Toxoplasma gondii: effects of Artemisia annua L. on susceptibility to infection in experimental models in vitro and in vivo.

Considering that the treatment for toxoplasmosis is based on drugs that show limited efficacy due to their substantial side effects, the purpose of the present study was to evaluate the effects of Artemisia annua on in vitro and in vivo Toxoplasma gondii infection. A. annua infusion was prepared from dried herb and tested in human foreskin fibroblasts (HFF) or mice that were infected with the parasite and compared with sulfadiazine treatment. For in vitro experiments, treatment was done on parasite before HFF infection or on cells previously infected with T. gondii and the inhibitory concentration (IC(50)) values for each treatment condition were determined. Viability of HFF cells in the presence of different concentrations of A. annua infusion and sulfadiazine was above 72%, even when the highest concentrations from both treatments were tested. Also, the treatment of T. gondii tachyzoites with A. annua infusion before infection in HFF cells showed a dose-response inhibitory curve that reached up to 75% of inhibition, similarly to the results observed when parasites were treated with sulfadiazine. In vivo experiments with a cystogenic T. gondii strain demonstrated an effective control of infection using A. annua infusion. In conclusion, our results indicate that A. annua infusion is useful to control T. gondii infection, due to its low toxicity and its inhibitory action directly against the parasite, resulting in a well tolerated therapeutic tool.

Ensaio imunoenzimático (ELISA) para detecçäo de toxina botulínica tipo D / Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of botulinum typy D toxin

Foi desenvolvido um teste imunoenzimático (ELISA) capaz de detectar toxina botulínica tipo D. A técnica empregada foi a de Duplo Anticorpo (ELISA "Sandwich") utilizando-se antitoxinas botulínicas tipo D de referência (Statens Seruminstitut, Dinamarca) tanto na fase de sensibilizaçäo das microplacas de polivinilcloreto como para a produçäo do conjugado imunoenzimático (antisoro botulínico tipo D ligado à peroxidase). A sensibilidade do teste foi verificada através de titulaçöes de toxina botulínica tipo D em fluidos de cultura e adicionada a "pool" de soro bovino normal, resultando em reatividade correspondendo respectivamente a 15,6 DL50/ml e 31,2 DL50/ml para camundongos, determinada espectrofotometricamente em leitor de microplacas. A especificidade, por sua vez, foi demonstrada pela ausência de reatividade com os diferentes tipos de toxinas botulínicas A, B e E, toxinas tetânica e deftérica. Entretanto, foi observado reatividade cruzada parcial com a toxina botulínica tipo C, devido às semelhanças antigênicas entre as toxinas tipos C e D. A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que o referido teste pode ser utilizado como um método de triagem, sensível, rápido e eficaz para a detecçäo de toxina botulínica tipo D, embora, especificamente para o diagnóstico direto do botulismo do bovino, o método tem as mesmas limitaçöes do bioensaio em camundongos por causa da baixa concentraçäo de toxina circulante