Seroprevalence of antibodies against smooth Brucella in small ruminants in the states of Sergipe, Bahia, Ceará and Paraíba / Soroprevalência de anticorpos contra Brucella lisa em pequenos ruminantes dos estados de Sergipe, Bahia, Ceará e Paraíba

Brucellosis is a zoonotic disease widespread almost all over the world, representing a significant economic and public health problem. Brucella melitensis, B. suis and B. abortus are considered the most pathogenic species for humans. The most virulent species, B. melitensis is endemic in many parts of the world, particularly the biovar 3 in the Mediterranean and Eastern Europe. Some Latin American countries are seriously affected by biovar 1, especially Mexico, Peru and northern Argentina. Furthermore, while Brazil is considered free of this etiologic agent, one recurrent question is whether this infection really does not occur in Brazil or there is a lack of research/data on the subject. To answer this question, this study aims to investigate the occurrence of antibodies against smooth Brucella in goats and sheep in the states of Sergipe, Paraíba, Ceará and Paraíba. All samples were screened by the Rose Bengal test (RBT). The complement fixation (CFT) and the fluorescence polarization (FPT) tests were used as confirmatory tests. There were no positive samples in the confirmatory tests (both CFT and FPT). We, therefore, conclude that this result reinforces the previous knowledge regarding the exotic status of B. melitensis infection in Brazil.

A brucelose é uma das doenças de caráter zoonótico mais difundidas no mundo, representando um grande problema econômico e de saúde pública. A Brucella melitensis, a B. suis e a B. abortus são consideradas as mais patogênicas espécies para humanos. A espécie apontada como a mais virulenta é a B. melitensis, endêmica em várias partes do mundo, particularmente o biovar 3 na região do Mediterrâneo e na Europa Oriental. Alguns países da América Latina são seriamente afetados pelo biovar 1, especialmente México, Peru e norte da Argentina. O Brasil é considerado livre desse agente etiológico, porém sempre há o questionamento se a infecção não ocorre ou se falta pesquisa. Diante dessa questão, o objetivo deste trabalho foi investigar a ocorrência de anticorpos contra amostras lisas de Brucella em caprinos e ovinos dos estados de Sergipe, Bahia, Ceará e Paraíba. Todas as amostras foram submetidas triagem pelo teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). Como testes confirmatórios, utilizou-se a reação de fixação de complemento (RFC) e também o teste de polarização fluorescente (TPF). Nenhuma amostra foi positiva nos testes confirmatórios (RFC e TPF). Esse resultado comprova que a infecção por B. melitensis é exótica no Brasil.

Brucelose bovina: aspectos gerais e contexto nos programas oficiais de controle

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial causada por bactérias do gênero Brucella. No Brasil, a brucelose bovina é enzoótica, e o seu controle/erradicação requer ações efetivas em todos os níveis do serviço público e ainda, engajamento da iniciativa privada. O Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose Animal –PNCEBT, instituído pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento -MAPA, possui como estratégia de atuação a adoção de medidas compulsórias (vacinação de bezerras e controle de trânsito), complementada por medidas de adesão voluntária (certificação de propriedades em livres). O diagnóstico oficial utiliza as provas do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), 2-Mercaptoetanol (2-ME), Fixação de Complemento (FC) e Teste de Polarização Flourescente (FPA). O presente artigo objetivou abordar os principais aspectos da brucelose bovina, e ainda, o contexto da mesma quanto aos programas oficiais de controle.

Brucellosis is a zoonosis of worldwide distribution caused by bacteria of the genus Brucella. In Brazil, bovine brucellosis is enzootic, and its control/erradication requires effective action at all levels of the public service, as well as private initiative engagement. The National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Animal Tuberculosis (PNCEBT), instituted by the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA), has the adoption of compulsory measures (heifer vaccination and traffic control), complemented by measures of voluntary membership (certification of free properties). The official diagnosis uses the Acidified Buffered Antigen (AAT), 2-Mercaptoethanol (2-ME), Complement Fixation (FC) and Flourescent Polarization Test (FPA) tests. The present article aimed to address the main aspects of bovine brucellosis, as well as its context regarding official control programs.

Brucelose bovina: aspectos gerais e contexto nos programas oficiais de controle

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial causada por bactérias do gênero Brucella. No Brasil, a brucelose bovina é enzoótica, e o seu controle/erradicação requer ações efetivas em todos os níveis do serviço público e ainda, engajamento da iniciativa privada. O Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose Animal –PNCEBT, instituído pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento -MAPA, possui como estratégia de atuação a adoção de medidas compulsórias (vacinação de bezerras e controle de trânsito), complementada por medidas de adesão voluntária (certificação de propriedades em livres). O diagnóstico oficial utiliza as provas do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), 2-Mercaptoetanol (2-ME), Fixação de Complemento (FC) e Teste de Polarização Flourescente (FPA). O presente artigo objetivou abordar os principais aspectos da brucelose bovina, e ainda, o contexto da mesma quanto aos programas oficiais de controle.(AU)

Brucellosis is a zoonosis of worldwide distribution caused by bacteria of the genus Brucella. In Brazil, bovine brucellosis is enzootic, and its control/erradication requires effective action at all levels of the public service, as well as private initiative engagement. The National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Animal Tuberculosis (PNCEBT), instituted by the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA), has the adoption of compulsory measures (heifer vaccination and traffic control), complemented by measures of voluntary membership (certification of free properties). The official diagnosis uses the Acidified Buffered Antigen (AAT), 2-Mercaptoethanol (2-ME), Complement Fixation (FC) and Flourescent Polarization Test (FPA) tests. The present article aimed to address the main aspects of bovine brucellosis, as well as its context regarding official control programs.(AU)

Brucella spp. in equines slaughtered in the south region of Brazil / Anticorpos contra Brucella spp. em equídeos da região Sul do Brasil abatidos em matadouro-frigorífico

Bacteria of the genus Brucella are widespread in many countries. These microorganisms can infect humans and many wild and domestic animal species. These bacteria have zoonotic potential, and can cause economic and public health problems since they can be transmitted by direct contact with sick animals, through consumption of contaminated milk, raw meat and its derivatives (Soares et al., 2015). Brucellosis is considered a chronic evolving disease, unusual in horses, predominantly caused by Brucella abortus. However, it is not characterized by reproductive disorders in horses, but primarily by abscess in the cervical region, bursa, tendons, and joints. Transmission is likely to occur via ingestion of contaminated water and pastures, especially in areas endemic for bovine brucellosis (Ribeiro et al., 2008). The slaughterhouse is a strategic point for obtaining information about the animal and animal products, edible or not. This study investigated the presence of anti-Brucella spp. immunoglobulins in the serum samples from horses slaughtered in a slaughterhouse in southern Brazil, to estimate the frequency of Brucella spp. antibodies and determine the spatial distribution of the cases.(AU)

Objetivou-se investigar a presença de imunoglobulinas anti-Brucella spp. em amostras de soros sanguíneos de equídeos abatidos em matadouro-frigorífico, sob Serviço de Inspeção Federal, localizado na região Sul do Brasil. Utilizaram-se 767 amostras de sangue de equídeos adultos abatidos no período de abril a maio de 2013. Os animais foram provenientes de 45 municípios dos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná. Para diagnóstico, foram utilizados os testes do antígeno acidificado tamponado (AAT), sendo os resultados positivos confirmados pelos testes de polarização fluorescente (TPF), reação de fixação de complemento (RFC) e 2-mercaptoetanol (2-ME). Foram sororreagentes no AAT 65 (8,47%) animais. Destes, apenas dois (3,07%) foram positivos também na RFC e três (4,62%) animais foram positivos no TPF. Apesar da baixa frequência de animais positivos para Brucella spp., pode-se afirmar que a infecção em equinos está presente na área estudada, o que é demonstrado pela presença de animais sororreatores. No âmbito da saúde animal, pública e ocupacional, sugere-se a atenção a essa doença, visando diminuir o risco de infecção.(AU)

Brucella spp. in equines slaughtered in the south region of Brazil / Anticorpos contra Brucella spp. em equídeos da região Sul do Brasil abatidos em matadouro-frigorífico

Bacteria of the genus Brucella are widespread in many countries. These microorganisms can infect humans and many wild and domestic animal species. These bacteria have zoonotic potential, and can cause economic and public health problems since they can be transmitted by direct contact with sick animals, through consumption of contaminated milk, raw meat and its derivatives (Soares et al., 2015). Brucellosis is considered a chronic evolving disease, unusual in horses, predominantly caused by Brucella abortus. However, it is not characterized by reproductive disorders in horses, but primarily by abscess in the cervical region, bursa, tendons, and joints. Transmission is likely to occur via ingestion of contaminated water and pastures, especially in areas endemic for bovine brucellosis (Ribeiro et al., 2008). The slaughterhouse is a strategic point for obtaining information about the animal and animal products, edible or not. This study investigated the presence of anti-Brucella spp. immunoglobulins in the serum samples from horses slaughtered in a slaughterhouse in southern Brazil, to estimate the frequency of Brucella spp. antibodies and determine the spatial distribution of the cases.(AU)

Objetivou-se investigar a presença de imunoglobulinas anti-Brucella spp. em amostras de soros sanguíneos de equídeos abatidos em matadouro-frigorífico, sob Serviço de Inspeção Federal, localizado na região Sul do Brasil. Utilizaram-se 767 amostras de sangue de equídeos adultos abatidos no período de abril a maio de 2013. Os animais foram provenientes de 45 municípios dos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná. Para diagnóstico, foram utilizados os testes do antígeno acidificado tamponado (AAT), sendo os resultados positivos confirmados pelos testes de polarização fluorescente (TPF), reação de fixação de complemento (RFC) e 2-mercaptoetanol (2-ME). Foram sororreagentes no AAT 65 (8,47%) animais. Destes, apenas dois (3,07%) foram positivos também na RFC e três (4,62%) animais foram positivos no TPF. Apesar da baixa frequência de animais positivos para Brucella spp., pode-se afirmar que a infecção em equinos está presente na área estudada, o que é demonstrado pela presença de animais sororreatores. No âmbito da saúde animal, pública e ocupacional, sugere-se a atenção a essa doença, visando diminuir o risco de infecção.(AU)

Serological response of Tabapuã heifers vaccinated with Brucella abortus strain 19 / Resposta sorológica de bezerras Tabapuãs vacinadas com cepa B19 de Brucella abortus

The study aimed to analyze the antibody response induced by vaccination with the standard dose of 60-120x109 organisms of Brucella abortus strain 19 in Tabapuã heifers, aged between 3 and 8 months, by serological tests recommended by the National Program for Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication (PNCEBT) for the diagnosis of bovine brucellosis. Serum samples of 72 animals were examined by four serological tests: rose Bengal test (RBT), standard agglutination test with the 2-mercaptoetanol (2-ME) test, complement fixation test (CFT) and fluorescence polarization assay (FPA), which was interpreted in two ways: variable cutoff and fixed cutoff. Heifers were bled immediately prior to vaccination, and after 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 and 360 days. Specificity of the tests was calculated, and the results were compared using the kappa statistic. FPA had a higher specificity than the other tests on the samples collected from 30 to 90 days after vaccination, but over time this difference decreased. At 270 days of vaccination, the specificity of RBT, 2-ME and RFC was 93.74%. The specificity of the FPA with variable cutoff was 87.5%, and with fixed cutoff was 100.0%. It was concluded that FPA had a higher discrimination ability for vaccination antibody titers shortly after vaccination, when compared with other tests recommended by the PNCEBT, and is a useful tool for the diagnosis of bovine brucellosis, besides being easy and quick to perform

Foi avaliada a resposta sorológica induzida pela vacinação com a dose padrão de 60-120x109 organismos da cepa B19 de Brucella abortus em bezerras Tabapuãs, entre 3 e 8 meses de idade, pelos testes sorológicos preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) para diagnóstico da brucelose bovina. Foram examinadas amostras de soro sanguíneo de 72 animais em quatro provas sorológicas: antígeno acidificado tamponado (AAT), teste de soroaglutinação lenta juntamente com o teste de 2-mercaptoetanol (2-ME), reação de fixação de complemento (RFC) e teste de polarização fluorescente (TPF), o qual foi interpretado de duas formas: ponto de corte variável e ponto de corte fixo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas imediatamente antes da vacinação, e após 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 e 360 dias. Foi calculada a especificidade dos testes e os resultados foram comparados pelo indicador kappa. O TPF apresentou especificidade mais elevada do que os outros testes nas amostras colhidas entre 30 e 90 dias após a vacinação. Aos 270 dias de vacinação, observou-se especificidade de 93,74% no AAT, no 2-ME e na RFC. No TPF com ponto de corte variável a especificidade foi 87,5% e com ponto de corte fixo foi 100,0%. O TPF apresentou maior capacidade de discriminação dos títulos de anticorpos vacinais logo após a vacinação, quando comparado com os outros testes preconizados pelo PNCEBT, mostrando-se um teste útil para o diagnóstico da brucelose bovina

Serological response of Tabapuã heifers vaccinated with Brucella abortus strain 19 / Resposta sorológica de bezerras Tabapuãs vacinadas com cepa B19 de Brucella abortus

The study aimed to analyze the antibody response induced by vaccination with the standard dose of 60-120x109 organisms of Brucella abortus strain 19 in Tabapuã heifers, aged between 3 and 8 months, by serological tests recommended by the National Program for Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication (PNCEBT) for the diagnosis of bovine brucellosis. Serum samples of 72 animals were examined by four serological tests: rose Bengal test (RBT), standard agglutination test with the 2-mercaptoetanol (2-ME) test, complement fixation test (CFT) and fluorescence polarization assay (FPA), which was interpreted in two ways: variable cutoff and fixed cutoff. Heifers were bled immediately prior to vaccination, and after 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 and 360 days. Specificity of the tests was calculated, and the results were compared using the kappa statistic. FPA had a higher specificity than the other tests on the samples collected from 30 to 90 days after vaccination, but over time this difference decreased. At 270 days of vaccination, the specificity of RBT, 2-ME and RFC was 93.74%. The specificity of the FPA with variable cutoff was 87.5%, and with fixed cutoff was 100.0%. It was concluded that FPA had a higher discrimination ability for vaccination antibody titers shortly after vaccination, when compared with other tests recommended by the PNCEBT, and is a useful tool for the diagnosis of bovine brucellosis, besides being easy and quick to perform(AU)

Foi avaliada a resposta sorológica induzida pela vacinação com a dose padrão de 60-120x109 organismos da cepa B19 de Brucella abortus em bezerras Tabapuãs, entre 3 e 8 meses de idade, pelos testes sorológicos preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) para diagnóstico da brucelose bovina. Foram examinadas amostras de soro sanguíneo de 72 animais em quatro provas sorológicas: antígeno acidificado tamponado (AAT), teste de soroaglutinação lenta juntamente com o teste de 2-mercaptoetanol (2-ME), reação de fixação de complemento (RFC) e teste de polarização fluorescente (TPF), o qual foi interpretado de duas formas: ponto de corte variável e ponto de corte fixo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas imediatamente antes da vacinação, e após 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300, 330 e 360 dias. Foi calculada a especificidade dos testes e os resultados foram comparados pelo indicador kappa. O TPF apresentou especificidade mais elevada do que os outros testes nas amostras colhidas entre 30 e 90 dias após a vacinação. Aos 270 dias de vacinação, observou-se especificidade de 93,74% no AAT, no 2-ME e na RFC. No TPF com ponto de corte variável a especificidade foi 87,5% e com ponto de corte fixo foi 100,0%. O TPF apresentou maior capacidade de discriminação dos títulos de anticorpos vacinais logo após a vacinação, quando comparado com os outros testes preconizados pelo PNCEBT, mostrando-se um teste útil para o diagnóstico da brucelose bovina(AU)

Comparação entre a reação de fixação de complemento e o teste de polarização fluorescente no diagnóstico sorológico da brucelose em bezerras Tabapuã 30 dias após a aplicação da vacina b19 / Comparison between complement fixation test and fluorescence polarization assay in the serodiagnosis of brucellosis in Tabapuã heifers 30 days after vaccination with b19 strain

A vacinação com a amostra B19 de Brucella abortus é fundamental nos programas de controle dessa infecção. Contudo, a vacina induz títulos decrescentes de anticorpos, mas que podem provocar resultados falso-positivos. Muitas técnicas sorológicas já foram avaliadas para discriminar anticorpos vacinais, e há estudos mostrando que o teste de polarização fluorescente (TPF) apresenta elevada capacidade de discriminação mesmo em animais vacinados há pouco tempo. O estudo teve por objetivo comparar os resultados obtidos pelo TPF com aqueles obtidos pela reação de fixação de complemento (RFC) 30 dias após a aplicação da dose-padrão de vacina B19 em 71 bezerras da raça Tabapuã. Antes da vacinação, nenhuma das bezerras apresentava títulos de anticorpos. O TPF foi realizado e interpretado conforme as recomendações do fabricante (Diachemix, USA), e a para a RFC foi utilizada a microtécnica 50% de hemólise recomendada por Alton et al. (1988). Os resultados obtidos nas técnicas foram comparados por meio de análise de regressão, após os títulos observados na RFC serem transformados em logaritmo de base 2. Os dados classificados em positivos e negativos foram comparados entre si usando o indicador kappa e o teste binomial. As análises de dados foram efetuadas por meio do software R. Apenas 6 animais apresentaram resultados negativos na RFC, e os títulos observados nesse teste chegaram a 1:128 (3 animais). O título mais frequente foi 1:16. O resultado mais elevado observado pelo TPF foi 127,3 mP. Observou-se uma associação positiva entre os resultados dos dois testes, com coeficiente de regressão 9,375 (IC 95%: 6,762 - 11,988; P = 1,149 x 10-9 ) e R² ajustado 0,4092. Na RFC, 8,45% dos animais apresentaram resultado negativo, ao passo que no TPF a proporção de negativos foi o dobro (16,9%). A diferença entre esses resultados foi estatisticamente significativa pelo teste binomial (P = 0,03125), e a concordância entre os resultados foi boa, com kappa 0,62 (IC 95%: 0,41 - 0,84). Os dados obtidos indicam que o TPF apresentou melhor capacidade do que a RFC para discriminar anticorpos induzidos pela vacina B19, porém essa capacidade não foi tão elevada quanto a descrita por outros autores.

Vaccination with Brucella abortus B19 is critical for the control programs of this infection. However, the vaccine induces decreasing antibodies titers, which can cause false-positive results. Many serological techniques have been evaluated to discriminate vaccine antibodies, and there are studies showing that the fluorescence polarization assay (FPA) has high discrimination ability even in animals recently vaccinated. The study aimed to compare the results obtained by FPA with those obtained by the complement fixation test (CFT) 30 days after standard vaccination with B19 of 71 Tabapuã heifers. Before vaccination, none of the calves showed antibody titers. The FPA was performed and interpreted according to the manufacturer's recommendations (Diachemix, USA). The CFT used the micro-technique with 50% haemolytic units as recommended by Alton et al. (1988). The results obtained with the two techniques were compared using regression analysis, after the titers observed for CFT were transformed into base-2 logarithm. The data, classified into positive and negative, were compared using the kappa index and the binomial test. Data analyses were performed using the software R. Only 6 animals tested negative according to CFT while the titers observed in this test reached 1:128 (3 animals). The most common titer was 1:16. The highest result was 127.3 mP observed by FPA. There was a positive association between the results of the two tests, with regression coefficient 9.375 (95% CI: 6.762 to 11.988, P = 1.149 x 10-9 ) and adjusted R² 0.4092. In CFT, 8.45% of the animals were negative, whereas the proportion of negative results according to FPA was double (16.9%). The difference between these results was statistically significant by the binomial test (P = 0.03125), and the agreement between the results was good, with kappa 0.62 (95% CI: 0.41 to 0.84). The data obtained indicate that the FPA was more efficient that CFT to discriminate B19 vaccine-induced antibodies, but this capability was not as high as that reported by other authors.

Comparação entre a reação de fixação de complemento e o teste de polarização fluorescente no diagnóstico sorológico da brucelose em bezerras Tabapuã 30 dias após a aplicação da vacina b19 / Comparison between complement fixation test and fluorescence polarization assay in the serodiagnosis of brucellosis in Tabapuã heifers 30 days after vaccination with b19 strain

A vacinação com a amostra B19 de Brucella abortus é fundamental nos programas de controle dessa infecção. Contudo, a vacina induz títulos decrescentes de anticorpos, mas que podem provocar resultados falso-positivos. Muitas técnicas sorológicas já foram avaliadas para discriminar anticorpos vacinais, e há estudos mostrando que o teste de polarização fluorescente (TPF) apresenta elevada capacidade de discriminação mesmo em animais vacinados há pouco tempo. O estudo teve por objetivo comparar os resultados obtidos pelo TPF com aqueles obtidos pela reação de fixação de complemento (RFC) 30 dias após a aplicação da dose-padrão de vacina B19 em 71 bezerras da raça Tabapuã. Antes da vacinação, nenhuma das bezerras apresentava títulos de anticorpos. O TPF foi realizado e interpretado conforme as recomendações do fabricante (Diachemix, USA), e a para a RFC foi utilizada a microtécnica 50% de hemólise recomendada por Alton et al. (1988). Os resultados obtidos nas técnicas foram comparados por meio de análise de regressão, após os títulos observados na RFC serem transformados em logaritmo de base 2. Os dados classificados em positivos e negativos foram comparados entre si usando o indicador kappa e o teste binomial. As análises de dados foram efetuadas por meio do software R. Apenas 6 animais apresentaram resultados negativos na RFC, e os títulos observados nesse teste chegaram a 1:128 (3 animais). O título mais frequente foi 1:16. O resultado mais elevado observado pelo TPF foi 127,3 mP. Observou-se uma associação positiva entre os resultados dos dois testes, com coeficiente de regressão 9,375 (IC 95%: 6,762 - 11,988; P = 1,149 x 10-9 ) e R² ajustado 0,4092. Na RFC, 8,45% dos animais apresentaram resultado negativo, ao passo que no TPF a proporção de negativos foi o dobro (16,9%). A diferença entre esses resultados foi estatisticamente significativa pelo teste binomial (P = 0,03125), e a concordância entre os resultados foi boa, com kappa 0,62 (IC 95%: 0,41 - 0,84). Os dados obtidos indicam que o TPF apresentou melhor capacidade do que a RFC para discriminar anticorpos induzidos pela vacina B19, porém essa capacidade não foi tão elevada quanto a descrita por outros autores.(AU)

Vaccination with Brucella abortus B19 is critical for the control programs of this infection. However, the vaccine induces decreasing antibodies titers, which can cause false-positive results. Many serological techniques have been evaluated to discriminate vaccine antibodies, and there are studies showing that the fluorescence polarization assay (FPA) has high discrimination ability even in animals recently vaccinated. The study aimed to compare the results obtained by FPA with those obtained by the complement fixation test (CFT) 30 days after standard vaccination with B19 of 71 Tabapuã heifers. Before vaccination, none of the calves showed antibody titers. The FPA was performed and interpreted according to the manufacturer's recommendations (Diachemix, USA). The CFT used the micro-technique with 50% haemolytic units as recommended by Alton et al. (1988). The results obtained with the two techniques were compared using regression analysis, after the titers observed for CFT were transformed into base-2 logarithm. The data, classified into positive and negative, were compared using the kappa index and the binomial test. Data analyses were performed using the software R. Only 6 animals tested negative according to CFT while the titers observed in this test reached 1:128 (3 animals). The most common titer was 1:16. The highest result was 127.3 mP observed by FPA. There was a positive association between the results of the two tests, with regression coefficient 9.375 (95% CI: 6.762 to 11.988, P = 1.149 x 10-9 ) and adjusted R² 0.4092. In CFT, 8.45% of the animals were negative, whereas the proportion of negative results according to FPA was double (16.9%). The difference between these results was statistically significant by the binomial test (P = 0.03125), and the agreement between the results was good, with kappa 0.62 (95% CI: 0.41 to 0.84). The data obtained indicate that the FPA was more efficient that CFT to discriminate B19 vaccine-induced antibodies, but this capability was not as high as that reported by other authors.(AU)

Effect of the water-soluble fraction of petroleum on microsomal lipid metabolism of Macrobrachium borellii (Arthropoda: Crustacea).

The effect of the water-soluble fraction of crude oil (WSF) on lipid metabolism was studied at critical metabolic points, namely fatty acid activation, enzymes of triacylglycerol and phospholipid synthesis, and membrane (lipid packing) properties in the freshwater prawn Macrobrachium borellii. To determine the effect of the contaminant, adults and embryos at different stages of development were exposed to a sublethal concentration of WSF for 7 days. After exposure, microsomal palmitoyl-CoA synthetase (ACS) showed a two-fold increase in adult midgut gland. Embryo's ACS activity was also affected, the increment being correlated with the developing stage. Endoplasmic reticulum acylglycerol synthesis was also increased by WSF exposure in adults and stage 5 embryos, but not at earlier stages of development. Triacylglycerol synthesis was particularly increased (18.5%) in adult midgut gland. The microsomal membrane properties were studied by fluorescent steady-state anisotropy, using the rotational behavior of the fluorescent probe 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH). Microsomes from midgut gland of WSF-exposed prawn showed no differences in fluidity. Nevertheless, microsomes incubated with WSF in vitro increased their fluidity in a temperature- and WSF concentration-dependent fashion. Both, aliphatic and aromatic hydrocarbons individually tested elicited an increase in membrane fluidity at 10 mg/l, but at 4 mg/l only nC10-C16 aliphatics did. In vivo results indicate that WSF increased the activity of microsomal enzymes that are critical in lipid metabolism, though this change was not due to direct alterations in membrane fluidity, suggesting a synthesis induction, or an enzyme-regulatory mechanism. Nevertheless, hydrocarbons elicited membrane fluidity alterations in in vitro experiments at concentrations that could be found in the environment after an oil spill.