Streptococcus mutans and Streptococcus dentisani in dental biofilm of children with different caries status: a pilot study / Streptococcus dentisani e Streptococcus mutans no biofilme dental de crianças com diferentes estados de cárie: um estudo piloto

Objective:Streptococcus mutans is one of the etiological agents associated with caries due to its ability to metabolize carbohydrates and resist acidic environments. On the other hand, Streptococcus dentisani, shows characteristics associated with caries control due to its ability to inhibit growth of cariogenic bacteria. The aim of this work was to quantify the levels of Streptococcus mutans and Streptococcus dentisani from dental biofilm of children related to their caries situation. Material and Methods: After identification of morphologic characteristics of reference strains was performed, clinical isolates of biofilm compatible with these strains were selected and the Polymerase Chain Reaction technique was performed using species-specific primers. Biofilm samples from 25 children with caries and 21 without caries were collected to quantify the levels of S. mutans and S. dentisani. Results: There were statistically significant differences in the levels of S. mutans in the caries group and the levels increased as the severity of the carious lesion increased. By contrast, higher levels of S. dentisaniwere found in the caries-free group, although no statistically significant differences were found. In addition, the levels of S. dentisani decreased as the severity of the carious lesion increased. Conclusion: The increase in the frequency of S. dentisani in the caries-free group suggests the possibility of requiring minimum levels of this species in the dental biofilm to show an actual protective effect. It must also be considered that this effect might be related to intrinsic factors in children and the intraspecies genetic variability found in every individual. (AU)

Objetivo : Streptococcus mutans é um dos agentes etiológicos associados à cárie devido à sua habilidade de metabolizar carboidratos e resistir a ambientes ácidos. Já o Streptococcus dentisani , apresenta características associadas ao controle da cárie devido à sua capacidade de inibir o crescimento de bactérias cariogênicas. O objetivo deste trabalho foi quantificar os níveis de Streptococcus mutans e Streptococcus dentisani no biofilme dental de crianças em relação à situação de cárie destas. Material e Métodos: Após a identificação das características morfológicas das cepas de referência, foram selecionados do biofilme isolados clínicos compatíveis com essas cepas e realizada a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase utilizando primers espécie-específicos. Amostras de biofilme de 25 crianças com cárie e 21 sem cárie foram coletadas para quantificar os níveis de S. mutans e S. dentisani. Resultados: Houve diferenças estatisticamente significativas nos níveis de S. mutans no grupo com cárie e os níveis aumentaram à medida que a gravidade da lesão cariosa aumentou. Por outro lado, foram encontrados níveis mais elevados de S. dentisani no grupo sem cáries, embora não tenham sido encontradas diferenças estatisticamente significativas. Além disso, os níveis de S. dentisani diminuíram à medida que a gravidade da lesão cariosa aumentava. Conclusão: O aumento da frequência de S. dentisani no grupo livre de cárie sugere a possibilidade de exigir níveis mínimos desta espécie no biofilme dental para mostrar um efeito protetor real. Deve-se considerar também que esse efeito pode estar relacionado a fatores intrínsecos nas crianças e à variabilidade genética intraespécie encontrada em cada indivíduo. (AU)

Antibacterial potentials of some toothpaste products against some oral bacterial isolates / Potencial ação antibacteriana de produtos de pastas de dentes contra isolados bacterianos orais

Objetive: Manufacturers of toothpastes claim that their products are active against oral microbiome capable of causing tooth decay. The objective of this study was to investigate the manufacturers' claim using some of the toothpaste products sold in Ado-Ekiti, Nigeria. Material and methods: The antibacterial potentials of five commercialized toothpaste products (designated sodium fluoride-zinc sulphate, benzyl alcohol-sodium fluorophosphate, sodium fluoride-eugenol, sodium fluoride-sodium laurylsulfate and sodium fluoride-potassium nitrate) were tested against six oral isolates of dental caries and periodontal origin ­ Staphylococcus aureus, Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius, Streptococcus pyogenes and Pseudomonas aeruginosa. The antimicrobial potentials were evaluated using modified agar well diffusion method. Various dilutions of the toothpaste products from 1:1 to 1:16 were tested against each test microorganism. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of the toothpastes were determined. Results: sodium fluoride-zinc sulphate, benzyl alcohol-sodium fluorophosphate and sodium fluoride-eugenol toothpastes showed inhibitory effects on S. aureus, S. mitis and S. salivarius. Sodium fluoride-sodium laurylsulfate and sodium fluoride-potassium nitrate toothpastes showed no inhibitory effect on the organisms except S. pyogenes. Only sodium fluoride-potassium nitrate toothpaste inhibited E. coli while none of the toothpastes inhibited P. aeruginosa. The MIC and MBC of sodium fluoride-zinc sulphate, benzyl alcohol-sodium fluorophosphate, and sodium fluoride-eugenol toothpastes showed bacteriostatic and bactericidal effects on the organisms. Sodium fluoride-zinc sulphate, benzyl alcohol-sodium fluorophosphate, and sodium fluoride-eugenol toothpastes showed comparable effects on S. aureus, S. mitis and S. salivarius. Sodium fluoride-eugenol toothpaste was strongest against S. mitis, benzyl alcohol-sodium fluorophosphates toothpaste was strongest against S. pyogenes, sodium fluoride-zinc sulphate toothpaste was strongest against S. salivarius and only sodium fluoride-potassium nitrate toothpaste inhibited E. coli. Conclusion: The manufacturer's claim is upheld by this study for sodium fluoride-zinc sulphate, benzyl alcohol-sodium fluorophosphate and sodium fluoride-eugenol toothpastes. However, sodium fluoride-sodium laurylsulfate and sodium fluoride-potassium nitrate toothpastes showed limited inhibitory potentials (AU)

Objetivo: Os fabricantes de dentifrícios afirmam que seus produtos são ativos contra a microbiota oral capaz de causar cáries. O objetivo deste estudo foi investigar a justificativa dos fabricantes sobre o uso de alguns produtos na pasta de dente vendida em Ado-Ekiti, Nigeria. Materiais e métodos:Os potenciais agentes antibacterianos dos cinco produtos de creme dental comercializados (denominados fluoreto de sódio-sulfato de zinco, álcool benzilico-fluorofosfato de sódio, fluoreto de sódio-eugenol, fluoreto de sódio-laurilsulfato de sódio-nitrato de potássio) foram testados contra 06 isolados orais de cárie dentária e origem periodontal - Staphylococcus aureus, Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius, Streptococcus piogenes e Pseudomonas aeruginosa. Os potenciais antimicrobianos foram avaliados usando o método de difusão em ágar modificado. Várias diluições dos produtos das pastas de dente de 1:1 a 1:16 foram testadas contra cada microorganismo citado. A concentração inibitório mínima (MIC) e a concentração bactericida mínima (CBM) das pastas de dente foram determinadas. Resultados: As pastas de fluoreto de sódio-sulfato de zinco, álcool benzilico-fluorofosfato de sódio e fluoreto de sódio-eugenol apresentaram efeitos inibitórios sobre S. aureus, S. mitis, S. salivarius. Os dentifrícios com fluoreto de sódio-laurilsulfato de sódio e fluoreto de sódio-nitrato de potássio não mostraram efeito inibitório sobre os microorganismos, exceto S. pyogenes. Apenas o creme dental com fluoreto de sódio e nitrato de potássio inibiu a E. coli, enquanto nenhum dos dentifrícios inibiu a P. aeruginosa. O MIC e CBM de fluoreto de sóido-sulfato de zinco, álcool benzilico-fluorofosfato de sódio e dentifrício fluoreto de sódio-eugenol mostraram efeitos bacteriostáticos e bactericidas sobre os organismos. As pastas de fluoreto de sódio-sulfato de zinco, álcool benzilico-fluorofosfato de sódio-eugenol mostraram efeitos comparáveis em S. aureus, S. mitis e S. salivarius. O creme dental com fluoreto de sódio-eugenol foi o mais forte contra S. mitis, o creme dental com álcool benzilico e fluorofosfatos de sódio foi o mais forte contra S. pyogenes, o creme dental com fluoreto de sódio-sulfato de zinco foi o mais forte contra o S. salivarius e apenas o creme dental com fluoreto de sódio-nitrato de potássio inibiu E. coli.Conclusão: A utilização de alguns produtos pelo fabricante é confirmada por este estudo para as pastas de dente com fluoreto de sódio-zinco, álcool benzilico-fluorofosfato de sódio e fluoreto de sódio-eugenol. No entanto, os dentifrícios com fluoreto de sódio-laurilsulfato de sódio e fluoreto de sódio-nitrato de potássio apresentaram potencial inibitório limitado (AU).

Antifungal susceptibility profile of Aspergillus fumigatus isolates from avian lungs / Perfil de suscetibilidade antifúngica de isolados de Aspergillus fumigatus provenientes de pulmões de aves

Susceptibility testing is essential to inform the correct management of Aspergillus infections. In this study we present antifungal susceptibility profile of A. fumigatus isolates recovered from lungs of birds with and without aspergillosis. Fifty three isolates were tested for their antifungal susceptibility to voriconazole (VRC), itraconazole (ITZ), amphotericin (AMB) and caspofungin (CSP) using the M38-A2 broth microdilution reference method. Five isolates were resistant to more than one antifungal drug (CSP + AMB, VRC + ITZ and AMB + ITZ). Fifteen (28%) isolates with susceptible increased exposure (I) to ITZ were sensible to VRC. Resistance to AMB (>2µg/mL) was observed in only four isolates. Eleven (21%) A. fumigatus present resistance to ITZ (13%) and VRC (8%). Fungal isolation from respiratory samples has been regarded as being of limited usefulness in the ante mortem diagnosis of aspergillosis in birds. However, the results suggest that the detection and antifungal susceptibility profile may be helpful for monitoring of therapy for avian species and where antifungal resistance might be emerging and what conditions are associated to the event.(AU)

Os testes de suscetibilidade são essenciais para informar o correto manejo das infecções por Aspergillus. Neste estudo apresentamos o perfil antifúngico de isolados de A. fumigatus provenientes de pulmões de aves com e sem aspergilose. Cinqüenta e três isolados foram testados quanto à susceptibilidade antifúngica ao voriconazol (VRC), itraconazol (ITZ), anfotericina B (AMB) e caspofungina (CSP) pelo método de referência de microdiluição do caldo M38-A2. Cinco isolados foram resistentes a mais de um antifúngico (CSP + AMB, VRC + ITZ e AMB + ITZ). Quinze (28%) isolados suscetíveis - com exposição aumentada (I) ao ITZ foram sensíveis ao VRC. A resistência ao AMB (>2µg/mL) foi observada em apenas quatro isolados. Onze (21%) A. fumigatus apresentaram resistência a ITZ (13%) e VRC (8%). O isolamento de fungos de amostras respiratórias tem sido considerado de utilidade limitada no diagnóstico ante mortem de aspergilose em aves. No entanto, os resultados sugerem que a detecção e o perfil de suscetibilidade a antifúngicos podem ser úteis para o monitoramento da terapia de espécies aviárias, assim como a emergência da resistência antifúngica e quais condições podem estar associadas ao evento.(AU)

Antifungal susceptibility profile of Aspergillus fumigatus isolates from avian lungs / Perfil de suscetibilidade antifúngica de isolados de Aspergillus fumigatus provenientes de pulmões de aves

Susceptibility testing is essential to inform the correct management of Aspergillus infections. In this study we present antifungal susceptibility profile of A. fumigatus isolates recovered from lungs of birds with and without aspergillosis. Fifty three isolates were tested for their antifungal susceptibility to voriconazole (VRC), itraconazole (ITZ), amphotericin (AMB) and caspofungin (CSP) using the M38-A2 broth microdilution reference method. Five isolates were resistant to more than one antifungal drug (CSP + AMB, VRC + ITZ and AMB + ITZ). Fifteen (28%) isolates with susceptible increased exposure (I) to ITZ were sensible to VRC. Resistance to AMB (>2µg/mL) was observed in only four isolates. Eleven (21%) A. fumigatus present resistance to ITZ (13%) and VRC (8%). Fungal isolation from respiratory samples has been regarded as being of limited usefulness in the ante mortem diagnosis of aspergillosis in birds. However, the results suggest that the detection and antifungal susceptibility profile may be helpful for monitoring of therapy for avian species and where antifungal resistance might be emerging and what conditions are associated to the event.(AU)

Os testes de suscetibilidade são essenciais para informar o correto manejo das infecções por Aspergillus. Neste estudo apresentamos o perfil antifúngico de isolados de A. fumigatus provenientes de pulmões de aves com e sem aspergilose. Cinqüenta e três isolados foram testados quanto à susceptibilidade antifúngica ao voriconazol (VRC), itraconazol (ITZ), anfotericina B (AMB) e caspofungina (CSP) pelo método de referência de microdiluição do caldo M38-A2. Cinco isolados foram resistentes a mais de um antifúngico (CSP + AMB, VRC + ITZ e AMB + ITZ). Quinze (28%) isolados suscetíveis - com exposição aumentada (I) ao ITZ foram sensíveis ao VRC. A resistência ao AMB (>2µg/mL) foi observada em apenas quatro isolados. Onze (21%) A. fumigatus apresentaram resistência a ITZ (13%) e VRC (8%). O isolamento de fungos de amostras respiratórias tem sido considerado de utilidade limitada no diagnóstico ante mortem de aspergilose em aves. No entanto, os resultados sugerem que a detecção e o perfil de suscetibilidade a antifúngicos podem ser úteis para o monitoramento da terapia de espécies aviárias, assim como a emergência da resistência antifúngica e quais condições podem estar associadas ao evento.(AU)

Antes sós do que mal acompanhados: contato e contágio com povos indígenas isolados e de recente contato no Brasil e desafios para sua proteção e assistência à saúde / Better alone than in bad company: contact and contagion with isolated and recently contacted indigenous people in Brazil and challenges for their protection and health care

Resumo O objetivo deste artigo é apresentar e discutir a vulnerabilidade de povos indígenas em isolamento voluntário a epidemias decorrentes do contato com representantes de nossa sociedade e apontar os desafios para a assistência à saúde nas situações de contato iminente. A partir da experiência dos autores na atenção à saúde de comunidades indígenas isoladas e de contato recente e de informações existentes na literatura indigenista, são apresentados exemplos da alta mortalidade que incidiu sobre alguns povos indígenas em períodos posteriores à quebra de seu estado de isolamento. O artigo atualiza as informações existentes sobre povos indígenas isolados no Brasil, discute a política indigenista e as ameaças a que estão submetidos esses povos pelo avanço da invasão ilegal de seus territórios e alerta para a possibilidade de novos contatos entre esses grupos e a sociedade circundante no contexto atual de ataque aos direitos indígenas agravados pela epidemia de covid-19. Contextualizam-se a suscetibilidade dos povos indígenas isolados, a necessidade de preparação para futuras situações de contato e medidas para evitar o contágio quando ocorrer a quebra do estado de isolamento desses povos.

Abstract The purpose of this article is to present and discuss the vulnerability of indigenous people in voluntary isolation due to epidemics resulting from contact with representatives of our society and to point out the challenges for health care in situations of imminent contact. Based on the authors' experience in the health care of isolated and recently contacted indigenous communities and on information in the indigenous literature, examples of the high mortality that affected some indigenous peoples in periods after break of their isolation state are presented. The article updates the existing information on isolated indigenous peoples in Brazil, discusses the indigenous policy formulated for them, the threats to which they are subjected by the advance of the illegal invasion of their territories and alerts to the possibility of new contacts of these groups and the surrounding society, in current context of attack on indigenous rights aggravated by the COVID-19 pandemic. It contextualizes the susceptibility of isolated indigenous peoples, the need to be ready for future situations of contact and measures to avoid contagion when the isolation of these peoples is interrupted.

Antimicrobial activity of propolis extract fractions against Staphylococcus spp. isolated from goat mastitis / Atividade antimicrobiana de frações do extrato de própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de mastite caprina

The indiscriminate use of antibiotics in the treatment of caprine mastitis causes the appearance of resistant microorganisms, besides leaving residues in milk, putting at risk to human health. In this way, propolis is an alternative in the treatment of diseases because it has antimicrobial activity, mainly because of the presence of flavonoids in its composition. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial potential of propolis to Staphylococcus spp. Isolated from cases of goat mastitis and qualify the crude ethanoic extract by high performance liquid chromatography (HPLC). In this study, the minimum bactericidal concentration values of propolis extracts in ethanol, ethyl acetate and hexane showed that the best concentrations capable of promoting the highest mortality of the isolates of Staphylococcus spp. from mastitis in goats, were 6250, 3125 and 1562.5µg/mL, respectively. By the microplate adherence test, it was found that 20.78% isolates were not able to form biofilm, 14.70% were classified as moderate and 64.70% were weak and none as a strong biofilm producer. Propolis in its different diluents was able to affect the formation of biofilm and showed a pronounced marked antimicrobial activity against Staphylococcus spp. strains and may be indicated for use in in vivo studies.(AU)

O uso indiscriminado de antibióticos no tratamento de mastite caprina leva ao desenvolvimento de micro-organismos resistentes que poderão estar presentes em alimentos, colocando em risco a saúde humana. Dessa forma, a própolis surge como uma alternativa para o tratamento de doenças por possuir uma ação antimicrobiana, principalmente pela presença de flavonoides em sua composição. O objetivo desse estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano da própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite caprina e qualificar o extrato etanoico bruto por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD). Neste estudo, os valores de concentração bactericida mínima (CBM) dos extratos de própolis em álcool etílico, acetato de etila e hexano nos isolados foram de 6250, 3125 e 1562,5µg/mL, respectivamente. Pelo teste de aderência à microplacas, observou-se que 20,78% dos microorganismos, não foram capazes de formar biofilme, 14,70% foram classificados como moderados, 64,70% em fracos e nenhum como forte produtor de biofilme. A própolis em seus diferentes diluentes foi capaz de afetar a formação de biofilme e apresentou significativa atividade antimicrobiana frente a cepas de Staphylococcus spp., podendo ser indicada para utilização em estudos "in vivo".(AU)

Antimicrobial activity of propolis extract fractions against Staphylococcus spp. isolated from goat mastitis / Atividade antimicrobiana de frações do extrato de própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de mastite caprina

The indiscriminate use of antibiotics in the treatment of caprine mastitis causes the appearance of resistant microorganisms, besides leaving residues in milk, putting at risk to human health. In this way, propolis is an alternative in the treatment of diseases because it has antimicrobial activity, mainly because of the presence of flavonoids in its composition. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial potential of propolis to Staphylococcus spp. Isolated from cases of goat mastitis and qualify the crude ethanoic extract by high performance liquid chromatography (HPLC). In this study, the minimum bactericidal concentration values of propolis extracts in ethanol, ethyl acetate and hexane showed that the best concentrations capable of promoting the highest mortality of the isolates of Staphylococcus spp. from mastitis in goats, were 6250, 3125 and 1562.5µg/mL, respectively. By the microplate adherence test, it was found that 20.78% isolates were not able to form biofilm, 14.70% were classified as moderate and 64.70% were weak and none as a strong biofilm producer. Propolis in its different diluents was able to affect the formation of biofilm and showed a pronounced marked antimicrobial activity against Staphylococcus spp. strains and may be indicated for use in in vivo studies.(AU)

O uso indiscriminado de antibióticos no tratamento de mastite caprina leva ao desenvolvimento de micro-organismos resistentes que poderão estar presentes em alimentos, colocando em risco a saúde humana. Dessa forma, a própolis surge como uma alternativa para o tratamento de doenças por possuir uma ação antimicrobiana, principalmente pela presença de flavonoides em sua composição. O objetivo desse estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano da própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite caprina e qualificar o extrato etanoico bruto por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD). Neste estudo, os valores de concentração bactericida mínima (CBM) dos extratos de própolis em álcool etílico, acetato de etila e hexano nos isolados foram de 6250, 3125 e 1562,5µg/mL, respectivamente. Pelo teste de aderência à microplacas, observou-se que 20,78% dos microorganismos, não foram capazes de formar biofilme, 14,70% foram classificados como moderados, 64,70% em fracos e nenhum como forte produtor de biofilme. A própolis em seus diferentes diluentes foi capaz de afetar a formação de biofilme e apresentou significativa atividade antimicrobiana frente a cepas de Staphylococcus spp., podendo ser indicada para utilização em estudos "in vivo".(AU)

Genotyping of Malassezia pachydermatis disclosed genetic variation in isolates from dogs in Colombia / Genotipagem de Malassezia pachydermatis revelou variação genética em isolados de cães na Colômbia

Malassezia pachydermatis is a lipophilic and lipid-dependent yeast mostly isolated from animals' skin; hence, it is regarded as a zoophilic species causing otitis externa in dogs. Aspects associated with its epidemiology and pathogenicity is a matter of interest. This study aimed to conduct a molecular characterization of 43 isolates of M. pachydermatis obtained from dogs with otitis externa. For this purpose, the 5.8S internal transcribed spacer 2 (ITS2) and D1/D2 26S rRNA regions were amplified, sequenced and analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP) with AluI, CfoI, and BstF5I endonucleases. Phylogenetic analyses revealed that these isolates grouped with the sequence types I, IV and V, previously proposed for M. pachydermatis. Interestingly, we found a new polymorphic RFLP pattern using BstF5I, these isolates were associated with the sequence types IV and V, nevertheless an association between polymorphic RFLP patterns, and fosfolipase activity or canine population data was not observed. These findings underline the genetic diversity of M. pachydermatis and provide new insights about the epidemiology of this species in the analyzed population.(AU)

Malassezia pachydermatis é uma levedura lipofílica e dependente de lipídios, principalmente da pele de animais. Sendo, por essa razão, considerada uma espécie zoofílica e causadora de otite externa em cães. Neste sentido, aspectos associados à sua epidemiologia e patogenicidade constituem um tema de interesse científico. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização molecular de 43 isolados de M. pachydermatis obtidos a partir de cães com otite externa. Para esta propósito, foram amplificadas, sequenciadas e analisadas com enzimas de restrição as regiões do gene 5.8S, do espaçador interno transcrito 2 (ITS2) e D1/D2 do 26S do rRNA pelo método RFLP, com as endonucleases AluI, CfOI e BstF5I. Análises filogenéticas revelaram que os isolados se agruparam com as sequências tipo I, IV e V de M. pachydermatis como já descrito anteriormente. De maneira interessante, se observou um novo RFLP polimórfico utilizando BstF5I. Os isolados que mostraram esse padrão foram associados com os padrões IV e V. No entanto, não foi observada associação entre padrões polimórficos de RFLP e atividade de fosfolipase ou dados da população canina. Estes resultados demonstram a diversidade genética de M. pachydermatis e fornecem novas perspectivas sobre a epidemiologia destas espécies na população analisada.(AU)

Genotyping of Malassezia pachydermatis disclosed genetic variation in isolates from dogs in Colombia / Genotipagem de Malassezia pachydermatis revelou variação genética em isolados de cães na Colômbia

Malassezia pachydermatis is a lipophilic and lipid-dependent yeast mostly isolated from animals' skin; hence, it is regarded as a zoophilic species causing otitis externa in dogs. Aspects associated with its epidemiology and pathogenicity is a matter of interest. This study aimed to conduct a molecular characterization of 43 isolates of M. pachydermatis obtained from dogs with otitis externa. For this purpose, the 5.8S internal transcribed spacer 2 (ITS2) and D1/D2 26S rRNA regions were amplified, sequenced and analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP) with AluI, CfoI, and BstF5I endonucleases. Phylogenetic analyses revealed that these isolates grouped with the sequence types I, IV and V, previously proposed for M. pachydermatis. Interestingly, we found a new polymorphic RFLP pattern using BstF5I, these isolates were associated with the sequence types IV and V, nevertheless an association between polymorphic RFLP patterns, and fosfolipase activity or canine population data was not observed. These findings underline the genetic diversity of M. pachydermatis and provide new insights about the epidemiology of this species in the analyzed population.(AU)

Malassezia pachydermatis é uma levedura lipofílica e dependente de lipídios, principalmente da pele de animais. Sendo, por essa razão, considerada uma espécie zoofílica e causadora de otite externa em cães. Neste sentido, aspectos associados à sua epidemiologia e patogenicidade constituem um tema de interesse científico. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização molecular de 43 isolados de M. pachydermatis obtidos a partir de cães com otite externa. Para esta propósito, foram amplificadas, sequenciadas e analisadas com enzimas de restrição as regiões do gene 5.8S, do espaçador interno transcrito 2 (ITS2) e D1/D2 do 26S do rRNA pelo método RFLP, com as endonucleases AluI, CfOI e BstF5I. Análises filogenéticas revelaram que os isolados se agruparam com as sequências tipo I, IV e V de M. pachydermatis como já descrito anteriormente. De maneira interessante, se observou um novo RFLP polimórfico utilizando BstF5I. Os isolados que mostraram esse padrão foram associados com os padrões IV e V. No entanto, não foi observada associação entre padrões polimórficos de RFLP e atividade de fosfolipase ou dados da população canina. Estes resultados demonstram a diversidade genética de M. pachydermatis e fornecem novas perspectivas sobre a epidemiologia destas espécies na população analisada.(AU)

Morphobiological, morphometric and ultrastructural characterization of sylvatic Trypanosoma cruzi isolates from Rio de Janeiro state, Brazil / Caracterização morfobiológica, morfométrica e ultraestrutural de isolados silvestres de Trypanosoma cruzi do estado do Rio de Janeiro, Brasil

Abstract Triatoma vitticeps is a triatomine with geographic distribution restrict to Brazil, which exhibits high prevalence of Trypanosoma cruzi natural infection. Of special epidemiologic concern, this species often invades households in the states of Rio de Janeiro, Minas Gerais and Espírito Santo. The objective of this study was to evaluate morphological and ultrastructural parameters on three T. cruzi isolates obtained from wild T. vitticeps specimens. The growth and cell differentiation of the parasite was evaluated through epimastigote and trypomastigote forms obtained in the growth curves for three distinct isolates. The maximum growth showed differences at the 20th day of the curve. Our in vitro results show a heterogeneity, regarding these features for samples cultivated under the same conditions. Morphometric analyzes based on the shape of epimastigotes and trypomastigotes corroborated such differentiation. These results highlight the need of better understanding the meaning of this diversity under an eco-epidemiological perspective.

Resumo Triatoma vitticeps é um triatomíneo com distribuição geográfica restrita ao território brasileiro, apresentando alta prevalência de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. Esta espécie é relevante sob o ponto de vista epidemiológico por invadir domicílios com frequência nos estados do Rio de Janeiro, Minas Gerais e Espírito Santo. O objetivo deste estudo foi avaliar parâmetros morfológicos e ultraestruturais, em três isolados de T. cruzi obtidos a partir de triatomíneos silvestres. O crescimento e a diferenciação celular do parasita foi avaliado através das formas epimastigotas e tripomastigotas obtidas nas curvas de crescimento para os três isolados. O crescimento máximo mostrou diferenças no 20º dia da curva. Nossos resultados in vitro mostram uma heterogeneidade, em relação a essas características para amostras cultivadas nas mesmas condições. As análises morfométricas baseadas na conformação de epimastigotas e trypomastigotes corroboraram essa diferenciação. Estes resultados ressaltam a necessidade de uma melhor compreensão do significado desta diversidade sob uma perspectiva eco-epidemiológica.

Antimicrobial activity of propolis extract fractions against Staphylococcus spp. isolated from goat mastitis

ABSTRACT: The indiscriminate use of antibiotics in the treatment of caprine mastitis causes the appearance of resistant microorganisms, besides leaving residues in milk, putting at risk to human health. In this way, propolis is an alternative in the treatment of diseases because it has antimicrobial activity, mainly because of the presence of flavonoids in its composition. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial potential of propolis to Staphylococcus spp. Isolated from cases of goat mastitis and qualify the crude ethanoic extract by high performance liquid chromatography (HPLC). In this study, the minimum bactericidal concentration values of propolis extracts in ethanol, ethyl acetate and hexane showed that the best concentrations capable of promoting the highest mortality of the isolates of Staphylococcus spp. from mastitis in goats, were 6250, 3125 and 1562.5g/mL, respectively. By the microplate adherence test, it was found that 20.78% isolates were not able to form biofilm, 14.70% were classified as moderate and 64.70% were weak and none as a strong biofilm producer. Propolis in its different diluents was able to affect the formation of biofilm and showed a pronounced marked antimicrobial activity against Staphylococcus spp. strains and may be indicated for use in in vivo studies.

RESUMO: O uso indiscriminado de antibióticos no tratamento de mastite caprina leva ao desenvolvimento de micro-organismos resistentes que poderão estar presentes em alimentos, colocando em risco a saúde humana. Dessa forma, a própolis surge como uma alternativa para o tratamento de doenças por possuir uma ação antimicrobiana, principalmente pela presença de flavonoides em sua composição. O objetivo desse estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano da própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite caprina e qualificar o extrato etanoico bruto por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD). Neste estudo, os valores de concentração bactericida mínima (CBM) dos extratos de própolis em álcool etílico, acetato de etila e hexano nos isolados foram de 6250, 3125 e 1562,5g/mL, respectivamente. Pelo teste de aderência à microplacas, observou-se que 20,78% dos microorganismos, não foram capazes de formar biofilme, 14,70% foram classificados como moderados, 64,70% em fracos e nenhum como forte produtor de biofilme. A própolis em seus diferentes diluentes foi capaz de afetar a formação de biofilme e apresentou significativa atividade antimicrobiana frente a cepas de Staphylococcus spp., podendo ser indicada para utilização em estudos in vivo.

Genotyping of Malassezia pachydermatis disclosed genetic variation in isolates from dogs in Colombia

ABSTRACT: Malassezia pachydermatis is a lipophilic and lipid-dependent yeast mostly isolated from animals skin; hence, it is regarded as a zoophilic species causing otitis externa in dogs. Aspects associated with its epidemiology and pathogenicity is a matter of interest. This study aimed to conduct a molecular characterization of 43 isolates of M. pachydermatis obtained from dogs with otitis externa. For this purpose, the 5.8S internal transcribed spacer 2 (ITS2) and D1/D2 26S rRNA regions were amplified, sequenced and analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP) with AluI, CfoI, and BstF5I endonucleases. Phylogenetic analyses revealed that these isolates grouped with the sequence types I, IV and V, previously proposed for M. pachydermatis. Interestingly, we found a new polymorphic RFLP pattern using BstF5I, these isolates were associated with the sequence types IV and V, nevertheless an association between polymorphic RFLP patterns, and fosfolipase activity or canine population data was not observed. These findings underline the genetic diversity of M. pachydermatis and provide new insights about the epidemiology of this species in the analyzed population.

RESUMO: Malassezia pachydermatis é uma levedura lipofílica e dependente de lipídios, principalmente da pele de animais. Sendo, por essa razão, considerada uma espécie zoofílica e causadora de otite externa em cães. Neste sentido, aspectos associados à sua epidemiologia e patogenicidade constituem um tema de interesse científico. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização molecular de 43 isolados de M. pachydermatis obtidos a partir de cães com otite externa. Para esta propósito, foram amplificadas, sequenciadas e analisadas com enzimas de restrição as regiões do gene 5.8S, do espaçador interno transcrito 2 (ITS2) e D1/D2 do 26S do rRNA pelo método RFLP, com as endonucleases AluI, CfOI e BstF5I. Análises filogenéticas revelaram que os isolados se agruparam com as sequências tipo I, IV e V de M. pachydermatis como já descrito anteriormente. De maneira interessante, se observou um novo RFLP polimórfico utilizando BstF5I. Os isolados que mostraram esse padrão foram associados com os padrões IV e V. No entanto, não foi observada associação entre padrões polimórficos de RFLP e atividade de fosfolipase ou dados da população canina. Estes resultados demonstram a diversidade genética de M. pachydermatis e fornecem novas perspectivas sobre a epidemiologia destas espécies na população analisada.

Morphobiological, morphometric and ultrastructural characterization of sylvatic Trypanosoma cruzi isolates from Rio de Janeiro state, Brazil / Caracterização morfobiológica, morfométrica e ultraestrutural de isolados silvestres de Trypanosoma cruzi do estado do Rio de Janeiro, Brasil

Triatoma vitticeps is a triatomine with geographic distribution restrict to Brazil, which exhibits high prevalence of Trypanosoma cruzi natural infection. Of special epidemiologic concern, this species often invades households in the states of Rio de Janeiro, Minas Gerais and Espírito Santo. The objective of this study was to evaluate morphological and ultrastructural parameters on three T. cruzi isolates obtained from wild T. vitticeps specimens. The growth and cell differentiation of the parasite was evaluated through epimastigote and trypomastigote forms obtained in the growth curves for three distinct isolates. The maximum growth showed differences at the 20th day of the curve. Our in vitro results show a heterogeneity, regarding these features for samples cultivated under the same conditions. Morphometric analyzes based on the shape of epimastigotes and trypomastigotes corroborated such differentiation. These results highlight the need of better understanding the meaning of this diversity under an eco-epidemiological perspective.(AU)

Triatoma vitticeps é um triatomíneo com distribuição geográfica restrita ao território brasileiro, apresentando alta prevalência de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. Esta espécie é relevante sob o ponto de vista epidemiológico por invadir domicílios com frequência nos estados do Rio de Janeiro, Minas Gerais e Espírito Santo. O objetivo deste estudo foi avaliar parâmetros morfológicos e ultraestruturais, em três isolados de T. cruzi obtidos a partir de triatomíneos silvestres. O crescimento e a diferenciação celular do parasita foi avaliado através das formas epimastigotas e tripomastigotas obtidas nas curvas de crescimento para os três isolados. O crescimento máximo mostrou diferenças no 20º dia da curva. Nossos resultados in vitro mostram uma heterogeneidade, em relação a essas características para amostras cultivadas nas mesmas condições. As análises morfométricas baseadas na conformação de epimastigotas e trypomastigotes corroboraram essa diferenciação. Estes resultados ressaltam a necessidade de uma melhor compreensão do significado desta diversidade sob uma perspectiva eco-epidemiológica.(AU)

Susceptibilidade antibiótica de isolados bacterianos em diferentes tipos de ceratites ulcerativas de cães na cidade de Cuiabá / Antibiotic susceptibility of bacteria isolated from different types of ulcerative keratitis of dogs in the city of Cuiabá, Brazil

Objetivou-se identificar microrganismos isolados de diferentes tipos de ceratite ulcerativa em cães, juntamente com a sua susceptibilidade a antimicrobianos. O resultado do tratamento médico e cirúrgico também foi correlacionado com o tipo de isolado. Amostras para microbiologia foram obtidas com auxílio de swab estéril em 104 olhos de 72 pacientes sem histórico prévio de tratamento com antibióticos tópicos, atendidos no período de maio de 2012 a março de 2015. Os antibióticos testados foram: neomicina, gentamicina, tobramicina, cloranfenicol, polimixina B, ciprofloxacino, ofloxacino e moxifloxacina. No total, 131 bactérias foram isoladas de 96/104 olhos estudados, sendo o gênero Staphylococcus (48,09%) predominante, seguido por Pseudomonas aeruginosa (16,01%). O Shih Tzu foi a raça mais prevalente (33,33%) e o número de isolados gram-negativos foi significativamente maior nessa raça, comparativamente aos Pinschers (p=0,003), aos Filas, aos Poodles e aos sem raça definida (p=0,046). As bactérias isoladas neste estudo apresentaram maior susceptibilidade ao ofloxacino (84,55%), que foi significativamente mais eficaz em relação a neomicina e a polimixina B (p<0,0001), ao cloranfenicol (p=0,0001), a tobramicina (p=0,0007), a gentamicina (p=0,0021) e as outras fluorquinolonas, ciprofloxacino (p=0,0004) e moxifloxacino (p<0,0001). Os organismos gram-positivos foram isolados de um número significativamente maior de olhos que apresentavam ceratite ulcerativa não complicada, comparativamente àqueles com olhos acometidos por ceratite ulcerativa complicada (p=0,011). Igualmente, o número de bactérias gram-positivas foi maior que o de gram-negativas, tanto nos casos que receberam tratamento médico, como nos que foram operados, sem significativa estatística (p=0,745). Na presente pesquisa, Staphylococcus sp. foi a bactéria mais encontrada nas ceratites ulcerativas não complicadas. Já nos olhos com ceratites complicadas, embora a Pseudomonas aeruginosa tenha sido a bactéria mais predominante, o tratamento clínico foi suficiente para cura da afecção corneal na maior parte dos casos. O ofloxacino e a gentamicina foram os agentes mais eficazes contra a maioria dos isolados, com exceção do Streptococcus sp., onde o cloranfenicol se mostrou o mais eficaz. Ceratites ulcerativas sem complicações que apresentem culturas negativas podem evoluir para ceratites ulcerativas complicadas, salientando a necessidade de tratamento anti-colagenolítico em todos os casos.

The purpose of the present study was to analyze antibiotic susceptibility of bacteria associated with different types of ulcerative keratitis in dogs. The outcome of medical or surgical treatment was also correlated with the type of isolate. Samples for microbiology were obtained by means of sterile swab from 104 eyes of 72 canine patients with ulcerative keratitis without previous history of antibiotic treatment, seen from May 2012 to March 2015. Only patients with no previous treatment with antibiotics were included in the study. Bacterial isolates were identified and the antibiotic susceptibility was tested to neomycin, gentamicin, tobramycin, chloramphenicol, polymyxin B, ciprofloxacin, ofloxacin and moxifloxacin. In total, 131 species of bacteria were isolated from 96/104 eyes, and Staphylococcus sp. predominated (48.09%), followed by Pseudomonas aeruginosa (16.01%). Shih Tzus were over represented (33.33%) and the number of gram-negative isolates were significantly higher in this breed, in comparison to Pinchers (P=0.003), Filas, Poodles, and other mixed-breeds (P=0.046). All species isolated in this study were more sensitive to ofloxacin (84.55%), that was significantly most efficient than neomycin and polymyxin B (P<0.0001), chloramphenicol (P=0.0001), tobramycin (P=0.0007), gentamicin (P=0.0021) and the other fluoroquinolones, ciprofloxacin (P=0.0004) and moxifloxacin (P<0.0001). Gram-positive organisms were isolated in a significant larger number of eyes with uncomplicated ulcerative keratitis, in comparison to those eyes with complicated ulcerative keratitis (P=0.011). Likewise, gram-positive were isolated in a larger number than gram-negatives microorganisms in cases that received either medically or surgical treatment, without statistical significance (P=0.745). In the present research, Staphylococcus sp. was the bacteria most commonly isolated in the eyes with uncomplicated ulcerative keratitis. Although Pseudomonas aeruginosa was the most common isolate in the eyes with complicated ulcerative keratitis, the majority of cases managed clinically had a successful outcome. Ofloxacin and gentamicin were found to be effective against the majority of isolates, with the exception of Streptococcus. sp, in which chloramphenicol was the most effective antibiotic. Uncomplicated ulcerative keratitis presenting negative culture may evolve to complicated ulcerative keratitis, warring the necessity of anti-collagenolytic treatment in all cases.(AU)

Susceptibilidade antibiótica de isolados bacterianos em diferentes tipos de ceratites ulcerativas de cães na cidade de Cuiabá / Antibiotic susceptibility of bacteria isolated from different types of ulcerative keratitis of dogs in the city of Cuiabá, Brazil

Objetivou-se identificar microrganismos isolados de diferentes tipos de ceratite ulcerativa em cães, juntamente com a sua susceptibilidade a antimicrobianos. O resultado do tratamento médico e cirúrgico também foi correlacionado com o tipo de isolado. Amostras para microbiologia foram obtidas com auxílio de swab estéril em 104 olhos de 72 pacientes sem histórico prévio de tratamento com antibióticos tópicos, atendidos no período de maio de 2012 a março de 2015. Os antibióticos testados foram: neomicina, gentamicina, tobramicina, cloranfenicol, polimixina B, ciprofloxacino, ofloxacino e moxifloxacina. No total, 131 bactérias foram isoladas de 96/104 olhos estudados, sendo o gênero Staphylococcus (48,09%) predominante, seguido por Pseudomonas aeruginosa (16,01%). O Shih Tzu foi a raça mais prevalente (33,33%) e o número de isolados gram-negativos foi significativamente maior nessa raça, comparativamente aos Pinschers (p=0,003), aos Filas, aos Poodles e aos sem raça definida (p=0,046). As bactérias isoladas neste estudo apresentaram maior susceptibilidade ao ofloxacino (84,55%), que foi significativamente mais eficaz em relação a neomicina e a polimixina B (p<0,0001), ao cloranfenicol (p=0,0001), a tobramicina (p=0,0007), a gentamicina (p=0,0021) e as outras fluorquinolonas, ciprofloxacino (p=0,0004) e moxifloxacino (p<0,0001). Os organismos gram-positivos foram isolados de um número significativamente maior de olhos que apresentavam ceratite ulcerativa não complicada, comparativamente àqueles com olhos acometidos por ceratite ulcerativa complicada (p=0,011). Igualmente, o número de bactérias gram-positivas foi maior que o de gram-negativas, tanto nos casos que receberam tratamento médico, como nos que foram operados, sem significativa estatística (p=0,745). Na presente pesquisa, Staphylococcus sp. foi a bactéria mais encontrada nas ceratites ulcerativas não complicadas. Já nos olhos com...(AU)

The purpose of the present study was to analyze antibiotic susceptibility of bacteria associated with different types of ulcerative keratitis in dogs. The outcome of medical or surgical treatment was also correlated with the type of isolate. Samples for microbiology were obtained by means of sterile swab from 104 eyes of 72 canine patients with ulcerative keratitis without previous history of antibiotic treatment, seen from May 2012 to March 2015. Only patients with no previous treatment with antibiotics were included in the study. Bacterial isolates were identified and the antibiotic susceptibility was tested to neomycin, gentamicin, tobramycin, chloramphenicol, polymyxin B, ciprofloxacin, ofloxacin and moxifloxacin. In total, 131 species of bacteria were isolated from 96/104 eyes, and Staphylococcus sp. predominated (48.09%), followed by Pseudomonas aeruginosa (16.01%). Shih Tzus were over represented (33.33%) and the number of gram-negative isolates were significantly higher in this breed, in comparison to Pinchers (P=0.003), Filas, Poodles, and other mixed-breeds (P=0.046). All species isolated in this study were more sensitive to ofloxacin (84.55%), that was significantly most efficient than neomycin and polymyxin B (P<0.0001), chloramphenicol (P=0.0001), tobramycin (P=0.0007), gentamicin (P=0.0021) and the other fluoroquinolones, ciprofloxacin (P=0.0004) and moxifloxacin (P<0.0001). Gram-positive organisms were isolated in a significant larger number of eyes with uncomplicated ulcerative keratitis, in comparison to those eyes with complicated ulcerative keratitis (P=0.011). Likewise, gram-positive were isolated in a larger number than gram-negatives microorganisms in cases that received either medically or surgical treatment, without statistical significance (P=0.745). In the present research, Staphylococcus sp. was the bacteria...(AU)

Morphobiological, morphometric and ultrastructural characterization of sylvatic Trypanosoma cruzi isolates from Rio de Janeiro state, Brazil

Abstract Triatoma vitticeps is a triatomine with geographic distribution restrict to Brazil, which exhibits high prevalence of Trypanosoma cruzi natural infection. Of special epidemiologic concern, this species often invades households in the states of Rio de Janeiro, Minas Gerais and Espírito Santo. The objective of this study was to evaluate morphological and ultrastructural parameters on three T. cruzi isolates obtained from wild T. vitticeps specimens. The growth and cell differentiation of the parasite was evaluated through epimastigote and trypomastigote forms obtained in the growth curves for three distinct isolates. The maximum growth showed differences at the 20th day of the curve. Our in vitro results show a heterogeneity, regarding these features for samples cultivated under the same conditions. Morphometric analyzes based on the shape of epimastigotes and trypomastigotes corroborated such differentiation. These results highlight the need of better understanding the meaning of this diversity under an eco-epidemiological perspective.

Resumo Triatoma vitticeps é um triatomíneo com distribuição geográfica restrita ao território brasileiro, apresentando alta prevalência de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. Esta espécie é relevante sob o ponto de vista epidemiológico por invadir domicílios com frequência nos estados do Rio de Janeiro, Minas Gerais e Espírito Santo. O objetivo deste estudo foi avaliar parâmetros morfológicos e ultraestruturais, em três isolados de T. cruzi obtidos a partir de triatomíneos silvestres. O crescimento e a diferenciação celular do parasita foi avaliado através das formas epimastigotas e tripomastigotas obtidas nas curvas de crescimento para os três isolados. O crescimento máximo mostrou diferenças no 20º dia da curva. Nossos resultados in vitro mostram uma heterogeneidade, em relação a essas características para amostras cultivadas nas mesmas condições. As análises morfométricas baseadas na conformação de epimastigotas e trypomastigotes corroboraram essa diferenciação. Estes resultados ressaltam a necessidade de uma melhor compreensão do significado desta diversidade sob uma perspectiva eco-epidemiológica.

Susceptibilidade antibiótica de isolados bacterianos em diferentes tipos de ceratites ulcerativas de cães na cidade de Cuiabá

ABSTRAT: The purpose of the present study was to analyze antibiotic susceptibility of bacteria associated with different types of ulcerative keratitis in dogs. The outcome of medical or surgical treatment was also correlated with the type of isolate. Samples for microbiology were obtained by means of sterile swab from 104 eyes of 72 canine patients with ulcerative keratitis without previous history of antibiotic treatment, seen from May 2012 to March 2015. Only patients with no previous treatment with antibiotics were included in the study. Bacterial isolates were identified and the antibiotic susceptibility was tested to neomycin, gentamicin, tobramycin, chloramphenicol, polymyxin B, ciprofloxacin, ofloxacin and moxifloxacin. In total, 131 species of bacteria were isolated from 96/104 eyes, and Staphylococcus sp. predominated (48.09%), followed by Pseudomonas aeruginosa (16.01%). Shih Tzus were over represented (33.33%) and the number of gram-negative isolates were significantly higher in this breed, in comparison to Pinchers (P=0.003), Filas, Poodles, and other mixed-breeds (P=0.046). All species isolated in this study were more sensitive to ofloxacin (84.55%), that was significantly most efficient than neomycin and polymyxin B (P 0.0001), chloramphenicol (P=0.0001), tobramycin (P=0.0007), gentamicin (P=0.0021) and the other fluoroquinolones, ciprofloxacin (P=0.0004) and moxifloxacin (P 0.0001). Gram-positive organisms were isolated in a significant larger number of eyes with uncomplicated ulcerative keratitis, in comparison to those eyes with complicated ulcerative keratitis (P=0.011). Likewise, gram-positive were isolated in a larger number than gram-negatives microorganisms in cases that received either medically or surgical treatment, without statistical significance (P=0.745). In the present research, Staphylococcus sp. was the bacteria most commonly isolated in the eyes with uncomplicated ulcerative keratitis. Although Pseudomonas aeruginosa was the most common isolate in the eyes with complicated ulcerative keratitis, the majority of cases managed clinically had a successful outcome. Ofloxacin and gentamicin were found to be effective against the majority of isolates, with the exception of Streptococcus. sp, in which chloramphenicol was the most effective antibiotic. Uncomplicated ulcerative keratitis presenting negative culture may evolve to complicated ulcerative keratitis, warring the necessity of anti-collagenolytic treatment in all cases.

RESUMO: Objetivou-se identificar microrganismos isolados de diferentes tipos de ceratite ulcerativa em cães, juntamente com a sua susceptibilidade a antimicrobianos. O resultado do tratamento médico e cirúrgico também foi correlacionado com o tipo de isolado. Amostras para microbiologia foram obtidas com auxílio de swab estéril em 104 olhos de 72 pacientes sem histórico prévio de tratamento com antibióticos tópicos, atendidos no período de maio de 2012 a março de 2015. Os antibióticos testados foram: neomicina, gentamicina, tobramicina, cloranfenicol, polimixina B, ciprofloxacino, ofloxacino e moxifloxacina. No total, 131 bactérias foram isoladas de 96/104 olhos estudados, sendo o gênero Staphylococcus (48,09%) predominante, seguido por Pseudomonas aeruginosa (16,01%). O Shih Tzu foi a raça mais prevalente (33,33%) e o número de isolados gram-negativos foi significativamente maior nessa raça, comparativamente aos Pinschers (p=0,003), aos Filas, aos Poodles e aos sem raça definida (p=0,046). As bactérias isoladas neste estudo apresentaram maior susceptibilidade ao ofloxacino (84,55%), que foi significativamente mais eficaz em relação a neomicina e a polimixina B (p 0,0001), ao cloranfenicol (p=0,0001), a tobramicina (p=0,0007), a gentamicina (p=0,0021) e as outras fluorquinolonas, ciprofloxacino (p=0,0004) e moxifloxacino (p 0,0001). Os organismos gram-positivos foram isolados de um número significativamente maior de olhos que apresentavam ceratite ulcerativa não complicada, comparativamente àqueles com olhos acometidos por ceratite ulcerativa complicada (p=0,011). Igualmente, o número de bactérias gram-positivas foi maior que o de gram-negativas, tanto nos casos que receberam tratamento médico, como nos que foram operados, sem significativa estatística (p=0,745). Na presente pesquisa, Staphylococcus sp. foi a bactéria mais encontrada nas ceratites ulcerativas não complicadas. Já nos olhos com ceratites complicadas, embora a Pseudomonas aeruginosa tenha sido a bactéria mais predominante, o tratamento clínico foi suficiente para cura da afecção corneal na maior parte dos casos. O ofloxacino e a gentamicina foram os agentes mais eficazes contra a maioria dos isolados, com exceção do Streptococcus sp., onde o cloranfenicol se mostrou o mais eficaz. Ceratites ulcerativas sem complicações que apresentem culturas negativas podem evoluir para ceratites ulcerativas complicadas, salientando a necessidade de tratamento anti-colagenolítico em todos os casos.

Antimicrobial susceptibility patterns of Brazilian Haemophilus parasuis field isolates / Perfil de susceptibilidade antimicrobiana de isolados clínicos brasileiros de Haemophilus parasuis

Haemophilus parasuis is the etiological agent of Glässer's disease (GD), an ubiquitous infection of swine characterized by systemic fibrinous polyserositis, polyarthritis and meningitis. Intensive use of antimicrobial agents in swine husbandries during the last years triggered the development of antibiotic resistances in bacterial pathogens. Thus, regular susceptibility testing is crucial to ensure efficacy of different antimicrobial agents to this porcine pathogen. In this study, 50 clinical isolates from South Brazilian pig herds were characterized and analyzed for their susceptibility to commonly used antibiotic. The identification and typing of clinical isolates was carried out by a modified indirect hemagglutination assay combined with a multiplex PCR. The susceptibility of each isolate was analyzed by broth microdilution method against a panel of 21 antimicrobial compounds. We found that field isolates are highly resistance to gentamycin, bacitracin, lincomycin and tiamulin, but sensitive to ampicillin, clindamycin, neomycin, penicillin, danofloxacin and enrofloxacin. Furthermore, an individual susceptibility analysis indicated that enrofloxacin is effective to treat clinical isolates with the exception of those classified as serovar 1. The results presented here firstly demonstrate the susceptibility of Brazilian clinical isolates of H. parasuis to antimicrobials widely used by swine veterinary practitioners and strengthen the need to perform susceptibility test prior to antibiotic therapy during GD outbreaks. In addition, because only six antimicrobial drugs (28.6%) were found effective against field isolates, a continuous surveillance of the susceptibility profile should be of major concern to the swine industry.(AU)

Haemophilus parasuis é o agente etiológico da doença de Glässer (GD), um processo infeccioso que acomete suínos e que se caracteriza por poliserosites fibrinosas sistêmicas, poliartrites e meningites. O uso intensivo de agentes antimicrobianos na produção de suínos, durante os últimos anos, tem disparado a seleção de cepas bacterianas resistentes a antibióticos. Desta maneira, a avaliação rotineira de susceptibilidade torna-se crucial para assegurar a correta seleção de um antimicrobiano eficaz contra este patógeno. Neste estudo, analisou-se a susceptibilidade antimicrobiana de 50 isolados clínicos de H. parasuis procedentes de granjas localizadas na região sul do Brasil. A identificação e tipificação dos isolados clínicos foi realizada através de uma PCR multiplex combinada com o teste de hemaglutinação indireta modificada. A susceptibilidade de cada isolado foi analisada pelo método de microdiluição em caldo utilizando-se um painel composto por 21 agentes antimicrobianos. Os resultados deste estudo indicam que as cepas clínicas de H. parasuis apresentam alta resistência à gentamicina, bacitracina, lincomicina e tiamulina, no entanto, são susceptíveis a ampicilina, clindamicina, neomicina, penicilina, enrofloxacina e danofloxacina. A análise de susceptibilidade realizada dentro de cada grupo de cepas de um mesmo sorovar indicou que a enrofloxacina é o antibiótico mais efetivo para tratar todos isolados clínicos com exceção daqueles pertencentes ao sorovar 1. Em termos gerais, neste trabalho, demonstra-se o perfil de susceptibilidade de isolados clínicos de H. parasuis aos antimicrobianos comumente utilizados pelos médicos veterinários especialistas em suínos, e reforça-se a necessidade da realização de testes de susceptibilidade antes do início da terapia com antibióticos durante surtos de DG. Além disso, como somente seis antimicrobianos (28.6%) foram efetivos contra os isolados clínicos, uma vigilância contínua do perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos deve ser de grande preocupação para a indústria de suínos.(AU)

Antimicrobial susceptibility patterns of Brazilian Haemophilus parasuis field isolates / Perfil de susceptibilidade antimicrobiana de isolados clínicos brasileiros de Haemophilus parasuis

Haemophilus parasuis is the etiological agent of Glãsser's disease (GD), an ubiquitous infection of swine characterized by systemic fibrinous polyserositis, polyarthritis and meningitis. Intensive use of antimicrobial agents in swine husbandries during the last years triggered the development of antibiotic resistances in bacterial pathogens. Thus, regular susceptibility testing is crucial to ensure efficacy of different antimicrobial agents to this porcine pathogen. In this study, 50 clinical isolates from South Brazilian pig herds were characterized and analyzed for their susceptibility to commonly used antibiotic. The identification and typing of clinical isolates was carried out by a modified indirect hemagglutination assay combined with a multiplex PCR. The susceptibility of each isolate was analyzed by broth microdilution method against a panel of 21 antimicrobial compounds. We found that field isolates are highly resistance to gentamycin, bacitracin, lincomycin and tiamulin, but sensitive to ampicillin, clindamycin, neomycin, penicillin, danofloxacin and enrofloxacin. Furthermore, an individual susceptibility analysis indicated that enrofloxacin is effective to treat clinical isolates with the exception of those classified as serovar 1. The results presented here firstly demonstrate the susceptibility of Brazilian clinical isolates of H. parasuis to antimicrobials widely used by swine veterinary practitioners and strengthen the need to perform susceptibility test prior to antibiotic therapy during GD outbreaks. In addition, because only six antimicrobial drugs (28.6%) were found effective against field isolates, a continuous surveillance of the susceptibility profile should be of major concern to the swine industry.(AU)

Haemophilus parasuis é o agente etiológico da doença de Glãsser (GD), um processo infeccioso que acomete suínos e que se caracteriza por poliserosites fibrinosas sistêmicas, poliartrites e meningites. O uso intensivo de agentes antimicrobianos na produção de suínos, durante os últimos anos, tem disparado a seleção de cepas bacterianas resistentes a antibióticos. Desta maneira, a avaliação rotineira de susceptibilidade torna-se crucial para assegurar a correta seleção de um antimicrobiano eficaz contra este patógeno. Neste estudo, analisou-se a susceptibilidade antimicrobiana de 50 isolados clínicos de H. parasuis procedentes de granjas localizadas na região sul do Brasil. A identificação e tipificação dos isolados clínicos foi realizada através de uma PCR multiplex combinada com o teste de hemaglutinação indireta modificada. A susceptibilidade de cada isolado foi analisada pelo método de microdiluição em caldo utilizando-se um painel composto por 21 agentes antimicrobianos. Os resultados deste estudo indicam que as cepas clínicas de H. parasuis apresentam alta resistência à gentamicina, bacitracina, lincomicina e tiamulina, no entanto, são susceptíveis a ampicilina, clindamicina, neomicina, penicilina, enrofloxacina e danofloxacina. A análise de susceptibilidade realizada dentro de cada grupo de cepas de um mesmo sorovar indicou que a enrofloxacina é o antibiótico mais efetivo para tratar todos isolados clínicos com exceção daqueles pertencentes ao sorovar 1. Em termos gerais, neste trabalho, demonstra-se o perfil de susceptibilidade de isolados clínicos de H. parasuis aos antimicrobianos comumente utilizados pelos médicos veterinários especialistas em suínos, e reforça-se a necessidade da realização de testes de susceptibilidade antes do início da terapia com antibióticos durante surtos de DG. Além disso, como somente seis antimicrobianos (28.6%) foram efetivos contra os isolados clínicos, uma vigilância contínua do perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos deve ser de grande preocupação para a indústria de suínos.(AU)

Reaction of common bean lines derived from recurrent selection for white mold resistance and aggressiveness of Sclerotinia sclerotirum isolates / Reação de linhagens de feijão comum derivadas de seleção recorrente para resistência ao mofo branco e agressividade de isolados de Sclerotinia sclerotiorum

The objectives of this study were to verify the resistance of common bean lines derived from recurrent selection for white mold resistance and to identify those more stable to different isolates; to compare the aggressiveness of different Sclerotinia sclerotiorum isolates; and to verify isolates x lines interaction. Fifteen common bean lines were evaluated, twelve derived from recurrent selection for white mold resistance, one non-adapted source of resistance (Cornell 605), one moderately resistant and adapted (VC-16) and one susceptible to white mold (Corujinha). Ten isolates were used to inoculate the common bean lines through the straw test. A total of ten experiments were performed, one for each isolate. The randomized complete block design with three replications was used in each experiment. Each plot had five plants inoculated in two main branches, therefore the plot data was the average of the ten evaluations through a scale of nine grades. Diallel analysis were used to estimate the general reaction capacity (lines) and general aggressiveness capacity (isolates) to measure the resistance to white mold and the aggressiveness of the isolates, respectively. The GGE biplot analysis was used to group the common bean lines based on their resistance alleles and identify those more instable to the isolates. The resistance of the lines P4 and P10 was similar to Cornell 605, and they had stable reaction to different isolates and "Carioca" grain type. The lines of the advanced cycles of recurrent selection accumulated more favorable alleles than those of the first cycles, confirming the efficiency of the recurrent selection to increase white mold resistance in common bean. In addition, it was identified more aggressive isolates, UFLA 109 and UFLA 116, and a small magnitude of isolates x lines interaction, indicating a predominance of the horizontal resistance of the lines.

Os objetivos deste estudo foram verificar a resistência de linhagens de feijoeiro derivadas de diferentes ciclos de seleção recorrente para resistência ao mofo branco e identificar aquelas mais estáveis quando inoculadas com diferentes isolados; comparar a agressividade de diferentes isolados de Sclerotinia sclerotiorum e verificar se há interação isolados x linhagens. Quinze linhagens de feijoeiro comum foram avaliadas, doze derivadas de seleção recorrente para mofo branco, uma fonte de resistência não adaptada (Cornell 605), uma moderadamente resistente e adaptada (VC-16) e uma suscetível ao mofo branco (Corujinha). Dez isolados foram utilizados para inocular as linhagens de feijoeiro através do straw test. Foram realizados dez experimentos, um para cada isolado. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com três repetições. Em cada parcela, cinco plantas foram inoculadas em dois ramos principais, portanto, os dados da parcela foram a média de dez avaliações utilizando uma escala de nove notas. A análise dialélica foi utilizada para estimar a capacidade geral de reação (linhagens) e capacidade geral de agressividade (isolados) para medir, respectivamente, a resistência das linhagens e a agressividade dos isolados. A análise GGE biplot foi utilizada para agrupar as linhagens baseado em seus alelos de resistência e identificar as mais estáveis aos isolados. A resistência das linhagens P4 e P10 foi semelhante à Cornell 605, com reação estável e grãos tipo "Carioca". Como esperado, as linhagens dos ciclos mais avançados de seleção recorrente acumularam mais alelos favoráveis que aquelas dos primeiros ciclos confirmando a eficiência da seleção. Além disso, foram identificados isolados mais agressivos, UFLA109 e UFLA 116 e interação isolados x linhagens de pequena magnitude, indicando um predomínio da resistência horizontal.