RESUMEN
The genetic control of in vitro direct regeneration was tested on seedlings of ten open-pollinated progenies from the base population of Atherton origin of Eucalyptus grandis at University of São Paulo (Brazil). Seeds were germinated in vitro, after twenty days, distal hypocotyls segments from 196 seedlings per progeny were inoculated in culture media at Generalized Complete Randomized Block Design, with two experimental units per block and seven repetitions, using the interaction blocks by progenies as an estimate of the experimental error. At week 14 from the inoculation bud induction was evaluated. Regeneration among progenies were significantly different (P 0.0001). Regeneration varied from 11 to 60%. The narrow-sense heritability between means of experimental units for in vitro regeneration was height. (h2m=0.94), indicating a strong genetic control of the trait within the population and also a high maternal effect. High variability within the study sample was found.
Com o objetivo de avaliar o controle genético da regeneração direta in vitro a partir de plântulas de Eucalyptus grandis, foram utilizadas sementes de 10 progênies de polinização aberta da população base, origem Atherton, localizada em Anhembi, Estado de São Paulo. Vinte dias de cultivo após a germinação, 196 segmentos distais dos hipocótilos por progênie foram inoculados in vitro num Delineamento em Blocos Completos Aleatorizado Generalizado, com duas unidades experimentais por bloco e sete repetições por bloco, usando a interação blocos por progênie como estimadora do erro experimental. Após 14 semanas de cultivo, foram feitas avaliações da regeneração. Houve diferenças significativas de regeneração entre as progênies (P 0,0001) com extremos de regeneração de 11% a 60%. A herdabilidade no sentido restrito entre as médias das unidades experimentais do caráter foi alta (h2m=0,94), indicando que houve um forte controle genético na regeneração in vitro dentro da população. Houve também alta variabilidade dentro da amostra estudada, assim como um forte efeito do progenitor materno sobre a regeneração.
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The genetic control of in vitro direct regeneration was tested on seedlings of ten open-pollinated progenies from the base population of Atherton origin of Eucalyptus grandis at University of São Paulo (Brazil). Seeds were germinated in vitro, after twenty days, distal hypocotyls segments from 196 seedlings per progeny were inoculated in culture media at Generalized Complete Randomized Block Design, with two experimental units per block and seven repetitions, using the interaction blocks by progenies as an estimate of the experimental error. At week 14 from the inoculation bud induction was evaluated. Regeneration among progenies were significantly different (P 0.0001). Regeneration varied from 11 to 60%. The narrow-sense heritability between means of experimental units for in vitro regeneration was height. (h2m=0.94), indicating a strong genetic control of the trait within the population and also a high maternal effect. High variability within the study sample was found.
Com o objetivo de avaliar o controle genético da regeneração direta in vitro a partir de plântulas de Eucalyptus grandis, foram utilizadas sementes de 10 progênies de polinização aberta da população base, origem Atherton, localizada em Anhembi, Estado de São Paulo. Vinte dias de cultivo após a germinação, 196 segmentos distais dos hipocótilos por progênie foram inoculados in vitro num Delineamento em Blocos Completos Aleatorizado Generalizado, com duas unidades experimentais por bloco e sete repetições por bloco, usando a interação blocos por progênie como estimadora do erro experimental. Após 14 semanas de cultivo, foram feitas avaliações da regeneração. Houve diferenças significativas de regeneração entre as progênies (P 0,0001) com extremos de regeneração de 11% a 60%. A herdabilidade no sentido restrito entre as médias das unidades experimentais do caráter foi alta (h2m=0,94), indicando que houve um forte controle genético na regeneração in vitro dentro da população. Houve também alta variabilidade dentro da amostra estudada, assim como um forte efeito do progenitor materno sobre a regeneração.
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Three Eucalyptus camaldulensis provenances were submitted to water deficit induced in vitro through the addition of 100, 400 and 1000 mM of sorbitol to the growth medium. Shoots were evaluated for growth in height, production of dry matter, moisture content and total proteins in SDS-PAGE (sodium dodecil sulphate-poliacrylamide gel electrophoresis). An inverse relationship was observed between the growth in height, that decreased with the increase of water deficit, and the production of dry matter. There was a general increase in content of total protein in relation to the reduction of the osmotic potential of the growth medium, and the diferenciation of two proteins (36 and 45 kDa).
Três procedências de Eucalyptus camaldulensis foram submetidas a deficiência hídrica induzida in vitro através da adição de 100, 400 e 1000 mM de sorbitol ao meio de cultura. As gemas foram avaliadas de acordo com seu crescimento em altura, produção de matéria seca, porcentagem de umidade e proteínas totais em eletroforese de gel de poliacrilamida. Observou-se uma relação inversa entre o crescimento em altura, que sofreu redução com o aumento do deficit hídrico, e a produção de matéria seca. Houve um aumento geral do conteúdo de proteínas totais em relação a redução do potencial osmótico do meio de cultura e a expressão diferenciada de duas proteínas de 36 e 45 quilodaltons (kDa).
RESUMEN
Shoots of E. camaldulensis seedlings from three distinct provenances were submitted to three different levels of in vitro water deficit induced by the addition of sorbitol in the growth media. Transversal sections from the leaf blades and stems were anatomically analysed using the historesin inclusion technique. Shoots from the different provenances presented distinct responses to the treatments. The Gilbert River provenance was the most sensible. The basic alterations found on the anatomical structure in response to the water deficit were: cell collapse, late tissue differentiation, vascular bundle and epidermis disorganization, and alterations on the mesophyll and epidermis thickness.
Três procedências distintas de E. camaldulensis foram submetidas à diferentes níveis de deficiência hídrica in vitro induzida através da adição de sorbitol em meio de cultura. Cortes transversais de limbos foliares e caules foram analisados anatomicamente através da técnica de emblocamento em historesina. As procedências apresentaram respostas diferenciadas, sendo Gilbert River a mais sensível. As alterações básicas da estrutura anatômica em função da deficiência hídrica são as seguintes: colapso das células, atraso na diferenciação dos tecidos, desorganização do feixe vascular e da epiderme e alterações na espessura do mesofilo e epiderme.
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Shoots of E. camaldulensis seedlings from three distinct provenances were submitted to three different levels of in vitro water deficit induced by the addition of sorbitol in the growth media. Transversal sections from the leaf blades and stems were anatomically analysed using the historesin inclusion technique. Shoots from the different provenances presented distinct responses to the treatments. The Gilbert River provenance was the most sensible. The basic alterations found on the anatomical structure in response to the water deficit were: cell collapse, late tissue differentiation, vascular bundle and epidermis disorganization, and alterations on the mesophyll and epidermis thickness.
Três procedências distintas de E. camaldulensis foram submetidas à diferentes níveis de deficiência hídrica in vitro induzida através da adição de sorbitol em meio de cultura. Cortes transversais de limbos foliares e caules foram analisados anatomicamente através da técnica de emblocamento em historesina. As procedências apresentaram respostas diferenciadas, sendo Gilbert River a mais sensível. As alterações básicas da estrutura anatômica em função da deficiência hídrica são as seguintes: colapso das células, atraso na diferenciação dos tecidos, desorganização do feixe vascular e da epiderme e alterações na espessura do mesofilo e epiderme.
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Three Eucalyptus camaldulensis provenances were submitted to water deficit induced in vitro through the addition of 100, 400 and 1000 mM of sorbitol to the growth medium. Shoots were evaluated for growth in height, production of dry matter, moisture content and total proteins in SDS-PAGE (sodium dodecil sulphate-poliacrylamide gel electrophoresis). An inverse relationship was observed between the growth in height, that decreased with the increase of water deficit, and the production of dry matter. There was a general increase in content of total protein in relation to the reduction of the osmotic potential of the growth medium, and the diferenciation of two proteins (36 and 45 kDa).
Três procedências de Eucalyptus camaldulensis foram submetidas a deficiência hídrica induzida in vitro através da adição de 100, 400 e 1000 mM de sorbitol ao meio de cultura. As gemas foram avaliadas de acordo com seu crescimento em altura, produção de matéria seca, porcentagem de umidade e proteínas totais em eletroforese de gel de poliacrilamida. Observou-se uma relação inversa entre o crescimento em altura, que sofreu redução com o aumento do deficit hídrico, e a produção de matéria seca. Houve um aumento geral do conteúdo de proteínas totais em relação a redução do potencial osmótico do meio de cultura e a expressão diferenciada de duas proteínas de 36 e 45 quilodaltons (kDa).
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Colli and shoots were produced from embryo axis and plumule from Dipterix odorata cultivate on Murashige & Skoog (1962) basic medium complemented with 2,4 - D (2 mg/1) and 6 - BAP (0,5 mg/1) medium A and with 6 - BAP (2 mg/1) medium B. On medium A, the embryo axis produced callus white on medium B the embryo axis and the plumule produced shoots. The embryo axis cultivated on medium B developed shoots from root típs. The callus and the shoots dis not develop after transfering.
Calos e gemas foram produzidas a partir de embriões extirpados e plúmulas de Dipterix odorata cultivada no meio de cultura básico de Murashige & Skoog (1962) complementados com 2,4 - D (2 mg/1) e 6 - BAP (0,5 mg/1) meio de cultura A e com 6 - BAP (2 mg/1) meio de cultura B. No meio de cultura A os embriões produziram calos enquanto que no meio de cultura B, tanto os embriões como as plúmulas deram origem a gemas. Os embriões cultivados no meio de cultura B desenvolveram gemas a partir de radículas.Tanto calos como as gemas não se desenvolveram após a repicagem.
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Colli and shoots were produced from embryo axis and plumule from Dipterix odorata cultivate on Murashige & Skoog (1962) basic medium complemented with 2,4 - D (2 mg/1) and 6 - BAP (0,5 mg/1) medium A and with 6 - BAP (2 mg/1) medium B. On medium A, the embryo axis produced callus white on medium B the embryo axis and the plumule produced shoots. The embryo axis cultivated on medium B developed shoots from root típs. The callus and the shoots dis not develop after transfering.
Calos e gemas foram produzidas a partir de embriões extirpados e plúmulas de Dipterix odorata cultivada no meio de cultura básico de Murashige & Skoog (1962) complementados com 2,4 - D (2 mg/1) e 6 - BAP (0,5 mg/1) meio de cultura A e com 6 - BAP (2 mg/1) meio de cultura B. No meio de cultura A os embriões produziram calos enquanto que no meio de cultura B, tanto os embriões como as plúmulas deram origem a gemas. Os embriões cultivados no meio de cultura B desenvolveram gemas a partir de radículas.Tanto calos como as gemas não se desenvolveram após a repicagem.
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SUMMARY The "angelim pedra" (Dinizia excelsa Ducke - Leguminosae) is a forest species of the Amazonian Region of economic importance, but is little studied. Its seeds show dormancy and germination heterogeneity, that creates difficulties in seedling formation. The authors of the present work studied methods of breaking this seed dormancy, and the influence of seed coat in germination. It is recommended that to break dormancy, scarification with sulfuric acid, mechanical scarification, or thermic action be utilized.
Resumo O angelim pedra (Dinizia excelsa Ducke Leguminosae) é uma essência florestal da região amazônica de importância econômica, mas pouco estudada. Suas sementes apresentam dormência e heterogeneidade de germinação, o que dificulta a atividade de formação de mudas. Os autores, no presente trabalho, estudam métodos de quebra de dormência destas sementes, e a influência do tegumento na germinação. Recomendam ainda para a quebra da dormência, escarificações com ácido sulfúrico, escarificações mecânicas ou ação térmica.
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SUMMARY The "angelim pedra" (Dinizia excelsa Ducke - Leguminosae) is a forest species of the Amazonian Region of economic importance, but is little studied. Its seeds show dormancy and germination heterogeneity, that creates difficulties in seedling formation. The authors of the present work studied methods of breaking this seed dormancy, and the influence of seed coat in germination. It is recommended that to break dormancy, scarification with sulfuric acid, mechanical scarification, or thermic action be utilized.
Resumo O angelim pedra (Dinizia excelsa Ducke Leguminosae) é uma essência florestal da região amazônica de importância econômica, mas pouco estudada. Suas sementes apresentam dormência e heterogeneidade de germinação, o que dificulta a atividade de formação de mudas. Os autores, no presente trabalho, estudam métodos de quebra de dormência destas sementes, e a influência do tegumento na germinação. Recomendam ainda para a quebra da dormência, escarificações com ácido sulfúrico, escarificações mecânicas ou ação térmica.