The short toxins alpha-Ebt and FAS blocked the extracellular increase of DA evoked by nicotine at 4.2 microM concentrations and alpha-Ebt was more potent, as reflected by the blockade at the lower dose of 0.42 microM. In contrast, the long toxins showed a different profile of action. Alpha-Cbt did not show any blockade of the nicotine-evoked release of DA at the doses studied while alpha-Bgt did block it only at the higher dose (4.2 microM) These results indicate that short neurotoxins show a stronger interaction with striatal nicotinic receptors subtypes controlling DA release when compared to the long ones. This interaction of short neurotoxin polypeptides and presynaptic receptors may permit the further elucidation of the particular nicotinic receptor populations responsible for the modulation of striatal DA release.
Subject(s)
Corpus Striatum/metabolism , Dopamine/metabolism , Neurotoxins/pharmacology , Nicotine/pharmacology , Snakes/metabolism , Animals , Bungarotoxins/pharmacology , Cobra Neurotoxin Proteins/pharmacology , Corpus Striatum/drug effects , Dose-Response Relationship, Drug , Elapid Venoms/pharmacology , Erabutoxins/pharmacology , Male , Neurotoxins/metabolism , Osmolar Concentration , Rats , Rats, Inbred StrainsABSTRACT
The presence of multiple nicotinic acetylcholine receptor (AchR)-binding proteins and phospholipases A2 was detected in the venom of a member of the Elapinae subfamily, Micrurus nigrocinctus nigrocinctus. Multi-step chromatographies were used to isolate four AchR-binding proteins (Mnn-9, Mnn-4, Mnn-3C and Mnn-1A) and five basic PLA2s (nigroxins A, B, C1, C2 and C3). The Micrurus AchR-binding proteins are antigenically and structurally related to short- and long-chain alpha-neurotoxins from Naja. The nigroxins are antigenically similar and constitute a new antigenic subclass of PLA(2)s. Nigroxins A and B are class I PLA(2)s, structurally more related to enzymes from Bungarinae than to those from Hydrophinae/Laticaudinae. These data contribute to clarify the relationships between Micrurus venom proteins and other elapid toxins and may be useful to improve the neutralizing efficiency of antivenoms.
Subject(s)
Elapid Venoms/chemistry , Elapid Venoms/enzymology , Elapidae , Phospholipases A/isolation & purification , Proteins/isolation & purification , Receptors, Nicotinic/metabolism , Amino Acid Sequence , Animals , Cobra Neurotoxin Proteins/chemistry , Isoenzymes/analysis , Isoenzymes/chemistry , Isoenzymes/isolation & purification , Molecular Sequence Data , Phospholipases A/analysis , Phospholipases A/chemistry , Protein Binding , Proteins/chemistry , Proteins/metabolism , Sequence AnalysisABSTRACT
Se realizó uno estudio histoquímico en cortes criostáticos de electrocitos de Discopyge tschudii con el objeto de investigar la distribución de isoformas de actina y la posible relación entre estas y el AChR. La membrana ventral del electrocito fue diferenciada de la no inervada mediante beta-cobrotoxina, marcador específico del AChR, conjugada con isotiocinato de tetrametil rodamina y la histoquímica de la AChE. La falacidina, una toxina que tiene la propiedad de unirse con alta afindad a la forma filamentosa (F) de la actina, detectó a la misma exclusivamente en la cara dorsal del electrocito. Utilizando dos líneas de anticuerpos monoclonales (mAbs) anti-actina (QAB1 y QAB2 obtenidas empleando com inmunógeno actina de músculo pectoral de codorniz) evidenciamos distintas isofromas de actina en el electrocito. El mAb QAB1 mostró una fluorescencia puntual a nivel de las terminales nerviosas; el mAb QAB2, en cambio, se distribuyó en todo el citoplasma del electrocito. De los presentes resultados podemos concluir que cada una de las isoformas de actina coexistentes en el electrocito de D. tschudii posee una polaridad estructural distinta: 1) la actina filamentosa (F) localizada exclusivamente en la cara dorsal o no-inervada; 2) la isoforma de actina reconocible por el mAb QAB1, probablemente análoga a la descrita por Walter y cols. (1981) en el electrocito de Torpedo y 3) la reconocible poer el mAb QAB2, la cual puede corresponder a la actina monomérica (G) evidenciada por Kordely y cols. (1986, 1987). La actina detectada por métodos bioquímicos en las membranas ricas en AChR parece no corresponder a ninguna de las isoformas descritas aquí por métodos inmunocitoquímicos, o se halla en cantidades, no detectadas por estos métodos
Subject(s)
Animals , Antibodies, Monoclonal/metabolism , Electric Organ/metabolism , Receptors, Cholinergic/metabolism , Receptors, Nicotinic/metabolism , Acetylcholinesterase , Argentina , Cobra Neurotoxin Proteins/metabolism , Fluorescent Antibody Technique , Immunohistochemistry , TorpedoABSTRACT
Se realizó uno estudio histoquímico en cortes criostáticos de electrocitos de Discopyge tschudii con el objeto de investigar la distribución de isoformas de actina y la posible relación entre estas y el AChR. La membrana ventral del electrocito fue diferenciada de la no inervada mediante beta-cobrotoxina, marcador específico del AChR, conjugada con isotiocinato de tetrametil rodamina y la histoquímica de la AChE. La falacidina, una toxina que tiene la propiedad de unirse con alta afindad a la forma filamentosa (F) de la actina, detectó a la misma exclusivamente en la cara dorsal del electrocito. Utilizando dos líneas de anticuerpos monoclonales (mAbs) anti-actina (QAB1 y QAB2 obtenidas empleando com inmunógeno actina de músculo pectoral de codorniz) evidenciamos distintas isofromas de actina en el electrocito. El mAb QAB1 mostró una fluorescencia puntual a nivel de las terminales nerviosas; el mAb QAB2, en cambio, se distribuyó en todo el citoplasma del electrocito. De los presentes resultados podemos concluir que cada una de las isoformas de actina coexistentes en el electrocito de D. tschudii posee una polaridad estructural distinta: 1) la actina filamentosa (F) localizada exclusivamente en la cara dorsal o no-inervada; 2) la isoforma de actina reconocible por el mAb QAB1, probablemente análoga a la descrita por Walter y cols. (1981) en el electrocito de Torpedo y 3) la reconocible poer el mAb QAB2, la cual puede corresponder a la actina monomérica (G) evidenciada por Kordely y cols. (1986, 1987). La actina detectada por métodos bioquímicos en las membranas ricas en AChR parece no corresponder a ninguna de las isoformas descritas aquí por métodos inmunocitoquímicos, o se halla en cantidades, no detectadas por estos métodos (AU)