Brucella spp. detection in blood, semen and vaginal swabs in dogs from the urban area of Cuiabá/MT, Brazil / Detecção de Brucella spp. em sangue, sêmen e swab vaginal de cães da região metropolitana de Cuiabá/MT

Brucellosis is a chronic contagious infectious zoonosis that affects the reproductive system of animals, causing economic and health losses. This study diagnosed Brucella spp. in commercial kennels, comparing PCR positivity in different biological samples (blood, semen, and vaginal secretion), as well as correlating these findings with reproductive indices. Hence, we analyzed dogs from kennels in the neighboring cities of Cuiabá and Várzea Grande/MT, Brazil. The reproductive histories of the animals were obtained and blood samples were collected from all animals (n=35); in addition, semen samples were collected from males (n=9) and vaginal swabs were collected from females (n=24) to perform polymerase chain reactions (PCR) for brucellosis. The findings indicated that vaginal swab PCR is an effective test to identify Brucella spp. For males, there were more positive results when testing blood samples, possibly because the male animals were at the beginning stage of infection.

A Brucelose é uma zoonose infectocontagiosa crônica que afeta o sistema reprodutivo dos animais, gerando prejuízos econômicos e sanitários. O objetivo do presente estudo foi diagnosticar a Brucella spp. em canis comerciais, comparando a positividade na PCR em diferentes amostras biológicas (sangue, sêmen e secreção vaginal) e correlacionar estes achados aos índices reprodutivos. Foram analisados cães provenientes de canis no município de Cuiabá e Várzea Grande/MT. Foi realizado o levantamento do histórico reprodutivo dos animais e em seguida, foi coletado o sangue em todos os animais (n=35), sendo sêmen nos machos (n=9) e swab vaginal (n=24) nas fêmeas para realização da técnica de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) para brucelose. De acordo com os resultados, conclui-se que a PCR de swab vaginal é um teste efetivo para identificar Brucella spp., porém em machos, verifica-se que no sangue obtivemos mais positivos, possivelmente por estarem no início da infecção.

Colheita de sêmen e inseminação artificial em onças-pintadas (Panthera onca) / Semen collection and artificial insemination in jaguars (Panthera onca)

A onça-pintada encontra-se classificada como "quase ameaçada" na lista vermelha de animais ameaçados da União Internacional para Conservação da Natureza (IUCN), com tendência ao declínio na América Latina, o que pode afetar o fluxo gênico elevando o risco de endogamia. Técnicas de reprodução assistida (TRAs) como colheita de sêmen e inseminação artificial (IA), são ferramentas que podem se tornar essenciais a manutenção da diversidade genética desses animais. A colheita de sêmen pode ser realizada por eletroejaculação (EEJ) ou colheita farmacológica (CF), sendo que podem ser aplicadas individualmente ou associadas, embora EEJ tenha se mostrado mais eficiente em inseminação artificial (IA) com sêmen a fresco. Para realização de IA a utilização de progestina oral (altrenogest), seguida da aplicação de gonadotropinas exógenas (Gonadotropina Coriônica equina-eCG e Hormônio Luteinizante suíno-pLH), tem se mostrado eficiente, promovendo ovulações consistentes. IA intratubárica (IA-IT) mostrou-se eficiente, tendo a vantagem de utilizar sêmen com baixo número de espermatozoides. O sucesso alcançado com o nascimento do primeiro filhote de Panthera onca utilizando TRAs se deve a vários fatores, dentre eles, a utilização de um novo protocolo hormonal ajustado à espécie; e a utilização da IA-IT, que possibilitou a utilização de sêmen com reduzido número de espermatozoides viáveis por inseminação.(AU)

The jaguar is classified as "near threatened" according International Union for Conservation of Nature red list, with a decreasing trend in the population of Latin America, increasing the risk of inbreeding. Assisted reproduction techniques (ARTs), such as semen collection and artificial insemination (AI), are tools that can become essential to maintain the genetic diversity of jaguars. Semen collection can be performed by electroejaculation (EEJ) or pharmacological collection (PC); and can be applied individually or associated, however EEJ was more efficient for artificial insemination (AI) with fresh semen. To perform Artificial Insemination (AI), oral progestin (altrenogest) followed exogenous gonadotropins (Gonadotropin Chorionic equine-eCG e Hormone Luteinizing porcine-pLH) application was efficient, promoting consistent ovulations. Similarly, laparoscopic oviductal insemination (IA-IT) was efficient, with the advantage to use low viable spermatozoa number by insemination. The success of jaguar cub birth using ARTs is due to several factors, among than, a new hormonal protocol adjusted to the species; and the use of IA-IT, which allowed the reduction in the number of sperm by insemination.(AU)

Reprodução ex situ de felinos silvestres e seus desafios / Challenges of ex situ reproduction in wild cats

A reprodução ex situ de felinos silvestres assegura a sobrevivência das espécies ameaçadas por meio do estabelecimento e manutenção de populações viáveis em cativeiro. O conhecimento da biologia reprodutiva básica é essencial para o desenvolvimento de planos de manejo reprodutivo (PMRs) eficientes, seja pela reprodução natural ou pela aplicação de técnicas de reprodução assistida (TRAs). Os PMRs visam garantir a representatividade das espécies quanto à variabilidade genética e demográfica baseada nos studbooks. Entretanto, o pareamento de animais selecionados pelos PMRs deve levar em conta, além de fatores genéticos e demográficos, fatores comportamentais e o fenótipo dos animais, uma vez que pode haver consequências negativas caso descendentes de gerações futuras sejam reintroduzidos na natureza. As TRAs estão cada vez mais sendo desenvolvidas para auxiliar na manutenção de populações geneticamente viáveis ex situ que possam contribuir geneticamente com populações in situ. A criopreservação de sêmen e a inseminação artificial (IA) são as TRAs utilizadas atualmente pelos PMR nacionais e internacionais, no entanto, são muitos os desafios para que as populações cativas se reproduzam de maneira adequada visando a manutenção de uma população viável que possa contribuir com populações de vida livre no futuro.(AU)

Reproductive management plans are essential to ensure that imperiled populations maintain adequate genetic and demographic variability and remain representative of the species as a whole. Basic reproductive biology knowledge is essential for the development of efficient reproductive management plans (PMPs), either through natural breeding or through assisted reproductive techniques (ARTs). The PMPs aim to ensure the representativeness of the species in terms of genetic and demographic variability based on studbooks. However, the specific animal pairings should be maintaining adequate genetic, behavioral and the phenotype of the animals, ensuring proper reintroduction of animals into the wild. ARTs have been explored as a means to enhance the conservation of endangered species, focused on maintaining genetic diversity through enhanced animal propagation. Semen cryopreservation and artificial insemination (AI) are used by national and international PMRs, however, there are many challenges for captive populations reproduction in order to maintain a viable population that can contribute for freeliving populations in the future.(AU)

Técnicas alternativas para colheita de sêmen de cão / Alternative dog semen collection techniques

Métodos eficazes para a colheita de sêmen permitem avanços na inseminação artificial em cães domésticos e canídeos selvagens geneticamente valiosos, permitindo a manutenção de linhagens genéticas e possibilitando a propagação de material genético post-mortem, bem como, diminuindo os custos e os riscos de transporte de animais para reprodução. Dentre os métodos de colheita de sêmen utilizados em cães, podemos destacar os métodos ejaculatórios como a manipulação digital e a eletroejaculação; e os métodos não ejaculatórios, que compreendem aqueles que envolvem os espermatozóides coletados do epidídimo, em casos de óbito ou orquiectomia ou em animais submetidos a vasectomia. Mais recentemente a colheita farmacológica de sêmen foi descrita em cães como um método não ejaculatório eficiente. Essa nova metodologia de colheita de sêmen surge como mais uma alternativa para facilitar a colheita de sêmen em cães domésticos que não aceitam a manipulação digital e eliminar a necessidade da eletroejaculação em animais selvagens. No entanto, os protocolos anestésicos utilizados ainda apresentam alguns efeitos colaterais indesejáveis, indicando que novos protocolos, mais seguros para a colheita de sêmen via cateterismo uretral necessitam ser testados.

Effective methods for semen collection are determinant for artificial insemination advances in genetically valuable domestic dogs and wild canids, allowing the genetic maintenance and enabling the post-mortem genetic material use, as well as, reducing the animals transporting costs and risks for breeding. The semen collection methods used in canids are ejaculatory methods, such as digital manipulation in dogs and electroejaculation in wild canids; and non-ejaculatory methods, which include sperm collected from epididymis after death or vasectomy. More recently, pharmacological semen collection was described in dogs as an efficient non-ejaculatory method. This new semen collection methodology emerges as another alternative to facilitate semen collection in domestic dogs that do not accept digital manipulation and eliminate the electroejaculation in wild animals. However, side effects undesirable was observed indicating that new anesthetic protocols, safer for semen collection via urethral catheterization, need to be tested.

Influência de diferentes doses de butorfanol na anestesia com sevofluorano em papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva) / Influence of different doses of butorphanol in anesthesia with sevoflurane in blue-fronted parrots (Amazona aestiva)

Background: Parrots frequently require veterinary medical care. To reduce their stress, it is necessary to use chemical restraint or anesthesia. The use of balanced anesthesia techniques such as combinations of inhaled and injectable drugs is recommended. However, there is a shortage of anesthetic and analgesic protocols and data on cardiovascular and respiratory variables in wild birds. The objective of the present study was to evaluate the analgesic, cardiovascular, and respiratory effects and the quality of anesthetic recovery in blue-front parrots (Amazona aestiva) anesthetized with sevoflurane in combination with various doses of butorphanol. Materials, Methods & Results: Twenty-four clinically healthy animals, based on their clinical and hematological results (hematocrit and total plasma protein), were divided into 3 groups: 1- sevofluoran alone (GS); 2- associated with butorphanol at 3 mg/kg (GB3), and 3- 6 mg/kg (GB6) doses administered via the intramuscular (IM) route; digital clamping was used as a nociceptive stimulus. Induction and anesthetic maintenance were performed with sevoflurane at 5 and 2.5 V%, respectively, administered through a calibrated vaporizer and an anesthetic system adequate for the weight of the animals that were kept under spontaneous ventilation. It took 15 min after induction for the expired sevoflurane concentration (EtSevo) to stabilize, after which one intramuscular treatment was applied. The digital clamping was continued as a supramaximal nociceptive stimulus; if it presented a positive response, EtSevo increased by 10%, and when the stimulus decreased by 20%, digital clamping was repeated every 15 min until a positive response to the stimulus was observed. Heart rate (HR) and rhythm, respiratory rate (f), systolic blood pressure (SBP), EtSevo, expired CO2 (EtCO2 ), and body temperature (T°C) were measured during digital clamping. At the end, anesthetic...

Coleta e criopreservação de células espermáticas do epidídimo de cervo dama (Dama dama): relato de caso / Fallow deer (Dama dama) epididymal sperm collection and cryopreservation: case report

O objetivo do presente relato foi avaliar a viabilidade da técnica de coleta de células espermáticas do epidídimo de um cervo dama (Dama dama) após orquiectomia e comparar sua capacidade de criopreservação utilizando dois diluidores comerciais diferentes, o Triladyl® e o Andromed®. Foram avaliados o volume testicular, a motilidade e vigor espermáticos e a morfologia das células espermáticas antes e após o processo de criopreservação. Ao se comparar os dois meios comerciais, pode-se constatar que a motilidade e vigor espermáticos foram melhores na alíquota congelada com Triladyl® (25% e 2) do que com Andromed® (10% e 1). Quanto a morfologia espermática os dois diluidores apresentaram valores semelhantes de defeitos totais (32.5% com Andromed® e 33% com Triladyl®, sendo a cabeça lanciforme o defeito predominante em ambos os casos). Diante desses resultados, a técnica de coleta de células espermáticas do epidídimo é viável para cervídeos Dama e mais estudos são necessários para se estabelecer o melhor meio diluidor para esta espécie criada em climas tropicais.

The aim of the present report was to evaluate the viability of epididymal sperm collection technique in a fallow deer (Dama dama) after orchiectomy and to compare its cryopreservation capacity using two different commercial extenders, Triladyl® and Andromed®. Thus, testicular volume, sperm motility and vigor, and sperm cell morphology were evaluated before and after the cryopreservation process. When comparing the two commercial media, sperm motility and vigor were better in the post-thawed aliquot extended with Triladyl® (25% and 2) than with Andromed® (10% and 1). Regarding sperm morphology, the two dilutors presented similar values of total defects (32.5% with Andromed® and 33% with Triladyl®, with the lanciform head being the predominant defect in both cases). Given these results, the epididymal sperm cell collection technique is viable for Dama cervids and further studies are needed to establish the best extender for this species raised under tropical conditions.

Coleta e criopreservação de células espermáticas do epidídimo de cervo dama (Dama dama): relato de caso / Fallow deer (Dama dama) epididymal sperm collection and cryopreservation: case report

O objetivo do presente relato foi avaliar a viabilidade da técnica de coleta de células espermáticas do epidídimo de um cervo dama (Dama dama) após orquiectomia e comparar sua capacidade de criopreservação utilizando dois diluidores comerciais diferentes, o Triladyl® e o Andromed®. Foram avaliados o volume testicular, a motilidade e vigor espermáticos e a morfologia das células espermáticas antes e após o processo de criopreservação. Ao se comparar os dois meios comerciais, pode-se constatar que a motilidade e vigor espermáticos foram melhores na alíquota congelada com Triladyl® (25% e 2) do que com Andromed® (10% e 1). Quanto a morfologia espermática os dois diluidores apresentaram valores semelhantes de defeitos totais (32.5% com Andromed® e 33% com Triladyl®, sendo a cabeça lanciforme o defeito predominante em ambos os casos). Diante desses resultados, a técnica de coleta de células espermáticas do epidídimo é viável para cervídeos Dama e mais estudos são necessários para se estabelecer o melhor meio diluidor para esta espécie criada em climas tropicais.(AU)

The aim of the present report was to evaluate the viability of epididymal sperm collection technique in a fallow deer (Dama dama) after orchiectomy and to compare its cryopreservation capacity using two different commercial extenders, Triladyl® and Andromed®. Thus, testicular volume, sperm motility and vigor, and sperm cell morphology were evaluated before and after the cryopreservation process. When comparing the two commercial media, sperm motility and vigor were better in the post-thawed aliquot extended with Triladyl® (25% and 2) than with Andromed® (10% and 1). Regarding sperm morphology, the two dilutors presented similar values of total defects (32.5% with Andromed® and 33% with Triladyl®, with the lanciform head being the predominant defect in both cases). Given these results, the epididymal sperm cell collection technique is viable for Dama cervids and further studies are needed to establish the best extender for this species raised under tropical conditions.(AU)

Histology of the testis and the epididymal ducts from hoary fox Lycalopex vetulus (Lund, 1842) / Histologia dos testículos e ductos epididimários da raposa-do-campo Lycalopex vetulus (Lund, 1842)

The hoary fox Lycalopex vetulus (Lund, 1842) is a small canid, endemic to Brazil, belonging to the Canidae family, widely distributed in the country, occurring records in different regions and habitats. The objective of this study is to describe morphologically the testicles and epididymal ducts of hoary fox. The animals, coming from the zoo of Federal University of Mato Grosso, Brazil, had died by natural causes. The male reproductive system was dissected to collect the testicles. The samples were fragmented and histologically examined. Microscopically, the testes were coated by the vaginal and albuginea tunic, formed by modeled dense connective tissue with large amount of collagen fibers. Into the organ, convoluted seminiferous tubules were surrounded by a basement membrane characterized by the presence of myoid and Sertoli cells and germinative epithelium composed by Between the seminiferous tubules, interstitial tissue composed of connective tissue, blood and lymph vessels and Leydig cells in polyhedral shape was present. The epididymal ducts showed pseudostratified columnar epithelium with secretory cells, in which stereocilia located on a basement membrane filled by myoid cells were found. The structures observed by us are very similar to those described for other mammals.(AU)

A raposa-do-campo Lycalopex vetulus (Lund, 1842) é um canídeo de pequeno porte, endêmico do Brasil, pertencente a família Canidae, com ampla distribuição no país, ocorrendo registros em várias regiões e habitats diferentes. Com base nessa informação, o objetivo deste trabalho é caracterizar morfologicamente os testículos e ductos epididimários da raposa-do-campo. O animal, oriundo do zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso, Brasil, veio a óbito por causas naturais e o sistema reprodutor masculino foi dissecado para coleta dos testículos. As amostras retiradas foram fragmentadas e histológicamente examinadas. A partir das análises microscópicas dos testículos foram identificados: a túnica vaginal e albugínea, formada por tecido conjuntivo denso modelado, com grande quantidade de fibras colágenas; túbulos seminíferos enovelados e revestidos por epitélio germinativo e células de Sertoli, envolvidos por uma membrana basal com presença de células mioides; tecido intersticial entre os túbulos seminíferos constituído de tecido conjuntivo, vasos sanguíneos e linfáticos, e células de Leydig em formato poliédrico. Os ductos epididimários apresentaram epitélio cilíndrico pseudoestratificado com células secretoras dos quais projetam estereocílios, situados sobre uma membrana basal repleta por células mióides. As estruturas por nós observadas possuem muita semelhança com as demais descrições para mamíferos.(AU)

Different Dissociative Anesthesia Protocols For Coatis (Nasua Nasua)

This study evaluated the effects of various combinations of dissociative drugs, tranquilizers, and sedatives in four male coatis (Nasua nasua) with an average age and weight of 4.8 ± 1.3 years and 6.02 ± 0.56 kg, respectively. We studied six groups with different anesthetic protocols: CX (10 mg/kg ketamine-S and 2 mg/kg xylazine); CXA (10 mg/kg ketamine-S, 2 mg/kg xylazine, and 0.04 mg/kg atropine); CM (10 mg/kg ketamine-S and 0.5 mg/kg midazolam); CMAc (10 mg/kg ketamine-S, 0.5 mg/kg of midazolam, and 1 mg/kg acepromazine); C(20)M (20 mg/kg of ketamine-S and 0.5 mg/kg midazolam); and TZ (7 mg/kg of tiletamine and zolazepam), with a 30-day interval between the completion of each procedure. We evaluated heart rate (HR), respiratory rate (RR), saturation of oxyhemoglobin (SpO2), body temperature T (°C), and muscle relaxation, using a scoring system. There was no statistical difference for SpO2. T (°C) was progressively reduced over time in all groups (p< 0.0001). The groups CM, C(20)M, CMAc, and TZ demonstrated the greatest effect on HR and T (°C). With respect to respiratory rate reduction, groups CM and TZ showed similar results. The best degree of muscle relaxation was observed in groups CM and C(20)M. We concluded that the combination of 20 mg/kg ketamine and midazolam 0. 5 mg/kg (group C(20)M) is an option for dissociative anesthesia of coatis, producing smaller changes in T (°C) and HR, and promoting better muscular relaxation when compared to other combinations.

Different Dissociative Anesthesia Protocols For Coatis (Nasua Nasua)

This study evaluated the effects of various combinations of dissociative drugs, tranquilizers, and sedatives in four male coatis (Nasua nasua) with an average age and weight of 4.8 ± 1.3 years and 6.02 ± 0.56 kg, respectively. We studied six groups with different anesthetic protocols: CX (10 mg/kg ketamine-S and 2 mg/kg xylazine); CXA (10 mg/kg ketamine-S, 2 mg/kg xylazine, and 0.04 mg/kg atropine); CM (10 mg/kg ketamine-S and 0.5 mg/kg midazolam); CMAc (10 mg/kg ketamine-S, 0.5 mg/kg of midazolam, and 1 mg/kg acepromazine); C(20)M (20 mg/kg of ketamine-S and 0.5 mg/kg midazolam); and TZ (7 mg/kg of tiletamine and zolazepam), with a 30-day interval between the completion of each procedure. We evaluated heart rate (HR), respiratory rate (RR), saturation of oxyhemoglobin (SpO2), body temperature T (°C), and muscle relaxation, using a scoring system. There was no statistical difference for SpO2. T (°C) was progressively reduced over time in all groups (p< 0.0001). The groups CM, C(20)M, CMAc, and TZ demonstrated the greatest effect on HR and T (°C). With respect to respiratory rate reduction, groups CM and TZ showed similar results. The best degree of muscle relaxation was observed in groups CM and C(20)M. We concluded that the combination of 20 mg/kg ketamine and midazolam 0. 5 mg/kg (group C(20)M) is an option for dissociative anesthesia of coatis, producing smaller changes in T (°C) and HR, and promoting better muscular relaxation when compared to other combinations.(AU)

Detection of Toxoplasma gondii in a free-ranging giant anteater / Detecção de Toxoplasma gondii em tamanduá-bandeira de vida livre

ABSTRACT: Toxoplasmosis is caused by Toxoplasma gondii, an obligatory intracellular protozoan, which establishes acute and chronic infections in birds and mammals, including humans. This note reports, for the first time, the detection and sequencing of DNA from T. gondii in the peripheral blood of a young free range giant anteater (Myrmecophaga tridactyla). For the diagnosis, the following methods were used: polymerase chain reaction (PCR) and positive serology (1:800) by means of the modified agglutination test (MAT). Since this species may be consumed by humans and predated by wild felids, its importance is emphasized as a probable source of zoonotic infection, in addition to its possible participation in the infection enzootic cycle. Although, parasitemia has been confirmed in this specimen, it presented no clinical sign of infection.(AU)

RESUMO: A toxoplasmose é causada pelo Toxoplasma gondii, um protozoário intracelular obrigatório, que estabelece infecções agudas e crônicas em aves e mamíferos, incluindo humanos. Esta nota relata, pela primeira vez, a detecção e o sequenciamento do DNA de T. gondii em sangue periférico de um filhote de tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) de vida livre. Para o diagnóstico, os seguintes métodos foram utilizados: reação em cadeia pela polimerase (PCR) e sorologia positiva (1:800) por meio de teste de aglutinação modificado (MAT). Por se tratar de uma espécie que pode ser consumida por humanos e predada por felídeos silvestres, sua importância é ressaltada como uma provável fonte de infecção zoonótica, além da sua possível participação no ciclo enzoótico de infecção. Embora a parasitemia tenha sido comprovada neste espécime, ele não apresentava sinais clínicos de infecção.(AU)

Detection of Toxoplasma gondii in a free-ranging giant anteater / Detecção de Toxoplasma gondii em tamanduá-bandeira de vida livre

ABSTRACT: Toxoplasmosis is caused by Toxoplasma gondii, an obligatory intracellular protozoan, which establishes acute and chronic infections in birds and mammals, including humans. This note reports, for the first time, the detection and sequencing of DNA from T. gondii in the peripheral blood of a young free range giant anteater (Myrmecophaga tridactyla). For the diagnosis, the following methods were used: polymerase chain reaction (PCR) and positive serology (1:800) by means of the modified agglutination test (MAT). Since this species may be consumed by humans and predated by wild felids, its importance is emphasized as a probable source of zoonotic infection, in addition to its possible participation in the infection enzootic cycle. Although, parasitemia has been confirmed in this specimen, it presented no clinical sign of infection.

RESUMO: A toxoplasmose é causada pelo Toxoplasma gondii, um protozoário intracelular obrigatório, que estabelece infecções agudas e crônicas em aves e mamíferos, incluindo humanos. Esta nota relata, pela primeira vez, a detecção e o sequenciamento do DNA de T. gondii em sangue periférico de um filhote de tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) de vida livre. Para o diagnóstico, os seguintes métodos foram utilizados: reação em cadeia pela polimerase (PCR) e sorologia positiva (1:800) por meio de teste de aglutinação modificado (MAT). Por se tratar de uma espécie que pode ser consumida por humanos e predada por felídeos silvestres, sua importância é ressaltada como uma provável fonte de infecção zoonótica, além da sua possível participação no ciclo enzoótico de infecção. Embora a parasitemia tenha sido comprovada neste espécime, ele não apresentava sinais clínicos de infecção.

Detection of resistance genes and evaluation of water quality at zoo lakes in Brazil / Detecção de genes de resistência e qualidade da água dos lagos de zoológico, Brasil

ABSTRACT: The investigation of the presence of antibiotic-resistance genes in aquatic environments is important to identify possible reservoirs of resistant microorganisms that could be a threat to human and animal health. The aims of this study were to analyze the presence of genes conferring resistance to antimicrobials in the aquatic environment and to assess the quality of water in zoo lakes. Results showed a pattern of genes conferring resistance to multiple antibiotics and turbidity, which was expected to be due to the presence of contaminants. The most frequent genes were sul I and sul II (sulfonamides), which were present in all the lakes, followed by genes encoding β-lactamases such as blaPSE I (77.8%) and ampC (66.7%). However, tet(K), tet(M), and ermC genes were not detected. There was a positive correlation between the number of Enterobacteriaceae and resistance genes. In conclusion, the source of contamination of all lakes was probably the neighboring urban sewage or wastewater that increased the frequency of the total coliforms and resistance genes, which in turn posed a threat to the conservation of the animal life inhabiting the zoo.

RESUMO: A investigação da presença de genes de resistência a antibióticos (ARGs) em ambientes aquáticos é importante para identificação de possíveis reservatórios de microrganismos resistentes que podem ser uma ameaça para a saúde humana e animal. O objetivo deste estudo foi analisar a presença de genes de resistência a antimicrobianos e a qualidade da água de zoológico. Os resultados mostraram um padrão de genes de resistência a múltiplos antibióticos e turbidez da água, devido à presença de contaminantes. Os genes mais frequentes foram sul I e sul II (sulfonamidas) que estão presentes em todos os lagos, e β-lactamases como blaPSE I (77,8%) e ampC (66,7%). Os genes tet(K), tet(M) e ermC não foram detectados. Houve correlação entre o número de Enterobacteriaceae e aumento na detecção de genes de resistência. As fontes de contaminação dos lagos são, provavelmente, esgoto urbano vizinho ou de águas residuais que aumentam a presença de coliformes totais e a frequência dos genes de resistência, que podem ser um risco para vida de animais silvestres em cativeiro.

Detection of resistance genes and evaluation of water quality at zoo lakes in Brazil / Detecção de genes de resistência e qualidade da água dos lagos de zoológico, Brasil

The investigation of the presence of antibiotic-resistance genes in aquatic environments is important to identify possible reservoirs of resistant microorganisms that could be a threat to human and animal health. The aims of this study were to analyze the presence of genes conferring resistance to antimicrobials in the aquatic environment and to assess the quality of water in zoo lakes. Results showed a pattern of genes conferring resistance to multiple antibiotics and turbidity, which was expected to be due to the presence of contaminants. The most frequent genes were sul I and sul II (sulfonamides), which were present in all the lakes, followed by genes encoding -lactamases such as blaPSE I (77.8%) and ampC (66.7%). However, tet(K), tet(M), and ermC genes were not detected. There was a positive correlation between the number of Enterobacteriaceae and resistance genes. In conclusion, the source of contamination of all lakes was probably the neighboring urban sewage or wastewater that increased the frequency of the total coliforms and resistance genes, which in turn posed a threat to the conservation of the animal life inhabiting the zoo.(AU)

A investigação da presença de genes de resistência a antibióticos (ARGs) em ambientes aquáticos é importante para identificação de possíveis reservatórios de microrganismos resistentes que podem ser uma ameaça para a saúde humana e animal. O objetivo deste estudo foi analisar a presença de genes de resistência a antimicrobianos e a qualidade da água de zoológico. Os resultados mostraram um padrão de genes de resistência a múltiplos antibióticos e turbidez da água, devido à presença de contaminantes. Os genes mais frequentes foram sul I e sul II (sulfonamidas) que estão presentes em todos os lagos, e -lactamases como blaPSE I (77,8%) e ampC (66,7%). Os genes tet(K), tet(M) e ermC não foram detectados. Houve correlação entre o número de Enterobacteriaceae e aumento na detecção de genes de resistência. As fontes de contaminação dos lagos são, provavelmente, esgoto urbano vizinho ou de águas residuais que aumentam a presença de coliformes totais e a frequência dos genes de resistência, que podem ser um risco para vida de animais silvestres em cativeiro.(AU)

Análise seminal e padronização da coloração eosina-nigrosina em tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) / Giant anteater's (Myrmecophaga tridactyla) semen analysis and eosin-nigrosin staining standardization

Os estudos que envolvem os aspectos reprodutivos do tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) podem contribuir para a preservação da espécie auxiliando no desenvolvimento de um manejo reprodutivo mais eficiente em cativeiro. O presente estudo teve como objetivo obter uma melhor compreensão da fisiologia reprodutiva por meio da caracterização física e morfológica do sêmen de tamanduá-bandeira. Foram realizados três exames reprodutivos em dois tamanduás-bandeira mantidos no Zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá/MT/Brasil. O método de coleta do sêmen foi a eletroejaculação. O volume médio obtido foi de 2,62 ± 1,67 mL, com motilidade média de 50 ± 20% e vigor de 2,17 ± 0,82. O pH médio foi de 7,29 ± 0,40. Quanto à patologia espermática foram encontrados 16,5% de defeitos maiores, 20,5 % de defeitos menores, perfazendo 37 ± 4,2% de defeitos totais. Os testes preliminares de padronização da coloração eosina-nigrosina mostraram-se eficazes para avaliar a integridade da membrana plasmática de espermatozoides nesta espécie, que nesta pesquisa foi de 65 ± 7,77%.

Studies involving the reproductive aspects of the giant anteater (Myrmecophaga tridactyla) can be contributed to the preservation of this specie. The aim of these study was accessed the reproductive physiology and describe physical and morphological giant anteater's sperm. We conducted three reproductive examination in two anteater maintained at the Federal University of Mato Grosso Zoo, Cuiaba/MT/Brazil. The method of semen collection used was electroejaculation. The volume average obtained was 2.62 ± 1.67 mL, the motility average was 50 ± 20% and the vigor was 2.17 ± 0.82. The pH mean was 7.29 ± 0.40. The sperm average concentration was 33.33 ± 12.52 x 106 sperm/mL. According sperm pathology we found 16.5% of larger defects, 20.5% of minor defects, amounting to 37 ± 4.2% of total defects. The preliminary tests of standardization of eosin-nigrosin staining proved to be effective to evaluate the integrity of plasma membrane of sperm in this species, in this research was 65 ± 7,77%.

Giant anteater's (Myrmecophaga tridactyla) semen analysis and eosin-nigrosin staining standardization / Análise seminal e padronização da coloração eosina-nigrosina em tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla)

Studies involving the reproductive aspects of the giant anteater (Myrmecophaga tridactyla) can be contributed to the preservation of this specie. The aim of these study was accessed the reproductive physiology and describe physical and morphological giant anteaters sperm. We conducted three reproductive examination in two anteater maintained at the Federal University of Mato Grosso Zoo, Cuiaba/MT/Brazil. The method of semen collection used was electroejaculation. The volume average obtained was 2.62 ± 1.67 mL, the motility average was 50 ± 20% and the vigor was 2.17 ± 0.82. The pH mean was 7.29 ± 0.40. The sperm average concentration was 33.33 ± 12.52 x 106 sperm/mL. According sperm pathology we found 16.5% of larger defects, 20.5% of minor defects, amounting to 37 ± 4.2% of total defects. The preliminary tests of standardization of eosin-nigrosin staining proved to be effective to evaluate the integrity of plasma membrane of sperm in this species, in this research was 65 ± 7,77%.(AU)

Os estudos que envolvem os aspectos reprodutivos do tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) podem contribuir para a preservação da espécie auxiliando no desenvolvimento de um manejo reprodutivo mais eficiente em cativeiro. O presente estudo teve como objetivo obter uma melhor compreensão da fisiologia reprodutiva por meio da caracterização física e morfológica do sêmen de tamanduá-bandeira. Foram realizados três exames reprodutivos em dois tamanduás-bandeira mantidos no Zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso, Cuiabá/MT/Brasil. O método de coleta do sêmen foi a eletroejaculação. O volume médio obtido foi de 2,62 ± 1,67 mL, com motilidade média de 50 ± 20% e vigor de 2,17 ± 0,82. O pH médio foi de 7,29 ± 0,40. Quanto à patologia espermática foram encontrados 16,5% de defeitos maiores, 20,5 % de defeitos menores, perfazendo 37 ± 4,2% de defeitos totais. Os testes preliminares de padronização da coloração eosina-nigrosina mostraram-se eficazes para avaliar a integridade da membrana plasmática de espermatozoides nesta espécie, que nesta pesquisa foi de 65 ± 7,77%.(AU)

[Leishmania (Leishmania) infantum chagasi in wild canids kept in captivity in the State of Mato Grosso]. / Leishmania (Leishmania) infantum chagasi em canídeos silvestres mantidos em cativeiro, no Estado de Mato Grosso.

INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis is a zoonosis that affects many mammals, and domestic canids are the main reservoirs in urban environments. This note describes infection by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi among wild canids kept in captivity in the State of Mato Grosso, Brazil. METHODS: Skin, bone marrow and lymph node samples were collected from six crab-eating foxes (Cerdocyon thous) and one bush dog (Spheotos venaticus), in order to detect and characterize Leishmania using the PCR-RFLP technique. RESULTS: All the animals studied were positive for Leishmania (L.) infantum chagasi. CONCLUSIONS: This study highlights the importance of adequate monitoring of these animals, as well as greater control of this disease, given that these animals are in a public recreation environment.

Leishmania (Leishmania) infantum chagasi em canídeos silvestres mantidos em cativeiro, no Estado de Mato Grosso / Leishmania (Leishmania) infantum chagasi in wild canids kept in captivity in the State of Mato Grosso

INTRODUÇÃO: Leishmaniose visceral é uma zoonose que acomete diversos mamíferos tendo os canídeos domésticos como principais reservatórios em ambiente urbano. A presente nota descreve a infecção de canídeos silvestres por Leishmania (Leishmania) infantum chagasi mantidos em cativeiro no Estado de Mato Grosso, Brasil. MÉTODOS: De seis raposas (Cerdocyon thous) e um cachorro vinagre (Spheotos venaticus), foram coletadas amostras de pele, medula óssea e linfonodo para detecção e caracterização de Leishmania sp pela técnica de PCR-RFLP. RESULTADOS: Todos as animais pesquisados apresentaram-se positivos para Leishmania (L.) infantum chagasi. CONCLUSÕES: Destaca-se a importância de monitoramento adequado dos mesmos, além do maior controle desta enfermidade já que estes animais estão em ambientes de recreação pública.

INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis is a zoonosis that affects many mammals, and domestic canids are the main reservoirs in urban environments. This note describes infection by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi among wild canids kept in captivity in the State of Mato Grosso, Brazil. METHODS: Skin, bone marrow and lymph node samples were collected from six crab-eating foxes (Cerdocyon thous) and one bush dog (Spheotos venaticus), in order to detect and characterize Leishmania using the PCR-RFLP technique. RESULTS: All the animals studied were positive for Leishmania (L.) infantum chagasi. CONCLUSIONS: This study highlights the importance of adequate monitoring of these animals, as well as greater control of this disease, given that these animals are in a public recreation environment.

Análise citogenética de oócitos de jaguatirica (Leopardus pardalis) e gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) coletados após estimulação ovariana / Cytogenetic analyses of ocelot (Leopardus pardalis) and tigrinus (Leopardus tigrinus) oocytes collected after ovarian stimulation

Este estudo representa a primeira avaliação da maturação nuclear de oócitos por análise citogenética realizada em duas espécies de felídeos brasileiros ameaçados de extinção: L. pardalis (n=5) e L. tigrinus (n=4).Os animais foram submetidos à estimulação ovariana alternada come CG-hCG e pFSH-pLH a cada quatro meses pelo período de dois anos, perfazendo um total de 6 intervenções. Os oócitos foram recuperados por vídeo-laparoscopia, caracterizados quanto à morfologia e utilizados para determinação dos estágios do ciclo meiótico por análise citogenética e maturação pela caracterização de metáfase II. Dos 33 oócitos de jaguatirica avaliados 12% (n=4) apresentaram cromossomos condensados em seu interior e dos 11 oócitos de gato-do-mato-pequeno avaliados 36% (n=4)apresentaram cromossomos condensados em seu interior, no entanto,nenhum oócito encontrava-se em metáfase II. Avaliação morfológica dos oócitos mostrou as mesmas características encontradas em outros mamíferos. Comparando os tratamentos, não houve diferença significativa(p>0,05) no número total de estruturas ovarianas (folículos e corpos lúteos recentes) observadas em estimulações alternadas sucessivas, nas duas espécies estudadas. Também não houve diferença significativa em relação ao total de estruturas ovarianas encontradas em cada tratamento(5,7±1,2 eCG/hCG; 7,9±0,9 pFSH/pLH) para L. pardalis e (2,6±0,7eCG/hCG; 2,0±0,5 pFSH/pLH) para L. tigrinus. Apesar das limitações deste experimento e do número reduzido de oócitos avaliados podemos sugerir que a aspiração folicular após estimulação ovariana com eCG/hCG e pFSH/pLH alternadamente resulta na recuperação de oócitos imaturos, que necessitam de cultivo em meios específicos para atingir o estágio de Metáfase II.

This study represents the first assessment of oocyte’s nuclear maturation by cytogenetical analysis in two endangered Brazilian felids:L. pardalis (n=5) and L. tigrinus (n=4). Females were treated 6 times with alternating eCG/hCG and pFSH/pLH protocols using an interval of 4 months between each treatment. Ovarian follicular development and oocytes recovery were performed through laparoscopy. Recovered oocytes were submitted to the morphological and cytogenetical analysis in order to evaluate the meiotic cycle and maturation (metaphase II), respectively. In 33 ocelot’s oocytes observed 12% (n=4) showed condensed chromosomes and in 11 tigrinu’s oocytes observed 36% (n=4) showed condensed chromosomes. However no oocytes in metaphase II were observed.O ocytes morphological evaluation showed the same characteristics were observed in others mammals. Our results suggest that L. pardalis and L. tigrinus do not show a decrease (p>0.05) in ovarian response after repeated and alternate exposure to different gonadotropin treatments. In both L. pardalis and L. tigrinus, no differences (p>0.05)were found regarding to the number of total ovarian structures (total follicles and CL) during successive gonadotropin treatments. There were no differences (p>0.05) regarding to the total number of ovarian structures in L. pardalis (5.7 ± 1.2 eCG/hCG and 7.9 ± 0.9 pFSH/pLH) or L. tigrinus (2.6 ± 0.7 eCG/hCG and 2.0 ± 0.5 pFSH/pLH).With these results we can suggest that follicular aspiration after ovarian stimulation with exogenous gonadotrophins results in immature oocytes, needing in vitro culture in specific mediums for metaphase II stage was observed.

Validação de conjuntos diagnósticos comerciais para dosagem sérica de progesterona e estradiol em jaguatirica (Leopardus pardalis) e gato-do-matopequeno (Leopardus tigrinus / Progesterone and estradiol commercial kits validation in serum of ocelots (Leopardus pardalis) and tigrina (Leopardus tigrinus)

Este estudo teve como objetivo validar os conjuntos diagnósticos m comerciais DPC (Coat-A-Count - Diagnostic Products Corporation/USA), em fase sólida, para dosagem de progesterona e DSL (Diagnostic System Laboratories INC/USA), em fase líquida, para dosagem de estradiol, por radioimunoensaio, em soro de Leopardus pardalis (n=5)e Leopardus tigrinus (n=4), antes (15-30 dias) e após (24-28 horas) tratamento com gonadotropinas exógenas (hCG/ Novormon® eeCG/ Vetecor®; pFSH/Folltropin-V® e pLH/Lutropin-V®). A concentração sérica para Leopardus pardalis variou 0,005 a 0,151ng/ml para estradiol e 0,15-37,22ng/ml para progesterona. A concentração sérica para Leopardus tigrinus variou 0,012-0,147ng/ml para estradiol e 0,06-34,09ng/ml para progesterona. A sensibilidade mínima detectada foi 0,004 ng/ml para progesterona e 0,00014ng/ml para estradiol. Para progesterona o coeficiente intra-ensaio baixo foi 2,58% e alto6,36%, já o coeficiente inter-ensaio baixo foi 0,67% e alto 5,55%. Para o estradiol o coeficiente intra-ensaio baixo foi 0,69% e alto 4,15%,sendo o coeficiente inter-ensaio baixo 1,40% e alto 3,00%. Paralelismo foi encontrado para progesterona e conjunto comercial DPC com r = 0,96 para Leopardus pardalis e r = 0,99 para Leopardus tigrinus. Para estradiol em conjunto comercial DSL paralelismo foi encontrado com r = 0,98 para Leopardus pardalis e com r = 0,99 para Leopardus tigrinus. Com estes resultados podemos concluir que o conjunto diagnóstico comercial DPC para dosagem de progesterona e DSL para dosagem de estradiol foram validados para utilização em soro de Leopardus pardalis e Leopardus tigrinus, podendo ser utilizado como ferramenta no manejo reprodutivo destas espécies visando à conservação.

DPC commercial kit (Coat-A-Count - Diagnostic Products Corporation/USA) and DSL commercial kit (Diagnostic System Laboratories INC/USA) were used for progesterone and estradiol radioimmunoassay validation in serum of two endangered Brazilian felids: Leopardus pardalis (n=5) and Leopardus tigrinus (n=4) before (15-30 days) and after (24-28 hours) exogenous gonadotrophins treatment(hCG/ Novormon® and eCG/ Vetecor®; pFSH/Folltropin-V® andpLH/Lutropin-V®). Variation of estradiol concentration was 0.005 -0.151 ng/ml and progesterone concentration was 0.15 - 37.22 ng/ml for Leopardus pardalis. Variation of estradiol concentration was 0.012 -0.147 ng/ml and progesterone concentration was 0.15 - 37.22 ng/ml for Leopardus tigrinus. Minimum sensibility detected for progesterone was 0.004 ng/ml and for estradiol was 0.00014 ng/ml. Progesterone intra-assay coefficient was 2.58% and 6.36% and inter-assay was 0.67% and 5.55%. Estradiol intra-assay coefficient was 0.69% and 4.15%,and inter-assay was 1.40% and 3.00%. Parallelism was used for kits validation. Progesterone and DPC commercial kit Parallelism wasr = 0.96 for Leopardus pardalis and r = 0.99 for Leopardus tigrinus. Estradiol and DSL commercial kit Parallelism was r = 0.98 for Leopardus pardalis and r = 0.99 for Leopardus tigrinus. In conclusion, these results showed that DPC commercial kit for serum progesterone dosages and DSL commercial kit for serum estradiol dosages can be used for Leopardus pardalis e Leopardus tigrinus. These findings are potentially valuable for the reproductive management and conservation of endangered felid populations.