Seroprevalence and risk factors associated with bovine leukemia virus (BLV) seropositivity in cattle herds from Ecuador / Seroprevalencia y factores de riesgo asociados a la seropositividad al virus de la leucemia bovina (BLV) en explotaciones de producción bovina en Ecuador / Seroprevalência e fatores de risco associados à soropositividade do vírus da leucemia bovina (BLV) em rebanhos bovinos do Equador

Abstract Background: Bovine leukemia virus (BLV) is the causative agent of enzootic bovine leukosis (EBL). This disease mainly affects cattle, causing severe economic losses to producers. Objective: To establish individual and herd seroprevalence and determine the risk factors associated with BLV seropositivity for dairy and dual-purpose cattle herds in Ecuador. Methods: A total of 2,668 serum samples from 386 herds were collected. A questionnaire, including variables related to cattle health, management and the environment was completed by each herd. A commercial blocking enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test was used to determine seropositivity. A generalized estimating equation model (GEE) was developed to determine the factors associated with BLV seropositivity. Results: Individual seroprevalence of BLV infection in Ecuador was 17.3% (CI95% = 15.86-18.74%). Herd prevalence was 37.8% (CI95% = 33.0-42.6%), and intra-herd prevalence ranged between 12.5 and 100% (median: 37.5%). The risk factors associated with BLV seropositivity were artificial insemination (OR: 2,215; CI95% =1.402-3.501), concrete floors (OR: 2.178; CI95% = 1.217-3.889), presence of wild ruminants (OR: 2.998; CI95% = 1.788-5.027), and sampling season (wet; OR: 1.996; CI95% = 1.140-3.497). Conclusions: Results indicate that BLV is widespread in cattle herds in Ecuador. In addition, the study suggests that a control program to fight BLV infection should focus on controlling the risk factors identified.

Resumen Antecedentes: El virus de la leucosis bovina (BLV) es el principal agente etiológico causante de la leucosis enzoótica bovina (EBL). Esta enfermedad afecta a los bovinos causando grandes pérdidas económicas a los productores. Objetivo: Establecer la seroprevalencia y dispersión del BLV, así como los factores de riesgo asociados a la seropositividad en explotaciones lecheras y de doble propósito en Ecuador. Métodos: Se recolectó un total de 2.668 muestras de suero de 386 explotaciones. Se aplicó un cuestionario que incluyó variables relacionadas con la salud del hato, medidas de manejo, y características ambientales de cada explotación. Para los análisis serológicos se utilizó un test inmunológico ligado a enzimas (ELISA). Para definir los factores de riesgo asociados a la seropositividad a BLV se desarrolló un modelo utilizando ecuaciones de estimación generalizadas (GEE). Resultados: La seroprevalencia de BLV en Ecuador fue de 17,3% (IC95% = 15,86-18,74%). La dispersión fue de 37,8% (IC95%= 33,0-42,6%), y la prevalencia intra-hato alcanzó rangos entre 12,5-100% (media: 37,5%). Los factores de riesgo asociados a la seropositividad a BLV fueron: inseminación artificial (OR: 2,215; IC95% = 1,402-3,501), piso de concreto (OR: 2,178; IC95% = 1,217-3,889), presencia de rumiantes salvajes (OR: 2,998; IC95% = 1,788-5,027), y temporada de muestreo (húmeda; OR: 1,996; IC95% = 1,140-3,497). Conclusiones: Los resultados indican que el BLV se encuentra disperso en las explotaciones de Ecuador. Adicionalmente, se sugiere la implementación de un programa de control para la lucha contra el BLV, debiéndose considerar medidas que se enfoquen al control de los factores de riesgo identificados en esta investigación.

Resumo Antecedentes: O vírus da leucemia bovina (BLV) é o principal agente causador da leucose enzoótica bovina (EBL). Esta doença afeta o gado causando graves prejuízos econômicos aos produtores. Objetivo: Estabelecer a soroprevalência e dispersão do BLV, assim como os fatores de risco associados à soropositividade nas produções leiteiras e de duplo propósito no Equador. Métodos: Um total de 2.668 amostras de soro de 386 explorações foram coletadas. Foi aplicado um questionário que incluía variáveis relacionadas à saúde do rebanho, medidas de manejo e ambiente para cada exploração. Para a análise sorológica foi utilizado um teste imunológico sobre enzimas (ELISA) para determinação da soropositividade. Para definir os fatores de risco associados à soropositividade a BLV, foi utilizado um modelo de equações estimativas generalizadas (GEE). Resultados: A soroprevalência de BLVno Equador é de 17,3% (IC95% = 15,86-18,74%). La dispersão de 37,8% (IC95% = 33,0-42,6%), e a prevalência intra-rebanho alcançou entre 12,5-100% (media: 37,5%). Os fatores de risco associados à soropositividade a BLV foram inseminação artificial (OR: 2,215; IC95% = 1,402-3,501), chão de concreto (OR: 2,178; IC95% = 1,217-3,889), presença de ruminantes selvagens (OR: 2,998; IC95% = 1,788-5,027) e época da amostragem (úmida; OR: 1,996; IC95% = 1,140-3,497). Conclusões: Os resultados indicam que o BLV se encontra disseminado nas explorações no Equador. Adicionalmente, o estudo pode contribuir para a implementação de um programa de controle para a luta contra o BLV, devendo-se considerar ações de controle dos fatores de risco identificados nesta investigação.

Indirect ELISA (iELISA) standardization for the diagnosis of bovine enzootic leukosis / Padronização de um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da leucose enzoótica bovina

Enzootic bovine leukosis (EBL) is an infectious disease caused by bovine leukemia virus (BLV) that affects cattle worldwide. Agar gel immunodiffusion (AGID) was the reference test for EBL diagnosis for many years, but enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed higher sensitivity, was faster to perform, and resulted in an objective reading. However, the importation of ELISA kits is lengthy and expensive, and currently, no AGID kits are available in Brazil. The aim of this work was to standardize an indirect ELISA (iELISA) for EBL diagnosis using BLV antigens produced in Tadarida brasiliensis lung (Tb1Lu) cells, which are Bovine viral diarrhea virus (BVDV) free, unlike fetal lamb kidney (FLK) cells, currently used for this purpose. Following standardization, iELISA results were compared with those obtained by AGID and the commercial Chekit Leucose-Serum ELISA. Compared to AGID, iELISA had 94,44% sensitivity, 75.68% specificity, 79.10% positive predictive value (PPV) and 93.30% negative predictive value (NPV), with 84% concordance and a Kappa index of 0.699. Compared to the Chekit Leucose-Serum ELISA, iELISA showed 92.60% sensitivity, 87.09% specificity, 90.27% PPV and 90,00% NPV, with 90.27% concordance and a Kappa index of 0.801. Taking into account the high agreement with the traditional tests and the absence of non-specific reactions with BVDV, the developed assay could be used as diagnostic method to control EBL in Brazil.(AU)

A leucose enzoótica bovina (LEB) é uma doença infecciosa natural dos bovinos com distribuição mundial causada pelo "bovine leukemia virus" (BLV). A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi considerada por muitos anos o teste de eleição, porém ensaios imunoenzimáticos (ELISA) apresentam sensibilidade mais elevada e leitura mais rápida e objetiva. No entanto, a importação de kits de ELISA é um processo dispendioso e demorado, e atualmente não há kits de IDGA comercialmente disponíveis no Brasil. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi padronizar um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da LEB utilizando antígenos produzidos a partir do cultivo do BLV em linhagem celular Tadarida brasiliensis "lung" (Tb1Lu) livre de "bovine viral diarrhea virus" (BVDV), diferentemente do que acontece com as linhagens "fetal lamb kidney" (FLK) atualmente utilizadas na produção desses antígenos para uso em ensaios sorológicos. Após a padronização do iELISA, os resultados foram comparados com aqueles obtidos por IDGA e pelo ELISA comercial "Chekit Leucose-Serum". Comparado ao IDGA, o iELISA apresentou 94,44% de sensibilidade, 75,68% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) de 79,1% e valor preditivo negativo (VPN) de 93,3%, com concordância entre os testes de 84% e o índice Kappa 0,699. Quando comparado ao ELISA "Chekit Leucose-Serum", o iELISA apresentou sensibilidade de 92,6%, especificidade de 87,09%, VPP de 90,27% e VPN de 90%, com concordância de 90,27% e o índice Kappa 0,801. Portanto, devido à alta concordância com os testes tradicionais e ausência da ocorrência de reações inespecíficas com BVDV, o ensaio desenvolvido pode ser utilizado como ferramenta diagnóstica para o controle da LEB no Brasil.(AU)

Indirect ELISA (iELISA) standardization for the diagnosis of bovine enzootic leukosis / Padronização de um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da leucose enzoótica bovina

Enzootic bovine leukosis (EBL) is an infectious disease caused by bovine leukemia virus (BLV) that affects cattle worldwide. Agar gel immunodiffusion (AGID) was the reference test for EBL diagnosis for many years, but enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed higher sensitivity, was faster to perform, and resulted in an objective reading. However, the importation of ELISA kits is lengthy and expensive, and currently, no AGID kits are available in Brazil. The aim of this work was to standardize an indirect ELISA (iELISA) for EBL diagnosis using BLV antigens produced in Tadarida brasiliensis lung (Tb1Lu) cells, which are Bovine viral diarrhea virus (BVDV) free, unlike fetal lamb kidney (FLK) cells, currently used for this purpose. Following standardization, iELISA results were compared with those obtained by AGID and the commercial Chekit Leucose-Serum ELISA. Compared to AGID, iELISA had 94,44% sensitivity, 75.68% specificity, 79.10% positive predictive value (PPV) and 93.30% negative predictive value (NPV), with 84% concordance and a Kappa index of 0.699. Compared to the Chekit Leucose-Serum ELISA, iELISA showed 92.60% sensitivity, 87.09% specificity, 90.27% PPV and 90,00% NPV, with 90.27% concordance and a Kappa index of 0.801. Taking into account the high agreement with the traditional tests and the absence of non-specific reactions with BVDV, the developed assay could be used as diagnostic method to control EBL in Brazil.(AU)

A leucose enzoótica bovina (LEB) é uma doença infecciosa natural dos bovinos com distribuição mundial causada pelo "bovine leukemia virus" (BLV). A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi considerada por muitos anos o teste de eleição, porém ensaios imunoenzimáticos (ELISA) apresentam sensibilidade mais elevada e leitura mais rápida e objetiva. No entanto, a importação de kits de ELISA é um processo dispendioso e demorado, e atualmente não há kits de IDGA comercialmente disponíveis no Brasil. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi padronizar um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da LEB utilizando antígenos produzidos a partir do cultivo do BLV em linhagem celular Tadarida brasiliensis "lung" (Tb1Lu) livre de "bovine viral diarrhea virus" (BVDV), diferentemente do que acontece com as linhagens "fetal lamb kidney" (FLK) atualmente utilizadas na produção desses antígenos para uso em ensaios sorológicos. Após a padronização do iELISA, os resultados foram comparados com aqueles obtidos por IDGA e pelo ELISA comercial "Chekit Leucose-Serum". Comparado ao IDGA, o iELISA apresentou 94,44% de sensibilidade, 75,68% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) de 79,1% e valor preditivo negativo (VPN) de 93,3%, com concordância entre os testes de 84% e o índice Kappa 0,699. Quando comparado ao ELISA "Chekit Leucose-Serum", o iELISA apresentou sensibilidade de 92,6%, especificidade de 87,09%, VPP de 90,27% e VPN de 90%, com concordância de 90,27% e o índice Kappa 0,801. Portanto, devido à alta concordância com os testes tradicionais e ausência da ocorrência de reações inespecíficas com BVDV, o ensaio desenvolvido pode ser utilizado como ferramenta diagnóstica para o controle da LEB no Brasil.(AU)

Influência do vírus da leucemia bovina sobre a atividade imunológica por meio da função neutrofílica / Influence of the bovine leukemia virus on the immunological activity by the neutrophilic function

Background: Bovine leukemia virus (VLB) is an oncogenic deltaretrovirus associated with the development of persistent lymphocytosis (LP) and lymphosarcomas in cattle. LP is characterized by chronic elevation of the number of circulating lymphocytes, in the case of B lymphocytes. Several studies have described functional changes in various leukocyte populations in both blood and milk in VLB-infected animals. The impact of some chronic diseases of low lethality is aggravated by the emergence of comorbidities.The objective of the present study was to evaluate the oxidative metabolism and neutrophil phagocytosis of bovines of the Holtein breed naturally infected with the bovine leukemia virus (VLB). Materials, Methods & Results: In this study, 20 cows were divided into three groups: (NG) seven non-seroreagent animals for VLB and without hematological alterations; (GAL) eight seroreagent animals for VLB and without hematological alterations; and (GLP) five seroreagent animals for VLB with persistent lymphocytosis (LP). The oxidative metabolism of neutrophils was determined by the tetrazolium nitroblast reduction test stimulated or not with Zymosan particles. The percentage of neutrophils that phagocytosed Zymosan particle (s) was also evaluated. The data were initially evaluated for normality and homoscedasticity by the Shapiro-Wilk test. Then the ANOVA test followed by the Student-Newman-Keuls test was applied for the comparison between the NG, GAL and GLP animals. Comparison between the NG animals and the seroreagent animals for the VLB (GVLB) was also performed through the unpaired Student’s t-test. The value of P < 0.05 was considered significant. No significant differences were observed in oxidative neutrophil metabolism in stimulated and non-stimulated samples with Zymosan particles nor in the percentage...

Fibrinous pleuropneumonia caused by Pasteurella multocida associated with bovine lymphoma / Pleuropneumonia fibrinosa causada por Pasteurella multocida associada a linfoma bovino

In this work, we describe an unusual case of fibrinous pleuropneumonia caused by Pasteurella multocida associated with generalized lymphadenomegaly in a bovine. The animal had a one-month history of generalized superficial lymphadenomegaly that progressed to anorexia and submandibular oedema, resulting in spontaneous death. At necropsy, the parenchyma of the lymph nodes and multiple organs was obliterated by a dense proliferation of round neoplastic cells (lymphoma). Additionally, the neoplasm presented multifocal areas of haemorrhage and necrosis, characteristic of lymphoma. The parietal and visceral pleura and parietal pericardium were enlarged and covered diffusely with large amounts of a yellowish fibrillary material. The lungs were mildly enlarged, non-collapsed, and firm and exhibited interlobular septae that were thickened with a gelatinous material. Histopathological examination showed that the parietal and visceral pleura were enlarged due to a diffuse and severe inflammatory infiltrate composed of degenerate neutrophils associated with severe fibrin deposition, characteristic of fibrinous pleuropneumonia. Pleura and parietal pericardium fragments were cultivated in aerobic and microaerobic microbiological conditions. Round greyish colonies of gram-negative coccobacilli that were shiny and non-haemolytic were observed in sheep blood agar. The biochemical profile was indicative of Pasteurella spp. Molecular identification was performed by partial 16S rRNA amplification following sequencing. Pasteurella multocida was confirmed as the primary bacterium associated with the bovine fibrinous pleuropneumonia. We are able to infer that the lymphoma caused immunodepression, which increased the animals susceptibility to atypical infectious microorganisms such as pathogenic P. multocida.(AU)

Nesse trabalho, relatamos um caso de pleuropneumonia fibrinossupurativa causada por Pasteurella multocida associada à linfoadenomegalia em um bovino. O animal apresentava aumento generalizado de linfonodos há um mês progredindo para anorexia e edema submandibular por três dias culminando com óbito. Durante a necropsia, tanto dos linfonodos quanto de diversos órgãos evidenciaram proliferação neoplásica de células arredondadas e arranjadas em mantos (linfoma). Adicionalmente, áreas multifocais de hemorragia e necrose, características de linfoma, foram observadas. As pleuras parietal e visceral e pericárdio parietal apresentavam-se espessas e recobertas por acentuada quantidade de fibrina. Os pulmões estavam aumentados, não colabados, firmes e exibiam espessamento com edema moderado de septos interlobulares. À microscopia, cortes da pleura visceral exibiram acentuado infiltrado inflamatório de neutrófilos degenerados com intensa deposição de fibrina, características da pleuropneumonia fibrinossupurativa, além de neovascularização e proliferação de fibroblastos. Amostras de pulmão e da pleura foram cultivadas em aerobiose e microaerobiose. Evidenciou-se o crescimento puro no ágar sangue ovino de colônias redondas, acinzentadas, brilhantes e não-hemolíticas, sendo caracterizadas como cocobacilos gram-negativos. As características bioquímicas do isolado foram condizentes com Pasteurella spp. Procedeu-se a identificação molecular do isolado através da amplificação parcial do gene rRNA 16S com posterior sequenciamento do produto amplificado. Deste modo foi possível a confirmação do isolado como Pasteurella multocida, sendo o agente primário da pleuropneumonia fibrinosa. Com estes dados, podemos afirmar que o linfoma causou um quadro de imunodepressão, a qual aumenta a susceptibilidade dos animais a agentes infecciosos atípicos, como a P. multocida patogênica.(AU)

Fibrinous pleuropneumonia caused by Pasteurella multocida associated with bovine lymphoma / Pleuropneumonia fibrinosa causada por Pasteurella multocida associada a linfoma bovino

In this work, we describe an unusual case of fibrinous pleuropneumonia caused by Pasteurella multocida associated with generalized lymphadenomegaly in a bovine. The animal had a one-month history of generalized superficial lymphadenomegaly that progressed to anorexia and submandibular oedema, resulting in spontaneous death. At necropsy, the parenchyma of the lymph nodes and multiple organs was obliterated by a dense proliferation of round neoplastic cells (lymphoma). Additionally, the neoplasm presented multifocal areas of haemorrhage and necrosis, characteristic of lymphoma. The parietal and visceral pleura and parietal pericardium were enlarged and covered diffusely with large amounts of a yellowish fibrillary material. The lungs were mildly enlarged, non-collapsed, and firm and exhibited interlobular septae that were thickened with a gelatinous material. Histopathological examination showed that the parietal and visceral pleura were enlarged due to a diffuse and severe inflammatory infiltrate composed of degenerate neutrophils associated with severe fibrin deposition, characteristic of fibrinous pleuropneumonia. Pleura and parietal pericardium fragments were cultivated in aerobic and microaerobic microbiological conditions. Round greyish colonies of gram-negative coccobacilli that were shiny and non-haemolytic were observed in sheep blood agar. The biochemical profile was indicative of Pasteurella spp. Molecular identification was performed by partial 16S rRNA amplification following sequencing. Pasteurella multocida was confirmed as the primary bacterium associated with the bovine fibrinous pleuropneumonia. We are able to infer that the lymphoma caused immunodepression, which increased the animals susceptibility to atypical infectious microorganisms such as pathogenic P. multocida.

Nesse trabalho, relatamos um caso de pleuropneumonia fibrinossupurativa causada por Pasteurella multocida associada à linfoadenomegalia em um bovino. O animal apresentava aumento generalizado de linfonodos há um mês progredindo para anorexia e edema submandibular por três dias culminando com óbito. Durante a necropsia, tanto dos linfonodos quanto de diversos órgãos evidenciaram proliferação neoplásica de células arredondadas e arranjadas em mantos (linfoma). Adicionalmente, áreas multifocais de hemorragia e necrose, características de linfoma, foram observadas. As pleuras parietal e visceral e pericárdio parietal apresentavam-se espessas e recobertas por acentuada quantidade de fibrina. Os pulmões estavam aumentados, não colabados, firmes e exibiam espessamento com edema moderado de septos interlobulares. À microscopia, cortes da pleura visceral exibiram acentuado infiltrado inflamatório de neutrófilos degenerados com intensa deposição de fibrina, características da pleuropneumonia fibrinossupurativa, além de neovascularização e proliferação de fibroblastos. Amostras de pulmão e da pleura foram cultivadas em aerobiose e microaerobiose. Evidenciou-se o crescimento puro no ágar sangue ovino de colônias redondas, acinzentadas, brilhantes e não-hemolíticas, sendo caracterizadas como cocobacilos gram-negativos. As características bioquímicas do isolado foram condizentes com Pasteurella spp. Procedeu-se a identificação molecular do isolado através da amplificação parcial do gene rRNA 16S com posterior sequenciamento do produto amplificado. Deste modo foi possível a confirmação do isolado como Pasteurella multocida, sendo o agente primário da pleuropneumonia fibrinosa. Com estes dados, podemos afirmar que o linfoma causou um quadro de imunodepressão, a qual aumenta a susceptibilidade dos animais a agentes infecciosos atípicos, como a P. multocida patogênica.

Fibrinous pleuropneumonia caused by Pasteurella multocida associated with bovine lymphoma / Pleuropneumonia fibrinosa causada por Pasteurella multocida associada a linfoma bovino

ABSTRACT: In this work, we describe an unusual case of fibrinous pleuropneumonia caused by Pasteurella multocida associated with generalized lymphadenomegaly in a bovine. The animal had a one-month history of generalized superficial lymphadenomegaly that progressed to anorexia and submandibular oedema, resulting in spontaneous death. At necropsy, the parenchyma of the lymph nodes and multiple organs was obliterated by a dense proliferation of round neoplastic cells (lymphoma). Additionally, the neoplasm presented multifocal areas of haemorrhage and necrosis, characteristic of lymphoma. The parietal and visceral pleura and parietal pericardium were enlarged and covered diffusely with large amounts of a yellowish fibrillary material. The lungs were mildly enlarged, non-collapsed, and firm and exhibited interlobular septae that were thickened with a gelatinous material. Histopathological examination showed that the parietal and visceral pleura were enlarged due to a diffuse and severe inflammatory infiltrate composed of degenerate neutrophils associated with severe fibrin deposition, characteristic of fibrinous pleuropneumonia. Pleura and parietal pericardium fragments were cultivated in aerobic and microaerobic microbiological conditions. Round greyish colonies of gram-negative coccobacilli that were shiny and non-haemolytic were observed in sheep blood agar. The biochemical profile was indicative of Pasteurella spp. Molecular identification was performed by partial 16S rRNA amplification following sequencing. Pasteurella multocida was confirmed as the primary bacterium associated with the bovine fibrinous pleuropneumonia. We are able to infer that the lymphoma caused immunodepression, which increased the animal's susceptibility to atypical infectious microorganisms such as pathogenic P. multocida.

RESUMO: Nesse trabalho, relatamos um caso de pleuropneumonia fibrinossupurativa causada por Pasteurella multocida associada à linfoadenomegalia em um bovino. O animal apresentava aumento generalizado de linfonodos há um mês progredindo para anorexia e edema submandibular por três dias culminando com óbito. Durante a necropsia, tanto dos linfonodos quanto de diversos órgãos evidenciaram proliferação neoplásica de células arredondadas e arranjadas em mantos (linfoma). Adicionalmente, áreas multifocais de hemorragia e necrose, características de linfoma, foram observadas. As pleuras parietal e visceral e pericárdio parietal apresentavam-se espessas e recobertas por acentuada quantidade de fibrina. Os pulmões estavam aumentados, não colabados, firmes e exibiam espessamento com edema moderado de septos interlobulares. À microscopia, cortes da pleura visceral exibiram acentuado infiltrado inflamatório de neutrófilos degenerados com intensa deposição de fibrina, características da pleuropneumonia fibrinossupurativa, além de neovascularização e proliferação de fibroblastos. Amostras de pulmão e da pleura foram cultivadas em aerobiose e microaerobiose. Evidenciou-se o crescimento puro no ágar sangue ovino de colônias redondas, acinzentadas, brilhantes e não-hemolíticas, sendo caracterizadas como cocobacilos gram-negativos. As características bioquímicas do isolado foram condizentes com Pasteurella spp. Procedeu-se a identificação molecular do isolado através da amplificação parcial do gene rRNA 16S com posterior sequenciamento do produto amplificado. Deste modo foi possível a confirmação do isolado como Pasteurella multocida, sendo o agente primário da pleuropneumonia fibrinosa. Com estes dados, podemos afirmar que o linfoma causou um quadro de imunodepressão, a qual aumenta a susceptibilidade dos animais a agentes infecciosos atípicos, como a P. multocida patogênica.

Prevalencia de anticuerpos para el Vírus de la diarreia viral bovina, Herpesvírus bovino Tipo 1 y Vírus de la leucosis enzoótica bovina en búfalos de rio de la Isla de Marajó / Prevalence of Bovine Viral Diarrhoea Virus, Bovine Herpesvirus 1 and Bovine Leucosis Virus antibodies in river buffaloes from Marajó Island / Prevalência de anticorpos para o Vírus da diarreia viral bovina, Herpesvírus bovino Tipo 1 e Vírus da leucose enzoótica bovina em búfalos de água da Ilha de Marajó

El objetivo de este estudio fue determinar la prevalencia de anticuerpos en una manada de búfalos de río en la Isla de Marajó en busca de virus: Virus de la Diarrea Viral Bovina, Bovino Herpesvirus tipo 1 del Virus y la leucosis bovina enzoótica. La técnica de neutralización se utilizó para detectar anticuerpos relacionados con el virus de la diarrea viral bovina y virus del herpes bovino tipo 1 y la prueba de inmunodifusión en gel de agar para la detección de anticuerpos contra el virus de la leucosis bovina enzoótica. La prevalencia de anticuerpos contra el virus del herpes bovino tipo 1 en los búfalos está muy cerca de la prevalencia observada en el ganado bovino. La prevalencia de anticuerpos viral bovina virus de la diarrea mostró muy por debajo de la media en comparación con la prevalencia de anticuerpos en el ganado bovino y búfalos, también creado en el Brasil. La prevalencia del virus de la leucosis bovina enzoótica mostró, sin embargo, cerca del rango observado en búfalos en Brasil y en todo el mundo, que divergen de la prevalencia observada en los anticuerpos de ganado muy bajo, probablemente mostrando una resistencia natural al virus de este tipo, este factor debe ser mejor dilucidado.

The aim of this study was to determine the antibodies prevalence of Bovine viral diarrhea virus, Bovine herpesvirus 1 and Bovine leukemia virus in a herd of river buffaloes from the Marajó Island. The serum neutralization technique was used for the detection of Bovine viral diarrhea virus and Bovine herpesvirus 1 antibodies. The agar gel immunodiffusion (AGID) was used for the detection of Bovine leukemia virus antibodies. The prevalence of antibody to the Bovine herpesvirus 1 in buffaloes is very similar to the observed in cattle. The Bovine viral diarrhea virus showed a below average prevalence whether compared to the antibodies prevalence in cattle and buffaloes created in other parts of Brazil. The Bovine leukemia virus showed a very low prevalence of antibodies, however, these parameters were similar to others observed in buffaloes in Brazil and worldwide. These parameters differ from the prevalence observed in cattle, which probably suggests a natural resistance from this specie to the virus. This fact, however, needs to be further elucidated.

O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência de anticorpos em um rebanho de búfalos de rio da Ilha de Marajó para os vírus: Vírus da diarreia viral bovina, Herpesvírus bovino tipo 1 e Vírus da leucose enzoótica bovina. A técnica de soroneutralização foi utilizada para detecção de anticorpos referentes aos Vírus da diarreia viral bovina e Herpesvírus bovino tipo 1 e o teste de imunodifusão em gel de ágar para detecção de anticorpos para o Vírus da leucose enzoótica bovina. A prevalência de anticorpos para o Herpesvírus bovino tipo 1 em bubalinos está muito próxima da prevalência observada em bovinos. O Vírus da diarreia viral bovina apresentou prevalência de anticorpos muito abaixo da média quando comparada com prevalência de anticorpos em bovinos e bubalinos, inclusive criados no Brasil. O Vírus da leucose enzoótica bovina mostrou prevalência de anticorpos muito baixa, porém, próxima dos parâmetros observados em búfalos no Brasil e no mundo, que divergem da prevalência observada em bovinos, mostrando provavelmente uma resistência natural dessa espécie ao vírus, fator esse que precisa ser mais bem elucidado.

Prevalencia de anticuerpos para el Vírus de la diarreia viral bovina, Herpesvírus bovino Tipo 1 y Vírus de la leucosis enzoótica bovina en búfalos de rio de la Isla de Marajó / Prevalence of Bovine Viral Diarrhoea Virus, Bovine Herpesvirus 1 and Bovine Leucosis Virus antibodies in river buffaloes from Marajó Island / Prevalência de anticorpos para o Vírus da diarreia viral bovina, Herpesvírus bovino Tipo 1 e Vírus da leucose enzoótica bovina em búfalos de água da Ilha de Marajó

El objetivo de este estudio fue determinar la prevalencia de anticuerpos en una manada de búfalos de río en la Isla de Marajó en busca de virus: Virus de la Diarrea Viral Bovina, Bovino Herpesvirus tipo 1 del Virus y la leucosis bovina enzoótica. La técnica de neutralización se utilizó para detectar anticuerpos relacionados con el virus de la diarrea viral bovina y virus del herpes bovino tipo 1 y la prueba de inmunodifusión en gel de agar para la detección de anticuerpos contra el virus de la leucosis bovina enzoótica. La prevalencia de anticuerpos contra el virus del herpes bovino tipo 1 en los búfalos está muy cerca de la prevalencia observada en el ganado bovino. La prevalencia de anticuerpos viral bovina virus de la diarrea mostró muy por debajo de la media en comparación con la prevalencia de anticuerpos en el ganado bovino y búfalos, también creado en el Brasil. La prevalencia del virus de la leucosis bovina enzoótica mostró, sin embargo, cerca del rango observado en búfalos en Brasil y en todo el mundo, que divergen de la prevalencia observada en los anticuerpos de ganado muy bajo, probablemente mostrando una resistencia natural al virus de este tipo, este factor debe ser mejor dilucidado.(AU)

The aim of this study was to determine the antibodies prevalence of Bovine viral diarrhea virus, Bovine herpesvirus 1 and Bovine leukemia virus in a herd of river buffaloes from the Marajó Island. The serum neutralization technique was used for the detection of Bovine viral diarrhea virus and Bovine herpesvirus 1 antibodies. The agar gel immunodiffusion (AGID) was used for the detection of Bovine leukemia virus antibodies. The prevalence of antibody to the Bovine herpesvirus 1 in buffaloes is very similar to the observed in cattle. The Bovine viral diarrhea virus showed a below average prevalence whether compared to the antibodies prevalence in cattle and buffaloes created in other parts of Brazil. The Bovine leukemia virus showed a very low prevalence of antibodies, however, these parameters were similar to others observed in buffaloes in Brazil and worldwide. These parameters differ from the prevalence observed in cattle, which probably suggests a natural resistance from this specie to the virus. This fact, however, needs to be further elucidated.(AU)

O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência de anticorpos em um rebanho de búfalos de rio da Ilha de Marajó para os vírus: Vírus da diarreia viral bovina, Herpesvírus bovino tipo 1 e Vírus da leucose enzoótica bovina. A técnica de soroneutralização foi utilizada para detecção de anticorpos referentes aos Vírus da diarreia viral bovina e Herpesvírus bovino tipo 1 e o teste de imunodifusão em gel de ágar para detecção de anticorpos para o Vírus da leucose enzoótica bovina. A prevalência de anticorpos para o Herpesvírus bovino tipo 1 em bubalinos está muito próxima da prevalência observada em bovinos. O Vírus da diarreia viral bovina apresentou prevalência de anticorpos muito abaixo da média quando comparada com prevalência de anticorpos em bovinos e bubalinos, inclusive criados no Brasil. O Vírus da leucose enzoótica bovina mostrou prevalência de anticorpos muito baixa, porém, próxima dos parâmetros observados em búfalos no Brasil e no mundo, que divergem da prevalência observada em bovinos, mostrando provavelmente uma resistência natural dessa espécie ao vírus, fator esse que precisa ser mais bem elucidado.(AU)

Classificação de 86 casos de linfoma em bovinos de acordo com a Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage e a Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL) / Classification of 86 bovine lymphomas cases according to the Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage and The Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL)

Por meio de um estudo retrospectivo, realizou-se avaliação fenotípica (histologia) e imunofenotípica (imuno-histoquímica [IHQ]) de 86 casos de linfoma bovino. Quanto ao padrão de distribuição, todos os linfomas foram incluídos como difusos. Em relação à dimensão dos linfócitos neoplásicos, 83,8% dos linfomas foram considerados como de grandes células e 11,6% como de pequenas células. Linfomas mistos, ou seja, constituídos por grandes e pequenas células, representaram apenas 4,6% dos casos. Quanto ao número de mitoses, 84,9% dos linfomas foram incluídos como de grau intermediário, 10,5% como de baixo grau e 4,6% como de alto grau. No que se refere à morfologia do núcleo, linfomas em que predominavam linfócitos não clivados (58,2%) ou linfócitos clivados (37,2%) foram mais frequentes do que aqueles em que havia uma mistura igualmente proporcional de linfócitos clivados e não clivados (4,6%). Com base nestes resultados, os 86 linfomas foram assim distribuídos utilizando-se a classificação proposta pela Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage: difuso de grandes células não clivadas (46,5%), difuso de grandes células clivadas (33,7%), difuso de pequenas e grandes células (4,6%), difuso de pequenas células - tipo plasmocitoide (7%), imunoblástico (3,5%), difuso de pequenas células - tipo intermediário (2,3%), difuso de pequenas células não clivadas (1,2%) e difuso de pequenas células não clivadas - tipo Burkitt (1,2%). Na imuno-histoquímica, 27 dos 86 (31,4%) linfomas foram positivos para o anticorpo monoclonal CD79αcy, utilizado para detecção de linfócitos B, e nenhum caso foi positivo para o anticorpo policlonal CD3, utilizado para detecção de linfócitos T. Com base nestes resultados, os 27 linfomas B foram assim distribuídos utilizando-se a Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL): linfoma difuso de grandes células B (81,5%), linfomas imunoblásticos de grandes células (11,1%) e linfomas...

A retrospective study of 86 cases of bovine lymphoma classified as with diffuse pattern of distribution and verified by phenotypic (histology) and immunophenotypic (immunohistochemistry [IHC]) is presented. Regarding the size of the neoplastic lymphocytes, 83.8% was classified as large cells lymphoma and 11.6% as small cells lymphoma. Mixed lymphomas, i.e., formed by large and small cells simultaneously represented only 4.6% of all cases. Regarding their mitotic index, 84.9% of lymphomas was included in the intermediate-grade, 10.5% as low-grade and 4.6% as high-grade. Regarding the nucleus morphology, lymphomas with mostly non-cleaved cells (58.2%) or cleaved cells (37.2%) were the more frequent than those with a balanced mixed proportion of cleaved and non-cleaved cells (4.6%). Based on these results, the 86 lymphoma cases were classified by the Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage as: diffuse large non-cleaved cell (46.5%), diffuse large cleaved cell (33.7%), diffuse mixed small and large cell (4.6%), diffuse small cell - plasmacytoid (7%), immunoblastic (3.5%), diffuse small cell - intermediate (2.3%), diffuse small non-cleaved cell (1.2%), and diffuse small non-cleaved cell Burkitt's (1.2%). According to the IHC, 27 out of 86 (31.4%) lymphomas were positive to monoclonal antibody CD79αcy, used to detect B cells, and none were positive for polyclonal antibody CD3, used to detect T cells. Based on this, the 27 B-cell type lymphomas were distributed as follows: diffuse large B-cell lymphoma (81.5%), large cell immunoblastic lymphoma (11.1%), and lymphoplasmacytoid lymphoma...

Classificação de 86 casos de linfoma em bovinos de acordo com a Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage e a Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL) / Classification of 86 bovine lymphomas cases according to the Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage and The Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL)

Por meio de um estudo retrospectivo, realizou-se avaliação fenotípica (histologia) e imunofenotípica (imuno-histoquímica [IHQ]) de 86 casos de linfoma bovino. Quanto ao padrão de distribuição, todos os linfomas foram incluídos como difusos. Em relação à dimensão dos linfócitos neoplásicos, 83,8% dos linfomas foram considerados como de grandes células e 11,6% como de pequenas células. Linfomas mistos, ou seja, constituídos por grandes e pequenas células, representaram apenas 4,6% dos casos. Quanto ao número de mitoses, 84,9% dos linfomas foram incluídos como de grau intermediário, 10,5% como de baixo grau e 4,6% como de alto grau. No que se refere à morfologia do núcleo, linfomas em que predominavam linfócitos não clivados (58,2%) ou linfócitos clivados (37,2%) foram mais frequentes do que aqueles em que havia uma mistura igualmente proporcional de linfócitos clivados e não clivados (4,6%). Com base nestes resultados, os 86 linfomas foram assim distribuídos utilizando-se a classificação proposta pela Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage: difuso de grandes células não clivadas (46,5%), difuso de grandes células clivadas (33,7%), difuso de pequenas e grandes células (4,6%), difuso de pequenas células - tipo plasmocitoide (7%), imunoblástico (3,5%), difuso de pequenas células - tipo intermediário (2,3%), difuso de pequenas células não clivadas (1,2%) e difuso de pequenas células não clivadas - tipo Burkitt (1,2%). Na imuno-histoquímica, 27 dos 86 (31,4%) linfomas foram positivos para o anticorpo monoclonal CD79αcy, utilizado para detecção de linfócitos B, e nenhum caso foi positivo para o anticorpo policlonal CD3, utilizado para detecção de linfócitos T. Com base nestes resultados, os 27 linfomas B foram assim distribuídos utilizando-se a Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL): linfoma difuso de grandes células B (81,5%), linfomas imunoblásticos de grandes células (11,1%) e linfomas [...](AU)

A retrospective study of 86 cases of bovine lymphoma classified as with diffuse pattern of distribution and verified by phenotypic (histology) and immunophenotypic (immunohistochemistry [IHC]) is presented. Regarding the size of the neoplastic lymphocytes, 83.8% was classified as large cells lymphoma and 11.6% as small cells lymphoma. Mixed lymphomas, i.e., formed by large and small cells simultaneously represented only 4.6% of all cases. Regarding their mitotic index, 84.9% of lymphomas was included in the intermediate-grade, 10.5% as low-grade and 4.6% as high-grade. Regarding the nucleus morphology, lymphomas with mostly non-cleaved cells (58.2%) or cleaved cells (37.2%) were the more frequent than those with a balanced mixed proportion of cleaved and non-cleaved cells (4.6%). Based on these results, the 86 lymphoma cases were classified by the Working Formulation (WF) of Non-Hodgkin's Lymphomas for Clinical Usage as: diffuse large non-cleaved cell (46.5%), diffuse large cleaved cell (33.7%), diffuse mixed small and large cell (4.6%), diffuse small cell - plasmacytoid (7%), immunoblastic (3.5%), diffuse small cell - intermediate (2.3%), diffuse small non-cleaved cell (1.2%), and diffuse small non-cleaved cell Burkitt's (1.2%). According to the IHC, 27 out of 86 (31.4%) lymphomas were positive to monoclonal antibody CD79αcy, used to detect B cells, and none were positive for polyclonal antibody CD3, used to detect T cells. Based on this, the 27 B-cell type lymphomas were distributed as follows: diffuse large B-cell lymphoma (81.5%), large cell immunoblastic lymphoma (11.1%), and lymphoplasmacytoid lymphoma (7.4%), according the Revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasms (REAL). The results of this retrospective study, similar to what has been described in other parts of the world, allow us to conclude that bovine lymphomas are basically diffuse and predominantly made of intermediate-grade, large cells, with cleaved or non-cleaved [...](AU)

Aspectos epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos do linfoma em bovinos: 128 casos (1965-2013) / Epidemiological, clinical and pathological aspects of lymphoma in cattle: 128 cases (1965-2013)

Por meio de um estudo retrospectivo, os aspectos epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos de 128 casos de linfoma bovino são descritos. Dos protocolos que informavam o sexo (n=111), 84,7% correspondiam a fêmeas e 15,3% a machos. Dos protocolos em que constava a raça (n=108), a mais prevalente foi a holandesa (63%). Em relação à idade (n=107), houve uma variação entre um e 14 anos. A maioria dos bovinos era adulta (89,7%) e a maior concentração dos casos ocorreu ao redor de 5-8 anos (57,9%). Em relação aos sinais clínicos (n=89), linfadenomegalia foi o achado mais frequentemente observado (74,1%). Outros sinais clínicos, principalmente aqueles relacionados com os sistemas respiratório (dispneia, estertoração pulmonar e taquipneia), cardiovascular (taquicardia, edema subcutâneo e pulso venoso positivo), digestório (atonia ruminal, timpanismo e diarreia) e nervoso (paresia dos membros pélvicos e andar cambaleante), foram pouco prevalentes. Na necropsia (n=125), 71,2% dos bovinos apresentavam aumento de volume dos linfonodos; essa linfadenomegalia foi classificada como localizada em 89,6% dos casos e generalizada em 10,3% dos casos. Dos protocolos que informavam os linfonodos acometidos (n=58), a distribuição foi a seguinte: mesentéricos (51,7%), mediastínicos (37,9%), pré-escapulares (29,3%), ilíacos internos (27,6%), inguinais superficiais (25,8%) e traqueobrônquicos (18,9%). Além dos linfonodos, outros órgãos comumente afetados pelo linfoma neste estudo incluíram: coração (40%), fígado (15,2%), rim (14,4%), abomaso (12,8%), útero (11,2%), intestino (10,4%) e pulmão (7,2%). A presença de massas tumorais no canal vertebral foi observada em poucos casos (3,2%). Com base na epidemiologia e na localização das lesões, a maioria dos casos (96%) foi classificada como linfoma enzoótico e o restante (4%) como linfoma esporádico. Os resultados encontrados neste estudo irão auxiliar clínicos de grandes animais e patologistas veterinários na suspeita e no diagnóstico definitivo do linfoma na espécie bovina.(AU)

The epidemiological, clinical and pathological aspects of 128 cases of bovine lymphoma are described in this study. Out of the cases were the gender was informed (n=111), 84.7% of affected animals were females and 15.3% were males. Out of the cases were breed was informed (n=108), 63% of affected animals were Holstein cows. The age of affected cows (n=107) varied from 1 to 14 years (57.9%), with most animals being adults (89.7%) with 5 to 8 years of age (57.9%). The most common clinical sign (n=89) was lymphadenomegaly (74.1%). Other clinical signs associated with the respiratory system (dyspnea, pulmonary stridor, and tachypnea), cardiovascular system (tachycardia, subcutaneous edema, and positive venous pulse), digestive system (ruminal atony, bloat, and diarrhea), and nervous system (pelvic limb paresis and staggering pace) were less prevalent. Gross findings (n=125) included enlargement of lymph nodes in 71.2% of the cases; this finding was classified as localized in 89.6% of the cases and generalized in 10.3% of the cases. Out of the cases where the affected lymph nodes were identified (n=58) the distribution of the lymphadenomegaly was the following: mesenteric (51.7%), mediastinal (37.9%), prescapular (29.3%), internal iliac (27.6%), superficial inguinal (25.8%), and tracheobronchial (18.9%). Other commonly affected organs included heart (40%), liver (15.2%), kidney (14.4%), abomasum (12.8%), uterus (11.2%), intestine (10.4%), and lung (7.2%). Tumor masses within the vertebral canal were observed in a few cases (3.2%). Based on the epidemiology and localization of the lesions, the majority of the cases (96%) in this study were classified as enzootic lymphoma (96%) and the remainder of the cases (4%) as sporadic lymphoma. The results herein presented will serve as a guide to large animal practitioners and veterinary pathologists and will help in the confirmation of their suspicion when dealing with cases of bovine lymphoma.(AU)

Aspectos epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos do linfoma em bovinos: 128 casos (1965-2013) / Epidemiological, clinical and pathological aspects of lymphoma in cattle: 128 cases (1965-2013)

Por meio de um estudo retrospectivo, os aspectos epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos de 128 casos de linfoma bovino são descritos. Dos protocolos que informavam o sexo (n=111), 84,7% correspondiam a fêmeas e 15,3% a machos. Dos protocolos em que constava a raça (n=108), a mais prevalente foi a holandesa (63%). Em relação à idade (n=107), houve uma variação entre um e 14 anos. A maioria dos bovinos era adulta (89,7%) e a maior concentração dos casos ocorreu ao redor de 5-8 anos (57,9%). Em relação aos sinais clínicos (n=89), linfadenomegalia foi o achado mais frequentemente observado (74,1%). Outros sinais clínicos, principalmente aqueles relacionados com os sistemas respiratório (dispneia, estertoração pulmonar e taquipneia), cardiovascular (taquicardia, edema subcutâneo e pulso venoso positivo), digestório (atonia ruminal, timpanismo e diarreia) e nervoso (paresia dos membros pélvicos e andar cambaleante), foram pouco prevalentes. Na necropsia (n=125), 71,2% dos bovinos apresentavam aumento de volume dos linfonodos; essa linfadenomegalia foi classificada como localizada em 89,6% dos casos e generalizada em 10,3% dos casos. Dos protocolos que informavam os linfonodos acometidos (n=58), a distribuição foi a seguinte: mesentéricos (51,7%), mediastínicos (37,9%), pré-escapulares (29,3%), ilíacos internos (27,6%), inguinais superficiais (25,8%) e traqueobrônquicos (18,9%). Além dos linfonodos, outros órgãos comumente afetados pelo linfoma neste estudo incluíram: coração (40%), fígado (15,2%), rim (14,4%), abomaso (12,8%), útero (11,2%), intestino (10,4%) e pulmão (7,2%)...

The epidemiological, clinical and pathological aspects of 128 cases of bovine lymphoma are described in this study. Out of the cases were the gender was informed (n=111), 84.7% of affected animals were females and 15.3% were males. Out of the cases were breed was informed (n=108), 63% of affected animals were Holstein cows. The age of affected cows (n=107) varied from 1 to 14 years (57.9%), with most animals being adults (89.7%) with 5 to 8 years of age (57.9%). The most common clinical sign (n=89) was lymphadenomegaly (74.1%). Other clinical signs associated with the respiratory system (dyspnea, pulmonary stridor, and tachypnea), cardiovascular system (tachycardia, subcutaneous edema, and positive venous pulse), digestive system (ruminal atony, bloat, and diarrhea), and nervous system (pelvic limb paresis and staggering pace) were less prevalent. Gross findings (n=125) included enlargement of lymph nodes in 71.2% of the cases; this finding was classified as localized in 89.6% of the cases and generalized in 10.3% of the cases. Out of the cases where the affected lymph nodes were identified (n=58) the distribution of the lymphadenomegaly was the following: mesenteric (51.7%), mediastinal (37.9%), prescapular (29.3%), internal iliac (27.6%), superficial inguinal (25.8%), and tracheobronchial (18.9%). Other commonly affected organs included heart (40%), liver (15.2%), kidney (14.4%), abomasum (12.8%), uterus (11.2%), intestine (10.4%), and lung (7.2%)...

Soroepidemiologia da leucemia bovina (LB) em bovinos curraleiros dos estados de Goiás e Tocantins, Brasil / Seroepidemiology of bovine leukaemia (LB) in curraleiro cattle breed from Goiás and Tocantins states

Aiming to verify bovine leukaemia (BL) occurrence in Curraleiro cattle breed, sera of 1051 animals were sampled from Goias (n=11) and Tocantins (n=12) states. BL serological diagnosis was performed by agar gel immunodiffusion method (AGID). The total occurrence rate was 21.1% (222/1051). In Tocantins it was 27.8% (136/489) occurrence was observed, higher value than in Goias, where 15.3% (86/562) occurrence was found. The serum reactivity was higher in females than in males, 23.3% (198/852) and 11.8% (23/195), respectively, and in animals older than 48 months old.

Com o objetivo de verificar a ocorrência da leucose enzoótica (LB) em bovinos Curraleiros, foram amostrados soros sanguíneos de um total de 1051 animais pertencentes a 11 rebanhos localizados nos Estados de Goiás e 12 em Tocantins. O diagnóstico sorológico de LB foi realizado pelo método de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). A taxa total de sororeagentes foi 21,1% (222/1051). Em Tocantins foram encontrados 27,8% (136/489) de sororreagentes, número significativamente maior que em Goiás, onde foram encontrados 15,3% (86/562). A sororreatividade foi maior em fêmeas que em machos, 23,3% (198/852) e 11,8% (23/195), respectivamente, e em animais com idade superior a 48 meses.

Soroepidemiologia da leucemia bovina (LB) em bovinos curraleiros dos estados de Goiás e Tocantins, Brasil / Seroepidemiology of bovine leukaemia (LB) in curraleiro cattle breed from Goiás and Tocantins states

Aiming to verify bovine leukaemia (BL) occurrence in Curraleiro cattle breed, sera of 1051 animals were sampled from Goias (n=11) and Tocantins (n=12) states. BL serological diagnosis was performed by agar gel immunodiffusion method (AGID). The total occurrence rate was 21.1% (222/1051). In Tocantins it was 27.8% (136/489) occurrence was observed, higher value than in Goias, where 15.3% (86/562) occurrence was found. The serum reactivity was higher in females than in males, 23.3% (198/852) and 11.8% (23/195), respectively, and in animals older than 48 months old.(AU)

Com o objetivo de verificar a ocorrência da leucose enzoótica (LB) em bovinos Curraleiros, foram amostrados soros sanguíneos de um total de 1051 animais pertencentes a 11 rebanhos localizados nos Estados de Goiás e 12 em Tocantins. O diagnóstico sorológico de LB foi realizado pelo método de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). A taxa total de sororeagentes foi 21,1% (222/1051). Em Tocantins foram encontrados 27,8% (136/489) de sororreagentes, número significativamente maior que em Goiás, onde foram encontrados 15,3% (86/562). A sororreatividade foi maior em fêmeas que em machos, 23,3% (198/852) e 11,8% (23/195), respectivamente, e em animais com idade superior a 48 meses.(AU)

Soroepidemiologia da leucemia bovina (LB) em bovinos curraleiros dos estados de Goiás e Tocantins, Brasil

Aiming to verify bovine leukaemia (BL) occurrence in Curraleiro cattle breed, sera of 1051 animals were sampled from Goias (n=11) and Tocantins (n=12) states. BL serological diagnosis was performed by agar gel immunodiffusion method (AGID). The total occurrence rate was 21.1% (222/1051). In Tocantins it was 27.8% (136/489) occurrence was observed, higher value than in Goias, where 15.3% (86/562) occurrence was found. The serum reactivity was higher in females than in males, 23.3% (198/852) and 11.8% (23/195), respectively, and in animals older than 48 months old.

Com o objetivo de verificar a ocorrência da leucose enzoótica (LB) em bovinos Curraleiros, foram amostrados soros sanguíneos de um total de 1051 animais pertencentes a 11 rebanhos localizados nos Estados de Goiás e 12 em Tocantins. O diagnóstico sorológico de LB foi realizado pelo método de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). A taxa total de sororeagentes foi 21,1% (222/1051). Em Tocantins foram encontrados 27,8% (136/489) de sororreagentes, número significativamente maior que em Goiás, onde foram encontrados 15,3% (86/562). A sororreatividade foi maior em fêmeas que em machos, 23,3% (198/852) e 11,8% (23/195), respectivamente, e em animais com idade superior a 48 meses.

Quantificação da população de linfócitos B e das subpopulações de linfócitos T em bovinos infectados pelo vírus da leucose enzoótica bovina / Quantification of B cells and T lymphocyte subsets in bovine leukemia virus infected dairy cows

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a frequência e número absoluto de linfócitos B e das subpopulações de linfócitos T em bovinos infectados pelo vírus da leucemia bovina (BLV) com distintos perfis leucocitários conhecidos como não leucêmicos (AL) e com linfocitose persistente (LP). Deste modo, 15 animais foram selecionados e divididos uniformemente em três grupos (negativo, AL e LP). A infecção pelo vírus da BLV foi detectada por imunodifusão em ágar gel e por ensaio imunoenzimático. A quantificação das populações de linfócitos B e T foi determinada por citometria de fluxo utilizando anticorpos monoclonais. Os resultados do presente estudo apontaram para aumento da população de linfócitos B, e também das células CD5+ e CD11b+, que geralmente são alvo da infecção pelo vírus da BLV, nos animais com LP. Consequentemente pode-se observar redução da porcentagem de linfócitos T, T CD4+ no sangue periférico, e de linfócitos T, T CD4+ e T CD8+ nas células mononucleares do sangue periférico isoladas por gradiente de centrifugação. No entanto, nenhuma alteração no número absoluto de linfócitos T, T CD4+ e T CD8+ no sangue periférico foi encontrada nos animais manifestando LP. Entretanto, encontrou-se correlação alta e significativa entre o número absoluto de linfócitos T e T CD8+ e o número absoluto de linfócitos B no sangue periférico nos animais manifestando LP, não encontrand

The aim of the present trial was to determine the frequencies and absolute number of B and T lymphocytes subpopulations in bovine leukemia virus (BLV)-infected dairy cows with distinct lymphocyte profile known as non-leukemic (AL) and persistent lymphocytosis (PL). Thus, 15 animals were selected and divided uniformly in three groups (negative, AL, PL). The BLV infection was detected by agar gel immunodiffusion and enzyme-linked immunosorbent-assay. The lymphocytes subsets were evaluated using monoclonal antibodies by flow cytometry. The results of the present study pointed out to an increase in B lymphocytes, and also an augment in CD5+ and CD11b+ cells in animals showing PL. Consequently, it can be observed a decrease in the percentage of T cells subsets in these animals. Conversely, no significant alterations in the absolute number of the T lymphocytes, T CD4+ cells and T CD8+ lymphocytes were found in BLV-infected dairy cows with PL. Therefore, the correlation between the absolute numbers of B- and T cell subsets in the peripheral blood applied to each group showed a significant and positive strong correlation between numbers of B cells and T cells or T CD8+ cells in the PL animals, although the same cannot be predicted for T CD4+ lymphocytes. No such correlation was encountered for the AL and negative-control animals.

Metabolismo oxidativo de leucócitos em animais infectados pelo Vírus da Leucemia Bovina / Oxidative burst of leukocytes from bovine leukemia Virus-Infected Cattle

A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H2O2) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H2O2, com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H2O2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2. Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H2O2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H2O2, demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão.(AU)

Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H2O2) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H2O2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H2O2-producing circulating leukocytes (H2O2-PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H2O2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H2O2 intracellular production and the percentage of H2O2-PCL obtained from BLVnegative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H2O2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H2O2-PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H2O2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression.(AU)

Quantificação da população de linfócitos B e das subpopulações de linfócitos T em bovinos infectados pelo vírus da leucose enzoótica bovina / Quantification of B cells and T lymphocyte subsets in bovine leukemia virus infected dairy cows

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a frequência e número absoluto de linfócitos B e das subpopulações de linfócitos T em bovinos infectados pelo vírus da leucemia bovina (BLV) com distintos perfis leucocitários conhecidos como não leucêmicos (AL) e com linfocitose persistente (LP). Deste modo, 15 animais foram selecionados e divididos uniformemente em três grupos (negativo, AL e LP). A infecção pelo vírus da BLV foi detectada por imunodifusão em ágar gel e por ensaio imunoenzimático. A quantificação das populações de linfócitos B e T foi determinada por citometria de fluxo utilizando anticorpos monoclonais. Os resultados do presente estudo apontaram para aumento da população de linfócitos B, e também das células CD5+ e CD11b+, que geralmente são alvo da infecção pelo vírus da BLV, nos animais com LP. Consequentemente pode-se observar redução da porcentagem de linfócitos T, T CD4+ no sangue periférico, e de linfócitos T, T CD4+ e T CD8+ nas células mononucleares do sangue periférico isoladas por gradiente de centrifugação. No entanto, nenhuma alteração no número absoluto de linfócitos T, T CD4+ e T CD8+ no sangue periférico foi encontrada nos animais manifestando LP. Entretanto, encontrou-se correlação alta e significativa entre o número absoluto de linfócitos T e T CD8+ e o número absoluto de linfócitos B no sangue periférico nos animais manifestando LP, não encontrand

The aim of the present trial was to determine the frequencies and absolute number of B and T lymphocytes subpopulations in bovine leukemia virus (BLV)-infected dairy cows with distinct lymphocyte profile known as non-leukemic (AL) and persistent lymphocytosis (PL). Thus, 15 animals were selected and divided uniformly in three groups (negative, AL, PL). The BLV infection was detected by agar gel immunodiffusion and enzyme-linked immunosorbent-assay. The lymphocytes subsets were evaluated using monoclonal antibodies by flow cytometry. The results of the present study pointed out to an increase in B lymphocytes, and also an augment in CD5+ and CD11b+ cells in animals showing PL. Consequently, it can be observed a decrease in the percentage of T cells subsets in these animals. Conversely, no significant alterations in the absolute number of the T lymphocytes, T CD4+ cells and T CD8+ lymphocytes were found in BLV-infected dairy cows with PL. Therefore, the correlation between the absolute numbers of B- and T cell subsets in the peripheral blood applied to each group showed a significant and positive strong correlation between numbers of B cells and T cells or T CD8+ cells in the PL animals, although the same cannot be predicted for T CD4+ lymphocytes. No such correlation was encountered for the AL and negative-control animals.

Metabolismo oxidativo de leucócitos em animais infectados pelo Vírus da Leucemia Bovina / Oxidative burst of leukocytes from bovine leukemia Virus-Infected Cattle

A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H2O2) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H2O2, com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H2O2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2. Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H2O2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H2O2, demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão.

Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H2O2) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H2O2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H2O2-producing circulating leukocytes (H2O2-PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H2O2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H2O2 intracellular production and the percentage of H2O2-PCL obtained from BLVnegative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H2O2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H2O2-PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H2O2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression.