Expresión de los genes de mucinas MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17 en el epitelio conjuntival normal humano in vivo / Normal human conjunctival epithelium expresses MUC13, MUC15, MUC16 and MUC17 mucin genes

Objetivo: La superficie ocular expresa al menos cinco de los 17 genes de mucinas descritos hasta ahora. El presente estudio fue diseñado para determinar el perfil de expresión de los genes de mucinas en muestras obtenidas mediante citología por impresión conjuntival (CIC) de sujetos sanos. Métodos: Se aplicaron dos filtros de polietersulfona en la conjuntiva superior de ambos ojos de 8 voluntarios sanos. Posteriormente, se llevó a cabo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) usando el ARN total extraído y retrotranscrito de las muestras de CIC, para posteriormente estudiar la expresión de todos los genes humanos de mucinas conocidos. Después de la amplificación, los productos de la PCR fueron sometidos a electroforesis en un gel de agarosa al 1,5 por ciento y teñidos con bromuro de etidio para confirmar la obtención de una única banda cuando los ADNc son amplificados con los adecuados oligonucleótidos. Resultados: Se detectaron los transcritos de los genes de mucinas conjuntivales publicados anteriormente MUC1, MUC2, MUC4, MUC5AC y MUC7 en todas las muestras. Además, también se detectaron los transcritos de los genes de mucinas MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17. Los productos amplificados mediante PCR convencional mostraron el tamaño de amplificación esperado. No se detectaron transcritos de los genes de mucinas MUC3A, MUC3B, MUC5B, MUC6, MUC8, MUC11 y MUC12. Conclusión: Por primera vez, se ha demostrado la expresión de cuatro ARNm de mucinas (MUC13, MUC15, MUC16 y MUC17) en el epitelio conjuntival humano de voluntarios sanos, hecho aún inédito. La función de estos genes habrá de ser estudiada posteriormente. (AU)

Lágrimas artificiales sin conservantes: estudio comparativo in vitro / In vitro toxicity of non-preserved artificial-tear formulations

Objetivo: Analizar los posibles efectos tóxicos de tres preparados comerciales de lágrimas artificiales sin conservantes sobre células conjuntivales humanas in vitro. Métodos: Cultivos de células epiteliales de conjuntiva humana fueron expuestos a la acción de los preparados comerciales Cellufresh, Oculotect y Acuolens durante 1, 3 y 24 horas. Transcurrido dicho tiempo se estudió su posible efecto tóxico, expresado como porcentaje de Viabilidad Celular, y se analizó la presencia de alteraciones en la superficie de las células mediante microscopia electrónica de barrido (MEB). El estudio incluyó como control negativo de toxicidad células expuestas a medio de cultivo DMEM-F12 sin suplementos y como control positivo, células expuestas a una solución de cloruro de benzalconio al 0,005 por ciento en dicho medio de cultivo. Resultados: La Viabilidad Celular obtenida tras incubar 1 ó 3 horas con Cellufresh y Oculotect fue similar a la del control negativo, si bien disminuyó algo cuando el tiempo de incubación fue de 24 horas. Sin embargo, la Viabilidad Celular tras incubar con Acuolens fue significativamente menor para todos los tiempos. La MEB mostró que con Cellufresh y Oculotect el aspecto general de las células era muy similar al observado en las células control. Sin embargo, con Acuolens se observaron alteraciones acusadas, tanto tras 1 hora como tras 3 horas de incubación, y una notable pérdida celular. Conclusión: De las lágrimas artificiales sin conservantes en estudio, Acuolens resultó ser la más tóxica in vitro, tanto a tiempos cortos como largos (AU)