RESUMEN
Two clinical isolates of the opportunist pathogen Pseudomonas aeruginosa named PAO1 and PA14 are commonly studied in research laboratories. Despite the isolates being closely related, PA14 exhibits increased virulence compared to that of PAO1 in various models. To determine which players are responsible for the hypervirulence phenotype of the PA14 strain, we elected a transcriptomic approach through RNA sequencing. We found 2,029 genes that are differentially expressed between the two strains, including several genes that are involved with or regulated by quorum sensing (QS), known to control most of the virulence factors in P. aeruginosa Among them, we chose to focus our study on QslA, an antiactivator of QS whose expression was barely detectable in the PA14 strain according our data. We hypothesized that lack of expression of qslA in PA14 could be responsible for higher QS expression in the PA14 strain, possibly explaining its hypervirulence phenotype. After confirming that QslA protein was highly produced in PAO1 but not in the PA14 strain, we obtained evidence showing that a PAO1 deletion strain of qslA has faster QS gene expression kinetics than PA14. Moreover, known virulence factors activated by QS, such as (i) pyocyanin production, (ii) H2-T6SS (type VI secretion system) gene expression, and (iii) Xcp-T2SS (type II secretion system) machinery production and secretion, were all lower in PAO1 than in PA14, due to higher qslA expression. However, biofilm formation and cytotoxicity toward macrophages, although increased in PA14 compared to PAO1, were independent of QslA control. Together, our findings implicated differential qslA expression as a major determinant of virulence factor expression in P. aeruginosa strains PAO1 and PA14.IMPORTANCEPseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen responsible for acute nosocomial infections and chronic pulmonary infections. P. aeruginosa strain PA14 is known to be hypervirulent in different hosts. Despite several studies in the field, the underlining molecular mechanisms sustaining this phenotype remain enigmatic. Here we provide evidence that the PA14 strain has faster quorum sensing (QS) kinetics than the PAO1 strain, due to the lack of QslA expression, an antiactivator of QS. QS is a major regulator of virulence factors in P. aeruginosa; therefore, we propose that the hypervirulent phenotype of the PA14 strain is, at least partially, due to the lack of QslA expression. This mechanism could be of great importance, as it could be conserved among other P. aeruginosa isolates.
Asunto(s)
Proteínas Bacterianas/genética , Pseudomonas aeruginosa/genética , Percepción de Quorum/genética , Transducción de Señal/genética , Biopelículas/crecimiento & desarrollo , Regulación Bacteriana de la Expresión Génica/genética , Sistemas de Secreción Tipo VI/genética , Virulencia/genética , Factores de Virulencia/genéticaRESUMEN
Introducción. En el presente artículo se presenta la línea de investigación sobre salud mental abierta en mayo de 1997 por un equipo interdepartamental formado por estudiantes de tercer ciclo y profesores de la Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Madrid. Objetivos. Investigar algunos aspectos psicosociales en estudiantes de medicina, haciendo especial referencia a su estado de salud mental, cambios de expectativas respecto a sus estudios y motivos para elegir y seguir en la carrera. Diseño. Estudio transversal de prevalencia en alumnos de medicina de la Universidad Autónoma de Madrid durante los cursos 1996/1997 y 1997/1998, con cortes en los cursos primero, tercero y sexto. Metodología. Autoaplicación del Cuestionario de Salud Mental de Goldberg (GHQ-28) y otras preguntas de elaboración propia a alumnos de los cursos primero, tercero y sexto (n = 860), previa explicación de los objetivos del trabajo por miembros del equipo. Los cuestionarios se responden de forma voluntaria, garantizando la confidencialidad. Los datos son procesados y analizados con el paquete estadístico SPSS. Resultados. GHQ-28 "positivo" indica malestar psicológico. Se obtuvieron un 63 per cent de cuestionarios positivos en primer curso, un 69 per cent en el tercero y un 25 per cent en el sexto curso. En los cursos primero y tercero dicho porcentaje duplica el obtenido en otras poblaciones de jóvenes universitarios. Encontramos diferencias significativas entre las expectativas previas a la carrera y su visión actual de la realidad p < 0,001). También se observaron cambios en los motivos referidos por los estudiantes para iniciar la licenciatura de medicina y aquellos por los que dicen continuar en ella. Se encontró una asociación significativa entre algunas situaciones relacionadas con los estudios y un GHQ-28 "positivo" (p < 0,01). Conclusiones. Los elevados porcentajes de GHQ-28 "positivo" en los cursos primero y tercero plantean la existencia de factores relacionados con los estudios de medicina y/o condiciones personales de los propios estudiantes que llegan a producir malestar psicológico. Las asociaciones del GHQ-28 con factores académicos nos plantean nuevos interrogantes e indican posibles direcciones para continuar (AU)
