Corneal transplantation and concomitant SARS-CoV-2 infection: a case report / Transplante de córnea e infecção concomitante por SARS-CoV-2: relato de caso

ABSTRACT This report was aimed at presenting a case of neurotrophic keratitis and concomitant SARS-CoV-2 infection in a patient who has recently undergone a corneal DALK transplant. One month after corneal transplantation with adequate corneal epithelialization, the patient presented neurotrophic keratitis with a torpid course of the corneal transplant coinciding with a SARS-CoV-2 infection, with an excessive host immune response. In addition, the patient presented a re-positivization of nasopharyngeal polymerase chain reaction of SARS-CoV-2 with past disease after starting treatment with autologous serum eye drops. The implications at the ophthalmological level of SARS-CoV-2 infection may be clarified as the time the illness progresses and we learn more about how it acts. In this case, the disparity of signs and symptoms, the antecedent of corneal surgery, and the possibility of a herpetic infection as a cause of the primary leukoma suggested neurotrophic keratitis. Nonetheless, the involvement of systemic SARS-CoV-2 infection in the process, triggering an excessive host immune response at the corneal level with an increase in inflammatory cytokines must be taken into account. No relationship was found between treatment with autologous serum and re-positivization of nasopharyngeal polymerase chain reaction, presenting the patient a favorable response to treatment.

RESUMO O objetivo deste relato foi apresentar um caso de ceratite neurotrófica e infecção concomitante por SARS-CoV-2 em paciente submetido recentemente a transplante de córnea DALK. Um mês após o transplante de córnea com adequada epitelização da córnea, o paciente apresentou ceratite neurotrófica com curso tórpido do transplante de córnea, coincidindo com infecção por SARS-CoV-2, com resposta imune excessiva do hospedeiro. Além disso, o paciente apresentou repositivização da reação em cadeia da polimerase nasofaríngeo de SARS-CoV-2, com doença pregressa após iniciar tratamento com colírio de soro autólogo. As implicações a nível oftalmológico da infecção por SARS-CoV-2, podem ser esclarecidas à medida que a doença progride e aprendemos mais sobre sua forma de atuação. Neste caso, a disparidade de sinais e sintomas, o antecedente de cirurgia de córnea e a possibilidade de infecção herpética como causa do leucoma primário sugeriram ceratite neurotrófica. No entanto, deve-se levar em consideração o envolvimento da infecção sistêmica por SARS-CoV-2 no processo, desencadeando uma resposta imune excessiva do hospedeiro no nível da córnea, com aumento de citocinas inflamatórias. Não foi encontrada relação entre o tratamento com soro autólogo e a repositivização da reação em cadeia da polimerase nasofaríngea, apresentando ao paciente uma resposta favorável ao tratamento.

Expresión antigénica ABH y carácter secretor en pacientes con lesiones orales precancerosas y cancerosas / Secretor status and ABH antigens expression in patients with oral lesion

Los antígenos ABH, productos de la interacción de dos sistemas genéticos Hh y ABO, están sujetos a leyes de herencia y pueden estar localizados no sólo en los eritrocitos sino también en la mayoría de las células humanas. El objetivo del este trabajo fue investigar la relación entre el carácter secretor de pacientes con lesiones orales pre-malignas y malignas y la expresión antigénica ABH en cortes histológicos de dichas lesiones. Se trabajó con muestras incluídas en tacos de parafina de pacientes con lesiones orales. Los pacientes fueron clasificados en 2 grupos a) lesiones pre-malignas y malignas y b) lesiones benignas. Se investigaron los antígenos ABH por la técnica de inmunoadherencia específica modificada. Se utilizó la adherencia al tejido vascular como control positivo y al tejido adiposo como control negativo. Los resultados fueron semicuantificados desde adherencia fuertemente positiva a negativa. El carácter secretor fue determinado por la técnica de inhibición de la hemaglutinación. En 21 de las 34 muestras se observó una débil expresión antigénica en áreas atípicas, y deleción total en las áreas histológicamente afectadas por neoplasia. En 8 muestras hubo pérdida total de los antígenos ABH tanto en áreas normales como patológicas, estos pacientes presentaron un mayor grado de malignidad y metástasis que aquellos que conservaron la antigenicidad. Los pacientes con lesiones orales pre-malignas y malignas presentaron un incremento del carácter no secretor (52,3 por ciento) respecto de la población control (19,5 por ciento) y de aquellos pacientes con lesiones orales benignas (15.4 por ciento). Se observó una importante asociación entre pacientes no secretores y deleción de los antigenos ABH en muestras de lesiones orales. Además, hemos encontrado, en el grupo no secretor, una mayor malignidad de las lesiones orales como así también una mayor presentación de displasia epitelial. El estudio del carácter secretor en los pacientes con lesiones orales...

Expresión antigénica ABH y carácter secretor en pacientes con lesiones orales precancerosas y cancerosas / Secretor status and ABH antigens expression in patients with oral lesion

Los antígenos ABH, productos de la interacción de dos sistemas genéticos Hh y ABO, están sujetos a leyes de herencia y pueden estar localizados no sólo en los eritrocitos sino también en la mayoría de las células humanas. El objetivo del este trabajo fue investigar la relación entre el carácter secretor de pacientes con lesiones orales pre-malignas y malignas y la expresión antigénica ABH en cortes histológicos de dichas lesiones. Se trabajó con muestras incluídas en tacos de parafina de pacientes con lesiones orales. Los pacientes fueron clasificados en 2 grupos a) lesiones pre-malignas y malignas y b) lesiones benignas. Se investigaron los antígenos ABH por la técnica de inmunoadherencia específica modificada. Se utilizó la adherencia al tejido vascular como control positivo y al tejido adiposo como control negativo. Los resultados fueron semicuantificados desde adherencia fuertemente positiva a negativa. El carácter secretor fue determinado por la técnica de inhibición de la hemaglutinación. En 21 de las 34 muestras se observó una débil expresión antigénica en áreas atípicas, y deleción total en las áreas histológicamente afectadas por neoplasia. En 8 muestras hubo pérdida total de los antígenos ABH tanto en áreas normales como patológicas, estos pacientes presentaron un mayor grado de malignidad y metástasis que aquellos que conservaron la antigenicidad. Los pacientes con lesiones orales pre-malignas y malignas presentaron un incremento del carácter no secretor (52,3 por ciento) respecto de la población control (19,5 por ciento) y de aquellos pacientes con lesiones orales benignas (15.4 por ciento). Se observó una importante asociación entre pacientes no secretores y deleción de los antigenos ABH en muestras de lesiones orales. Además, hemos encontrado, en el grupo no secretor, una mayor malignidad de las lesiones orales como así también una mayor presentación de displasia epitelial. El estudio del carácter secretor en los pacientes con lesiones orales...(AU)

Inmuno-hemo-reología: análisis termodinámico de la aglutinación eritrocitaria inmunológica / Immuno-hemo-reology: Thermodynamic analysis of immunological agglutination of erythrocites

La aglutinación inmunológica es la consecuencia de la reacción Ag-Ac que adhiere eritrocitos adyacentes. Los anticuerpos se fijan a los sitios antigénicos distribuidos sobre la superficie de la membrana eritrocitaria, actuando como anclajes moleculares para unir células adyacentes y formas aglutinadas. Una pequeña cantidad de energía es disipada durante la reacción. Si se suministra una cantidad de trabajo mecánico equivalente a la energía disipada, los aglutinatos pueden ser disociados. El trabajo mecánico es realizado por tensiones de corte generadas en un viscosímetro de tipo Couette. Se propone una nueva técnica que utiliza la retrodifusión de un haz láser para analizar la cinética de disociación de aglutinatos eritrocitarios inmunológicos, producida por cizallamiento de los aglutinatos en suspensión. La intensidad del láser, retrodifundida, aumenta en la medida que los aglutinatos son disociados por corte. El registro de la intensidad retrodifundida suministra una curva de disociación que es ajustada por una ecuación exponencial. Los parámetros que caracterizan esta ecuación muestran una buena correlación con la potencia de la aglutinación. La integración numérica de las curvas de disociación conduce a la obtención de un parámetro ED que estima la energía intercambiada en el proceso de disociación y, en consecuencia, la constante de afinidad.

Inmuno-hemo-reología: análisis termodinámico de la aglutinación eritrocitaria inmunológica / Immuno-hemo-reology: Thermodynamic analysis of immunological agglutination of erythrocites

La aglutinación inmunológica es la consecuencia de la reacción Ag-Ac que adhiere eritrocitos adyacentes. Los anticuerpos se fijan a los sitios antigénicos distribuidos sobre la superficie de la membrana eritrocitaria, actuando como anclajes moleculares para unir células adyacentes y formas aglutinadas. Una pequeña cantidad de energía es disipada durante la reacción. Si se suministra una cantidad de trabajo mecánico equivalente a la energía disipada, los aglutinatos pueden ser disociados. El trabajo mecánico es realizado por tensiones de corte generadas en un viscosímetro de tipo Couette. Se propone una nueva técnica que utiliza la retrodifusión de un haz láser para analizar la cinética de disociación de aglutinatos eritrocitarios inmunológicos, producida por cizallamiento de los aglutinatos en suspensión. La intensidad del láser, retrodifundida, aumenta en la medida que los aglutinatos son disociados por corte. El registro de la intensidad retrodifundida suministra una curva de disociación que es ajustada por una ecuación exponencial. Los parámetros que caracterizan esta ecuación muestran una buena correlación con la potencia de la aglutinación. La integración numérica de las curvas de disociación conduce a la obtención de un parámetro ED que estima la energía intercambiada en el proceso de disociación y, en consecuencia, la constante de afinidad. (AU)

Partículas lipoproteicas: concepto, aislamiento e implicancias clínicas / Lipoprotein particles: concept, isolation and clinical significance

La utilización de la cromatografía de afinidad con concanavalina A o de cromatografía de inmunoafinidad con anticuerpos anti apoB permite obtener dos grupos de lipoproteínas: las que contienen apoA y las que contienen apoB. El subfraccionamiento por cromatografía de inmunoafinidad secuencial de las partículas lipoproteicas que contienen apoA permite obtener a su vez tres mayores partículas lipoproteicas: LP-A-I, LP-A-I:A-II y LP-A-II. El subfraccionamiento a través de inmunoprecipitación secuencial o cromatografía de inmunoafinidad secuencial de las partículas lipoproteicas que contienen apoB permite obtener cinco mayores grupos de partículas: LP-B, LP-B:C, LP-B:E, LP-B:C:E y LP-A-II:B. La diferencia entre normo e hiperlipoproteinémicos sería el resultado de cambios cuantitativos (y no cualitativos) de las partículas lipoproteicas. En hipercolesterolémicos se destaca un aumento de LP-B en tanto que en hipertrigliceridémicos aumentan la LP-B-C y LP-B:C:E. Las drogas hipolipemiantes, independientemente de su mecanismo de acción, afectan en diferentes sentidos las concentraciones de las partículas lipoproteicas que contienen apoA y apoB. Bajas concentraciones de LP-A-I y elevadas de LP-B:C y LP-B:C:E se asocian con riesgo aterogénico

Partículas lipoproteicas: concepto, aislamiento e implicancias clínicas / Lipoprotein particles: concept, isolation and clinical significance

La utilización de la cromatografía de afinidad con concanavalina A o de cromatografía de inmunoafinidad con anticuerpos anti apoB permite obtener dos grupos de lipoproteínas: las que contienen apoA y las que contienen apoB. El subfraccionamiento por cromatografía de inmunoafinidad secuencial de las partículas lipoproteicas que contienen apoA permite obtener a su vez tres mayores partículas lipoproteicas: LP-A-I, LP-A-I:A-II y LP-A-II. El subfraccionamiento a través de inmunoprecipitación secuencial o cromatografía de inmunoafinidad secuencial de las partículas lipoproteicas que contienen apoB permite obtener cinco mayores grupos de partículas: LP-B, LP-B:C, LP-B:E, LP-B:C:E y LP-A-II:B. La diferencia entre normo e hiperlipoproteinémicos sería el resultado de cambios cuantitativos (y no cualitativos) de las partículas lipoproteicas. En hipercolesterolémicos se destaca un aumento de LP-B en tanto que en hipertrigliceridémicos aumentan la LP-B-C y LP-B:C:E. Las drogas hipolipemiantes, independientemente de su mecanismo de acción, afectan en diferentes sentidos las concentraciones de las partículas lipoproteicas que contienen apoA y apoB. Bajas concentraciones de LP-A-I y elevadas de LP-B:C y LP-B:C:E se asocian con riesgo aterogénico

[Erythrocyte CR1 receptor reactivity in patients with systemic lupus erythematosus]. / Reactividad del receptor eritrocitario CR1 en pacientes con lupus eritematoso sistémico.

Erythrocytes from 42 systemic lupus erythematosus (SLE) patients and 80 healthy volunteers were tested for the immunoadherence (CR1) receptor reactivity, observed by hemagglutination (IAHA) when incubating erythrocytes and aggregated human gamma-globulin (AHGG)-complement in appropriate proportions. Reactivity was expressed as the highest two-fold dilution of AHGG (2n) that induced hemagglutination. Erythrocytes of 15 SLE patients (35.7%) showed reactivity compared with 70 normal controls (87.5%). Both groups showed a trimodal distribution of IAHA titers in accordance with the three phenotypic groups described by other authors. Of the healthy population 72.5% belong to the intermediate reactivity mode (2(6) to 2(8)) and 64.3% of the SLE patients to the low reactivity group (negative). There was no correlation between CR1 defective expression and conventional activity parameters. This erythrocyte receptor involved in the immunocomplex clearance process, which constitutes 95% of the circulating CR1, is another factor that contributes to the pathophysiology of the disease when it is defective.

Reactividad del receptor eritrocitario CR1 en pacientes con lupus eritematoso sistémico / Erythrocyte CR1 receptor reactivity in patients with systemic lupus erythematosus

Se estudia la reactividad del receptor CR1 eritrocitario, por su capacidad de inmunoadherencia-hemoaglutinación (IAH) frente a distintas concentraciones de gamaglobulina humana agregada en presencia de suero fresco de cobayo como fuente de complemento, en glóbulos rojos de 80 voluntarios sanos y 42 pacientes con lupus eritematoso sistémico. Por este método se detecta reactividad del receptor CR1 en un 87,5% de la población sana versus un 35,7% de la población lúpica. Ambas poblaciones presentan una distribución trimodal de los títulos de IAHA. El 72,5% de la población sana se distribuye en el grupo de reactividad intermedia y 64,3% de la población lúpica en el de reactividad baja, en concordancia con otros autores que describen tres grupos fenotípicos. No se encuentra correlación entre la expresión defectuosa del CR1 y los parámetros convencionales de actividad. Este receptor eritrocitario comprometido en el procesamiento de inmunocomplejos, que constituye el 95% del CR1 circulante, es un factor más que contribuye a la fisiopatología de la enfermedad cuando su reactividad es defectuosa

Reactividad del receptor eritrocitario CR1 en pacientes con lupus eritematoso sistémico / Erythrocyte CR1 receptor reactivity in patients with systemic lupus erythematosus

Se estudia la reactividad del receptor CR1 eritrocitario, por su capacidad de inmunoadherencia-hemoaglutinación (IAH) frente a distintas concentraciones de gamaglobulina humana agregada en presencia de suero fresco de cobayo como fuente de complemento, en glóbulos rojos de 80 voluntarios sanos y 42 pacientes con lupus eritematoso sistémico. Por este método se detecta reactividad del receptor CR1 en un 87,5% de la población sana versus un 35,7% de la población lúpica. Ambas poblaciones presentan una distribución trimodal de los títulos de IAHA. El 72,5% de la población sana se distribuye en el grupo de reactividad intermedia y 64,3% de la población lúpica en el de reactividad baja, en concordancia con otros autores que describen tres grupos fenotípicos. No se encuentra correlación entre la expresión defectuosa del CR1 y los parámetros convencionales de actividad. Este receptor eritrocitario comprometido en el procesamiento de inmunocomplejos, que constituye el 95% del CR1 circulante, es un factor más que contribuye a la fisiopatología de la enfermedad cuando su reactividad es defectuosa (AU)

Simplification of immune adherence hemagglutination test for detection of rabies antibodies in human serum

A Reaçäo de Hemaglutinaçäo por Imunoaderência foi padronizada de maneira simplificada, para detecçäo de anticorpos rábicos em soros humanos. Esta reaçäo mostrou grande reprodutibilidade, maior que a apresentada pela clássica prova de soroneutralizaçäo em camundongos (SN). Ambas as provas mostraram alto grau de correlaçäo, ou seja, altos títulos em uma reaçäo correspondeu a altos títulos na outra; o mesmo ocorreu em relaçäo aos títulos baixos. A reaçäo de Hemaglutinaçäo por Imunoaderência, além de ser de execuçäo extremamente simples e rápida, tem custo bem menor se comparada a provas como a soroneutralizaçäo ou a imunofluorescência indireta. Pode, portanto, ser de grande utilidade em laboratórios com poucos recursos ou mesmo ser utilizada como uma prova de triagem para a titulaçäo de anticorpos rábicos

Simplification of immune adherence hemagglutination test for detection of rabies antibodies in human serum.

In the present work the immune adherence hemagglutination test (IAHA) was standardized in a simplified procedure. This test showed good reproducibility, better than the classical mice serum neutralization test (SN). The tests showed high correlation degree: high titers in one test corresponded to high titers in the other one, and the same occurred with low titers. The IAHA test is extremely simple, fast to perform, and of low cost when compared to tests such as SN or indirect immunofluorescence (IIF). It also proved to be useful in less sophisticated laboratories or even as a screening test for the titration of rabies antibodies.

Propuesta de caracterización y tipificación de proteínas monoclonales aplicable al laboratorio clínico / Proposal of characterization and typification of monoclonal proteins applicable to clinical laboratory

En el presente trabajo se incorporan y ordenan procedimientos para obtener la mayor información posible a nivel laboratorio clínico en la indagación de proteínas "M" y la definición de su clase (cadenas pesadas) y tipo (cadenas livianas). Se propone una secuencia de las siguientes técnicas: electroforesis, inmunoelectroforesis, inmunofijación, inmunodifusión radial cuantitativa, tratamientos despolimerizantes e inmunosustracción. La inmunosustracción, descripta por W. A. White y col., consiste en la remoción de la inmunoglobulina en estudio mediante un antisuero específico en presencia de polietilenglicol, separación del inmunocomplejo precipitado y posterior evaluación del sobrenadante mediante inmunofijación; se identifica la cadena liviana que pertenece a la inmunoblobulina sustraída por su ausencia al fijar con el antisuero correspondiente. Es particularmente útil cuando se desea establecer la correspondencia liviana/pesada en presencia de bandas homogéneas múltiples, identificar bandas menores enmascaradas en un fondo policlonal y excluir la presencia coincidente de cadenas livianas libres. Se aconseja incorporar el tratamiento despolimerizante con 2-mercaptoetanol previamente a la cuantificación de IgM por inmunodifusión radial ya que la comparación previa entre controles tratados y no tratados reveló una diferencia muy significativa cuando se analizó mediante contraste de diferencias entre pares homólogos (n = 12, test t = 37,2 p <0,01)

Propuesta de caracterización y tipificación de proteínas monoclonales aplicable al laboratorio clínico / Proposal of characterization and typification of monoclonal proteins applicable to clinical laboratory

En el presente trabajo se incorporan y ordenan procedimientos para obtener la mayor información posible a nivel laboratorio clínico en la indagación de proteínas "M" y la definición de su clase (cadenas pesadas) y tipo (cadenas livianas). Se propone una secuencia de las siguientes técnicas: electroforesis, inmunoelectroforesis, inmunofijación, inmunodifusión radial cuantitativa, tratamientos despolimerizantes e inmunosustracción. La inmunosustracción, descripta por W. A. White y col., consiste en la remoción de la inmunoglobulina en estudio mediante un antisuero específico en presencia de polietilenglicol, separación del inmunocomplejo precipitado y posterior evaluación del sobrenadante mediante inmunofijación; se identifica la cadena liviana que pertenece a la inmunoblobulina sustraída por su ausencia al fijar con el antisuero correspondiente. Es particularmente útil cuando se desea establecer la correspondencia liviana/pesada en presencia de bandas homogéneas múltiples, identificar bandas menores enmascaradas en un fondo policlonal y excluir la presencia coincidente de cadenas livianas libres. Se aconseja incorporar el tratamiento despolimerizante con 2-mercaptoetanol previamente a la cuantificación de IgM por inmunodifusión radial ya que la comparación previa entre controles tratados y no tratados reveló una diferencia muy significativa cuando se analizó mediante contraste de diferencias entre pares homólogos (n = 12, test t = 37,2 p <0,01) (AU)

Fatores de virulência em amostras de Escherichia coli enteropatogênicas para suínos isoladas no Brasil / Virulence factors present in strains of porcine enteropathogenic Escherichia coli isolated in Brazil

Trezentas e vinte e três amostras de Escherichia coli, isoladas de suínos com diarréia em Porto Alegre, RS, pertencentes aos sorogrupos 08, 09, 010, 035, 045, 064, 0108, 0115, 0119, 0138, 0139, 0141, 0147, 0149 e 0157, considerados enteropatogênicos para suínos, foram examinadas quanto à presença de fatores de virulência. A enterotoxina termolábil (LT) foi detectada através do teste de imunohemólise passiva em 56 amostras (17,3%), principalmente nos sorogrupos 08 e 0149, que totalizaram 52 amostras (92.85%) das 56 LT+. Amostras pertencentes aos sorogrupos 035, 0141 e 0157 também produziram LT, ao passo que as amostras pertencentes aos demais sorogrupos näo produziram estA enterotoxina. A enterotoxina termoestável, detectável pelo teste do camundongo recém-nascido, (STa), foi encontrada em 33 (10,2%) amostras pertencentes aos sorogrupos 09, 064, 0138, 0141 e 0149. Entre as 122 amostras STa-, examinadas para a detecçäo de enterotoxina termoestável, pelo teste de alça ligada de leitäo de 6 semanas, (STb), 31 (25,4%) foram positivas e pertenceram aos sorogrupos 035, 064, 0108, 0115, 0119, 0139, 0149 e 0157. Ao que se sabe, é a primeira vez que se relata no Brasil a produçäo de STb por amostras de E. coli de origem suína. Quanto às provas de microhemaglutinaçäo manose-resistente com hemácias de cobaia e cavalo, para a detecçäo dos antígenos K88 e K99, respectivamente, observou-se uma frequência maior de positividade entre as amostras LT+. A presença do antígeno 987P, também relatado pela primeira vez em nosso país, foi detectado sorologicamente em 12 (8,75%) das 137 amostras examinadas

Action of diethylcarbamazine citrate on protective immunity in rats infected with Nippostrongylus brasiliensis.

Rats made immune to Nippostrongylus brasiliensis and treated with diethylcarbamazine citrate (DEC) orally (250 mg/kg X 6) exhibited significant suppression of functional immunity. Similarly, administration of compound 48/80 (100 micrograms/rat i.p.) made the immune rats susceptible to challenge infection. Treatment of rats, with 22-day infection with compound 48/80, histamine (20 mg/rat, per os), or L-histidine (20 mg/rat, orally s.c.) did not accelerate worm expulsion. A massive complement-dependent adherence of peritoneal cells (1 X 10(8], isolated from immune DEC-treated and untreated rats, to infective larvae (L3) was observed. Likewise, heavy congregation of normal peritoneal cells to larvae was noticed when the cells were incubated with sera obtained from immune, DEC-treated or untreated rats. The rats receiving mesenteric lymph node cells (125 X 10(6) i.v.) or sera (0.5 ml or 1 ml X 3 i.p.), obtained from immune DEC-treated rats and challenged with infective larvae developed 50% more worms than those which received cells or serum from untreated immune donors. DEC appears to cause suppression of functional immunity and worm expulsion is not histamine mediated.

Antibody deficiency and alopecia.

Three patients are described with antibody deficiency, recurrent infections, and alopecia. One patient had congenital agammaglobulinemia; the other two patients, a brother and sister, had an incomplete antibody deficiency syndrome. The loss of hair in each patient was total; the history was typical of alopecia areata. The association of alopecia and antibody deficiency has not previously been described to our knowledge in children.