RESUMEN
P34 is an antimicrobial peptide produced by Bacillus sp. P34, isolated from the intestinal contents of a fish from the Amazon basin. This peptide showed antibacterial properties against Gram-positive and Gram-negative bacteria and was characterized as a bacteriocin like substance. It was demonstrated that the peptide P34 exhibited antiviral activity against feline herpesvirus type 1 in vitro. The aim of this work was to evaluate P34 for its antiviral properties in vitro, using RK 13 cells, against the equine arteritis virus, since it has no specific treatment and a variable proportion of stallions may become persistently infected. The results obtained show that P34 exerts antiviral and virucidal activities against equine arteritis virus, probably in the viral envelope. The antiviral assays performed showed that P34 reduces significantly the viral titers of treated cell cultures. The mechanism of action of P34 seems to be time/temperature-dependent. This peptide tends to be a promising antiviral compound for the prevention and treatment of arteriviral infections since it has a high therapeutic index. However, more detailed studies must be performed to address the exact step of viral infection where P34 acts, in order to use this peptide as an antiviral drug in vivo in the future.(AU)
P34 é um peptídeo antimicrobiano produzido pelo Bacillus sp. P34, isolado do conteúdo intestinal de um peixe na Bacia Amazônica. Esse peptídeo demonstrou propriedades antibacterianas contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas e foi caracterizado como uma substância do tipo bacteriocina. Foi demonstrado que o peptídeo P34 exibiu atividade antiviral contra o herpesvírus felino tipo 1 in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar o P34 in vitro, em cultivo de células RK 13, contra o vírus da arterite equina, uma vez que não há tratamento específico e uma variável proporção de garanhões pode permanecer persistentemente infectada. Os resultados obtidos mostram que o peptídeo exerce atividade antiviral e virucida contra o vírus da arterite equina, agindo provavelmente no envelope viral. Os ensaios antivirais realizados demonstraram que o P34 reduz significativamente os títulos do vírus nas células infectadas e tratadas. O mecanismo de ação do P34 parece ser tempo/temperatura dependente. Esse peptídeo tende a ser um antiviral promissor para o tratamento e a prevenção das infecções por arterivírus, tendo em vista que ele possui um alto índice terapêutico. Contudo, estudos mais detalhados devem ser realizados para precisar a etapa exata da infecção viral em que o P34 age, para que ele possa ser usado como antiviral in vivo no futuro.(AU)
Asunto(s)
Equartevirus , Péptidos/farmacología , Bacillus , Antiinfecciosos/análisis , Antivirales/uso terapéuticoRESUMEN
Abstract Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus (Cope, 1860), is a species widely distributed in the Pampa Domain, occurring in Rio Grande do Sul, Argentina and Uruguay, mainlyin the pampa region. In the coastal region of southern Brazil this is serpent is considered one of the most abundant. The purpose of the present study is to describe the techniques of sperm evaluation in vitro for E. poecilogyrus sublineatus in the coastal plain of Rio Grande do Sul, Brazil. After laparatomy the efferent vases were collected and the semen was diluted in 1ml Beltsville Thawing Solution. The characteristics of motility, membrane integrity, mitochondria, acrosome, DNA, cell viability and cellular functionality were evaluated. Fluorescent probes were used for the evaluation of sperm structure in epifluorescence microscope. With the techniques described, it was possible to identify intact and injured cells, enabling the determination of cell characteristics for the spring season (October and November). It was observed in the analyses that 80% of sperm cells were mobile and that 84.1 ± 8.0% of sperm membranes were intact. The standards found were of 48 ± 13.8% of intact acrosome, 73.6 ± 6.0 of perfect DNA and of 91.8 ± 4.0 of functional mitochondria. Thus, these values from the sperm analysis can be used as standards for the species Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus.
Resumo Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus (Cope, 1860), é uma espécie amplamente distribuída no Domínio Pampa, ocorrendo no Rio Grande do Sul, Argentina e Uruguai, principalmente na região dos pampas. Na região costeira do extremo sul do Brasil essa é uma das serpentes consideradas mais abundantes. O objetivo deste estudo é descrever as técnicas de avaliação espermática in vitro para E. poecilogyrus sublineatus da planície costeira do Rio Grande do Sul, Brasil. Após laparatomia os vasos eferentes foram coletados e o sêmen diluído em 1ml Beltsville Thawing Solution. Foram avaliadas as características de motilidade, integridade de membrana, mitocôndria, acrossoma, DNA, viabilidade celular e funcionalidade celular. Foram utilizadas sondas fluorescentes para avaliação das estruturas espermática em microscópio de epifluoescência. Com as técnicas descritas foram possível identificar células integras e lesadas, podendo determinar as características celulares para o período de primavera (outubro e novembro). Nas análises foi observado que 80% das células espermáticas estavam móveis e que 84,1 ± 8,0% das membranas espermáticas estavam íntegras. Os padrões encontrados para foram de 48 ± 13,8% de acrossoma íntegro, 73,6 ± 6,0 de DNA íntegro e de 91,8 ± 4,0 de mitocôndria funcional. Desta forma, esses valores das análises espermáticas podem ser utilizados como padrão para a espécie Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus.