A Ternary Copper (II) Complex with 4-Fluorophenoxyacetic Acid Hydrazide in Combination with Antibiotics Exhibits Positive Synergistic Effect against Salmonella Typhimurium.

Salmonella spp. continues to figure prominently in world epidemiological registries as one of the leading causes of bacterial foodborne disease. We characterised 43 Brazilian lineages of Salmonella Typhimurium (ST) strains, characterized drug resistance patterns, tested copper (II) complex as control options, and proposed effective antimicrobial measures. The minimum inhibitory concentration was evaluated for seven antimicrobials, isolated and combined with the copper (II) complex [Cu(4-FH)(phen)(ClO4)2] (4-FH = 4-fluorophenoxyacetic acid hydrazide and phen = 1,10-phenanthroline), known as DRI-12, in planktonic and sessile ST. In parallel, 42 resistance genes were screened (PCR/microarray). All strains were multidrug resistant (MDR). Resistance to carbapenems and polymyxins (86 and 88%, respectively) have drawn attention to the emergence of the problem in Brazil, and resistance is observed also to CIP and CFT (42 and 67%, respectively), the drugs of choice in treatment. Resistance to beta-lactams was associated with the genes blaTEM/blaCTX-M in 39% of the strains. Lower concentrations of DRI-12 (62.7 mg/L, or 100 µM) controlled planktonic and sessile ST in relation to AMP/SUL/TET and AMP/SUL/TET/COL, respectively. The synergistic effect provided by DRI-12 was significant for COL/CFT and COL/AMP in planktonic and sessile ST, respectively, and represents promising alternatives for the control of MDR ST.

Diversity and antimicrobial resistance of Salmonella isolated from swines feces and carcasses / Diversidade e resistência aos antimicrobianos de Salmonella isoladas de fezes e carcaças de suínos

The aim of this study was to determine the most frequent Salmonella serovars in swine feces in the farm, piggerys waiting slaughterhouse and after in their carcasses during slaughter, as well as their antimicrobial resistance profiles. Eighty six strains of Salmonella spp. were used, they were previously isolated from three different lots in different collections. The identification of serovars was done by serotyping and the resistance to antimicrobial agents was determined by disc diffusion. A variety of serovars was observed, and the 86 strains were serologically identified as: 28 (32.55%) S. Typhimurium, 20 (23.26%) S. Agona, 17 (19.77%) S. Infantis, 6 (6.98%) S. Panama, and 15 (17.44%) S. Minnesota. The diversity of serovars indicated that different factors influence the infection of finishing pigs and the persistence of microorganisms in the carcass after slaughter of these animals. More than 50% of the isolates were resistant to nine of the 11 tested antibiotics. The drugs that microorganisms had the highest percentages of sensitivity were sulphazotrim and norfloxacin, 22.1% and 14%, respectively. S. Typhimurium serovar was the most isolated, including in the carcasses, and also showed the largest difference in antimicrobial resistance when compared to other serovars. The profile of multidrug resistance observed in this study highlights to the necessity of a judicious observation of antimicrobial resistance in zoonotic foodborne bacteria.(AU)

Objetivou-se determinar os sorovares de Salmonella mais freqüentes em fezes de suínos na granja de terminação, pocilga de espera do frigorífico e em suas carcaças durante o abate, assim como, seus perfis de resistência aos antimicrobianos. Utilizou-se 86 cepas de Salmonella spp previamente isoladas de três lotes diferentes em coletas distintas. A identificação dos sorovares foi realizada por meio de sorotipificação e a resistência aos antimicrobianos foi determinada pela técnica de difusão de discos. Foi observada uma multiplicidade de sorovares, sendo as 86 cepas identificadas sorologicamente como: 28 (32,55%) S. Typhimurium, 20 (23,26%), S. Agona, 17 (19,77%) S. Infantis, 6 (6,98%) S. Panama, e 15 (17,44%) S. Minnesota. A diversidade de sorovares indicou que diferentes fatores influenciam na infecção de suínos em terminação e na persistência do microrganismo na carcaça destes animais após o abate. Mais de 50% dos isolados apresentaram resistência a nove dos 11 antibióticos testados. As drogas as quais os microrganismos apresentaram os maiores percentuais de sensibilidade foram o sulfazotrim e a norfloxacina, 22,1% e 14%, respectivamente. S. Typhimurium foi o sorovar mais isolado, inclusive nas carcaças, e também o que demonstrou maior diferença quanto à resistência aos antimicrobianos, quando comparado aos outros sorovares. O perfil de multirresistência observado neste estudo alerta para a necessidade de vigilância e monitoramento sistemático da resistência aos antimicrobianos em bactérias zoonóticas transmitidas pelos alimentos.(AU)

Diversity and antimicrobial resistance of Salmonella isolated from swines feces and carcasses / Diversidade e resistência aos antimicrobianos de Salmonella isoladas de fezes e carcaças de suínos

The aim of this study was to determine the most frequent Salmonella serovars in swine feces in the farm, piggery’s waiting slaughterhouse and after in their carcasses during slaughter, as well as their antimicrobial resistance profiles. Eighty six strains of Salmonella spp. were used, they were previously isolated from three different lots in different collections. The identification of serovars was done by serotyping and the resistance to antimicrobial agents was determined by disc diffusion. A variety of serovars was observed, and the 86 strains were serologically identified as: 28 (32.55%) S. Typhimurium, 20 (23.26%) S. Agona, 17 (19.77%) S. Infantis, 6 (6.98%) S. Panama, and 15 (17.44%) S. Minnesota. The diversity of serovars indicated that different factors influence the infection of finishing pigs and the persistence of microorganisms in the carcass after slaughter of these animals. More than 50% of the isolates were resistant to nine of the 11 tested antibiotics. The drugs that microorganisms had the highest percentages of sensitivity were sulphazotrim and norfloxacin, 22.1% and 14%, respectively. S. Typhimurium serovar was the most isolated, including in the carcasses, and also showed the largest difference in antimicrobial resistance when compared to other serovars. The profile of multidrug resistance observed in this study highlights to the necessity of a judicious observation of antimicrobial resistance in zoonotic foodborne bacteria.

Objetivou-se determinar os sorovares de Salmonella mais freqüentes em fezes de suínos na granja de terminação, pocilga de espera do frigorífico e em suas carcaças durante o abate, assim como, seus perfis de resistência aos antimicrobianos. Utilizou-se 86 cepas de Salmonella spp previamente isoladas de três lotes diferentes em coletas distintas. A identificação dos sorovares foi realizada por meio de sorotipificação e a resistência aos antimicrobianos foi determinada pela técnica de difusão de discos. Foi observada uma multiplicidade de sorovares, sendo as 86 cepas identificadas sorologicamente como: 28 (32,55%) S. Typhimurium, 20 (23,26%), S. Agona, 17 (19,77%) S. Infantis, 6 (6,98%) S. Panama, e 15 (17,44%) S. Minnesota. A diversidade de sorovares indicou que diferentes fatores influenciam na infecção de suínos em terminação e na persistência do microrganismo na carcaça destes animais após o abate. Mais de 50% dos isolados apresentaram resistência a nove dos 11 antibióticos testados. As drogas as quais os microrganismos apresentaram os maiores percentuais de sensibilidade foram o sulfazotrim e a norfloxacina, 22,1% e 14%, respectivamente. S. Typhimurium foi o sorovar mais isolado, inclusive nas carcaças, e também o que demonstrou maior diferença quanto à resistência aos antimicrobianos, quando comparado aos outros sorovares. O perfil de multirresistência observado neste estudo alerta para a necessidade de vigilância e monitoramento sistemático da resistência aos antimicrobianos em bactérias zoonóticas transmitidas pelos alimentos.

Maintenance of strains of Campylobacter jejuni in laboratories after use of cryoprotectors and pre-treatment of stress / Manutenção de cepas de Campylobacter jejuni em laboratório após uso de crioprotetores e pré-tratamento de estresse

This study evaluated the feasibility and the production of transcripts of sodB, p19, ciaB and dnaJ genes in strains of Campylobacter jejuni ATCC 33291, NCTC 11351, and 2383 IAL stored in whole UHT milk and or neopepton + 12% glycerol, submitted or not to pre-treatments at 4°C or 10°C for 30 minutes. The analyzes were performed immediately after freezing in liquid nitrogen (day 0) and after maintenance for 30, 60, and 90 days at -20ºC. The viability was evaluated by the traditional culture method and the production of transcripts by the RT-PCR technique. The quantification was only possible on the first day of analysis (day 0) and presented a mean of 3.0 x 107 CFU, and in the other periods of storage the strains presented confluent growth, not allowing their enumeration. The results indicated that whole UHT milk was more adequate for cryopreservation than the use of neopepton + 12% glycerol. The use of pre-treatments combined with the use of UHT milk as a cryoprotective medium stabilized the cells in order to transcribe the ciaB, dnaJ, sodBand p19 genes in the strains maintained under -20 ° for 30 to 60 days, indicating that they are more suitable methods for the maintenance of strains in the laboratory.(AU)

Este estudo avaliou a viabilidade e a produção de transcritos dos genes sodB, p19, ciaB e dnaJ em cepas de Campylobacter jejuni ATCC 33291, NCTC 11351 e 2383 IAL armazenadas em leite integral UHT e / ou neopeptona + 12% glicerol, submetidas ou não a pré-tratamentos a 4°C ou 10°C durante 30 minutos. As análises foram realizadas imediatamente após o congelamento em nitrogênio líquido (dia 0) e após a manutenção por 30, 60 e 90 dias à -20ºC. A viabilidade foi avaliada pelo método tradicional de cultura e a produção de transcritos, pela técnica de RT-PCR. A quantificação só foi possível no primeiro dia de análise (dia 0) e apresentou uma média de 3,0 x 107 UFC, e nos demais períodos de armazenamento as cepas apresentaram crescimento confluente, não permitindo sua enumeração. Os resultados indicaram que o leite integral UHT foi mais adequado para criopreservação em relação ao uso de neopeptona + 12% glicerol. A utilização de pré-tratamentos combinados com o uso de leite UHT como meio crioprotetor estabilizou as células para transcrever os genes ciaB, dnaJ, sodB e p19 nas cepas mantidas abaixo de -20° por 30 a 60 dias, indicando que são métodos mais adequados para a manutenção de cepas em laboratório.(AU)

Maintenance of strains of Campylobacter jejuni in laboratories after use of cryoprotectors and pre-treatment of stress / Manutenção de cepas de Campylobacter jejuni em laboratório após uso de crioprotetores e pré-tratamento de estresse

This study evaluated the feasibility and the production of transcripts of sodB, p19, ciaB and dnaJ genes in strains of Campylobacter jejuni ATCC 33291, NCTC 11351, and 2383 IAL stored in whole UHT milk and or neopepton + 12% glycerol, submitted or not to pre-treatments at 4°C or 10°C for 30 minutes. The analyzes were performed immediately after freezing in liquid nitrogen (day 0) and after maintenance for 30, 60, and 90 days at -20ºC. The viability was evaluated by the traditional culture method and the production of transcripts by the RT-PCR technique. The quantification was only possible on the first day of analysis (day 0) and presented a mean of 3.0 x 107 CFU, and in the other periods of storage the strains presented confluent growth, not allowing their enumeration. The results indicated that whole UHT milk was more adequate for cryopreservation than the use of neopepton + 12% glycerol. The use of pre-treatments combined with the use of UHT milk as a cryoprotective medium stabilized the cells in order to transcribe the ciaB, dnaJ, sodBand p19 genes in the strains maintained under -20 ° for 30 to 60 days, indicating that they are more suitable methods for the maintenance of strains in the laboratory.

Este estudo avaliou a viabilidade e a produção de transcritos dos genes sodB, p19, ciaB e dnaJ em cepas de Campylobacter jejuni ATCC 33291, NCTC 11351 e 2383 IAL armazenadas em leite integral UHT e / ou neopeptona + 12% glicerol, submetidas ou não a pré-tratamentos a 4°C ou 10°C durante 30 minutos. As análises foram realizadas imediatamente após o congelamento em nitrogênio líquido (dia 0) e após a manutenção por 30, 60 e 90 dias à -20ºC. A viabilidade foi avaliada pelo método tradicional de cultura e a produção de transcritos, pela técnica de RT-PCR. A quantificação só foi possível no primeiro dia de análise (dia 0) e apresentou uma média de 3,0 x 107 UFC, e nos demais períodos de armazenamento as cepas apresentaram crescimento confluente, não permitindo sua enumeração. Os resultados indicaram que o leite integral UHT foi mais adequado para criopreservação em relação ao uso de neopeptona + 12% glicerol. A utilização de pré-tratamentos combinados com o uso de leite UHT como meio crioprotetor estabilizou as células para transcrever os genes ciaB, dnaJ, sodB e p19 nas cepas mantidas abaixo de -20° por 30 a 60 dias, indicando que são métodos mais adequados para a manutenção de cepas em laboratório.