Common bile duct perforation due to choledocholithiasis in a cat with gallbladder agenesis.

Case summary: An 8-year-old neutered male domestic shorthair cat was presented for further investigation of anorexia, vomiting and lethargy. Abdominal ultrasonography and contrast-enhanced CT revealed choledocholithiasis with suspected bacterial peritonitis and non-visualisation of the gallbladder. During surgery, the common bile duct was noted to be perforated, and a cholelith was found in the abdominal cavity. No gallbladder was confirmed during surgery. Three months postoperatively, the cat underwent CT cholangiography and absence of the gallbladder with a vestigial duplicated gallbladder was diagnosed. Relevance and novel information: Gallbladder agenesis is extremely rare in cats, with only one previous report, but several dogs have been diagnosed based on CT cholangiography and laparoscopy. This report describes gallbladder agenesis concurrent with choledocholithiasis in an adult cat and represents the first report of CT cholangiography in a cat with gallbladder agenesis.

DnaJ-promoted binding of DnaK to multiple sites on σ32 in the presence of ATP.

The Escherichia coli DnaK chaperone system is a canonical heat shock protein 70 (Hsp70) chaperone system comprising Hsp70, Hsp40, and a nucleotide exchange factor. Although Hsp40 is known to facilitate the effective binding of Hsp70 to substrates, the role of Hsp40 in Hsp70-substrate interactions has not yet been fully elucidated. Using the E. coli heat shock transcription factor σ(32) as a substrate in the DnaK chaperone system, we here provide new insight into the Hsp70-substrate interaction. When DnaK-σ(32) complexes formed under various conditions were analyzed by gel filtration, several DnaK-σ(32) complexes with different molecular masses were detected. The results indicated that multiple DnaK molecules simultaneously bind to σ(32), even though it has been suggested that DnaK interacts with σ(32) at a molar ratio of 1:1. Two σ(32) mutants, L201D σ(32) and I54A σ(32), which have reduced affinities for DnaK and DnaJ (Hsp40), respectively, were used to further characterize DnaK-σ(32) complex formation. Pulldown assays demonstrated that the affinity of I54A σ(32) for DnaK was similar to that of wild-type σ(32) in the absence of DnaJ, whereas L201D σ(32) exhibited an extremely low affinity for DnaK. However, in the presence of ATP and DnaJ, the yield of DnaK eluted with L201D σ(32) was much higher than that eluted with I54A σ(32). These results indicate that there are multiple DnaK binding sites on σ(32) and that DnaJ strongly promotes DnaK binding to any site in the presence of ATP, regardless of the intrinsic affinity of DnaK for the site.

Synergistic binding of DnaJ and DnaK chaperones to heat shock transcription factor σ32 ensures its characteristic high metabolic instability: implications for heat shock protein 70 (Hsp70)-Hsp40 mode of function.

Escherichia coli heat shock transcription factor σ(32) is rapidly degraded by ATP-dependent proteases, such as FtsH and ClpYQ. Although the DnaK chaperone system (DnaK, DnaJ, and GrpE) promotes σ(32) degradation in vivo, the precise mechanism that is involved remains unknown. Our previous results indicated that σ(32) mutants containing amino acid substitution in the N-terminal half of Region 2.1 are markedly stabilized in vivo. Here, we report the further characterization of these mutants by examining purified σ(32) mutants in vitro. Surprisingly, I54A σ(32), a very stable mutant, is more susceptible to ClpYQ and FtsH proteases than wild-type σ(32), indicating that the stability of σ(32) does not always reflect its susceptibility to proteases. Co-precipitation and gel filtration analyses show that purified σ(32) mutants exhibit a reduced affinity for DnaJ, leading to a marked decrease in forming a complex with DnaK in the presence of DnaJ and ATP. Other mutants with modestly increased stability (A50S σ(32) and K51E σ(32)) show an intermediate efficiency of complex formation with DnaK, suggesting that defects in binding to DnaK and DnaJ are well correlated with metabolic stability; effective interaction with DnaK promotes σ(32) degradation in vivo. We argue that the stable and effective interaction of heat shock protein 70 (Hsp70) with a substrate polypeptide may generally require the simultaneous binding of heat shock protein 40 (Hsp40) to distinct sites on the substrate.

[Follow-up study of diastolic paradoxical flow in the left ventricle with apical hypertrophic cardiomyopathy].

OBJECTIVES: Left ventricular apical asynergy and cardiovascular complications were evaluated in patients with apical hypertrophic cardiomyopathy, in whom apical diastolic paradoxical flow toward the base could be detected by Doppler color flow echocardiography. METHODS: Twenty-nine patients with apical hypertrophic cardiomyopathy were followed up with echocardiographic examinations for at least 5 years. They were divided into three groups: those who persistently exhibited paradoxical flow (Group A, n = 13), those in whom paradoxical flow developed during the follow-up period (Group B, n = 8), and those in whom paradoxical flow was not detected during the follow-up period (Group C, n = 8). Peak flow velocity and duration of paradoxical flow, the presence or absence of apical asynergy, and cardiovascular complications were evaluated. RESULTS: The mean follow-up period was 7.3 +/- 1.4 years. In Groups A and B, the apical wall motion deteriorated over time, whereas there was no asynergy change in Group C. Further, peak flow velocity and duration of paradoxical flow increased throughout the follow-up period in Groups A and B, and were correlated with the severity of apical asynergy. Ventricular tachycardia and cerebrovascular complications also occurred more often in patients with paradoxical flow. CONCLUSIONS: The presence of paradoxical flow was related to the severity of apical asynergy and cardiovascular complications, and may be an important marker for evaluating the clinical course of patients with apical hypertrophic cardiomyopathy.

Níveis séricos de aminotransferases, bilirrubinas e gama-glutamil transpeptidase após a administraçäo de óleo de copaíba em ratos / Serum levels of aminotransferases, bilirrubins and gama-glutamyltranspeptidase after copaiba oil administration in rats

O óleo de copaiíba é um óleo-resina empregado como fitoterápico na regiäo Amazônica. Sua utilizaçäo se faz de forma empírica e pouco se conhece à respeito de seus efeitos sobre os sistemas orgânicos. Objetivo: Verificar os níveis séricos de aminotransferases, bilirrubinas e gama-glutamil transpeptidase após a administraçäo do óleo. Métodos: Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos, pesando entre 250 e 300g, distribuídos em 2 grupos: Grupo Cop (n=10) submetidos diariamente à gavagem com administraçäo de 0,63m1/kg do óleo, por 5 dias; Grupo P (n=10), animais nos quais nenhuma substância foi administrada. Ao sexto dia, em ambos os grupos, procedeu-se anestesia inalatória e obtençäo de 3ml de sangue da VCI para dosagem dos níveis séricos de ALT, AST, bilirrubinas e GGT. Resultados: Os resultados obtidos com o GCop foram comparados com os do GP e analisados estatisticamente pelo teste t -Student. O GCop apresentou níveis de ALT, AST e GGT significantemente mais baixos que o GP (p<0,01), enquanto os níveis de BT elevaram-se às custas da fraçäo direta. Conclusäo: O óleo de copaíba altera os níveis das aminotrans-ferases, bilirrubinas e GGT, sem alterar os níveis da fraçäo indireta.

Níveis séricos de aminotransferases, bilirrubinas e gama-glutamil transpeptidase após a admininstração de óleo de copaíba em ratos

Copaiba oil is a oil-resin used as a phytotherapic in Amazon region in a folkloric way. This use is empirical and little is known about its effect in the organic systems. Objective: To determine serum levels of aminotransferases, bilirrubins and gama-glutamyl transpeptidase after copaiba oil administration. Methods: Male Wistar rats (n=20) divided in two groups of 10 animals: Group Cop which received a daily oral administration of copaiba oil, 0.63ml/kg, during 5 days; Group P in which any substance was administrated. In the sixth day the animals of both groups were submitted to inalatory anesthesia, laparotomy and collection of blood samples (3ml) from inferior vena cava for the determination of serum aminotransferases, bilirrubins and gama-glutamyl transpeptidase levels. Results: The results were compared between groups and analyzed by t-Student test. Group Cop showed AST, ALT and GGT levels significantly decreased when compared with Gruop P (p 0.01), while total bilirrubins levels increased by its direct fraction. Conclusion: Copaiba oil can alter serum levels of aminotransferases, bilirrubins and gama-glutamyl transpeptidase, showing a possible interaction between this substance and liver, but this considerations require posterior evalutaion.

O óleo de copaíba é um óleo-resina empregado como fitoterápico na região Amazônica. Sua utilização se faz de forma empírica e pouco se conhece à respeito de seus efeitos sobre os sistemas orgânicos. Objetivo: Verificar os níveis séricos de aminotransferases, bilirrubinas e gama-glutamil transpeptidase após a administração do óleo. Métodos: Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos, pesando entre 250 e 300g, distribuídos em 2 grupos: Grupo Cop (n=10) submetidos diariamente à gavagem com administração de 0,63ml/kg do óleo, por 5 dias; Grupo P (n=10), animais nos quais nenhuma substância foi administrada. Ao sexto dia, em ambos os grupos, procedeu-se anestesia inalatória e obtenção de 3ml de sangue da VCI para dosagem dos níveis séricos de ALT, AST, bilirrubinas e GGT. Resultados: Os resultados obtidos com o GCop foram comparados com os do GP e analisados estatisticamente pelo teste t -Student. O GCop apresentou níveis de ALT, AST e GGT significantemente mais baixos que o GP (p 0,01), enquanto os níveis de BT elevaram-se às custas da fração direta. Conclusão: O óleo de copaíba altera os níveis das aminotransferases, bilirrubinas e GGT, sem alterar os níveis da fração indireta.

Aspectos microscópicos do fígado de ratos após administração do óleo de copaíba / Microscopic aspects of the rats liver after copaiba oil administration

A utilização de plantas medicinais é uma prática comumente observada nos países em desenvolvimento. Desta forma objetivou-se verificar os efeitos microscópicos do óleo de copaíba no fígado de ratos. Para tal foram utilizados 50 Rattus norvegicus albinus, machos, distribuídos em cinco grupos: Grupo Copaíba 0,63 (GC0,63 ml/Kg de óleo de copaíba), Grupo copaíba 0,06 (GC0,06 ml/Kg de óleo de copaíba), Grupo Água (GA0,63 ml/kg de água), Grupo milho (GM0,63 ml/Kg de óleo de milho) e grupo Padrão (GP). As substâncias foram administradas diariamente por 14 dias, quando os animais foram submetidos à eutanásia. Os resultados obtidos demonstraram que microscopicamente, não foram encontradas alterações hepatocelulares, porém, foi verificado congestão vascular nas veias portais e centrolobulares, maior no grupo GC0,63 em relação aos grupos GC0,06, GM, GA e GP (<0,05). Já no grupo GC0,06, apesar de não haver diferença estatística, foi observado congestão em maior intensidade que nos grupos GM, GA e GP (p>0,05) o que sugere haver uma relação dose dependente. Os autores concluem que, de acordo com a metodologia empregada, o óleo de copaíba tanto na dose de 0,06 ml/kg como de 0,63 ml/kg foi capaz de promover congestão vascular no fígado de ratos, sugerindo ação dose dependente.

Técnica de obtenção do peso seco de fígado de rato / Technique to obtain the rat liver dry weight

O fígado é um órgão dotado de extrema capcidade regenerativa. No estudo desta característica vários métodos são empregados. A determinação da relação entre seu peso seco (PS) e úmido (PU) é um parâmetro que pode ser empregado em laboratórios que não dispõem de técnicas mais modernas. Deste modo, o objetivo deste artigo é estudar esta relação após dessecação em estufa. Foram utilizados 40 animais (Rattus norvegicus albinus), distribuídos nos grupos GM (machos) e GF (fêmeas). Realizada ressecção do órgão, que foi separado em seus lobos e pesado em balaça de precisão e acondicionado em estufa a uma temperatura de 50ºC, por seis dias. O peso do fígado foi aferido a cada 24 horas. Houve um decréscimo estatisticamente significante (p<0,01) nos valores absolutos e percentuais referentes aos lobos hepáticos nas primeiras 48 horas, não havendo significância estatística nos períodos posteriores. A percentagem referente a cada lobo em relação