First Argentine database for the accurate identification of Brucella to species level by MALDI-TOF MS.

MALDI-TOF mass spectrometry (MS) has proven to be a fast and reliable method for the identification of a large number of taxonomic groups. It offers the advantage of being able to incorporate protein spectra of microorganisms that are absent or poorly represented in commercial databases, such as the genus Brucella. The aim of the study was to build the first database of protein spectra of local biological variants of Brucella in Argentina and of standard strains. First, the identification performance of a panel of 135 strains was evaluated with the Swedish database ¨Folkhälsomyndigheten¨ (containing protein spectra of several international standards of the genus Brucella) imported from the open access site https://spectra.folkhalsomyndigheten.se/spectra/. With this library 100 % of the strains were correctly identified by mass spectrometry to genus level, but not to species level. Due to the limitation found, an in-house database was designed with local Brucella isolates from Argentina and standard strains used in routine bacteriological diagnosis. For its validation, a panel of strains, different from those used to develop the extended local database (n: 177), was used to, simultaneously, challenge both libraries. The samples were processed by triplicate and the results obtained were: 177 strains correctly identified to genus and species level compared to the gold standard method (phenotypic typing), meeting the criteria accepted by the literature and the manufacturer as reliable identification. Only 2 of these isolates had score values lower than 2 (1.862) and were therefore not included in the calculation of results. According to these results, MALDI-TOF MS is a fast and reliable method for the routine identification of the different Brucella species, and even has the advantage of reducing the time of exposure to pathogenic microorganisms for laboratorians. It could be considered a valuable technique to replace, in the near future, the current conventional techniques due to the ease of transferring protein spectra, avoiding the use of reference strains that are difficult to find commercially available and commonly used in phenotypic typing.

Brucellosis and bovine tuberculosis in dairy farms in the state of Acre, Brazil / Brucelose e tuberculose bovina em fazendas leiteiras no estado do Acre, Brasil

This study aimed to evaluate the to evaluate the occurrence rate of bovine brucellosis and tuberculosis in dairy herds of Acre State, Brazil. The survey was performed on 487 lactating cows distributed across 27 farms in seven cities from June 2018 to February 2019. Farms were selected according to the following criteria: volume of milk production (150 L/day), distance to an urban perimeter (43 km), and time of dairy activity (12 years). For the diagnosis of brucellosis, buffered acidified plate antigen (BAPA) and complement fixation (CF) tests were used. Among the investigated animals, the occurrence rates for brucellosis and tuberculosis were 1.88% (9/487) and 1.23% (6/487), respectively; among the investigated farms, 11.11% (3/27) and 22.2% (6/27) had livestock diagnosed as positive for brucellosis and tuberculosis, respectively. The farms with tuberculosis-positive cattle possessed some common features with respect to herd size. These farms had considerable herd sizes, which were reared extensively in pastures shared with other susceptible or pathogen-carrying animals. In conclusion, the occurrence rate of bovine brucellosis and tuberculosis in dairy herds from Acre state is, in general, lower than that observed in other states of Brazil. Nevertheless, there is an urgent need for developing strategies to control and eradicate both diseases to prevent eventual outbreaks and pathogen dissemination.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a taxa de ocorrência de brucelose e tuberculose bovina em rebanhos leitei-ros do Estado do Acre, Brasil. A pesquisa foi realizada em 487 vacas em lactação distribuídas em 27 fazendas em sete cidades de junho de 2018 a fevereiro de 2019. As fazendas foram selecionadas de acordo com os seguintes critérios: volume de produ-ção de leite (150 L / dia), distância do perímetro urbano (43 km), e tempo de atividade leiteira (12 anos). Para o diagnóstico da brucelose, foram utilizados os testes de antígeno acidificado tamponado (AAT) e de fixação de complemento (FC). Entre os animais investigados, as taxas de ocorrência de brucelose e tuberculose foram de 1,88% (9/487) e 1,23% (6/487), respec-tivamente; entre as propriedades investigadas, 11,11% (3/27) e 22,2% (6/27) tiveram rebanhos diagnosticados como positi-vos para brucelose e tuberculose, respectivamente. As propriedades com rebanho positivo para tuberculose possuíam algumas características comuns com relação ao tamanho do rebanho. Essas fazendas tinham rebanhos consideráveis, que eram criados extensivamente em pastagens compartilhadas com outros animais suscetíveis ou portadores de patógenos. Em conclusão, a taxa de ocorrência de brucelose e tuberculose bovina em rebanhos leiteiros do estado do Acre é, em geral, inferior à observada em outros estados do Brasil. No entanto, há uma necessidade urgente de desenvolver estratégias para controlar e erradicar ambas as enfermidades, para prevenir eventuais surtos e disseminação de patógenos.(AU)

Brucellosis and bovine tuberculosis in dairy farms in the state of Acre, Brazil / Brucelose e tuberculose bovina em fazendas leiteiras no estado do Acre, Brasil

This study aimed to evaluate the to evaluate the occurrence rate of bovine brucellosis and tuberculosis in dairy herds of Acre State, Brazil. The survey was performed on 487 lactating cows distributed across 27 farms in seven cities from June 2018 to February 2019. Farms were selected according to the following criteria: volume of milk production (150 L/day), distance to an urban perimeter (43 km), and time of dairy activity (12 years). For the diagnosis of brucellosis, buffered acidified plate antigen (BAPA) and complement fixation (CF) tests were used. Among the investigated animals, the occurrence rates for brucellosis and tuberculosis were 1.88% (9/487) and 1.23% (6/487), respectively; among the investigated farms, 11.11% (3/27) and 22.2% (6/27) had livestock diagnosed as positive for brucellosis and tuberculosis, respectively. The farms with tuberculosis-positive cattle possessed some common features with respect to herd size. These farms had considerable herd sizes, which were reared extensively in pastures shared with other susceptible or pathogen-carrying animals. In conclusion, the occurrence rate of bovine brucellosis and tuberculosis in dairy herds from Acre state is, in general, lower than that observed in other states of Brazil. Nevertheless, there is an urgent need for developing strategies to control and eradicate both diseases to prevent eventual outbreaks and pathogen dissemination.

Este estudo teve como objetivo avaliar a taxa de ocorrência de brucelose e tuberculose bovina em rebanhos leitei-ros do Estado do Acre, Brasil. A pesquisa foi realizada em 487 vacas em lactação distribuídas em 27 fazendas em sete cidades de junho de 2018 a fevereiro de 2019. As fazendas foram selecionadas de acordo com os seguintes critérios: volume de produ-ção de leite (150 L / dia), distância do perímetro urbano (43 km), e tempo de atividade leiteira (12 anos). Para o diagnóstico da brucelose, foram utilizados os testes de antígeno acidificado tamponado (AAT) e de fixação de complemento (FC). Entre os animais investigados, as taxas de ocorrência de brucelose e tuberculose foram de 1,88% (9/487) e 1,23% (6/487), respec-tivamente; entre as propriedades investigadas, 11,11% (3/27) e 22,2% (6/27) tiveram rebanhos diagnosticados como positi-vos para brucelose e tuberculose, respectivamente. As propriedades com rebanho positivo para tuberculose possuíam algumas características comuns com relação ao tamanho do rebanho. Essas fazendas tinham rebanhos consideráveis, que eram criados extensivamente em pastagens compartilhadas com outros animais suscetíveis ou portadores de patógenos. Em conclusão, a taxa de ocorrência de brucelose e tuberculose bovina em rebanhos leiteiros do estado do Acre é, em geral, inferior à observada em outros estados do Brasil. No entanto, há uma necessidade urgente de desenvolver estratégias para controlar e erradicar ambas as enfermidades, para prevenir eventuais surtos e disseminação de patógenos.

Epidemiological study of swine brucellosis in household farms in Federal District of Brazil / Estudo epidemiológico de brucelose em suínos em criatórios de subsistência do Distrito Federal, Brasil

Brucellosis is caused by 10 species of Brucella sp. and is responsible for huge economic losses. There are no specific prophylactic measures present for household pigs, which can be also reservoirs, in the brazilian National Program for the Control and Eradication of Animal Brucellosis and Tuberculosis. Therefore, we conducted a cross-sectional study of blood serum samples from 1793 household pigs from 823 farms in Federal District of Brazil. Serum samples were collected between August and October in 2011, 2012, and 2014 by the veterinarians under the Secretary of Agriculture. The Rose Bengal plate test (RBPT) was used for screening for antibodies against smooth Brucella sp. Positive results were confirmed by the slow agglutination test (SAT) and 2-mercaptoethanol test (2-ME). Among the 1793 samples screened with RBPT, 125 were positive for antibodies against smooth Brucella sp.; 46 (32%) of these samples showed agglutination in SAT, but only one (0.8%) sample was considered positive by 2-ME. The animal with the positive blood serum was traced back in a household farm whose owner had supplemented feeds with cow milk whey. For preventing swine brucellosis, it is necessary to prevent the cross-infection either by the consumption of contaminated cow milk or by direct contact with infected animals. The government policy should enhance the sanitary education for encouraging household farmers to employ prophylactic measures and ensure biosecurity. The present study results indicate that swine brucellosis risk in household farms occurs in a low prevalence rate in pigs from the Federal District of Brazil.

A brucelose, enfermidade causada por 10 espécies de Brucella sp, pode afetar várias espécies de animais. A doença é responsável por perdas econômicas em diversos setores, inclusive na suinocultura. Não existem medidas profiláticas específicas para suínos no Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose Animal e Tuberculose-PNCEBT. Foi realizado um estudo transversal durante o período de agosto a outubro em 2011, 2012 e 2014 para o estudo de soroprevalência. Os analistas veterinários da Secretaria de Agricultura coletaram sangue de 1793 suínos de 823 criatórios no Distrito Federal. O teste Rosa de Bengala (RBPT) foi utilizado como triagem para a pesquisa de anticorpos contra Brucella sp. Os resultados positivos foram confirmados pelo teste de aglutinação lenta (SAT) e teste de 2-mercaptoetanol (2-ME) em série. Das 1793 amostras testadas pelo RBPT, 125 foram reagentes; sendo que 32% (46) destas amostras apresentaram aglutinação no SAT, mas apenas uma (0,8%) amostra foi confirmada positiva pelo teste 2-ME. O animal positivo foi rastreado em uma chácara de subsistência cujo dono tinha hábito de fornecer soro de leite de vaca aos suínos. Para prevenira brucelose suína, é necessário evitar a infecção cruzada pelo consumo de leite de vaca contaminado ou pelo contato direto com animais infectados. A política do governo deve melhorar a educação sanitária para incentivar a agricultura familiar a empregar medidas profiláticas e garantir a biossegurança. Os resultados do presente estudo indicam que o risco de brucelosesuína é baixo entre os criatórios de suínos do Distrito Federal.

Epidemiological study of swine brucellosis in household farms in Federal District of Brazil / Estudo epidemiológico de brucelose em suínos em criatórios de subsistência do Distrito Federal, Brasil

Brucellosis is caused by 10 species of Brucella sp. and is responsible for huge economic losses. There are no specific prophylactic measures present for household pigs, which can be also reservoirs, in the brazilian National Program for the Control and Eradication of Animal Brucellosis and Tuberculosis. Therefore, we conducted a cross-sectional study of blood serum samples from 1793 household pigs from 823 farms in Federal District of Brazil. Serum samples were collected between August and October in 2011, 2012, and 2014 by the veterinarians under the Secretary of Agriculture. The Rose Bengal plate test (RBPT) was used for screening for antibodies against smooth Brucella sp. Positive results were confirmed by the slow agglutination test (SAT) and 2-mercaptoethanol test (2-ME). Among the 1793 samples screened with RBPT, 125 were positive for antibodies against smooth Brucella sp.; 46 (32%) of these samples showed agglutination in SAT, but only one (0.8%) sample was considered positive by 2-ME. The animal with the positive blood serum was traced back in a household farm whose owner had supplemented feeds with cow milk whey. For preventing swine brucellosis, it is necessary to prevent the cross-infection either by the consumption of contaminated cow milk or by direct contact with infected animals. The government policy should enhance the sanitary education for encouraging household farmers to employ prophylactic measures and ensure biosecurity. The present study results indicate that swine brucellosis risk in household farms occurs in a low prevalence rate in pigs from the Federal District of Brazil.(AU)

A brucelose, enfermidade causada por 10 espécies de Brucella sp, pode afetar várias espécies de animais. A doença é responsável por perdas econômicas em diversos setores, inclusive na suinocultura. Não existem medidas profiláticas específicas para suínos no Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose Animal e Tuberculose-PNCEBT. Foi realizado um estudo transversal durante o período de agosto a outubro em 2011, 2012 e 2014 para o estudo de soroprevalência. Os analistas veterinários da Secretaria de Agricultura coletaram sangue de 1793 suínos de 823 criatórios no Distrito Federal. O teste Rosa de Bengala (RBPT) foi utilizado como triagem para a pesquisa de anticorpos contra Brucella sp. Os resultados positivos foram confirmados pelo teste de aglutinação lenta (SAT) e teste de 2-mercaptoetanol (2-ME) em série. Das 1793 amostras testadas pelo RBPT, 125 foram reagentes; sendo que 32% (46) destas amostras apresentaram aglutinação no SAT, mas apenas uma (0,8%) amostra foi confirmada positiva pelo teste 2-ME. O animal positivo foi rastreado em uma chácara de subsistência cujo dono tinha hábito de fornecer soro de leite de vaca aos suínos. Para prevenira brucelose suína, é necessário evitar a infecção cruzada pelo consumo de leite de vaca contaminado ou pelo contato direto com animais infectados. A política do governo deve melhorar a educação sanitária para incentivar a agricultura familiar a empregar medidas profiláticas e garantir a biossegurança. Os resultados do presente estudo indicam que o risco de brucelosesuína é baixo entre os criatórios de suínos do Distrito Federal.(AU)

Development and characterization of IgY antibodies against synthetic peptides from Brucella abortus OMP25 and BP26 proteins / Desarrollo y caracterización de anticuerpos IgY contra péptidos sintéticos de las proteínas OMP25 y BP26 de Brucella abortus

Brucellosis is a zoonose produced by bacterial species from the Brucella genus. Its isolation and identification in food using classical microbiological techniques is not practical due to its slow growth rate. Therefore, it is necessary to establish fast and specific methods for the detection of the bacteria in food. The goal of this work was the production and characterization of monospecific polyclonal antibodies in chicken (IgY) against synthetic peptides from Brucella abortus OMP25 and BP26 proteins, suitable for an antigen-capture assay. Conformational as well as antigenic predictions were performed using the ANTHEPROT package. Chemical synthesis was carried out by the multiple manual synthesis using the t-boc strategy. The peptides were used as antigens for the preparation of polyclonal antibodies in chicken. Experimental animals produced specific antibodies against the OMP25 and BP26 peptides constructs determined by ELISA and MABA assays showing correspondence between the predictive study and the immunogenicity obtained in chicken. The IgY proved to be able to recognize B. abortus by MABA assays. The binding activity and specificity of antibodies was determined by Western blot with cell extract from B. abortus. In this study, we demonstrated that OMP25 and BP26 peptides constructs are good candidates for production of specific IgY antipeptide antibodies capable of recognizing proteins from sonicated B. abortus strain S19, indicating the potential usefulness of the IgY antibody for development of immunoassays for detection of Brucella abortus.

La brucelosis es una zoonosis producida por especies del género Brucella. El aislamiento e identificación de la bacteria en alimentos usando las técnicas clásicas de microbiología no es práctico debido a su lenta tasa de crecimiento. Por lo tanto, es necesario establecer métodos rápidos para la detección de la bacteria en alimentos. En el presente trabajo se desarrollaron y caracterizaron anticuerpos policlonales monoespecíficos en gallinas (IgY) contra péptidos sintéticos de las proteínas OMP25 y BP26 de Brucella abortus, que puedan ser utilizados en un ensayo de captura. Para ello, se realizaron estudios conformacionales y de predicción de epítopes en la selección de los péptidos, los cuales se utilizaron como antígenos para la producción de las IgY. Los animales desarrollaron anticuerpos específicos contra los péptidos, mostrando correspondencia entre los estudios predictivos y la inmunogenicidad obtenida. Las IgY reconocieron a B. abortus en un ensayo de MABA y la actividad de unión y especificidad fue determinada por western blot con extracto celular de B. abortus. En este estudio, demostramos que los péptidos de las proteínas OMP25 y BP26 de B. abortus son buenos candidatos para la producción de anticuerpos IgY especificos capaces de reconocer proteínas de extracto de B. abortus cepa S19, indicando el potencial uso de anticuerpos IgY para el desarrollo de inmunoensayos para la detección de Brucella abortus.

Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão: uma abordagem sorológica, imunohistoquímica, microbiológica e molecular

Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão: uma abordagem sorológica, imunohistoquímica, microbiológica e molecular. [Brucella sp. like a bioagent of cervical bursitis in cattle slaughtered in São Luís, Maranhão: a serological approach, immunohistochemistry, and molecular microbiological]. 2012. 82f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) – Universidade Estadual do Maranhão, São Luís, 2012. RESUMO A brucelose é uma antropozoonose de evolução preferencialmente crônica, caracterizada pela infecção do sistema fagocítico mononuclear, por bactérias do gênero Brucella. Considerando a hipótese do abate de animais infectados e o seu risco potencial ao homem, a presente pesquisa buscou avaliar a Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão. Foram coletadas amostras de sangue, com e sem E.D.T.A (ácido etilenodiamino tetra-acético), fragmentos de bolsa cervical e linfonodos correspondentes de 47 bovinos abatidos em frigoríficos sob Inspeção Municipal, que apresentaram bursite cervical postmortem. A partir deste material coletado estimou-se a freqüência do bioagente Brucella sp. nas diferentes abordagens diagnósticas: sorologia, histopatologia, imunohistoquímica e PCR. Na sorologia de animais acima de 24 meses, 85,1% das amostras foram reagentes ao teste do AAT, confirmando-se a positividade em 78,7% através dos testes de soroaglutinação lenta e 2-mercaptoetanol. Na histopatologia foi possível observar que a maioria das amostras de bolsa cervical e linfonodos apresentaram infiltrado inflamatório linfohistioplasmocitário, mais comumente associado ao quadro crônico da doença. Todas as amostras de sangue total coletadas foram submetidas a PCR convencional, não sendo verificada a amplificação de produto de DNA compatível com Brucella sp. As 47 amostras coletadas foram submetidas ao isolamento bacteriano, sendo, posteriormente, efetuada a PCR a partir de tecidos (bolsa cervical e linfonodos correspondentes). Nesta PCR, evidenciou-se que 63,8% das amostras apresentaram um amplificado de 223pb, condizentes com o gênero Brucella sp. As amostras nas quais foram confirmadas o gênero Brucella, foram submetidas ao PCR multiplex AMOS – ENHANCED, objetivando verificar quais espécies desta bactéria estavam presentes nas amostras analisadas, constatou-se que em 28,0% foram identificadas duas bandas de 498 e 178pb, correspondentes ao biovar 1, 2, 4; em 30,0% das amostras foi identificada somente uma banda de 178pb, correspondente ao biovar 3, 5, 6, 9; 6,0% das amostras foram negativas na PCR multiplex e em 36,0% não houve isolamento de colônias, demonstrando padrões diferenciados entre os amplificados. Os resultados obtidos com a conclusão deste estudo puderam fornecer subsídios para futuras publicações científicas, além de contribuir com dados para o entendimento epidemiológico, isolamento e caracterização das espécies de Brucella sp., que acometem o rebanho bovino maranhense.

Levantamento sorológico de brucelose em cervídeos cativosdo parque Pampas Safari, Gravataí, RS / Serologic survey for brucellosis in captive cervids of Pampas Safari Park, Gravataí, RS

A brucelose é uma doença infecto-contagiosa provocada por diferentes espécies de bactérias do gêneroBrucella, que podem causar doença em praticamente todos mamíferos. O homem pode se infectaratravés da ingestão de leite e seus derivados sem tratamento térmico adequado e ao manipular restosplacentários, recém-nascidos, fezes e carcaças de animais infectados. O parque Pampas Safari possuiem seu plantel cerca de 470 cervídeos numa área de 320 hectares, juntamente com outros animais dafauna silvestre mundial. Durante o período de janeiro 2008 a março de 2010, todos os animais quenecessitaram ser anestesiados para procedimentos gerais tiveram seu sangue coletado. Por meio dasamostras de soro desses animais investigou-se sorologicamente a presença de bacterias do generoBrucella spp., utilizando-se testes de Antígeno Acidificado Tamponado, para detecção de anticorposanti-brucelas lisas, e Imunodifusão em Agar gel, para anticorpos anti-brucelas rugosas. Das 66 amostrasanalisadas, representando 10,6% do total de cervos do plantel, todas foram negativas para brucelose.Essa enfermidade não parece ser um problema na população de cervídeos do Parque, porém otrabalho de monitoramento deve ser continuadamente realizado, para saúde do plantel, de visitantese de funcionários.

Brucellosis is an infectious disease caused by different species of bacteria of the genus Brucella, which caninfect practically all mammals. Man can become infected through ingestion of milk and dairy productswithout heat treatment and through handling placental membranes, newborns, feces and carcasses ofinfected animals. Pampas Safari Park has a deer population of about 470 animals in 320 hectares, amongother animals of the wild world fauna. During the period of January 2008 to March 2010, all animals neededto be anesthetized for general procedures and had their blood collected. Through the serum of theseanimals it was done a serological investigation for Brucella spp, using the tests of Buffered Acidified PlateBrucella Antigen for the detection of antibodies to smooth brucella, and Agar Gel Immunodiffusion Testfor the detection of antibodies to rough brucella. The 66 samples were analyzed, representing 10,6% ofthe deer population, and were all negative for brucellosis. This disease does not seem to be a problem inthe deer population of the park, but the monitoring research must be carried out continuously, for thehealth of the flock, visitors and employees.

Levantamento sorológico de brucelose em cervídeos cativosdo parque Pampas Safari, Gravataí, RS / Serologic survey for brucellosis in captive cervids of Pampas Safari Park, Gravataí, RS

A brucelose é uma doença infecto-contagiosa provocada por diferentes espécies de bactérias do gêneroBrucella, que podem causar doença em praticamente todos mamíferos. O homem pode se infectaratravés da ingestão de leite e seus derivados sem tratamento térmico adequado e ao manipular restosplacentários, recém-nascidos, fezes e carcaças de animais infectados. O parque Pampas Safari possuiem seu plantel cerca de 470 cervídeos numa área de 320 hectares, juntamente com outros animais dafauna silvestre mundial. Durante o período de janeiro 2008 a março de 2010, todos os animais quenecessitaram ser anestesiados para procedimentos gerais tiveram seu sangue coletado. Por meio dasamostras de soro desses animais investigou-se sorologicamente a presença de bacterias do generoBrucella spp., utilizando-se testes de Antígeno Acidificado Tamponado, para detecção de anticorposanti-brucelas lisas, e Imunodifusão em Agar gel, para anticorpos anti-brucelas rugosas. Das 66 amostrasanalisadas, representando 10,6% do total de cervos do plantel, todas foram negativas para brucelose.Essa enfermidade não parece ser um problema na população de cervídeos do Parque, porém otrabalho de monitoramento deve ser continuadamente realizado, para saúde do plantel, de visitantese de funcionários.(AU)

Brucellosis is an infectious disease caused by different species of bacteria of the genus Brucella, which caninfect practically all mammals. Man can become infected through ingestion of milk and dairy productswithout heat treatment and through handling placental membranes, newborns, feces and carcasses ofinfected animals. Pampas Safari Park has a deer population of about 470 animals in 320 hectares, amongother animals of the wild world fauna. During the period of January 2008 to March 2010, all animals neededto be anesthetized for general procedures and had their blood collected. Through the serum of theseanimals it was done a serological investigation for Brucella spp, using the tests of Buffered Acidified PlateBrucella Antigen for the detection of antibodies to smooth brucella, and Agar Gel Immunodiffusion Testfor the detection of antibodies to rough brucella. The 66 samples were analyzed, representing 10,6% ofthe deer population, and were all negative for brucellosis. This disease does not seem to be a problem inthe deer population of the park, but the monitoring research must be carried out continuously, for thehealth of the flock, visitors and employees.(AU)

Padronização e validação do ELISA indireto para diagnostico de brucelose bovina utilizando como antigeno lipopolissacarideo e extrato protéico solúvel de Brucella abortus

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial, acarreta problemas sanitários importantes e prejuízos econômicos vultuosos a pecuária. A vacinação de fêmeas bovinas de 3 a 8 meses de idade e o sacrifício obrigatório de animais sororreagentes são importantes medidas de controle desta doença, descritas sob forma de lei através do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT). Visto a obrigatoriedade da eliminação dos animais sororreagentes e a inexistência de um teste preciso para detecção da doença, objetivou-se padronizar e validar dois ensaios imunoenzimáticos indiretos (iELISA) para o diagnóstico da brucelose bovina, capaz de diferenciar animal recém-vacinado de naturalmente infectado, utilizando como antígeno Lipopolissacarideo (LPS) e Extrato Protéico Solúvel (EPS), ambos extraídos da cepa 1119-3 de Brucella abortus. Para padronização utilizou-se duas concentrações dos antígenos; diferentes diluições de um pool de amostras negativas para brucelose, positivas de fêmeas bovinas recém-vacinadas contra brucelose e outro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas para brucelose; e duas diluições de anticorpo secundário. Após serem padronizados, os testes foram validados com 96 amostras de soros sanguíneos de bovinos previamente testados pelo Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e 2-Mercaptoetanol (2-ME), sendo 64 positivas (fêmeas bovinas naturalmente infectadas e recém-vacinadas) e 32 negativas. Os cálculos estatísticos foram feitos separando-se os grupos de amostras positivas de fêmeas bovinas naturalmente infectadas e de fêmeas bovinas recém-vacinadas. Para comparação entre os resultados dos testes foi usado o coeficiente kappa. Calculou-se a sensibilidade e a especificidade em relação ao 2-ME. Os testes iELISA/LPS e iELISA/EPS para amostras de soro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas, e iELISA/LPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, tiveram alta sensibilidade e especificidade, e concordância excelente com o 2-ME, porém não foi capaz de diferenciar animais recém-vacinados de naturalmente infectados, ao contrário do iELISA/EPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, capaz de fazer esta diferenciação, porém com baixa sensibilidade e fraca concordância com o 2-ME. Constatou-se que o EPS pode se tornar um potencial antígeno para testes diagnósticos de brucelose.(AU)

The malasseziose is a major disease causing inflammation of the hearing of dogs and cats. Thus, the objective was to report the cases of a cat and a dog assisted in the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia, and diagnosed with otitis externa by Malassezia sp. from laboratory and subjected to treatment with Auritop®.(AU)

Padronização e validação do ELISA indireto para diagnostico de brucelose bovina utilizando como antigeno lipopolissacarideo e extrato protéico solúvel de Brucella abortus

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial, acarreta problemas sanitários importantes e prejuízos econômicos vultuosos a pecuária. A vacinação de fêmeas bovinas de 3 a 8 meses de idade e o sacrifício obrigatório de animais sororreagentes são importantes medidas de controle desta doença, descritas sob forma de lei através do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT). Visto a obrigatoriedade da eliminação dos animais sororreagentes e a inexistência de um teste preciso para detecção da doença, objetivou-se padronizar e validar dois ensaios imunoenzimáticos indiretos (iELISA) para o diagnóstico da brucelose bovina, capaz de diferenciar animal recém-vacinado de naturalmente infectado, utilizando como antígeno Lipopolissacarideo (LPS) e Extrato Protéico Solúvel (EPS), ambos extraídos da cepa 1119-3 de Brucella abortus. Para padronização utilizou-se duas concentrações dos antígenos; diferentes diluições de um pool de amostras negativas para brucelose, positivas de fêmeas bovinas recém-vacinadas contra brucelose e outro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas para brucelose; e duas diluições de anticorpo secundário. Após serem padronizados, os testes foram validados com 96 amostras de soros sanguíneos de bovinos previamente testados pelo Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e 2-Mercaptoetanol (2-ME), sendo 64 positivas (fêmeas bovinas naturalmente infectadas e recém-vacinadas) e 32 negativas. Os cálculos estatísticos foram feitos separando-se os grupos de amostras positivas de fêmeas bovinas naturalmente infectadas e de fêmeas bovinas recém-vacinadas. Para comparação entre os resultados dos testes foi usado o coeficiente kappa. Calculou-se a sensibilidade e a especificidade em relação ao 2-ME. Os testes iELISA/LPS e iELISA/EPS para amostras de soro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas, e iELISA/LPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, tiveram alta sensibilidade e especificidade, e concordância excelente com o 2-ME, porém não foi capaz de diferenciar animais recém-vacinados de naturalmente infectados, ao contrário do iELISA/EPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, capaz de fazer esta diferenciação, porém com baixa sensibilidade e fraca concordância com o 2-ME. Constatou-se que o EPS pode se tornar um potencial antígeno para testes diagnósticos de brucelose.

The malasseziose is a major disease causing inflammation of the hearing of dogs and cats. Thus, the objective was to report the cases of a cat and a dog assisted in the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia, and diagnosed with otitis externa by Malassezia sp. from laboratory and subjected to treatment with Auritop®.

Espondilodiscite por brucelose: relato de caso / Brucellosis spondylodiscitis: case report

Relata-se um caso de espondilodiscite por Brucella em um paciente do sexo masculino, 56 anos, fazendeiro, com manifestações sistêmicas da doença. O diagnóstico foi realizado por sorologia com título de 1/160, hemocultura positiva, o VHS foi elevado, bem como alterações radiológicas mostraram espondilodiscite ao nível de T8/T9 compatíveis com a patologia. O paciente foi tratado com estreptomicina 1gIM/dia por 15 dias, doxaciclina e rifampicina por seis semanas, com melhora clínica do quadro. O envolvimento vertebral na brucelose é uma complicação de ocorrência variável na literatura, mas considerado pouco freqüente, de difícil diagnóstico principalmente em regiões com alta prevalência de tuberculose, visto que esta pode mimetizar o quadro de brucelose. Chama-se atenção a um caso raro de espondilodiscite por brucelose, dada a necessidade de diagnóstico precoce e tratamento a fim de se evitar possíveis seqüelas.

A case of spondylodiscitis due to Brucella with systematic manifestation of the disease, in a 56-year-old male patient who was a farmer, is reported. The diagnosis was made from serological tests, with a titer of 1/160. The blood culture was positive and the blood sedimentation rate was high. Radiological abnormalities showed spondylodiscitis at the T8/T9 level that were compatible with this disease. The patient was treated with streptomycin at 1g IM/day for 15 days, and doxycycline plus rifampicin for six weeks, with a clinical improvement in the condition. Vertebral involvement in brucellosis is a complication of variable occurrence in the literature. However, it is considered to be infrequent and difficult to diagnose, particularly in regions with high prevalence of tuberculosis, given that this may mimic conditions of brucellosis. Attention is drawn to this rare case of spondylodiscitis due to brucellosis, given the need for early diagnosis and treatment in order to avoid possible sequelae.

Bovine and human brucellosis diagnosed in county slaughterhouse of São Luis - MA, Brazil / Brucelose bovina e humana diagnosticada em matadouro municipal de São Luís - MA, Brasil

Brucellosis is an infectious and contagious disease caused by bacteria of the genus Brucella, infecting animals and humans, presenting a major economic and public health impact, especially in developing countries. In this context, the objectives were to diagnose anti-Brucella spp. aglutinins, isolate Brucella spp. in cattle, and to verify the frequency of soropositive workers, from a slaughthouse in São Luiz-MA. Samples of blood were collected to obtain the serum, as well as exsudate and fibrosed part of serous sacks. Blood samples from 59 workers from the slaughterhouse were also collected. These samples were analyzed through the tests of soroaglutination test (AAT) and 2-Mercaptoetanol (2-ME) and complement fixation. From the 419 cattle samples examined, 25 animals (5.97%) soropositives were found, from which 28.00% (7/25) had bursitis and the presence of Brucella spp. was confirmed by isolation. Of the human samples, six (10.17%) were positive in the test of 2-ME. The prevalence rate of anti-Brucella spp. aglutinins in cattle is above the national average and of the Northeast. The prevalence of infection in workers from the slaughterhouse in the county of São Luis could pose serious problems to public health, requiring the establishment of a Program of Sanitary Education for workers of the slaughterhouse.

A brucelose é uma doença infecto-contagiosa provocada por bactérias do gênero Brucella, que infectam animais e o homem, apresentando um grande impacto econômico e de saúde pública, sobretudo em países em desenvolvimento. Neste contexto objetivou-se diagnosticar aglutininas anti-Brucella sp., isolar Brucella sp. em bovinos, e verificar a freqüência de trabalhadores soropositivos, provenientes de um abatedouro municipal em São Luís - MA. Amostras de sangue foram colhidas, para obtenção do soro, bem como exsudato e parte fibrosada de bolsas serosas. Também foram colhidos sangue de 59 funcionários do abatedouro. Estas amostras foram analisadas através dos testes de Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e 2-Mercaptoetanol (2-ME) e Fixação de Complemento. Das 419 amostras bovinas examinadas, verificou-se que 25 animais (5,97%) foram soropositivos, dos quais, 28,00% (7/25) apresentaram bursite e a presença de Brucella sp. foi confirmada por isolamento bacteriano. Das amostras humanas, seis (10,17%) foram positivas, no teste de 2-ME. A taxa de prevalência de aglutinas anti-Brucella sp. em bovinos encontra-se acima da média nacional e do Nordeste. A prevalência da infecção em funcionários de abatedouros no Município de São Luís pode acarretar sérios problemas à saúde pública, necessitando a implantação de um Programa de Educação Sanitária para funcionários de abatedouros.

Bovine and human brucellosis diagnosed in county slaughterhouse of São Luis - MA, Brazil / Brucelose bovina e humana diagnosticada em matadouro municipal de São Luís - MA, Brasil

Brucellosis is an infectious and contagious disease caused by bacteria of the genus Brucella, infecting animals and humans, presenting a major economic and public health impact, especially in developing countries. In this context, the objectives were to diagnose anti-Brucella spp. aglutinins, isolate Brucella spp. in cattle, and to verify the frequency of soropositive workers, from a slaughthouse in São Luiz-MA. Samples of blood were collected to obtain the serum, as well as exsudate and fibrosed part of serous sacks. Blood samples from 59 workers from the slaughterhouse were also collected. These samples were analyzed through the tests of soroaglutination test (AAT) and 2-Mercaptoetanol (2-ME) and complement fixation. From the 419 cattle samples examined, 25 animals (5.97%) soropositives were found, from which 28.00% (7/25) had bursitis and the presence of Brucella spp. was confirmed by isolation. Of the human samples, six (10.17%) were positive in the test of 2-ME. The prevalence rate of anti-Brucella spp. aglutinins in cattle is above the national average and of the Northeast. The prevalence of infection in workers from the slaughterhouse in the county of São Luis could pose serious problems to public health, requiring the establishment of a Program of Sanitary Education for workers of the slaughterhouse. 

A brucelose é uma doença infecto-contagiosa provocada por bactérias do gênero Brucella, que infectam animais e o homem, apresentando um grande impacto econômico e de saúde pública, sobretudo em países em desenvolvimento. Neste contexto objetivou-se diagnosticar aglutininas anti-Brucella sp., isolar Brucella sp. em bovinos, e verificar a freqüência de trabalhadores soropositivos, provenientes de um abatedouro municipal em São Luís - MA. Amostras de sangue foram colhidas, para obtenção do soro, bem como exsudato e parte fibrosada de bolsas serosas. Também foram colhidos sangue de 59 funcionários do abatedouro. Estas amostras foram analisadas através dos testes de Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e 2-Mercaptoetanol (2-ME) e Fixação de Complemento. Das 419 amostras bovinas examinadas, verificou-se que 25 animais (5,97%) foram soropositivos, dos quais, 28,00% (7/25) apresentaram bursite e a presença de Brucella sp. foi confirmada por isolamento bacteriano. Das amostras humanas, seis (10,17%) foram positivas, no teste de 2-ME. A taxa de prevalência de aglutinas anti-Brucella sp. em bovinos encontra-se acima da média nacional e do Nordeste. A prevalência da infecção em funcionários de abatedouros no Município de São Luís pode acarretar sérios problemas à saúde pública, necessitando a implantação de um Programa de Educação Sanitária para funcionários de abatedouros.