Siponimod (BAF312): Características generales e implicancias clínicas de la dosificación farmacogenómica en el tratamiento de la Esclerosis Múltiple secundaria progresiva / Siponimod (BAF312): General Characteristics and Clinical Implications of Pharmacogenomic Dosage in the Treatment of Active Secondary Progressive Multiple Sclerosis

Siponimod es un medicamento inmunosupresor selectivo, desarrollado como la primera terapia oral para la esclerosis múltiple secundaria progresiva activa. Este medicamento actúa modulando el receptor de esfingosina 1 fosfato (S1P), como antagonista de S1P1 y S1P5, evitando así la salida de linfocitos desde los nódulos linfáticos y previniendo procesos inflamatorios en el Sistema Nervioso Central que desencadenan una desmielinización. Existe amplio conocimiento científico respecto a que la administración del medicamento a pacientes va a depender de sus características farmacogenéticas, por lo que la FDA recomienda fuertemente realizar un estudio de genotipificación de la enzima que metaboliza siponimod, CYP2C9, cuyas variantes genéticas *2 y *3 clasifican a pacientes como metabolizadores pobres, extensivos o rápidos. Para pacientes homocigotos de CYP2C9*3 siponimod está totalmente contraindicado. Adicionalmente, antes de su prescripción se debe realizar un electrocardiograma, evaluaciones del estado de anticuerpos, oftálmica, estado de vacunación contra varicela y recuento de linfocitos periféricos, ya que el efecto del medicamento es dependiente de la dosis administrada, por lo que se realiza un proceso de titulación en dosis desde los 0,25mg hasta los 2 mg. El protocolo farmacoterapéutico de siponimod es reflejo fidedigno de la utilidad de la farmacogenética en la medicina personalizada..

Siponimod is a selective immunosuppressive medication, developed as the first oral therapy for active secondary progressive multiple sclerosis. This medication acts by modulating the sphingosine 1 phosphate (S1P) receptor, as an antagonist of S1P1 and S1P5, thus preventing the egress of lymphocytes from lymph nodes and preventing inflammatory processes in the Central Nervous System that trigger demyelination. There is extensive scientific knowledge regarding the administration of the medication to patients, which will depend on their pharmacogenetic characteristics. Therefore, the FDA strongly recommends conducting a genotyping study of the enzyme that metabolizes siponimod, CYP2C9, whose genetic variants *2 and *3 classify patients as poor, extensive, or rapid metabolizers. Siponimod is completely contraindicated for patients who are homozygous for CYP2C9*3. Additionally, before prescribing it, an electrocardiogram, assessments of antibody status, ophthalmic evaluation, varicella vaccination status, and peripheral lymphocyte count should be conducted, as the medication's effect is dose-dependent. Therefore, a titration process is carried out starting from 0.25mg up to 2 mg. The pharmacotherapeutic protocol of siponimod is a reliable reflection of the utility of pharmacogenetics in personalized medicine.

Barniz polimerizable de vidrio ionómero modificado con resina "clinpro xt": una alternativa de tratamiento para la sensibilidad dentaria. Revisión sistemática de la literatura

Resumen Introducción: En respuesta a la sensibilidad dentinaria, se han desarrollado múltiples productos, entre ellos, Clinpro XT, barniz de vidrio ionómero modificado con resina fotopolimerizable con flúor, calcio y fosfato. Metodología: Se realizó una revisión sistemática de la literatura. La selección fue en base a título, resumen y texto completo de acuerdo a los criterios de inclusión y exclusión. Resultados: De 299 artículos, fueron seleccionados revisiones sistemáticas, metaanálisis, estudios in vivo e in vitro y 2 encuestas. Discusión: Clinpro XT reduce la permeabilidad dentinaria, ocluye túbulos dentinarios e inhibe su reapertura, aumenta la biodisponibilidad de minerales en saliva y promueve la remineralización del esmalte. Significando una mayor protección del esmalte y dentina de forma inmediata y a largo plazo. Conclusiones: Clinpro XT demostró disminuir la hipersensibilidad dentinaria incluso después 6 meses posterior a su aplicación.

Resumo Introdução: Em resposta à sensibilidade dentinária, foram desenvolvidos múltiplos produtos, incluindo Clinpro XT, um verniz de vidro de ionómero modificado com resina fotopolimerizável com flúor, cálcio, e fosfato. Metodologia: Foi realizada uma revisão sistemática da literatura. A selecção foi baseada no título, resumo e texto completo de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Resultados: De 299 artigos, revisões sistemáticas, meta-análises, estudos in vivo e in vitro e 2 inquéritos foram seleccionados. Discussão: Clinpro XT reduz a permeabilidade da dentina, oclui os túbulos dentinários e inibe a sua reabertura, aumenta a biodisponibilidade dos minerais na saliva e promove a remineralização do esmalte. O que significa uma maior protecção do esmalte e da dentina imediatamente e a longo prazo. Conclusões: Foi demonstrado que o Clinpro XT diminui a hipersensibilidade da dentina mesmo 6 meses após a aplicação.

Abstract Introduction: Multiple products have been developed to treat dentin sensitivity, including Clinpro XT, a lightcuring resinmodified ionomer glass varnish with fluoride, calcium, and phosphate. Methodology: A systematic literature review was conducted. The articles were selected based on title, abstract, and full text according to the inclusion and exclusion criteria. Results: Of 299 articles, systematic reviews, metaanalysis, in vivo and in vitro studies, and 2 surveys were selected. Discussion Clinpro XT reduces dentin permeability, occludes dentin tubules, inhibits their reopening, increases mineral bioavailability in saliva, and promotes enamel remineralization. This entails greater protection of enamel and dentin immediately and in the long term. Conclusions: Clinpro XT was shown to decrease dentin hypersensitivity even six months after application.

Efeito de soluções contendo hexametafosfato de sódio e quercetina, associados ou não ao fluoreto, sobre o desgaste erosivo dentinário in vitro / Effect of sodium hexametaphosphate and quercetin, associated or not with fluoride, on dentin erosion in vitro

O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito de soluções contendo fluoreto (F), hexametafosfato de sódio (HMP) e quercetina (QC), sozinhos ou em associação, sobre a erosão dentinária e sobre a inibição de metaloproteinases da matriz (MMPs) -2 e -9, em protocolos in vitro. Blocos de dentina radicular bovina (4 × 4 × 2 mm; n = 96), selecionados por dureza superficial, foram aleatoriamente divididos em 8 grupos experimentais (n = 12/grupo) e tratados 2×/dia (um minuto) com as seguintes soluções: (1) água deionizada (controle negativo); (2) 1100 ppm F ("F"); (3) 1,0% HMP ("HMP"); (4) 0,03% QC ("QC"); (5) F+HMP; (6) F+QC; (7) HMP+QC; e (8) F+HMP+QC. Os blocos foram submetidos a desafios erosivos 4×/dia, por 5 dias (exposição dinâmica a ácido cítrico 50 mmol.l-1 , pH 3,2, 90 s). Em seguida, foram analisados quanto à perda dentinária (perfilometria) e à perda de dureza integrada em profundidade (área sob a curva, ∆KHN). O potencial antiproteolítico das soluções contendo F, HMP e/ou QC foi analisado por zimografia. Os dados de perda dentinária (log10) foram submetidos a ANOVA um critério, seguido do teste de Tukey. Os resultados de ∆KHN (dados brutos) foram submetidos a ANOVA dois critérios, medidas repetidas, seguido do teste HolmSidak (p< 0,05). O menor desgaste erosivo foi observado no grupo F+HMP+QC. Nas menores profundidades (5-30 µm), os blocos tratados com a solução contendo F+HMP+QC apresentaram os maiores valores de ∆KHN. A análise zimográfica mostrou que todos os tratamentos promoveram atividade antiproteolítica total da MMP-2, com exceção da QC administrada sozinha (inibição de 77%). Para MMP-9, todas as soluções contendo HMP e a associação de F+QC apresentaram atividade antiproteolítica total. Conclui-se que a adição de HMP e QC a soluções contendo F levou a uma maior proteção contra a erosão dentinária, tanto em superfície (perda dentinária) quanto em relação ao conteúdo mineral do tecido remanescente (∆KHN), além de promover uma completa inibição da atividade de MMPs -2 e -9 in vitro(AU)

The aim of the present study was to investigate the effect of solutions containing fluoride (F), sodium hexametaphosphate (HMP) and quercetin (QC), alone or in association, on dentin erosion and on the inhibition of matrix metalloproteinases (MMPs) - 2 and -9, using in vitro protocols. Bovine root dentin blocks (4 × 4 × 2 mm; n = 96), selected by surface hardness, were randomly divided into 8 experimental groups (n = 12/group) and treated 2×/day (one minute) with the following solutions: (1) deionized water (negative control); (2) 1100 ppm F ("F"); (3) 1.0% HMP ("HMP"); (4) 0.03% QC ("QC"); (5) F+HMP; (6) F+QC; (7) HMP+QC; and (8) F+HMP+QC. Blocks were submitted to erosive challenges 4×/day for 5 days (dynamic exposure to 50 mmol.l-1 citric acid, pH 3.2, 90 s). They were then analyzed for dentin loss (profilometry) and integrated hardness loss in depth (area under the curve, ∆KHN). The antiproteolytic potential of solutions containing F, HMP and/or QC was analyzed by zymography. Dentin loss results (log10 transformed) were submitted to one-way ANOVA, followed by Tukey's test. ∆KHN data (raw) were submitted to two-way, repeated-measures ANOVA, followed by the Holm-Sidak test (p< 0.05). The lowest dentin erosive wear was promoted by F+HMP+QC. At the lowest depths (5-30 µm), blocks treated with F+HMP+QC showed the highest values of ∆KHN. Zymography analysis showed that all treatments completely inhibited MMP-2 activity, except for QC administered alone (77% inhibition). For MMP-9, all the solutions containing HMP or the association of F+QC promoted total antiproteolytic activity. It was concluded that the addition of HMP and QC to F solutions led to greater protection against dentin erosion, both at the surface (dentin loss) and in relation to the mineral content of the remaining tissue (∆KHN), in addition to promoting a complete inhibition of MMPs -2 and -9 activity in vitro(AU)

Efeitos de nanopartículas de hexametafosfato de sódio, associadas ou não ao fluoreto, em biofilmes mistos de Streptococcus mutans e Candida albicans e em biofilmes microcosmos / Effects of sodium hexametaphosphate nanoparticles, combined or not with fluoride, on dual-species biofilms of Streptococcus mutans and Candida albicans and on microcosm biofilms

O presente estudo avaliou os efeitos de nanopartículas de hexametafosfato de sódio (HMPnano), associadas ou não ao fluoreto (F), na composição orgânica (Subprojeto 1- S1) e inorgânica (Subprojeto 2-S2) de biofilmes mistos de Streptococcus mutans e Candida albicans formados in vitro; e na viabilidade celular e atividade metabólica de biofilmes microcosmos derivados de saliva (Subprojeto 3-S3). Em S1 e S2, soluções de HMPnano ou HMP microparticulado (HMPmicro) foram preparadas a 0,5% ou 1%, com ou sem F (1100 ppm F, NaF), além de 1100 ppm F (controle positivo) e saliva artificial (controle negativo). S. mutans e C. albicans foram cultivados em saliva artificial. Os biofilmes foram formados no fundo de poços de placas de microtitulação e tratados 72, 78 e 96 horas após o início da formação, por 1 minuto. Em S1, após o último tratamento, realizou-se análises de quantificação das unidades formadoras de colônias (UFCs), produção de biomassa total, atividade metabólica, além da composição da matriz extracelular dos biofilmes e avaliação estrutural. Observou-se que 1% de HMPnano combinado ao F levou aos menores UFCs de S. mutans, bem como às menores concentrações de carboidratos da matriz extracelular dos biofilmes, além de afetar substancialmente a sua estrutura. Em S2, após o último tratamento, avaliou-se o pH e a composição inorgânica dos biofilmes (análise das concentrações de F, cálcio (Ca) e fósforo (P)), antes e após exposição a sacarose. Soluções contendo 1% HMPnano combinado ao F promoveram os maiores valores de pH dos biofilmes, mesmo após exposição à sacarose. Além disso, 1% HMPnano promoveu maiores concentrações de P, enquanto que o HMP (micro/nano, com/sem F) levou a concentrações inexpressivas de Ca no fluido do biofilme. Em S3, os efeitos do HMPmicro ou HMPnano, sozinhos ou associados ao F, foram avaliados em biofilmes microcosmos derivados de saliva. Os biofilmes foram formados sobre discos de vidro por 24 h e, em seguida, S. mutans (C180- 2) foi incorporado ou não aos biofilmes. A partir deste momento, os mesmos ativos avaliados em S1/S2 foram adicionados ao meio de cultura, a 20% das concentrações utilizadas nesses subprojetos. Após 96 h de formação, foram determinadas as UFCs totais e de S. mutans, e avaliada a produção de ácido láctico pelos biofilmes. Todos os meios de cultura contendo contendo HMP levaram às menores concentrações de ácido láctico e às maiores reduções de UFCs totais e de S. mutans dos biofilmes, sem influência do tamanho da partícula de HMP, associação com F ou adição de S. mutans. Conclui-se que o HMPnano a 1%, associado a 1100 ppm F, promoveu uma diminuição substancial no metabolismo de biofilmes mistos de S. mutans e C. albicans, e da viabilidade de S. mutans. Esta combinação também levou a valores de pH mais próximos do neutro, além de afetar a composição inorgânica destes biofilmes. Para biofilmes microcosmos, o HMP promoveu a diminuição da viabilidade microbiana e acidogenicidade, sem influência, entretanto, do tamanho da partícula de HMP e da presença de F(AU)

This study evaluated the effects of sodium hexametaphosphate nanoparticles (HMPnano), combined or not with fluoride (F), on the organic (Subproject 1-S1) and inorganic (Subproject 2-S2) compositions of dual-species biofilms of Streptococcus mutans and Candida albicans formed in vitro; and on the cell viability and metabolic activity of saliva-derived microcosms biofilms (Subproject 3-S3). In S1 and S2, solutions containing HMPnano or conventional/micrometric HMP (HMPmicro) were prepared at 0.5 or 1%, combined or not with F (1,100 ppm F, as NaF). Also, a solution containing 1,100 ppm F and pure artificial saliva were tested as positive and negative controls, respectively. S. mutans and C. albicans strains were cultivated in artificial saliva. The biofilms were formed in well plates, and treated with the test solutions at 72, 78 and 96 from the beginning of the biofilm formation, for 1 minute. In S1, after the last treatment, the number of the colony-forming units (CFUs), production of total biomass, metabolic activity, composition of the extracellular matrix, and the structure of the biofilms were determined. HMP at 1% combined with F led to the lowest S. mutans CFUs and lowest concentration of carbohydrates from the extracellular matrix of the biofilms, besides substantially affecting biofilm's structure. In S2, after the last treatment, the pH and the inorganic composition of the biofilms (analysis of F, calcium (Ca), and phosphorus (P) concentrations), prior to and after sucrose exposure, were evaluated. Solutions containing 1% HMPnano combined with F led to the highest biofilm pH, even after exposure to sucrose. In addition, 1% HMPnano promoted the highest P concentrations, while HMP (micro/nano, with/without F) led to inexpressive Ca levels in the biofilm fluid. In S3, the effects of HMPmicro or HMPnano, alone or associated with F, were evaluated in salivaderived microcosm biofilms, which were formed during 24 h attached to glass coverslips. Thereafter, S. mutans (C180-2) was incorporated to the biofilms. From that timepoint onwards, the same actives analyzed in S1/S2 were added to the culture medium at 20% of the concentrations used in those subprojects. After 96 h of formation, total and S. mutans CFU-counting were determined, and the production of lactic acid was assessed. All HMP-containing culture media led to the lowest lactic acid concentrations, and to the highest reductions in total and S. mutans CFU counts, with no significant influence of HMP's particle size, association with F or the addition of S. mutans. In summary, it was concluded from S1 and S2 that 1% HMPnano combined with 1,100 ppm F substantially reduced the metabolism of S. mutans and C. albicans dual-species biofilms, besides reducing the viability of S. mutans. Also, this combination led to biofilm pH values closer to neutral ones, besides affecting their inorganic composition. From S3, HMP promoted reductions in the microbial viability and acidogenicity, without the influence, however, of HMP's particle size or the presence of F(AU)

Efeito do trimetafosfato de sódio micro e nanoparticulado, associadas ou não ao fluoreto, sobre biofilmes mistos de Streptococcus mutans e Candida albicans: avaliação da composição orgânica e inorgânica / Effect of micro and nanoparticulate sodium trimetaphosphate, associated or not with fluoride, on mixed biofilms of Streptococcus mutans and Candida albicans: evaluation of organic and inorganic composition

Este estudo avaliou o efeito de nanopartículas de TMP (TMPn) sobre a composição inorgânica e componentes da matriz extracelular de biofilmes mistos de Streptococcus mutans e Candida albicans. Biofilmes de duas espécies de S. mutans e C. albicans foram cultivados em saliva artificial em placas de 6 poços e tratados três vezes (72, 78 e 96 h após o início de sua formação), por 1 minuto, com soluções contendo TMP microparticulado (TMPm) e TMPn nas concentrações de 1% e 3%, combinadas ou não com 1100 ppm F. Além disso, solução de 1100 ppm F (F) e saliva artificial (CTL) foram testadas como controles positivos e negativos, respectivamente. Após o último tratamento, a composição da matriz extracelular foi analisada em termos de proteína e carboidrato, e o pH e as concentrações de F, cálcio (Ca), fósforo (P) e P do TMP da biomassa e fluido do biofilme foram determinadas. Em outro conjunto de experimentos, após o último tratamento, os biofilmes foram expostos a uma solução de sacarose a 20%, e o pH e componentes inorgânicos dos biofilmes foram avaliados conforme mencionado acima. Os dados de proteínas e carboidratos foram submetidos a ANOVA a 1 critério, seguido pelo teste de Student-Newman-Keuls, enquanto os dados da composição inorgânica do biofilme foram submetidos a ANOVA a 2 critérios, seguido pelo teste de Fisher LSD (p< 0,05). Tratamentos com TMPn a 3% combinado com F levou a reduções significativamente maiores nas concentrações de carboidratos da matriz extracelular, maior concentração iônica de F no fluido, e um pH significativamente mais alto, se comparado a todos os outros grupos. Além disso, TMPn a 3% sem F levou a concentrações de P significativamente mais altas em comparação a todos os outros grupos, antes da exposição a sacarose. Conclui-se que o TMPn afetou a composição da matriz extracelular, o pH dos biofilmes analisados, além de interferir nos componentes inorgânicos dos biofilmes ao aumentar os níveis de fósforo no fluido do biofilme(AU)

This study evaluated the effect of TMP nanoparticles (nTMP) on the inorganic composition and extracellular matrix components of mixed biofilms of Streptococcus mutans and Candida albicans. Biofilms of two species of S. mutans and C. albicans were cultivated in artificial saliva in 6-well plates and treated three times (72, 78 and 96 h after the beginning of their formation), for 1 minute, with Solutions containing microparticulate TMP (TMPm) and TMPn at concentrations of 1% and 3%, combined or not with 1100 ppm F. In addition, 1100 ppm F (F) solution and artificial saliva (CTL) were tested as positive and negative controls, respectively. After the last treatment, the composition of the extracellular matrix was analyzed in terms of protein and carbohydrate, and the pH and concentrations of F, calcium (Ca), phosphorus (P) and P of the TMP of the biomass and biofilm fluid were determined. In another set of experiments, after the last treatment, the biofilms were exposed to a 20% sucrose solution, and the pH and inorganic components of the biofilms were evaluated as mentioned above. Protein and carbohydrate data were subjected to 1-way ANOVA, followed by the Student-Newman-Keuls test, while biofilm inorganic composition data were subjected to 2-way ANOVA, followed by the Fisher LSD test (p< 0 .05). Treatments with 3% nTMP combined with F led to significantly greater reductions in extracellular matrix carbohydrate concentrations, and significantly higher pH, compared to all other groups. In addition, 3% nTMP without F led to significantly higher P concentrations compared to all other groups before sucrose exposure. It is concluded that TMPn affected the composition of the extracellular matrix, the pH of the analyzed biofilms, in addition to interfering with the inorganic components of the biofilms by increasing phosphorus levels in the biofilm fluid(AU)

Efeito de soluções ou dentifrícios contendo trimetafosfato de sódio, xilitol, eritritol e fluoreto, em diferentes associações, sobre biofilmes de interesse cariogênico / Effect of solutions or dentifrices containing sodium trimetaphosphate, xylitol, erythritol and fluoride, in different associations, on biofilms of cariogenic interest

Este estudo avaliou o efeito de dentifrícios ou soluções contendo trimetafosfato de sódio(TMP), xilitol(X), eritritol(E) e fluoreto(F), em diferentes associações, sobre cepas e biofilmes cariogênicos. Três subprojetos (SP1, SP2 e SP3) apresentaram os objetivos: SP1) Avaliar o efeito de dentifrícios contendo "TMP(0,25%)", "X(16%)", "E(4%)", "F(200 e 1100 ppm)" sozinhos ou em diferentes associações, sobre cepas isoladas de Streptococcus mutans(SM), Lactobacillus casei(LC), Actinomyces israelii(AI) e Candida albicans(CA). SP2) Avaliar o efeito de soluções contendo "TMP"(0,075%), "X"(4,8%), "E"(1,2%), "F"(60 e 330 ppm) e saliva artificial pura, sozinhos ou em diferentes associações sobre biofilmes mistos de SM e CA. SP3) Avaliar o efeito das mesmas soluções de SP2 sobre biofilmes microcosmos patogênicos com a incorporação ou não de SM. No SP1, cepas de SM, LC, AI e CA foram incorporadas ao meio de BHIágar, vertidas em placas, realizados poços no ágar e diferentes diluições de slurries dos dentifrícios foram adicionados. Os halos foram medidos com paquímetro digital. A análise estatística se deu por ANOVA dois critérios, e teste de Tukey HSD (p< 0,05). Para SM, o maior halo foi observado por "200F+TMP" em todas as diluições, seguido por "200F+X+E". Para LC, a tendência mostrou inibição microbiana promovida pelos polióis, potencializado pela associação com os outros compostos. Para AI, observou-se uma tendência menos definida. Para CA, o dentifrício experimental "200F+X+E+TMP" foi mais eficaz que os outros. No SP2, as mesmas soluções e grupos do SP1 foram usados a uma concentração final de 30% do valor inicial dos dentifrícios. Biofilmes mistos de SM e CA foram cultivados na presença contínua desses ativos e avaliou-se a quantificação de células viáveis (UFCs), biomassa total, atividade metabólica e componentes da matriz extracelular. A análise estatística se deu por ANOVA um critério e teste de Tukey HSD (p< 0,05). As contagens de UFCs foram afetadas pelo F, enquanto a biomassa e atividade metabólica pelo TMP. Adicionalmente, observou-se efeito sinérgico desses ativos. Os polióis tiveram efeitos mais pronunciados nos carboidratos da matriz extracelular, com pouca ou nenhuma ação nas demais variáveis. A associação dos quatro ativos promoveu aumento no efeito antibiofilme, e foi afetado por F e/ou TMP, com pouco efeito dos polióis isoladamente. No SP3, biofilmes microcosmos foram formados em um modelo de biofilme de alto rendimento com ou sem a incorporação da cepa de SM. As mesmas soluções e concentrações de SP2 estavam constantemente presentes no meio de cultura. Analisou-se as UFCs e produção de acido lático dos biofilmes. Os dados foram analisados por ANOVA ou Kruskal-Wallis, e StudentNewman-Keuls (p< 0,05). O grupo "60F+TMP" produziu quantidades de ácido lático significativamente menor, e apresentou reduções na contagem total de UFCs em biofilmes microcosmos, incorporados ou não com SM, comparado ao grupo controle. O grupo experimental promoveu diminuições sobre os parâmetros analisados. A associação de "F+TMP" e o grupo experimental reduziram as contagens de UFCs total e de SM, e a produção de ácido lático por biofilmes microcosmos derivados de saliva. Os resultados permitiram concluir que a associação dos quatro compostos ativos e "F+TMP" apresentaram reduções em todos os parâmetros avaliados(AU)

This study evaluated the effect of dentifrices or solutions containing sodium trimetaphosphate(TMP), xylitol(X), erythritol(E) and fluoride(F), in different associations, on cariogenic strains and biofilms. Three subprojects (SP1, SP2 and SP3) presented the objectives: SP1) To evaluate the effect of dentifrices containing "TMP(0.25%)", "X(16%)", "E(4%)", "F( 200 and 1100 ppm)" alone or in different associations, on isolated strains of Streptococcus mutans(SM), Lactobacillus casei(LC), Actinomyces israelii(AI) and Candida albicans(CA). SP2) Evaluate the effect of solutions containing "TMP"(0.075%), "X"(4.8%), "E"(1.2%), "F"(60 and 330 ppm) and pure artificial saliva, alone or in different associations on mixed SM and CA biofilms. SP3) To evaluate the effect of the same SP2 solutions on pathogenic microcosm biofilms with or without the incorporation of SM. In SP1, SM, LC, AI and CA strains were incorporated into the BHI-agar medium, poured into plates, wells were made in the agar, and different dilutions of dentifrice slurries were added. The halos were measured with a digital caliper. Statistical analysis was performed by two-way ANOVA and Tukey HSD test (p< 0.05). For SM, the largest halo was observed by "200F+TMP" in all dilutions, followed by "200F+X+E". For LC, the trend showed microbial inhibition promoted by polyols, potentiated by the association with the other compounds. For AI, a less defined trend was observed. For CA, the experimental dentifrice "200F+X+E+TMP" was more effective than the others. In SP2, the same solutions and groups of SP1 were used at a final concentration of 30% of the initial value of the dentifrices. Mixed biofilms of SM and CA were cultured in the continuous presence of these actives, and the quantification of viable cells (CFUs), total biomass, metabolic activity and extracellular matrix components were evaluated. Statistical analysis was performed by one-way ANOVA and Tukey HSD test (p< 0.05). CFU counts were affected by F, while biomass and metabolic activity by TMP. Additionally, a synergistic effect of these actives was observed. Polyols had more pronounced effects on extracellular matrix carbohydrates, with little or no action on other variables. The association of the four actives promoted an increase in the antibiofilm effect and was affected by F and/or TMP, with little effect of polyols alone. In SP3, microcosm biofilms were formed in a high-throughput biofilm model with or without the incorporation of the SM strain. The same SP2 solutions and concentrations were constantly present in the culture medium. The CFUs and lactic acid production of biofilms were analyzed. Data were analyzed by ANOVA or Kruskal-Wallis and StudentNewman-Keuls (p< 0.05). The "60F+TMP" group produced significantly lower amounts of lactic acid and showed reductions in total CFU counts in microcosm biofilms, whether or not incorporated with SM, compared to the control group. The experimental group promoted decreases in the analyzed parameters. The association of "F+TMP" and the experimental group reduced total and SM CFU counts and lactic acid production by saliva-derived microcosm biofilms. The results allowed us to conclude that the association of the four active compounds and "F+TMP" showed reductions in all evaluated parameters(AU)

Cardiovascular mortality in peritoneal dialysis: the impact of mineral disorders / Mortalidade cardiovascular em diálise peritoneal: o impacto dos distúrbios minerais

Abstract Introduction: Mineral and bone disorders (MBD) are associated with higher mortality in dialysis patients. The main guidelines related to the subject, Kidney Disease Outcomes Quality Initiative (KDOQI) and Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO), were elaborated based on published information from hemodialysis participants. The aim of our study was to evaluate the impact of calcium (Ca), phosphorus (P), and parathyroid hormone (PTH) (according to guideline ranges from KDOQI and KDIGO) on the cardiovascular mortality of peritoneal dialysis (PD) patients. Methods: We used the BRAZPDII database, an observational multi-centric prospective study, which assessed participants on PD between December 2004 and January 2011. Amongst 9,905 participants included in this database, we analyzed 4424 participants who were on PD for at least 6 months. The appropriate confounding variables were entered into the model. Serum levels of Ca, P, and PTH were the variables of interest for the purposes of the current study. Results: We found a significant association between high P serum levels, categorized by KDOQI and KDIGO (P above 5.5 mg/dL), and cardiovascular survival (p < 0.01). Likewise, a compelling association was found between lower levels of PTH, categorized by guidelines (KDOQI and KDIGO - PTH less than 150 pg/mL, p < 0.01), and cardiovascular survival. Conclusion: In conclusion, levels of P above and PTH below the values proposed by KDOQI and KDIGO were associated with cardiovascular mortality in PD patients.

Resumo Introdução: Os distúrbios minerais e ósseos (DMO) estão associados a maior mortalidade em pacientes de diálise. As principais diretrizes relacionadas ao assunto, Kidney Disease Outcomes Quality Initiative (KDOQI) e Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO) foram elaboradas com base em informações publicadas de pacientes em hemodiálise. O objetivo do nosso estudo foi avaliar o impacto do cálcio (Ca), fósforo (P) e paratormônio (PTH) (de acordo com as faixas propostas pelas diretrizes do KDOQI e KDIGO) na mortalidade cardiovascular de pacientes em diálise peritoneal (DP). Métodos: Utilizamos o banco de dados BRAZPDII, um estudo prospectivo observacional multicêntrico, que avaliou participantes de DP entre dezembro de 2004 e janeiro de 2011. Entre os 9.905 participantes incluídos neste banco de dados, analisamos 4.424 que estavam em DP há pelo menos 6 meses. As variáveis de confusão apropriadas foram inseridas no modelo. Os níveis séricos de Ca, P e PTH foram as variáveis de interesse para os fins do presente estudo. Resultados: Encontramos uma associação significativa entre níveis séricos de P elevados, categorizados por KDOQI e KDIGO (P acima de 5,5 mg/dL), e sobrevivência cardiovascular (p < 0,01). Da mesma forma, foi encontrada uma associação convincente entre níveis mais baixos de PTH, categorizados por diretrizes (KDOQI e KDIGO - PTH inferior a 150 pg/mL, p < 0,01), e sobrevivência cardiovascular. Conclusão: Em conclusão, níveis de P acima e PTH abaixo dos valores propostos por KDOQI e KDIGO foram associados à mortalidade cardiovascular em pacientes de DP.

Characterization of Pseudomonas bacteria of Piper tuberculatum regarding the production of potentially bio-stimulating compounds for plant growth / Caracterização de bactérias Pseudomonas de Piper tuberculatum quanto à produção de compostos potencialmente bioestimulantes para o crescimento de plantas

Despite advances in the identification and characterization of endophytic bacteria in various plant species worldwide, little is known about such microorganisms in plants from the Amazon region. Previous studies reported that Piper tuberculatum endophytic Pseudomonas (isolates Pt12 and Pt13, identified as Pseudomonas putida and Pseudomonas sp., respectively) were able to inhibit the in vitro growth of Fusarium solani f. sp. piperis, which causes root rot in black pepper (Piper nigrum), and that Pt13 promoted the growth of P. nigrum. Therefore, the aim here was to characterize these bacteria regarding their ability to produce plant growth-promoting substances [siderophores, indol acetic acid (IAA) and soluble phosphate]. Chrome azurol S assays were performed for the detection of siderophores. For qualitative and quantitative assays of IAA production and phosphate solubilization, Salkowski´s reagent and NBRIP medium with molybdenum blue reagent, respectively, were used. Results revealed that Pt12 and Pt13 were able to synthesize IAA, mainly under a high concentration of L-tryptophan, indicating that they are IAA-producing bacteria, probably through a tryptophan-dependent biosynthesis pathway. The presence of P. nigrum extract positively influenced the IAA production by Pt12 and Pt13, with highest values of 125 and 90 µg mL-1, respectively. In addition, Pt12 was positive for the production of siderophores and produced 56.56 µg mL-1 of soluble phosphate. In contrast, Pt13 showed no ability to produce siderophores or to solubilize phosphate. Besides their potential in controlling plant diseases, Pt12 and Pt13 have potential as biofertilizers, favoring sustainable agriculture.(AU)

Apesar dos avanços na identificação e caracterização de bactérias endofíticas em espécies vegetais em todo o mundo, pouco se sabe sobre esses microrganismos em plantas da região amazônica. Estudos anteriores mostraram que Pseudomonas de Piper tuberculatum (isolados Pt12 e Pt13, identificados como Pseudomonas putida e Pseudomonas sp., respectivamente) são capazes de inibir Fusarium solani f. sp. piperis, que causa a podridão das raízes da pimenteira-do-reino (Piper nigrum), e que Pt13 promoveu o crescimento de P. nigrum. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi caracterizar essas bactérias quanto à capacidade de produzir substâncias potencialmente bioestimulantes para o crescimento vegetal [sideróforos, ácido indol acético (AIA) e fosfato solúvel]. Ensaios de Cromo Azurol S foram realizados para detecção de sideróforos. Para os ensaios qualitativos e quantitativos de produção de AIA e solubilização de fosfato, foram utilizados o reagente de Salkowski e o meio NBRIP com azul de molibdênio, respectivamente. Os resultados revelaram que Pt12 e Pt13 sintetizaram AIA, principalmente sob alta concentração de L-triptofano, indicando que provavelmente utilizam uma via de biossíntese dependente deste aminoácido. A presença do extrato de P. nigrum influenciou positivamente a produção de AIA por Pt12 e Pt13, com valores máximos de 125 e 90 µg mL-1, respectivamente. Além disso, Pt12 foi positiva para produção de sideróforos e produziu 56.56 µg.mL-1 de fosfato solúvel. Em contraste, Pt13 não produziu sideróforos, nem solubilizou fosfato. Além do potencial de controle de doenças de plantas, Pt12 e Pt13 têm potencial como biofertilizantes, favorecendo a agricultura sustentável.(AU)

Síntese e caracterização de ciclotrifosfato de sódio contendo cálcio e seu efeito na prevenção da erosão do esmalte in vitro / Synthesis and characterization of calcium-containing sodium cyclotriphosphate and its effect on preventing enamel erosion in vitro

O objetivo do presente estudo foi sintetizar e caracterizar ciclotrifosfato de sódio (NaTMP) contendo cálcio, e verificar seu efeito utilizando modelo de lesões iniciais de erosão do esmalte. Os ciclotrifosfatos contendo cálcio (CaNaTMP) foram sintetizados utilizando coluna para cromatografia e adição de sobrenadante de solução contendo hidróxido de cálcio e analisados por meio de microscopia eletrônica de varredura e espectroscopia de raios-X por dispersão de energia. Para determinar o efeito sobre lesões erosivas iniciais, blocos de esmalte bovino sadios (n=96) foram selecionados por dureza de superfície inicial e divididos em 8 grupos experimentais (12 blocos/grupo): controle (água deionizada), 0,24% NaF (1100 ppm F), 0,25%, 0,5% e 1% de NaTMP e CaNaTMP nas mesmas concentrações. Os blocos de esmalte foram imersos em 4 mL das soluções experimentais durante 2 minutos, seguidos por 4 desafios erosivos (ácido cítrico, 0,75%, pH 3,5, por 1 minuto, sob agitação). A porcentagem de perda da dureza de superfície (%SH) foi calculada após cada desafio ácido. Os dados foram submetidos à análise de variância de medidas repetidas a dois critérios, seguida pelo teste de Tukey (p< 0,05). O processo de síntese levou a substituição de átomos de Na por átomos de Ca e as partículas apresentaram tamanhos homogêneos. As soluções contendo 0,25%, 0,5% e 1% CaNaTMP apresentaram menor %SH quando comparadas as suas contrapartes sem cálcio (p< 0,001), após os quatro desafios erosivos. Quando comparado a solução contendo 1100 ppm F, as soluções 0,5% e 1% CaNaTMP promoveram redução na perda de dureza (p< 0,001). Concluiu-se que soluções contendo CaNaTMP promoveram efeitos protetores superiores em comparação ao grupo 1100 ppm F sobre lesões iniciais do esmalte(AU)

The objective of the present study was to synthesize and characterize sodium cyclotriphosphate (NaTMP) containing calcium and verify its effect using an initial enamel erosion model. Cyclotriphosphate containing calcium (CaNaTMP) was synthesized using column chromatography, and addition of a solution with calcio hydroxide supernatant and analyzed by scanning electron microscopy and energydispersive X-ray spectroscopy. To determine the effect on enamel initial erosion, sound bovine enamel blocks (n=96) were selected by initial surface hardness and divided into to 8 experimental groups (12 blocks/group): control (deionized water), 0.24% NaF (1100 ppm F), 0.25%, 0.5% and 1% NaTMP and CaNaTMP at the same concentrations. The enamel blocks were immersed in 4 mL of the experimental solutions for 2 minutes followed by 4 erosive challenges (citric acid, 0.75%, pH 3.5, for 1 minute, under stirring). The percentage of surface hardness variation (%SH) was calculated after each acid challenge. Data were subjected to two-way repeated measures analysis of variance, followed by Tukey's test (p< 0.05). The synthesis process led to the replacement atoms of Na by atoms of Ca with particles having, homogeneous sizes. The solutions containing 0.25%, 0.5% and 1% CaNaTMP promoted lower %SH when compared to their counterparts without calcium (p< 0.001), after the four erosive challenges. When compared to the solution containing 1100 ppm F, the 0.5% and 1% CaNaTMP solutions were superior in reducing hardness loss (p< 0.001). It was concluded that solutions containing CaNaTMP led to superior protective effects compared to the 1100 ppm F group on initial enamel erosion(AU)

Avaliação da atividade antimicrobiana de biomateriais nanocompósitos de poliamida 6 com nanopartículas de trimetafosfato decoradas com nanopartícula de prata / Evaluation of the antimicrobial activity of polyamide 6 nanocomposite biomaterials with trimetaphosphate nanoparticles decorated with silver nanoparticles

O uso de novos materiais nanocompósitos para fabricação de dispositivos protéticos, matrizes para preenchimento de defeitos ósseos, proteção do tecido pulpar de dentes e túbulos dentinários expostos pode colaborar significativamente na qualidade de vida da população. Objetivo: Realizar o processamento da matriz polimérica de poliamida-6 (P6) impregnada com nanopartículas de trimetafosfato (TMP) e nanopartícula de prata (AgNP), avaliar a atividade antimicrobiana contra Streptococcus mutans e Candida albicans e a liberação de TMP e Ag+ . Métodos: Foi determinado a concentração inibitória mínima (CIM) da AgNP com ou sem a presença da NH3 para S. mutans e C. albicans. Em seguida, realizado a síntese e caracterização dos nanocompósios (P6, P6-2,5, 5 e 10%TMP associado ou não a AgNP), quantificação das unidades formadoras de colônia (UFC), determinação do halo de inibição e quantificação de TMP e Ag+ liberados durante 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 14, 16, 18, 20 e 24 horas em água deionizada. Os dados foram submetidos à análise de variância bidirecional, seguida do teste de Fisher LSD (p< 0,05). Resultados: A CIM para C. albicans foi de 9,40 mg/mL com ou sem a presença da NH3 e para o S. mutans foi de 601,9 mg/mL com NH3 e 300,9 mg/mL sem NH3. Nos testes de caracterização foi possível incorporar a P6 com TMP sem alterar suas propriedades. A maior quantidade de Ag+ liberada ocorreu nas primeiras três hora para todos os grupos decorados com AgNP. Houve liberação de TMP nas primeira três horas para os grupos P6-5%TMP e P6-10%TMP e para as demais membranas não foram detectadas liberações. No ensaio de difusão em ágar os halos formados para C. albicans e S. mutans mostraram ação da AgNP para ambos os microrganismos. Os grupos P6-Ag2,5%TMP e P6-Ag-5%TMP com AgNP apresentam maior redução de UFC para S. mutans quando comparado aos demais grupos, com maior redução no tempo de 18 horas. Para C. albicans todos os grupos apresentaram redução na UFC quando comparado ao controle, sem diferença estatística entre os mesmo. Conclusão: Foi possível desenvolver um matriz polimérica de P6 impregnada com TMP e AgNP com ação antimicrobiana contra os microrganismos testados(AU)

The use of new nanocomposite materials for the manufacture of prosthetic devices, matrices for filling bone defects, protection of the pulp tissue of exposed teeth and dentinal tubules can significantly contribute to the quality of life of the population. Objective: To perform the processing of the polymeric matrix of polyamide. 6 (P6) impregnated with trimetaphosphate nanoparticles (TMP) and silver nanoparticles (AgNP), evaluate the antimicrobial activity against Streptococcus mutans and Candida albicans and the release of TMP and Ag +. Methods: The minimum inhibitory concentration (MIC) of AgNP was determined with or without the presence of NH3 for S. mutans and C. albicans. Then, the synthesis and characterization of the nanocomposites (P6, P6-2.5, 5 and 10% TMP associated or not with AgNP), quantification of colony forming units (CFU), determination of the inhibition halo and quantification of TMP and Ag + released during 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 14, 16, 18, 20 and 24 hours in deionized water. The data were submitted to bidirectional analysis of variance, followed by the Fisher LSD test (p < 0.05). Results: The MIC for C. albicans was 9.40 mg / mL with or without the presence of NH3 and for S. mutans it was 601.9 mg / mL with NH3 and 300.9 mg / mL without NH3. In the characterization tests it was possible to incorporate the P6 with TMP without changing its properties. The highest amount of Ag + released occurred in the first three hours for all groups decorated with AgNP. There was TMP release in the first three hours for the P6-5% TMP and P6-10% TMP groups and for the other membranes, no releases were detected. In the agar diffusion assay, halos formed for C. albicans and S. mutans showed AgNP action for both microorganisms. The P6-Ag-2.5% TMP and P6-Ag-5% TMP groups with AgNP show a greater reduction in CFU for S. mutans when compared to the other groups, with a greater reduction in the time of 18 hours. For C. albicans, all groups showed a reduction in CFU when compared to the control, with no statistical difference between them. Conclusion: It was possible to develop a polymeric matrix of P6 impregnated with TMP and AgNP with antimicrobial action against the microorganisms tested(AU)

Antagonic and plant growth-promoting effects of bacteria isolated from mine tailings at El Fraile, Mexico / Efecto antagónico y promotor del crecimiento vegetal de bacterias aisladas de losjales mineros de El Fraile, México

Abstract Mine tailings contain high concentrations of heavy metals such as As, Pb, Cu, Mn, andFe, which are detrimental to the health of humans and the environment. In tailings at the ElFraile mine in Guerrero, Mexico, some plant species are apparently tolerant of heavy metals andcan be found growing in the tailings. These plants could be associating with heavy metal-tolerantbacteria that promote plant growth and improve biomass production, and these bacteria couldbe a useful alternative for bacteria-assisted phytoremediation. The objective of this study wasto isolate bacteria detected in the mine tailings at El Fraile-Taxco, focusing on those in the soilfrom the rhizosphere, the inner tissue of the root, leachate, and water, which have the poten-tial to promote plant growth. The ability of the isolated bacteria to promote plant growth wasevaluated in vitro. Of the 151 morphotypes isolated, 51% fix nitrogen, 12% dissolve phosphates,and 12%, 39.7%, and 48.3% produce indole acetic acid, gibberellins, and siderophores, respec-tively. In addition, 66.7% were observed to produce lytic enzymes, such as proteases, celluloses,lipases, esterases, and amylases, which exhibited activity against Fusarium, Aspergillus, andColletotrichum. The use of 16S rRNA analysis led to the identification of the bacterial generaChryseobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Mycobacterium, Staphylococcus, Curtobacterium,Enterobacter, Agrobacterium, Ochrobactrum, Serratia, Stenotrophomonas, and Acinetobac-ter. The bacteria isolated from the rhizosphere exhibited the greatest ability to fix nitrogenand produced indole acetic acid, gibberellins, siderophore, and lytic enzymes. In addition, theisolates collected from the soil samples demonstrated ability to solubilize phosphate.

Resumen Los jales mineros contienen una alta concentración de metales pesados como As, Pb, Cu, Mn y Fe. Estas altas concentraciones de metales son perjudiciales para la salud humana y el medio ambiente. En los jales mineros de El Fraile, México, es posible detectar especies de plantas tolerantes a los metales pesados; estas plantas podrían estar asociadas con bacterias capaces de promover su crecimiento, además de poseer actividad antagonista contra hongos. El objetivo de este estudio fue aislar de diferentes microambientes (suelo rizosférico, tejido de raíz, lixiviado y agua) del área del jale El Fraile bacterias con potencial de promover el crecimiento vegetal y actividad antagonista contra hongos fitopatógenos. Estudios in vitro demostraron que el 51% de los morfotipos aislados (151 en total) fijan nitrógeno y el 12% disuelven fosfatos. Asimismo, el 12, 39,7 y 48,3% producen ácido indolacético, giberelinas y sideróforos, respectivamente. Por otro lado, se observó que el 66,7% producía enzimas líticas como proteasas, celulasas, lipasas, esterasas y amilasas, además de exhibir actividad antagonista contra Fusarium, Aspergillus y Colletotrichum. Mediante análisis del gen 16S ARNr, se identificó a estas bacterias como pertenecientes a los géneros Chryseobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Mycobacterium, Staphylococcus, Curtobacterium, Enterobacter, Agrobacterium, Ochrobac-trum, Serratia, Stenotrophomonas y Acinetobacter. Las bacterias de la rizosfera exhibieron la mayor capacidad para fijar nitrógeno y produjeron ácido indolacético, giberelinas, sideróforos y enzimas líticas. Además, se detectó que las cepas aisladas de suelo rizosférico eran las que tenían la capacidad de solubilizar fosfatos.

Antagonic and plant growth-promoting effects of bacteria isolated from mine tailings at El Fraile, Mexico.

Mine tailings contain high concentrations of heavy metals such as As, Pb, Cu, Mn, and Fe, which are detrimental to the health of humans and the environment. In tailings at the El Fraile mine in Guerrero, Mexico, some plant species are apparently tolerant of heavy metals and can be found growing in the tailings. These plants could be associating with heavy metal-tolerant bacteria that promote plant growth and improve biomass production, and these bacteria could be a useful alternative for bacteria-assisted phytoremediation. The objective of this study was to isolate bacteria detected in the mine tailings at El Fraile-Taxco, focusing on those in the soil from the rhizosphere, the inner tissue of the root, leachate, and water, which have the potential to promote plant growth. The ability of the isolated bacteria to promote plant growth was evaluated in vitro. Of the 151 morphotypes isolated, 51% fix nitrogen, 12% dissolve phosphates, and 12%, 39.7%, and 48.3% produce indole acetic acid, gibberellins, and siderophores, respectively. In addition, 66.7% were observed to produce lytic enzymes, such as proteases, celluloses, lipases, esterases, and amylases, which exhibited activity against Fusarium, Aspergillus, and Colletotrichum. The use of 16S rRNA analysis led to the identification of the bacterial genera Chryseobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Mycobacterium, Staphylococcus, Curtobacterium, Enterobacter, Agrobacterium, Ochrobactrum, Serratia, Stenotrophomonas, and Acinetobacter. The bacteria isolated from the rhizosphere exhibited the greatest ability to fix nitrogen and produced indole acetic acid, gibberellins, siderophore, and lytic enzymes. In addition, the isolates collected from the soil samples demonstrated ability to solubilize phosphate.

Efeito de dentifrícios com reduzida concentração de fluoreto contendo trimetafosfato de sódio e polióis na erosão inicial do esmalte / Effect of low-fluoride toothpaste containing sodium trimetaphosphate and polyols on initial enamel erosion

Este estudo in vitro avaliou o efeito de dentifrícios contendo fluoreto (F), trimetafosfato de sódio (TMP) e/ou xilitol e eritritol (XE) em inibir ou reparar lesão erosiva inicial do esmalte. Blocos de esmalte bovino (n=120) foram selecionados por dureza de superfície (SH) inicial e divididos em 5 grupos compostos por dentifrícios (24 blocos/grupo): Placebo (sem F, TMP e XE); 1100 ppm F; 16% xilitol + 4% eritritol (XE); 200 ppm F + 0,2% TMP (200 ppm F/TMP); e 200 ppm F + 0,2% TMP + 16% xilitol + 4% eritritol (200 ppm F/TMP/XE). Para a análise do efeito protetor, blocos hígidos (n=60) foram imersos 1x/2 minutos em suspensão de dentifrícios/saliva humana. Em seguida, os blocos foram submetidos a 4 desafios erosivos com ácido cítrico (0,75%, pH 3,5) de 1 minuto cada, sob agitação. A seguir, a SH foi determinada pós-tratamento (t) e após o 1º, 2º, 3º e 4º desafios ácidos erosivos (d) para o cálculo da porcentagem de variação da SH (%SH). Para a análise do efeito reparador, esmalte previamente erodido (n=60) foi tratado e submetido aos mesmos desafios erosivos descritos anteriormente. A %SH de recuperação (R) e %SHt foram calculadas, bem como, a diferença entre a %SHR e %SHd obtendo-se o Δ%SH para cada desafio. Experimento adicional foi realizado para análise da deposição de precipitados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) em esmalte hígido e erodido. Os dados foram submetidos à análise de variância de medidas repetidas a dois critérios, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Os resultados mostraram que o maior efeito protetor e reparador foi produzido pelo dentifrício 200 ppm F/TMP/XE quando comparado aos demais grupos (p<0,001). Os grupos 1100 ppm F e 200 ppm F/TMP apresentaram similar efeito protetor para o 1º, 2º e 3º desafios (p>0,05), e menor quando comparados ao XE (p<0,001). O efeito protetor e reparador foi: XE>200 ppm F/TMP>1100 ppm F>Placebo (p<0,001). Na MEV observou-se deposição de precipitado no esmalte para todos os grupos, formando uma camada mais espessa e homogênea nos grupos contendo XE e/ou TMP. Concluiu-se que dentifrício contendo 200 ppm F, TMP e polióis apresenta efeito protetor e reparador superior quando comparado a um dentifrício 1100 ppm F em lesões erosivas iniciais no esmalte(AU)

This in vitro study evaluated the effect of toothpaste containing fluoride (F), sodium trimetaphosphate (TMP) and/or xylitol and erythritol (XE) in inhibit or repair initial enamel erosion lesions. Bovine enamel blocks (n=120) were selected by initial surface hardness (SH) and divided into 5 groups of toothpastes (n=24 blocks/group): Placebo (no F, TMP or XE); 1100 ppm F; 16% xylitol + 4% erythritol (XE); 200 ppm F + 0.2% TMP (200 ppm F/TMP); and 200 ppm F + 0.2% TMP + 16% xylitol + 4% erythritol (200 ppm F/TMP/XE). For the analysis of the protective effect, sound blocks (n=60) were immersed in toothpaste slurry in human saliva once for 2 minutes. Hereafter, the blocks were submitted to 4 erosive challenges in citric acid (0.75%, pH 3.5) by 1 minute, under stirring. Then, the SH was determined after treatment (t) and after the 1st, 2nd, 3rd and 4th erosive acid challenges (d) to calculate the percentage of change of the SH (%SH). For the analysis of the repair effect, eroded enamel (n=60) were treated and submitted to erosive challenges as describe previously. The recovery (R) of %SH and %SHt were calculated, as well as the difference between the %SHR and %SHd obtaining the Δ%SH for each challenge. Additional experimental was performed to analysis the deposition of precipitates by Scanning Electronic Microscopy (SEM) on sound and eroded enamel. Variables were submitted to two-way repeated measures analysis of variance followed by StudentNewman-Keuls test (p<0.05). The results showed that the highest protective and repair effect was produced by the 200 ppm F/TMP/XE toothpaste when compared to the other groups (p<0.001). The 1100 ppm F and 200 ppm F/TMP groups had similar protective effect for the 1st, 2nd and 3rd challenges (p>0.05), and lower when compared to XE (p<0.001). The protective and repair effect was: XE>200 ppm F/TMP>1100 ppm F>Placebo (p<0.001). There were deposition of precipitates on enamel for all groups, with a thicker layer and homogeneous for XE and/or TMP groups. It was concluded that toothpaste containing 200 ppm F, TMP and polyols has superior protective and repair effect when compared to 1100 ppm F toothpaste in initial enamel erosive lesions(AU)

Efeito de vernizes fluoretados suplementados com nanopartículas de trimetafosfato de sódio sobre o desgaste dental erosivo in vitro e in situ / Effect of fluoride varnishes supplemented with nanosized Sodium Trimetaphosphate on enamel erosive wear in vitro and in situ

O presente estudo avaliou o efeito de vernizes fluoretados suplementados com nanopartículas de Trimetafosfato de Sódio (TMP) sobre o desgaste erosivo do esmalte dental bovino, em protocolos in vitro e in situ. Para a 1ª fase, blocos de esmalte dental bovino (n=100) foram selecionados por meio de dureza de superfície (DS) e aleatoriamente divididos em 5 grupos experimentais (n=20/grupo), de acordo com os vernizes testados: (a) Placebo (Pla - sem F ou TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% TMP microparticulado (5% Micro), (d) 5% NaF + 2,5% TMP nanoparticulado (2,5% Nano), (e) 5% NaF + 5% TMP nanoparticulado (5% Nano). Os blocos receberam uma única aplicação dos vernizes e foram imersos em saliva artificial por 6 h. Em seguida, os vernizes foram removidos e todos os blocos, submetidos a 4 desafios erosivos diários durante 5 dias (ERO, imersão em ácido cítrico 0,05 M, pH 3,2, 90 s/ciclo, sob agitação). Após ERO, metade dos blocos foi submetida a abrasão por escovação (15 s/ciclo) com dentifrício placebo (ERO+ABR). Os blocos foram analisados por perfilometria, dureza de superfície (DS) e dureza em secção longitudinal (ΔKHN). Os dados foram submetidos a ANOVA a dois critérios e Teste de Fisher LSD (p< 0,05). O desgaste do esmalte foi significativamente menor para ERO comparado a ERO+ABR para todos os vernizes testados (p< 0,001), seguindo o padrão 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < 2,5% Nano < Pla (ERO e ERO+ABR). A maior perda de DS foi observada para o Pla e a menor para 5% NaF (ERO) e 2,5% Nano (ERO+ABR), sem diferenças significativas entre 2,5% Nano, 5% NaF e 5% Micro. Os maiores valores de ΔKHN foram observados para 5% Micro e 5% Nano a 5-30 µm, com diferenças menos acentuadas entre os grupos a 30-70 µm (ERO e ERO+ABR). Para a 2ª fase, blocos de esmalte bovino (n=224) foram selecionados por DS e distribuídos aleatoriamente entre os grupos: (a) Placebo (Pla - sem F ou TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% TMP microparticulado (5% Micro), e (d) 5% NaF + 5% TMP nanoparticulado (5% Nano). Os blocos foram inseridos em dispositivos acrílicos palatinos (n=4/dispositivo), e tratados com os vernizes uma única vez, permanecendo na cavidade bucal dos voluntários (n=14) por 6 h. Em seguida, os vernizes foram removidos e os blocos, submetidos à ERO (imersão ex vivo em ácido cítrico 0,05 M, pH 3,2, 90 s, 4x/dia), enquanto dois blocos foram adicionalmente submetidos a abrasão por escovação com dentifrício fluoretado (ERO+ABR), totalizando 5 dias em cada etapa experimental, seguindo um protocolo duplo-cego e cruzado. As análises dos blocos e dos dados foram idênticas às da 1ª fase. Os valores do desgaste seguiram um padrão similar em ambas as condições experimentais (ERO ou ERO+ABR), com 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < Pla. Um padrão similar foi observado para dureza em secção longitudinal (ΔKHN), apesar de não serem verificadas diferenças significativas entre 5% Micro×5% Nano (5-30 µm). Quanto à perda de DS, o maior valor foi observado para Pla e o menor para 5% Nano (ERO ou ERO+ABR), sem diferenças significativas entre Pla×5% NaF (ERO), 5% NaF×5% Micro (ERO+ABR), e 5% Micro×5% Nano (ERO+ABR). Diante dos resultados, conclui-se que a adição de TMP a vernizes fluoretados melhorou significativamente a proteção contra o desgaste erosivo do esmalte in vitro e in situ. O uso de 5% de TMP em escala nanométrica aumentou ainda mais esses efeitos(AU)

The present study evaluated the effect of fluoride (F) varnishes supplemented with sodium trimetaphosphate (TMP) nanoparticles on erosive tooth wear, using in vitro and in situ protocols. For the first phase, bovine enamel blocks (n=100) were selected by surface hardness (SH) and randomly divided into 5 experimental groups (n=20/group), according to the varnishes tested: (a) Placebo (Pla - without F or TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% micrometric TMP (5% Micro), (d) 5% NaF + 2.5% nano-sized TMP (2.5% Nano), (e) 5% NaF + 5% nano-sized TMP (5% Nano). Blocks received a single varnish application, and were immersed in artificial saliva for 6 h. Varnishes were then removed and all blocks, subjected to 4 daily erosive challenges during for 5 days (ERO, immersion in 0.05 M citric acid, pH 3.2, 90 s/cycle, under agitation). After ERO, half of the blocks were subjected to abrasion by brushing (15 s/cycle) with placebo dentifrice (ERO+ABR). Blocks were analyzed by profilometry, surface hardness (SH) and cross-sectional hardness (ΔKHN). The data were submitted to 2-way ANOVA and Fisher's LSD test (p< 0.05). Enamel wear was significantly lower for ERO compared to ERO+ABR for all varnishes tested (p< 0.001), following the pattern 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < 2.5% Nano < Pla (ERO and ERO+ABR). The highest SH loss was observed for Pla, and the lowest for 5% NaF (ERO) and 2.5% Nano (ERO+ABR), without significant differences between 2.5% Nano, 5% NaF and 5% Micro. The highest values of ΔKHN were observed for 5% Micro and 5% Nano at 5-30 µm, with less marked differences between the groups at 30-70 µm (ERO and ERO+ABR). In the second phase, bovine enamel blocks (n=224) were selected by SH and randomly distributed among the groups: (a) Placebo (Pla - without F or TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% micrometric TMP (5% Micro), and (d) 5% NaF + 5% nano-sized TMP (5% Nano). The blocks were inserted in acrylic palatal devices (n=4/device), and treated with the varnishes only once, remaining in the oral cavity of the volunteers (n=14) for 6 h. Then, the varnishes were removed and the blocks, subjected to ERO (ex vivo immersion in 0.05 M citric acid, pH 3.2, 90 s, 4x/ day), while two blocks were additionally subjected to abrasion by brushing with fluoride dentifrice (ERO+ABR), totaling 5 days in each experimental stage, following a double-blind, crossover protocol. The blocks and the data were analyzed as described for the first phase. The wear values followed a similar pattern under both experimental conditions (ERO or ERO+ABR), with 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < Pla. A similar pattern was observed for hardness in depth (ΔKHN), although no significant differences were found between 5% Micro×5% Nano (5-30 µm). As for SH loss, the highest value was observed for Pla, and the lowest for 5% Nano (ERO or ERO+ABR), without significant differences between Pla×5% NaF (ERO), 5% NaF×5% Micro (ERO+ABR), and 5% Micro×5% Nano (ERO + ABR). In view of the results, it was concluded that the addition of TMP to fluoride varnishes significantly improved protection against erosive enamel wear in vitro and in situ. The use of 5% nano-sized TMP further increased these effects(AU)

Characterization of bacterial endophytes from the roots of native and cultivated Brazil nut trees (Bertholletia excelsa) / Caracterização de bactérias endofíticas de raízes de castanha-do-Brasil (Bertholletia excelsa) em habitats nativos e cultivados

Brazil nut is a very important nontimber forest product in the Amazon region. Propagation of this tree still represents a challenge due to slow and uneven seed germination. In this context, plant growth-promoting bacteria can facilitate the process of propagation. The aims of this study were to isolate and characterize endophytic bacteria from the roots of Brazil nut trees in native terra firme forest and cultivation areas in northern Brazil, and to identify mechanisms by which bacteria act in plant growth promotion. Overall, 90 bacterial isolates were obtained from the roots of Brazil nut trees in monoculture, agroforestry and native forest areas by using different semisolid media. The isolates were characterized by sequencing the 16S rRNA gene. Plant growth-promoting characteristics were evaluated by the presence of the nifH gene, aluminum phosphate solubilization and the production of indole compounds. The isolates were affiliated with 18 genera belonging to 5 different classes (α-Proteobacteria, β-Proteobacteria, γ-Proteobacteria, Bacilli and Actinobacteria). The genus Bacillus was predominant in the forest and monoculture areas. Fourteen isolates presented the nifH gene. Most of the bacteria were able to solubilize aluminum phosphate and synthetize indole compounds. The results indicated high diversity of endophytic bacteria present among the roots of Brazil nut trees, mainly in the agroforestry area, which could be related to soil attributes. Among the 90 isolates, the 22 that presented the best results regarding plant growth promotion traits were good candidates for testing in seedling production of Brazil nut trees.(AU)

A castanha-do-brasil é um produto florestal não madeireiro muito importante na região amazônica. A propagação desta árvore ainda representa um desafio, devido ao lento e irregular processo de germinação das sementes. Neste contexto, bactérias promotoras do crescimento vegetal podem facilitar o processo de propagação. O objetivo deste estudo foi isolar e caracterizar bactérias endofíticas em raízes de castanha-do-Brasil em floresta de terra firme e em áreas cultivadas no norte do Brasil, e identificar alguns mecanismos de promoção do crescimento vegetal executados por essas bactérias. No total, 90 isolados bacterianos foram obtidos de raízes de castanha-do-Brasil em monocultura, agrofloresta e floresta nativa, usando diferentes meios de cultivo semi-sólidos. Os isolados foram caracterizados pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As características de promoção do crescimento vegetal foram avaliadas através da presença do gene nifH, solubilização de fosfato de alumínio e produção de compostos indólicos. Os isolados foram afiliados a 18 gêneros, pertencentes a cinco diferentes classes (α-Proteobacteria, β-Proteobacteria, γ-Proteobacteria, Bacilli e Actinobacteria). O gênero Bacillus foi predominante, principalmente nas áreas de floresta e monocultura. Quatorze isolados apresentaram o gene nifH. A maioria dos isolados foi capaz de solubilizar fosfato de alumínio e sintetizar compostos indólicos. Os resultados indicam uma elevada diversidade de bactérias endofíticas presente em raízes de castanha-do-Brasil, principalmente em área de agrofloresta, que pode estar relacionado aos atributos do solo. Entre os 90 isolados, 22 apresentaram os melhores resultados relacionados às características de promoção do crescimento vegetal, e são bons candidatos para testes em produção de mudas de castanha-do-Brasil.(AU)

Laguncularia racemosa (Combretaceae) y bacterias terrestres asociadas medio siglo después de la contaminación crónica por hidrocarburos / Laguncularia racemosa (Combretaceae) and associated ground bacteria half a century after chronic oil pollution

La evaluación del impacto del petróleo en la interacción suelo-raíz de la planta de mangle blanco, Laguncularia racemosa, es básica para identificar los cambios en la actividad microbiana y en el potencial biotecnológico para la remediación de histosoles contaminados. El objetivo de la investigación fue evaluar la distribución espacial de los hidrocarburos totales del petróleo (HTP) en el suelo orgánico, la densidad poblacional de bacterias promotoras del crecimiento vegetal, así como la respiración microbiana en el rizoplano (RI) en la rizósfera (RZ) y en suelo no rizosférico (SNR) de L. racemosa. Una superficie de 8 000 m2 de un histosol afectado desde 1967 y 1968 se evaluó por derrame crónico de petróleo y lodos de perforación provenientes del pozo petrolero La Venta 248. Se seleccionaron 15 árboles de L. racemosa y se extrajeron muestras del RI, RZ y SNR. Los HTP se extrajeron en equipo soxhlet con diclorometano durante ocho horas y se cuantificaron por gravimetría. La cantidad promedio extraída de HTP permitió la diferenciación de cuatro suelos (S) en el área evaluada, con valor promedio para el S1 de 1 797 mg kg-1 (no contaminado para la normativa mexicana) y tres suelos contaminados: S2 con 3 294, S3: 5 249 y S4: 10 389 mg kg-1. Los resultados evidencian diferencias estadísticas (Duncan, P ≤ 0.05) entre medias de las variables evaluadas. La mayor acumulación de HTP fue 22 962 mg kg-1, se extrajo del SNR en el S4. Las mayores densidades de bacterias fijadoras de N, solubilizadoras de P, Azospirillum y Azotobacter fueron bioestimuladas por la presencia de niveles altos de HTP en el suelo, sin embargo la respiración microbiana fue inhibida. Los resultados sugieren que L. racemosa es sostenible en suelos con petróleo intemperizado, y es un bioestimulador de la actividad microbiana para la atenuación natural.

The evaluation of the impact of oil on the soil-root interaction of the white mangrove plant, Laguncularia racemosa is essential to identify changes in microbial activity and biotechnological potential for remediation contaminated histosols. The objective was to evaluate the spatial distribution of total petroleum hydrocarbons (THP) in organic soil, the population density of plant growth promoting bacteria, also in microbial respiration in the rhizoplane (RI), in the rhizosphere (RZ) and in non-rhizospheric soil (NRS) of L. racemosa. An area of 8 000 m2 of an affected histosol was evaluated, during 1967 and 1968, by chronic oil spill and drilling mud from the La Venta 248 oil well. Fifteen trees of this species were selected to obtain samples of the RI, RZ and NRS. The TPH were extracted in soxhlet with dichloromethane for eight hours and quantified by gravimetry. The average amount extracted from TPH allowed the differentiation of four soils (S) from the evaluated area, the average values were for S1: 1 797 mg kg-1 (not contaminated for Mexican regulations) and three contaminated soils, the values are S2: 3 294, S3: 5 249, and S4: 10 389 mg kg-1. The results show statistical differences (Duncan, P ≤ 0.05) between means of the evaluated variables. The greatest accumulation of TPH was 22 962 mg kg-1, it was extracted from the NRS in S4. The highest densities of N-fixing bacteria, P solubilizers, Azospirillum and Azotobacter were biostimulated by the presence of high levels of THP in the soil, however microbial respiration was inhibited. The results suggest that L. racemosa is sustainable in soils with weathering oil, and is a biostimulator of microbial activity for natural attenuation.

Efeito de dentifrício fluoretado contendo hexametafosfato de sódio na erosão inicial do esmalte / Effect of fluoride toothpaste containing sodium hexametaphosphate on initial enamel erosion

Este estudo in vitro avaliou o efeito de dentifrício fluoretado (F) contendo ou não hexametafosfato de sódio (HMP) em inibir ou reparar a erosão inicial do esmalte. Blocos de esmalte bovino hígido (n=48) e desmineralizado (n=48) foram selecionados por dureza superficial inicial e submetidos a 4 grupos experimentais (12 blocos/grupo): Placebo (sem F e HMP), 1100 ppm F, 1% HMP e 1100 ppm F + 1% HMP. Para a análise do efeito protetor, os blocos de esmalte hígido foram imersos uma única vez em solução de dentifrícios com saliva humana por 2 minutos. Em seguida, os blocos foram submetidos a 4 desafios erosivos com ácido cítrico (0,75%, pH 3,5) por 1 minuto, sob agitação. A percentagem de variação da dureza superficial (%SH) foi calculada após os tratamentos e pós desafios ácidos de 1, 2, 3 e 4 minutos. Para a análise do efeito reparador, o esmalte desmineralizado foi tratado e submetido aos mesmos desafios erosivos, como descritos anteriormente. A partir de então, %SH foi calculada após a desmineralização, tratamentos e desafios ácidos de 1, 2, 3 e 4 minutos. Experimento adicional foi realizado para análise da deposição de precipitados por microscopia eletrônica de varredura (MEV) em esmalte desmineralizado. Os dados foram submetidos à análise de variância de medidas repetidas a dois critérios, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Os resultados mostraram que o grupo placebo apresentou a menor capacidade de inibir e reparar a erosão do esmalte (p<0,001). A perda de dureza aumentou durante repetidos desafios ácidos para todos os grupos; no entanto, o efeito contra a erosão do dentifrício com F/HMP mostrou-se mais resistente. Dentifrícios contendo 1100 ppm F + 1% HMP apresentou maior capacidade de inibir e reparar a erosão do esmalte seguido pelos grupos 1% HMP e 1100 ppm F (p<0,001). Na MEV observou-se deposição de precipitado no esmalte para todos os grupos, formando uma camada mais espessa e homogênea nos grupos com HMP. Concluiu-se que o dentifrício contendo 1100 ppm F e 1% HMP teve um efeito superior quando comparado ao 1100 ppm F em inibir a erosão inicial do esmalte, reparar o esmalte previamente erodido e resistir aos repetidos desafios erosivos(AU)

This in vitro study evaluated the effect of fluoride (F) toothpaste containing or not sodium hexametaphosphate (HMP) in inhibit or repair initial enamel erosion. Sound (n=48) and demineralized (n=48) bovine enamel blocks were selected by initial surface hardness and subjected to 4 experimental groups (12 blocks/group): Placebo (without F and HMP), 1100 ppm F, 1% HMP and 1100 ppm F + 1% HMP. For the analysis of the protective effect, sound enamel were immersed in toothpaste slurry in human saliva once for 2 minutes. Hereafter, enamel blocks were submitted to 4 erosive challenges in citric acid (0.75%, pH 3.5) by 1 minute, under stirring. Percentage of surface hardness change (%SH) was calculated after treatments and 1, 2, 3 and 4 minutes. For the analysis of the repair effect, demineralized enamel were treated and submitted to erosive challenges as describe previously. Hereafter, %SH was calculated after demineralization, treatments and 1, 2, 3 and 4 minutes. Additional experimental was performed to analysis the deposition of precipitates by scanning electronic microscopy (SEM) on demineralized enamel. Variables were submitted to two-way repeated measures analysis of variance followed by Student-Newman-Keuls test (p<0.05). The results showed that the Placebo group had the lowest capacity to inhibit and repair enamel erosion (p<0.001). Hardness loss increased during repeated acid challenges for all groups; however the effect against erosion of F/HMP toothpaste proved to be more resistant. Toothpaste containing 1100 ppm F and 1% HMP presented greatest ability to inhibit and repair enamel erosion followed by 1% HMP and 1100 ppm F groups (p<0.001). There were deposition of precipitated on enamel for all groups, forming a thicker layer and homogeneous HMP groups. It was conclude that toothpaste containing 1100 ppm F and 1% HMP had a superior effect when compared to 1100 ppm F to inhibit the initial erosion on sound enamel, repair the eroded enamel and to resist to the repeated erosive challenges(AU)

Efeitos da obesidade induzida por dieta hipercalórica e de seu tratamento com exenatida sobre a neurotransmissão colinérgica muscarínica em hipocampo de ratos / Effects of obesity induced by hypercaloric diet and its treatment with exenatide on the muscarinic cholinergic neurotransmitter in rat hippocampus

Introduction: Molecular cloning studies have revealed the existence of five distinct muscarinic acethylcholine receptor (mAChRs) subtypes (M1 to M5), which interact, via a G protein-regulated process, with multiple effector systems. The M1, M3 and M5 subtypes couple primarily to PLC-mediated phosphoinositide hydrolysis, while the M2 and M4 subtypes couple primarily to adenylyl cyclase inhibition. In the Hippocampus, the modulation of excitatory transmission by mAChRs seems particularly relevant to learning and memory processing in the hippocampal formation, where the diversity and differential localization of the receptors are likely to account for the complex cholinergic modulation in this structure. Experimental studies has been shown that obesity-associated with hypercaloric diet impair learning and memory in rodents, suggesting a strong association between obesity and cognitive dysfunction. However, the mechanisms of how the obesity induced by hypercaloric diet affect memory are not understood fully. Objective: The aim of this study was to investigate the possible effects of obesity induced by hypercaloric diet and its treatment with exenatide, an antidiabetogenic and potential antiobesogenic drug derived from the venom of the Gila monster Heloderma suspectum, on the affinity, density, subtypes and intracellular signaling pathways linked to activation of mAChRs in rat hippocampus. Methodology: Male Wistar rats were divided into three groups: control (CT), obese induced by hypercaloric diet (DIO) and DIO treated with exenatide (DIO+E). The experimental procedures were approved by the Research Ethics Committee of the Butantan Institute (# 22381003/17). In the hippocampus obtained from CT, DIO and DIO+E were performed: I- [ 3H]QNB binding to determine the affinity (KD) and density (Bmax) of mAChRs; II- Expression of each mAChR subtype (M1 to M5) by immunoprecipitation assays and III- Determination of [3H]inositol phosphates accumulation. Results: Specific binding analysis showed that the affinity did not differ among CT, DIO and DIO+E. In contrast, the density of mAChRs obtained in DIO animals was lower than that obtained from CT rats. Moreover, the density of mAChRs from DIO+E was similar when compared with CT rats. Immunoprecipitation assays induced a decrease in the expression of M1 and M3 subtypes of DIO animals when compared with CT. Treatment with exenatide (DIO+E) recovered the expression of the two subtypes similar to CT. On the other hand, the M2, M4 and M5 subtypes did not differ among CT, DIO and DIO+E. Carbacol caused a concentration-dependent increase in the accumulation of [3 H]inositol phosphates in the 3 experimental groups. However, the magnitude of the maximal response to carbachol was lower in the DIO group compared to CT and DIO+E animals, which did not differ from each other. Conclusion: Our results indicate that obesity induced by hypercaloric diet strongly influences the expression and intracellular signaling coupled to M1-M3 subtypes. The exenatide reversed these effects, suggesting an important role on hippocampal muscarinic cholinergic system. This action of obesity might be a key step mediating cellular events important for learning and memory.

Introdução: Estudos de clonagem molecular revelaram a existência de cinco diferentes subtipos de receptores muscarínicos de acetilcolina (mAChRs) (M1-M5) que interagem com múltiplos sistemas efetores através de um processo regulado pela proteína G. Os subtipos M1, M3 e M5 acoplam-se principalmente à hidrólise do fosfoinositídeos mediada pela fosfolipase C. Por outro lado, os subtipos M2 e M4 acoplam-se principalmente à inibição da adenililciclase. No hipocampo, a modulação da transmissão excitatória pelos mAChRs é relevante para o aprendizado e o processamento da memória aonde a diversidade e a localização diferencial dos mAChRs são responsáveis pela complexa modulação colinérgica nessa estrutura. Estudos experimentais demonstraram que a obesidade induzida por dieta hipercalórica prejudica o aprendizado e a memória em roedores, sugerindo uma associação entre obesidade e disfunção cognitiva. No entanto, os mecanismos pelos quais a obesidade afeta os processos cognitivos não são totalmente compreendidos. Objetivo: O objetivo deste estudo foi investigar os possíveis efeitos da obesidade induzida por dieta hipercalórica e seu tratamento com exenatida, uma droga anti- diabetogênica e anti-obesogênica, derivada do veneno do Monstro-de-Gila (Heloderma suspectum), sobre a afinidade, densidade, subtipos e sinalização intracelular acoplada à ativação de mAChRs no hipocampo de ratos. Metodologia: Ratos machos Wistar foram divididos em três grupos: controle (CT), obeso induzido por dieta hipercalórica (DIO) e DIO tratado com exenatida (DIO+E). Os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Butantan (no 22381003/17). No hipocampo obtido de animais CT, DIO e DIO+E foram realizados: I- Ensaios de saturação da ligação do [3H]QNB para determinar os parâmetros farmacológicos KD (afinidade) e Bmax (densidade); II- A expressão de cada subtipo de receptor muscarínico (M1 a M5) por ensaios de imunoprecipitação com anticorpo que reconhece cada um dos subtipos de mAChRs e III- Determinação do conteúdo intracelular de [3H]fosfatos de inositol. Resultados: A análise da ligação específica mostrou que a afinidade não diferiu entre os grupos CT, DIO e DIO-E. Contrariamente, a densidade de mAChRs obtida nos animais DIO foi menor que a observada em ratos CT. A densidade dos animais DIO+E foi similar ao CT. Animais DIO induziram uma diminuição na expressão dos subtipos M1 e M3 quando comparada com o CT. O tratamento com exenatida (DIO+E) recuperou a expressão dos dois subtipos similar ao CT. Por outro lado, os subtipos M2, M4 e M5 não diferiram entre os grupos CT, DIO e DIO+E. O carbacol causou um aumento, dependente da concentração, sobre o acumulo de [3H]fosfatos de inositol nos 3 grupos experimentais. Entretanto, a magnitude da resposta máxima ao carbacol foi menor no grupo DIO comparativamente aos animais CT e DIO+E que não diferiram entre si. Conclusão: Nossos resultados indicam que a obesidade induzida por dieta hipercalórica, influência de maneira contundente, por meio da diminuição da expressão e sinalização intracelular acoplada aos subtipos M1 e M3. A exenatida reverteu esses efeitos, sugerindo ter um papel importante na neurotransmissão colinérgica muscarínica hipocampal. O presente estudo é também o primeiro passo para outras abordagens como a avaliação da importância funcional dessa modulação sobre os mAChRs no hipocampo.

Capacidad solubilizadora de fosfato de aluminio por hongos rizosféricos aislados de un Andisol colombiano / Solubilizing capacity of aluminum phosphate by rhizospheric fungi isolated from an Andisol Colombian / Capacidade de solubilização de fosfato de alumínio por fungos rizosféricos isolados de um Andisol colombiano

RESUMEN A partir de un Typic Melanudands cultivado con café (Coffea arabica variedad Caturra), proveniente del Departamento del Cauca (Colombia), se aislaron hongos con capacidad solubilizadora de fosfato de aluminio (Al-P), de los cuales se seleccionaron dos microorganismos que presentaron la mayor actividad, identificados como cepa UNHI (Mycelia sterilia), y UNH2 (Penicillium sp). Los hongos seleccionados fueron evaluados por quince días en medio líquido Pikovskaya (PVK) con Al-P bajo dos condiciones, con agitación (método A) y en reposo con aireación (método B). Al comparar los resultados se encontraron diferencias estadísticas significativas en el porcentaje de fósforo soluble, el método A presentó mejores resultados con un porcentaje de 73,8% frente a 62% con la cepa UNH1 y en menor proporción con la cepa UNH2 49% y 44%. El incremento de biomasa fue mayor con el método B y el pH de los medios de cultivo no mostraron diferencias significativas, con un pH promedio de 2,7.

ABSTRACT Based on Typic Melanudands grow with coffea (Coffea Arabica Caturra variety) resulting from the Cauca department, fungi with solubilization capacity of aluminum phosphate were isolated (Al-P), from which two microorganisms with greater solubilization activity were selected, identified as strain UNH!: Mycelia sterilia y UNH2: Penicillium sp. Selected fungi were evaluated through the Pikovskaya liquid (PVK) with (Al-P), under two conditions, with stirring (A method) and repose with aireation ( B method), for fifteen days. When comparing the results, significant statistical differences were found in the percentage of soluble phosphorus, method A presented better results with a percentage of 73.8% compared to 62% with the strain UNH1 and in smaller proportion with the strain UNH2 49% and 44 %. The increase in biomass was greater with method B and the pH of the culture media did not show significant differences, with an average pH of 2.7.

RESUMO De PVAc Melanudands cultivadas com café (Coffea arabica variedade caturra), a partir do Departamento (Colômbia), fungos foram isoladas com fosfato de alumínio capacidade de solubilização (Al-P), de que introduziu foram seleccionados dois microrganismos a atividade mais alta, identificada como cepa UNH1 (Mycelia sterilia) e UNH2 (Penicillium sp). fungos seleccionados foram avaliadas durante duas semanas em meio líquido Pikovskaya (PVK) com Al-P sob duas condições, com agitação (método A) e que descansa com arejamento (método B). Ao comparar os resultados estatisticamente diferenças significativas na percentagem de fósforo solúvel encontrada, método A proporcionou melhores resultados com uma percentagem de 73,8% versus 62% com a estirpe UNH1 e em menor grau com a estirpe UNH2 49% e 44 %. O aumento da biomassa foi maior com o método B e o pH do meio de cultura não mostrou diferenças significativas, com um pH médio de 2,7.

Avaliação de duas formas de hidroxiapatita e beta-tricálcio fosfato em enxertos sinusais com concomitante instalação de implantes em coelhos / Evaluation of two formulations of hydroxyapatite and beta-tricalcium phosphate in rabbit sinus grafts with concomitant implant placement

Este trabalho teve por objetivo avaliar o tecido ósseo periimplantar formado após o enxerto sinusal com hidroxiapatita e beta-tricálcio fosfato (HA + ß-TCP), nas apresentações em grânulos e em pasta, concomitante à instalação de implantes em coelhos. Trinta e quatro seios maxilares de coelhos foram enxertados com HA + ß-TCP, sendo metade do grupo grânulos e metade do grupo pasta. Concomitantemente, foi realizada a instalação de implantes. Aos 7 e 40 dias pósoperatórios, realizou-se a eutanásia dos animais, e as amostras foram preparadas para as análises tomográfica, microtomográfica, histológica (coloração por hematoxilina e eosina - HE), imunoistoquímica (marcação de fator de transcrição Runt-2 ­ RUNX2 ­, fator de crescimento endotelial vascular ­ VEGF ­, osteocalcina ­ OCN ­ e fosfatase ácida resistente ao tartarato ­ TRAP) e de torque de remoção dos implantes. Na tomografia, foi observada a manutenção da integridade da membrana sinusal, sem extravasamento de material, nos dois grupos e períodos. Parâmetros morfométricos de volume ósseo, porcentagem do volume ósseo e número de trabéculas foram significativamente superiores para o grupo pasta do que para o grupo grânulos aos 7 dias, enquanto que a porosidade foi maior para o grupo grânulos nesse mesmo período. Aos 40 dias, não houve diferença significativa entre os grupos para a maioria dos parâmetros microtomográficos estudados. Nos cortes histológicos corados por HE, observou-se que em ambos os grupos ocorreu a formação de tecido ósseo junto às espiras do implante aos 40 dias, favorecendo a osseointegração. Imunomarcações positivas semelhantes foram encontradas tanto para o fator de diferenciação osteoblástica RUNX2 quanto para o fator de mineralização OCN no osso neoformado nos dois grupos experimentais. A atividade osteoclástica evidenciada pela TRAP mostrou-se semelhante nos dois grupos, com discreto predomínio para o grupo grânulos. Já a marcação positiva para o VEGF mostrou-se aumentada no grupo grânulos, caracterizando um potencial osteocondutor superior nessa apresentação do biomaterial. Ademais, não houve diferenças nos valores de torque de remoção do implante entre ambos os grupos. Logo, as duas apresentações da HA + ß-TCP mostraram resultados favoráveis à osseointegração a longo prazo, com formação de tecido ósseo em quantidade e qualidade semelhantes junto aos implantes(AU)

This work aimed to evaluate the peri-implant bone tissue after maxillary sinus grafting with hydroxyapatite and beta-tricalcium phosphate (HA + ß-TCP), in granular and paste formulations, concomitant with implant placement in rabbits. Thirty four rabbit maxillary sinuses were grafted with HA + ß-TCP, being half of the granular group and half of the paste group. Concomitantly, the implant placement was performed. At 7 and 40 postoperative days, animals were euthanized, and the samples were prepared for tomographic, microtomographic, histological (hematoxylin and eosin staining), immunohistochemical (Runt-related transcription factor 2 ­ RUNX2, vascular endothelial growth factor ­ VEGF ­, osteocalcin ­ OCN ­ and tartrate-resistant acid phosphatase ­ TRAP ­ staining) and implant torque removal analyses. In computed tomography, the maintenance of sinus membrane integrity, with no material extravasation, was observed in both groups and periods. Morphometric parameters of bone volume, percentage of bone volume and trabecular number were significantly higher for paste than granular group at day 7, while the porosity was higher for granular group in this period. At day 40, there were no significant differences between both groups for the majority of the microtomographic parameters studied. In the HE-stained histological sections, it was observed that bone healing around implant threads occurred for both groups at day 40, enhancing osseointegration. Similar positive immunostainings were observed for both the RUNX2 osteoblastic differentiation factor and the OCN mineralization factor in the neoformed bone in the two experimental groups. The osteoclast activity evidenced by TRAP was similar in both groups, with a slight predominance for the granular group. Positive staining for VEGF growth factor was increased in the granular group, characterizing a superior osteoconductive potential for this biomaterial formulation. Besides, there were no differences in the values of implant removal torque between both groups. Thus, the two formulations o H + ß-TCP showed favorable osseointegration results in the long term, with similar amount and quality of bone tissue formation around the implants(AU)