RESUMEN
In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.
No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.
Asunto(s)
Técnicas In Vitro , Candida albicans , Fluconazol , Candida parapsilosis , AntifúngicosRESUMEN
Abstract In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.
Resumo No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.
RESUMEN
Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.(AU)
A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.(AU)
Asunto(s)
Humanos , Tuberculosis/diagnóstico , Tuberculosis Ganglionar/diagnóstico , Tuberculosis Ganglionar/microbiología , Técnicas y Procedimientos DiagnósticosRESUMEN
Abstract Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.
Resumo A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.
Asunto(s)
Humanos , Tuberculosis Ganglionar/diagnóstico , Tuberculosis Resistente a Múltiples Medicamentos , Mycobacterium tuberculosis , Rifampin/uso terapéutico , Rifampin/farmacologíaRESUMEN
Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.
A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.
Asunto(s)
Humanos , Tuberculosis Ganglionar/diagnóstico , Tuberculosis Ganglionar/microbiología , Tuberculosis/diagnóstico , Técnicas y Procedimientos DiagnósticosRESUMEN
Abstract Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.
Resumo A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.
RESUMEN
Abstract Background Smoking dependence is a chronic disease and a public health problem. The neurobiology of nicotine addiction can explain smoking behavior. This system has genetic variability that has been associated with vulnerability to dependence. Genetic variability in the neurobiology of smoking can help to understand why individuals exposed to drugs may or may not become addicted. Objective This study aims to address genetic variability in the neurobiology of smoking addiction with a focus on polymorphic genes related to the nicotinic response and the dopaminergic reward pathway. Method This work involved a search of the main scientific research on genetic variability in the neurobiology of smoking and its effects on smoking behavior. One hundred and five studies were selected, most of which highlighted polymorphisms in the genes of nicotinic receptors, dopamine receptors, and nicotine metabolism. Results The majority of studies have focused on genes related to the activation of the dopaminergic reward system by nicotine. Combinations between different polymorphisms were also highlighted, showing that interactions can determine a genetic profile of predisposition to smoking addiction. Additionally, gender and ethnicity were identified as relevant factors. Conclusion Knowledge of the genetic bases involved in the individual response to smoking can enable a better understanding of inter-individual differences in smoking behavior, and contribute to improving the treatment of addiction.
Resumo Introdução A dependência nicotínica é uma doença crônica e um problema de saúde pública. O comportamento tabágico pode ser explicado pela neurobiologia da adição, cujas variações genéticas têm sido associadas à dependência. A variabilidade genética na neurobiologia do tabagismo pode ajudar a entender por que indivíduos expostos a drogas podem ou não se tornar viciados. Objetivo Este estudo tem como objetivo abordar a variabilidade genética na neurobiologia do tabagismo com foco em genes polimórficos relacionados à resposta nicotínica e à via de recompensa dopaminérgica. Método Uma pesquisa foi realizada nas principais bases de dados científicos sobre a variabilidade genética na neurobiologia do tabagismo e seus efeitos no comportamento do tabagismo. 105 estudos foram selecionados, em sua maioria destacando polimorfismos nos genes de receptores nicotínicos, receptores de dopamina e de metabolismo da nicotina. Resultados A maioria dos estudos concentrou-se em genes relacionados à ativação do sistema de recompensa dopaminérgico pela nicotina. Determinadas combinações entre genótipos de diferentes polimorfismos também se destacaram, mostrando que interações gênicas podem determinar um perfil genético de predisposição ao tabagismo. Além disso, gênero e etnia foram identificados como fatores relevantes. Conclusão O conhecimento das bases genéticas envolvidas na resposta individual ao tabagismo pode permitir uma melhor compreensão das diferenças interindividuais no comportamento tabágico e contribuir para melhoria dos tratamentos disponíveis para a dependência.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Tabaquismo , Variación Genética , Conducta , Predisposición Genética a la Enfermedad , Nicotina , Polimorfismo Genético , Receptores Dopaminérgicos , Receptores Nicotínicos , Identidad de GéneroRESUMEN
Frequent application of glyphosate for consecutive years has enhanced the selection pressure on sourgrass (Digitaria insularis) populations, which resulted in the development of glyphosate-resistant biotypes. Therefore, this work was developed with the objective of monitoring sourgrass resistance to glyphosate, develop a baseline of sourgrass susceptibility to this molecule and, consequently, identify the discriminatory dose between resistant and susceptible populations. This work was divided into three steps. The first step consisted of identifying and sorting sourgrass resistant and susceptible biotypes among 30 samples. In the second step, glyphosate baseline was elaborated considering exclusively the glyphosate-susceptible biotypes, which allowed the definition of a discriminatory dose. At the end, the third step, monitoring of glyphosate-resistant biotypes was achieved, considering five growing seasons (2016 2020) and 809 samples of sourgrass populations, collected throughout 12 states of Brazil. Glyphosate baseline was elaborated to sourgrass and ideal discriminatory rate was identified as 960 g ha-1.Glyphosate-resistant populations of sourgrass were found in all soybean growing regions sampled. Among 809 populations, 25.96% were considered resistant to glyphosate. The states with the highest frequency of glyphosate-resistant populations were Rio Grande do Sul, Mato Grosso do Sul, Bahia, Mato Grosso and Paraná.
Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de monitorar a resistência de capim-amargoso ao herbicida glyphosate desenvolver uma baseline de suscetibilidade da espécie e, por consequência, identificar a dose discriminatória de glifosato entre populações resistentes e suscetíveis de capim-amargoso. Todo o trabalho foi dividido em três fases. A primeira fase consistiu da análise de 30 amostras de capim-amargoso, identificando-as e classificando-as em resistentes ou suscetíveis. Na segunda fase, foi elaborada uma baseline para suscetibilidade do capim-amargoso ao herbicida glyphosate, o que permitiu a definição de uma dose discriminatória. Ao final, na terceira fase, obteve-se o monitoramento dos biótipos de capim-amargoso quanto à resistência, considerando-se cinco safras (2016 2020) e 809 amostras de capim-amargoso, oriundas de 12 estados brasileiros. Assim sendo, a baseline de suscetibilidade de capim-amargoso ao glyphosate foi estimada, cuja dose discriminatória ideal foi de 960 g ha-1. Populações de capim-amargoso resistentes ao glyphosate foram encontradas em todas as regiões produtoras de soja amostradas. Dentre 809populações, 25,96% foram consideradas resistentes ao glyphosate. Os estados com maior frequência de populações resistentes foram: Rio Grande do Sul, Mato Grosso do Sul, Bahia, Mato Grosso e Paraná.
Asunto(s)
Digitaria , Resistencia a los Herbicidas , Protección de Cultivos/métodos , Herbicidas/administración & dosificación , Brasil , 24444 , Dispersión de las PlantasRESUMEN
A hanseníase é uma doença infectocontagiosa crônica causada pelo Mycobacterium leprae (M. leprae). Manifesta-se, principalmente, por lesões de pele com alteração de sensibilidade térmica, dolorosa e tátil, decorrentes da predileção de seu agente etiológico por células cutâneas e nervosas periféricas. No mundo, em 2018, foram reportados à Organização Mundial da Saúde (OMS), 208.619 casos novos; desses, 28.660 foram notificados no Brasil, sendo o segundo país com maior número detectado. Acredita-se que a transmissão e infecção ocorram através de secreções provenientes das vias aéreas superiores, pelo contato íntimo e prolongado de indivíduo suscetível com paciente multibacilar sem tratamento, por meio da inalação dos bacilos. O tratamento preconizado pela OMS consiste na associação de três medicamentos dapsona (DDS), rifampicina (RFP) e clofazimina (CLO) com o objetivo de atuar na prevenção da seleção de cepas mutantes do M. leprae resistentes a uma ou mais drogas utilizadas. A ofloxacina (OFLO) é usada como esquema alternativo ao tratamento padrão, associando-se a RFP e CLO, sendo útil nos casos de resistência medicamentosa ou intolerância a uma das drogas. O bacilo não se reproduz em meios de cultura artificiais ou celulares obstáculo para o avanço em estudos do patógeno. Em 1960, Charles Shepard, demonstrou pela primeira vez a multiplicação do M. leprae em coxim plantar de camundongo imunocompetente, técnica considerada marco na pesquisa do bacilo, propiciando a verificação de sua viabilidade e uma possível resistência às drogas utilizadas no tratamento da doença. O presente estudo teve como objetivo validar o método fenotípico, por meio da inoculação do bacilo em coxim plantar posterior de camundongos imunocompetentes da linhagem BALB/c (técnica de Shepard), para detecção de sensibilidade à CLO e OFLO. Os animais foram inoculados com suspensão de bacilos obtidos de camundongos nude mouse atímicos previamente infectados com a cepa Thai53, que possui perfil genético de sensibilidade às drogas, e divididos em grupo controle (não tratado), RFP (10mg/kg), CLO (50mg/kg) e OFLO (150mg/kg). Após cinco meses de inoculação e tratamento, os animais foram eutanasiados, e os coxins excisados para contagem do número de bacilos e análise histopatológica. No grupo controle, o número de bacilos recuperados foi maior que 1,0x105 /coxim, compatível com multiplicação bacilar; a análise histopatológica evidenciou infiltrado inflamatório intenso com bacilos agrupados ou em globias, íntegros e bem corados. Nos grupos tratados, não foi observada evidência de multiplicação bacilar, mostrando sensibilidade às drogas testadas; a análise histopatológica evidenciou infiltrado inflamatório discreto a moderado com ausência de bacilos. A técnica de Shepard é considerada padrão ouro para a multiplicação do bacilo, sendo fundamental para validar a identificação de novos alvos de mutação em genes determinantes da ação das drogas anti-hansênicas. Os resultados gerados no presente estudo terão grande impacto, principalmente para compreender a falha terapêutica em pacientes com recidiva que não apresentaram perfil de resistência pelos mecanismos moleculares até o momento descritos para a doença.
Leprosy is a chronic infectious disease caused by Mycobacterium leprae (M. leprae). It is mainly manifested by skin lesions with changes in thermal, sensory and tactile sensitivity resulting from the predilection of its etiologic agent by skin and peripheral nerve cells. The World Health Organization (WHO) reported 208,619 new cases in 2018 worldwide; among these, 28,660 were reported in Brazil, the second country with the highest number detected. It is believed that transmission and infection occur by inhaling bacilli through the upper airways, while in close and prolonged contact of a susceptible individual with an untreated multibacillary patient. The treatment recommended by the WHO consists of the combination of three drugs -dapsone (DDS), rifampicin (RFP) and clofazimine (CLO) - in order to prevent the selection of mutant M. leprae strains resistant to one or more drugs. Ofloxacin (OFLO) is used as an alternative regimen to standard treatment, in association with RFP and CLO, being useful in cases of drug resistance or intolerance to one of the drugs. The bacillus does not reproduce in artificial or cellular culture media - an obstacle to progress in studies of the pathogen. In 1960, Charles Shepard, demonstrated for the first time the multiplication of M. leprae in an immunocompetent mouse footpad, a technique considered a landmark in the bacillus research, enabling the verification of its viability and a possible resistance to drugs used in the treatment of the disease. The present study aimed to validate the phenotypic method, by inoculating the bacillus in the hind footpads of immunocompetent BALB/c mice strain (Shepard's technique), to detect sensitivity to CLO and OFLO. The animals were inoculated with a suspension of bacilli obtained from athymic nude mouse previously infected with the Thai-53 strain, a sensitive strain. Mice were divided into a control (untreated), RFP (10mg / kg), CLO (50mg / kg) and OFLO (150mg / kg) groups. After five months of inoculation and treatment, the animals were euthanized and the foopads excised for enumeration of bacilli and histopathological analysis. In the control group, the number of bacilli recovered was greater than 1.0x105 /footpad, compatible with bacillary multiplication; histopathological analysis showed an intense inflammatory infiltrate with well stained grouped bacilli and globi. In the treated groups, there was no evidence of bacillary multiplication, showing sensitivity to the drugs tested; histopathological analysis showed mild to moderate inflammatory infiltrate with no bacilli. The Shepard technique is considered the gold standard for bacillus multiplication, being essential to validate the identification of new mutation targets in genes that determine anti-leprosy drugs activity. The results generated in the present study will have a great impact, mainly to understand the therapeutic failure in patients with recurrence who did not present a resistance profile using molecular mechanisms described so far for the disease.
Asunto(s)
Lepra/terapia , Mycobacterium leprae/efectos de los fármacos , Resistencia a Medicamentos , Ofloxacino/uso terapéutico , Clofazimina/uso terapéuticoRESUMEN
A criptococose é uma infecção oportunista comum em pacientes HIV positivos, mas também pode afetar pacientes com outras comorbidades imunológicas ou imunocompetentes. Neste trabalho, cepas clínicas de Cryptococcus spp. provenientes de hospitais de São José dos Campos (SP) foram identificadas pela amplificação do gene SRT. A seguir, foi avaliada a sensibilidades das cepas a fluconazol e anfotericina B (AMB) pela técnica de microdiluição conforme EUCAST. Também foi analisada a capacidade de formação de biofilme por cristal violeta (formação da biomassa) e XTT (viabilidade celular). Foram analisadas in vivo a formação da cápsula durante a infecção, a curva de sobrevivência e do índice de saúde em modelo invertebrado de Galleria mellonella. Seis cepas foram identificadas como C. neoformans var. grubbii e uma como C. gattii. Todas as cepas clínicas foram sensíveis a AMB e a concentração inibitória mínima para fluconazol variou entre 2 e 32 µg/mL. Todos os isolados de Cryptococcus spp. foram capazes de produzir biofilme. A sobrevida de G. mellonella infectada variou entre 6 e 7 dias para C. neoformans, e a cepa clínica 6 se mostrou menos virulenta, com 24% das larvas vivas no último dia de experimento. Para cepa de C. gattii, 20,8% das larvas infectadas permaneceram vivas ao final da análise. Em relação a análise do tamanho da cápsula após inoculação in vivo, as cepas clínicas de ambas espécies apresentaram aumento no tamanho, sendo observado o maior percentual de cápsulas ≥ 30µm na cepa 6. O índice de saúde foi capaz de agregar informações ao resultado da curva de sobrevivência de G. mellonella, uma vez que ele mostrou diferenças de saúde das larvas entre os grupos que apresentaram mesmo perfil de sobrevida. A associação do índice de saúde à curva de sobrevivência amplia a visão da vitalidade das larvas durante os dias de experimento e, ainda, auxilia na comparação de resultados entre laboratórios. O conhecimento das características genotípicas e fenotípicas de Cryptococcus spp. em uma determinada região pode ser ferramenta importante para implementação de políticas públicas de saúde eficazes. (AU)
Cryptococcosis is a common opportunistic infection in HIV-positive patients, but it can also affect patients with other immunological comorbidities or immunocompetent. In this work, clinical strains of Cryptococcus spp. from hospitals in São José dos Campos (SP) were identified by amplification of the SRT gene. Next, the sensitivities of the strains to fluconazole and amphotericin B (AMB) were evaluated by the microdilution technique according to EUCAST. Biofilm formation capacity by crystal violet (biomass formation) and XTT (cellular viability) was also analyzed. Capsule formation during infection, survival curve and health index in an invertebrate model of Galleria mellonella were analyzed in vivo. Six strains were identified as C. neoformans var. grubbii and one as C. gattii. All clinical strains were sensitive to AMB and the minimum inhibitory concentration for fluconazole ranged between 2 and 32 µg/mL. All Cryptococcus spp. were able to produce biofilm. The survival of infected G. mellonella ranged between 6 and 7 days for C. neoformans, and the clinical strain 6 was less virulent, with 24% of larvae alive on the last day of the experiment. For the C. gattii strain, 20.8% of the infected larvae remained alive at the end of the analysis. Regarding the analysis of capsule size after in vivo inoculation, the clinical strains of both species showed an increase in size, with the highest percentage of capsules ≥ 30µm being observed in strain 6. The health index was able to add information to the result of the survival curve of G. mellonella, since it showed differences in the health of larvae between the groups that presented the same survival profile. The association of the health index to the survival curve broadens the vision of the larvae's vitality during the days of the experiment and also helps in comparing the results between laboratories. The knowledge of the genotypic and phenotypic characteristics of Cryptococcus spp. in a given region, it can be an important tool for the implementation of effective public health policies (AU)
Asunto(s)
Humanos , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Criptococosis , Cryptococcus , Susceptibilidad a Enfermedades , Fluconazol , Anfotericina BRESUMEN
INTRODUCCIÓN: las infecciones fúngicas ocasionadas por levaduras del género Cándida son extremadamente comunes en mujeres de edad reproductiva, y constituyen un motivo de atención medica de salud. OBJETIVO: evaluar la susceptibilidad de Cándidas spp, mediante el método colorimétrico (Integral Yeast System Plus). MÉTODO: fue de tipo descriptivo, transversal; se recopiló información mediante observación directa en campo y el análisis documental para obtener información bibliográfica de tipo secundaria. RESULTADOS: de los 72 casos encontrados de Cándida Albicans revela que son susceptibles a la anfotericina B (2ug/ml); de los 5 casos encontrados de Cándida Krusei revela que son sensibles a la Anfotericina B (2ug/ml); De 1 caso encontrado de Cándida Parapsilosis revela sensibilidad en la Nistatina (1.25ug/ml). En este estudio la prevalencia de la infección por Cándida fue del (44.98%). CONCLUSIONES: Cándida Albicans fue la especie más común aislada en las mujeres embarazadas representando un 72%, En la evaluación de la susceptibilidad a través del kit Integral System Yeast Plus se obtuvo que Cándida Albicans es susceptible a Anfotericina B, Flucitosina entre otros, en Cándida Glabrata se obtuvo que es sensible a la Nistatina, Anfotericina B, susceptible entre otros, en Cándida Krusei se obtuvo que es sensible a la Anfotericina B, Clotrimazol, Miconazol, susceptibles a la Nistatina, Voriconazol y resistente a la Flucitosina, Ketoconazol, Itraconazol y Fluconazol.
INTRODUCTION: fungal infections caused by yeast of the genus Candida are extremely common in women of reproductive age, and constitute a reason for medical health care. OBJECTIVE: to evaluate the susceptibility of Candida spp, using the colorimetric method (Integral Yeast System Plus). METHOD: it was descriptive, transversal; Information was collected through direct observation in the field and documentary analysis to obtain secondary bibliographic information. RESULTS: of the 72 cases found, Candida Albicans reveals that they are susceptible to amphotericin B (2ug / ml); of the 5 cases found, Candida Krusei reveals that they are sensitive to Amphotericin B (2ug / ml); Of 1 case found of Candida Parapsilosis reveals sensitivity in Nystatin (1.25ug / ml). In this study, the prevalence of Candida infection was (44.98%). CONCLUSIONS: Candida Albicans was the most common species isolated in pregnant women, representing 72%. In the evaluation of susceptibility through the Integral System Yeast Plus kit it was obtained that Candida Albicans is susceptible to Amphotericin B, Flucytosine among others, in Candida Glabrata was obtained that it is sensitive to Nystatin, Amphotericin B, susceptible among others, in Candida Krusei it was obtained that it is sensitive to Amphotericin B, Clotrimazole, Miconazole, susceptible to Nystatin, Voriconazole and resistant to Flucytosin, Ketoconazole, Itraconazole and Fluconazole.
INTRODUÇÃO: as infecções fúngicas causadas por leveduras do gênero Candida são extremamente comuns em mulheres em idade reprodutiva e constituem motivo de cuidados médicos. OBJETIVO: avaliar a suscetibilidade de Candida spp, por meio do método colorimétrico (Integral Yeast System Plus). MÉTODO: foi descritivo, transversal; as informações foram coletadas por meio de observação direta em campo e análise documental para obtenção de informações bibliográficas secundárias. RESULTADOS: Dos 72 casos encontrados, Cândida Albicans revelou ser suscetíveis à anfotericina B (2ug /ml); dos 5 casos encontrados, Candida Krusei revela que são sensíveis à Anfotericina B (2ug / ml); de 1 caso encontrado de Candida Parapsilosis revela sensibilidade na Nistatina (1,25ug / ml). Neste estudo, a prevalência de infecção por Candida foi (44,98%). CONCLUSÕES: Cândida Albicans foi a espécie mais comum isolada em gestantes, representando 72%. Na avaliação da susceptibilidade através do kit Integral System Yeast Plus foi obtido que Candida Albicans é suscetível à Anfotericina B, Flucitosina entre outras, em Cândida Glabrata foi obtido que é sensível a Nistatina, Anfotericina B, suscetível entre outras, em Candida Krusei foi obtido que é sensível a Anfotericina B, Clotrimazol, Miconazol, suscetível a Nistatina, Voriconazol e resistente a Flucitosina, Cetoconazol, Itraconazol e Fluconazol.
Asunto(s)
Humanos , Femenino , Embarazo , Adulto , Candida , Candida albicans , Anfotericina B , Colorimetría , Candida glabrata , Mujeres Embarazadas , Fluconazol , Prevalencia , Clotrimazol , Itraconazol , Voriconazol , Flucitosina , Candida parapsilosis , Infecciones , MiconazolRESUMEN
Abstract The treatment of choice for chronic atrophic candidiasis (CAC), also known as denture stomatitis, is topical antifungal therapy. This study aimed to isolate, identify, and assess the antifungal susceptibility of Candida species from mucosal sites in denture wearers with a diagnosis of CAC and determine the prevalence of associated variables. The sample consisted of 44 patients wearing complete or partial dentures who had a clinical diagnosis of CAC. Using sterile cotton swabs, specimens were collected from the oral mucosa of all patients and grown at 30ºC for 48 h in CHROMagar Candida, as a means of isolating and screening the species. The complementary identification of the species was performed using the VITEK 2 automated system (BioMérieux), as well as the determination of their susceptibility to antifungal agents. Data were analyzed using the chi-square test. STATA 13.1 was used for statistical analysis (α = 5%). Of 44 patients with CAC, 33 (75%) had lesions classified as Newton type II. Yeasts were isolated in 38 cases. The most prevalent species was Candida albicans. None of the isolates were resistant to the antifungals tested. Our findings suggest that current indications for antifungal agents are appropriate. Also, antifungal susceptibility testing and proper fungal identification can help dentists to determine the optimal course of treatment for CAC.
Resumo O tratamento de escolha para candidíase atrófica crônica (CAC), também conhecida como estomatite protética, é a terapia antifúngica tópica. Este estudo teve como objetivo isolar, identificar e avaliar a susceptibilidade antifúngica de espécies de Candida de locais mucosos em portadores de prótese com diagnóstico de CAC e determinar a prevalência de variáveis associadas. A amostra consistiu em 44 pacientes portadores de próteses completas ou parciais que tiveram um diagnóstico clínico de CAC. Usando swab estéril, foram coletados espécimes da mucosa oral de todos os pacientes e cultivados a 30ºC durante 48 h em CHROMagar Candida, como forma de isolamento e triagem das espécies. A identificação complementar das espécies foi realizada no sistema automatizado VITEK 2 (BioMérieux), bem como a determinação da susceptibilidade delas a agentes antifúngicos. Os dados foram analisados usando o teste do qui-quadrado. O STATA 13.1 foi utilizado para análise estatística (α = 5%). Dos 44 pacientes com CAC, 33 (75%) apresentaram lesões classificadas como Newton tipo II. As leveduras foram isoladas em 38 casos. A espécie mais prevalente foi Candida albicans. Nenhum dos isolados foi resistente aos antifúngicos testados. Nossas descobertas sugerem que as indicações atuais para os agentes antifúngicos são apropriadas. Além disso, testes de susceptibilidade antifúngicos e identificação fúngica adequada podem ajudar os dentistas a determinar o curso ótimo de tratamento para CAC.
Asunto(s)
Humanos , Candida , Candidiasis Bucal , Candida albicans , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , AntifúngicosRESUMEN
The treatment of choice for chronic atrophic candidiasis (CAC), also known as denture stomatitis, is topical antifungal therapy. This study aimed to isolate, identify, and assess the antifungal susceptibility of Candida species from mucosal sites in denture wearers with a diagnosis of CAC and determine the prevalence of associated variables. The sample consisted of 44 patients wearing complete or partial dentures who had a clinical diagnosis of CAC. Using sterile cotton swabs, specimens were collected from the oral mucosa of all patients and grown at 30ºC for 48 h in CHROMagar Candida, as a means of isolating and screening the species. The complementary identification of the species was performed using the VITEK 2 automated system (BioMérieux), as well as the determination of their susceptibility to antifungal agents. Data were analyzed using the chi-square test. STATA 13.1 was used for statistical analysis ( = 5%). Of 44 patients with CAC, 33 (75%) had lesions classified as Newton type II. Yeasts were isolated in 38 cases. The most prevalent species was Candida albicans. None of the isolates were resistant to the antifungals tested. Our findings suggest that current indications for antifungal agents are appropriate. Also, antifungal susceptibility testing and proper fungal identification can help dentists to determine the optimal course of treatment for CAC.(AU)
O tratamento de escolha para candidíase atrófica crônica (CAC), também conhecida como estomatite protética, é a terapia antifúngica tópica. Este estudo teve como objetivo isolar, identificar e avaliar a susceptibilidade antifúngica de espécies de Candida de locais mucosos em portadores de prótese com diagnóstico de CAC e determinar a prevalência de variáveis associadas. A amostra consistiu em 44 pacientes portadores de próteses completas ou parciais que tiveram um diagnóstico clínico de CAC. Usando swab estéril, foram coletados espécimes da mucosa oral de todos os pacientes e cultivados a 30ºC durante 48 h em CHROMagar Candida, como forma de isolamento e triagem das espécies. A identificação complementar das espécies foi realizada no sistema automatizado VITEK 2 (BioMérieux), bem como a determinação da susceptibilidade delas a agentes antifúngicos. Os dados foram analisados usando o teste do qui-quadrado. O STATA 13.1 foi utilizado para análise estatística ( = 5%). Dos 44 pacientes com CAC, 33 (75%) apresentaram lesões classificadas como Newton tipo II. As leveduras foram isoladas em 38 casos. A espécie mais prevalente foi Candida albicans. Nenhum dos isolados foi resistente aos antifúngicos testados. Nossas descobertas sugerem que as indicações atuais para os agentes antifúngicos são apropriadas. Além disso, testes de susceptibilidade antifúngicos e identificação fúngica adequada podem ajudar os dentistas a determinar o curso ótimo de tratamento para CAC.(AU)
Asunto(s)
Candida , Antifúngicos , Candidiasis , Estomatitis , Susceptibilidad a EnfermedadesRESUMEN
The objective of this study was to evaluate the antimicrobial susceptibility profile of bacteria isolated from the eyes of dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS). We evaluated 65 dogs diagnosed with KCS and 30 healthy dogs (Control Group). Conjunctival swab samples were collected after KCS was diagnosed. Microbiological examinations were performed, including aerobic culture, antimicrobial susceptibility testing and minimum inhibitory concentration (MIC) determination for chloramphenicol, tobramycin, ofloxacin and moxifloxacin. MICs of the fifteen most resistant strains of Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group, SIG) and the fifteen most resistant strains of gram-negative bacteria were determined. By percentage, the microorganisms exhibited the highest susceptibility to polymyxin B, tobramycin and chloramphenicol and the lowest to tetracycline. Three multi-drug-resistant strains of SIG were detected: one displayed isolated susceptibility to cefazolin, another to vancomycin, and another to polymyxin B and amikacin. The species of bacteria isolated from the eyes of dogs with KCS presented variable susceptibility to the antibiotics tested. We found evidence of the emergence of quinolone-resistant strains of SIG and further evidence of increased ocular prevalence. These findings reinforce the need to identify the bacteria involved and their antimicrobial susceptibility profile, as secondary infections can serve as exacerbating and perpetuating factors in KCS.(AU)
O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de susceptibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de olhos de cães com ceratoconjuntivite seca (CCS). Foram avaliados 65 cães com diagnóstico de CCS e 30 cães saudáveis ââ(Grupo Controle). Depois do diagnosticado de CCS, suabes conjuntivais foram coletados. Exames microbiológicos foram realizados, incluindo cultura aeróbia, teste de susceptibilidade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) para cloranfenicol, tobramicina, ofloxacina e moxifloxacina. Para determinar a CIM, foram selecionadas as quinze cepas mais resistentes de Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group-SIG) e as quinze cepas mais resistentes de bactérias gram-negativas. Os microrganismos apresentaram maior suscetibilidade percentual à polimixina B, tobramicina e cloranfenicol e menor suscetibilidade à tetraciclina. Três cepas de SIG resistentes a múltiplos medicamentos foram detectadas, do quais um demonstrou suscetibilidade isolada à cefazolina, outro à vancomicina e outro à polimixina B e à amicacina. As espécies de bactérias isoladas dos olhos de cães com CCS apresentaram suscetibilidade variável aos antibióticos testados. Encontramos evidências do surgimento de cepas resistentes à quinolona de S. pseudintermedius e outras evidências de aumento da prevalência ocular. Esses achados reforçam a necessidade de identificar as bactérias envolvidas e seu perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, pois as infecções secundárias podem servir como fatores exacerbantes e perpetuantes na CCS.(AU)
Asunto(s)
Animales , Perros , Staphylococcus/aislamiento & purificación , Farmacorresistencia Microbiana , Queratoconjuntivitis Seca/veterinaria , Pruebas de Sensibilidad Microbiana/veterinaria , QuinolonasRESUMEN
The objective of this study was to evaluate the antimicrobial susceptibility profile of bacteria isolated from the eyes of dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS). We evaluated 65 dogs diagnosed with KCS and 30 healthy dogs (Control Group). Conjunctival swab samples were collected after KCS was diagnosed. Microbiological examinations were performed, including aerobic culture, antimicrobial susceptibility testing and minimum inhibitory concentration (MIC) determination for chloramphenicol, tobramycin, ofloxacin and moxifloxacin. MICs of the fifteen most resistant strains of Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group, SIG) and the fifteen most resistant strains of gram-negative bacteria were determined. By percentage, the microorganisms exhibited the highest susceptibility to polymyxin B, tobramycin and chloramphenicol and the lowest to tetracycline. Three multi-drug-resistant strains of SIG were detected: one displayed isolated susceptibility to cefazolin, another to vancomycin, and another to polymyxin B and amikacin. The species of bacteria isolated from the eyes of dogs with KCS presented variable susceptibility to the antibiotics tested. We found evidence of the emergence of quinolone-resistant strains of SIG and further evidence of increased ocular prevalence. These findings reinforce the need to identify the bacteria involved and their antimicrobial susceptibility profile, as secondary infections can serve as exacerbating and perpetuating factors in KCS.(AU)
O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de susceptibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de olhos de cães com ceratoconjuntivite seca (CCS). Foram avaliados 65 cães com diagnóstico de CCS e 30 cães saudáveis ââ(Grupo Controle). Depois do diagnosticado de CCS, suabes conjuntivais foram coletados. Exames microbiológicos foram realizados, incluindo cultura aeróbia, teste de susceptibilidade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) para cloranfenicol, tobramicina, ofloxacina e moxifloxacina. Para determinar a CIM, foram selecionadas as quinze cepas mais resistentes de Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group-SIG) e as quinze cepas mais resistentes de bactérias gram-negativas. Os microrganismos apresentaram maior suscetibilidade percentual à polimixina B, tobramicina e cloranfenicol e menor suscetibilidade à tetraciclina. Três cepas de SIG resistentes a múltiplos medicamentos foram detectadas, do quais um demonstrou suscetibilidade isolada à cefazolina, outro à vancomicina e outro à polimixina B e à amicacina. As espécies de bactérias isoladas dos olhos de cães com CCS apresentaram suscetibilidade variável aos antibióticos testados. Encontramos evidências do surgimento de cepas resistentes à quinolona de S. pseudintermedius e outras evidências de aumento da prevalência ocular. Esses achados reforçam a necessidade de identificar as bactérias envolvidas e seu perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, pois as infecções secundárias podem servir como fatores exacerbantes e perpetuantes na CCS.(AU)
Asunto(s)
Animales , Perros , Staphylococcus/aislamiento & purificación , Farmacorresistencia Microbiana , Queratoconjuntivitis Seca/veterinaria , Pruebas de Sensibilidad Microbiana/veterinaria , QuinolonasRESUMEN
ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the antimicrobial susceptibility profile of bacteria isolated from the eyes of dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS). We evaluated 65 dogs diagnosed with KCS and 30 healthy dogs (Control Group). Conjunctival swab samples were collected after KCS was diagnosed. Microbiological examinations were performed, including aerobic culture, antimicrobial susceptibility testing and minimum inhibitory concentration (MIC) determination for chloramphenicol, tobramycin, ofloxacin and moxifloxacin. MICs of the fifteen most resistant strains of Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group, SIG) and the fifteen most resistant strains of gram-negative bacteria were determined. By percentage, the microorganisms exhibited the highest susceptibility to polymyxin B, tobramycin and chloramphenicol and the lowest to tetracycline. Three multi-drug-resistant strains of SIG were detected: one displayed isolated susceptibility to cefazolin, another to vancomycin, and another to polymyxin B and amikacin. The species of bacteria isolated from the eyes of dogs with KCS presented variable susceptibility to the antibiotics tested. We found evidence of the emergence of quinolone-resistant strains of SIG and further evidence of increased ocular prevalence. These findings reinforce the need to identify the bacteria involved and their antimicrobial susceptibility profile, as secondary infections can serve as exacerbating and perpetuating factors in KCS.
RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de susceptibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de olhos de cães com ceratoconjuntivite seca (CCS). Foram avaliados 65 cães com diagnóstico de CCS e 30 cães saudáveis (Grupo Controle). Depois do diagnosticado de CCS, suabes conjuntivais foram coletados. Exames microbiológicos foram realizados, incluindo cultura aeróbia, teste de susceptibilidade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) para cloranfenicol, tobramicina, ofloxacina e moxifloxacina. Para determinar a CIM, foram selecionadas as quinze cepas mais resistentes de Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group-SIG) e as quinze cepas mais resistentes de bactérias gram-negativas. Os microrganismos apresentaram maior suscetibilidade percentual à polimixina B, tobramicina e cloranfenicol e menor suscetibilidade à tetraciclina. Três cepas de SIG resistentes a múltiplos medicamentos foram detectadas, do quais um demonstrou suscetibilidade isolada à cefazolina, outro à vancomicina e outro à polimixina B e à amicacina. As espécies de bactérias isoladas dos olhos de cães com CCS apresentaram suscetibilidade variável aos antibióticos testados. Encontramos evidências do surgimento de cepas resistentes à quinolona de S. pseudintermedius e outras evidências de aumento da prevalência ocular. Esses achados reforçam a necessidade de identificar as bactérias envolvidas e seu perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, pois as infecções secundárias podem servir como fatores exacerbantes e perpetuantes na CCS.
RESUMEN
Abstract The treatment of choice for chronic atrophic candidiasis (CAC), also known as denture stomatitis, is topical antifungal therapy. This study aimed to isolate, identify, and assess the antifungal susceptibility of Candida species from mucosal sites in denture wearers with a diagnosis of CAC and determine the prevalence of associated variables. The sample consisted of 44 patients wearing complete or partial dentures who had a clinical diagnosis of CAC. Using sterile cotton swabs, specimens were collected from the oral mucosa of all patients and grown at 30ºC for 48 h in CHROMagar Candida, as a means of isolating and screening the species. The complementary identification of the species was performed using the VITEK 2 automated system (BioMérieux), as well as the determination of their susceptibility to antifungal agents. Data were analyzed using the chi-square test. STATA 13.1 was used for statistical analysis ( = 5%). Of 44 patients with CAC, 33 (75%) had lesions classified as Newton type II. Yeasts were isolated in 38 cases. The most prevalent species was Candida albicans. None of the isolates were resistant to the antifungals tested. Our findings suggest that current indications for antifungal agents are appropriate. Also, antifungal susceptibility testing and proper fungal identification can help dentists to determine the optimal course of treatment for CAC.
Resumo O tratamento de escolha para candidíase atrófica crônica (CAC), também conhecida como estomatite protética, é a terapia antifúngica tópica. Este estudo teve como objetivo isolar, identificar e avaliar a susceptibilidade antifúngica de espécies de Candida de locais mucosos em portadores de prótese com diagnóstico de CAC e determinar a prevalência de variáveis associadas. A amostra consistiu em 44 pacientes portadores de próteses completas ou parciais que tiveram um diagnóstico clínico de CAC. Usando swab estéril, foram coletados espécimes da mucosa oral de todos os pacientes e cultivados a 30ºC durante 48 h em CHROMagar Candida, como forma de isolamento e triagem das espécies. A identificação complementar das espécies foi realizada no sistema automatizado VITEK 2 (BioMérieux), bem como a determinação da susceptibilidade delas a agentes antifúngicos. Os dados foram analisados usando o teste do qui-quadrado. O STATA 13.1 foi utilizado para análise estatística ( = 5%). Dos 44 pacientes com CAC, 33 (75%) apresentaram lesões classificadas como Newton tipo II. As leveduras foram isoladas em 38 casos. A espécie mais prevalente foi Candida albicans. Nenhum dos isolados foi resistente aos antifúngicos testados. Nossas descobertas sugerem que as indicações atuais para os agentes antifúngicos são apropriadas. Além disso, testes de susceptibilidade antifúngicos e identificação fúngica adequada podem ajudar os dentistas a determinar o curso ótimo de tratamento para CAC.
RESUMEN
Infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) being a constant concern, ceftaroline fosamil has been recently approved as a new cephalosporin, active against MRSA, for use in humans; only rare cases of resistance have been reported till date. There is no report of resistance to ceftaroline in Staphylococcus pseudintermedius, which is the main bacterium causing dermatitis and otitis in dogs. To evaluate staphylococcal resistance to ceftaroline, 35 isolates of methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP), carrying the mecA gene, from 26 dogs with folliculitis and nine dogs with external otitis, underwent disk diffusion test with cefoxitin, oxacillin, and ceftaroline. Tests with cefoxitin and oxacillin showed > 90% sensitivity in methicillin resistance detection. In the disk diffusion test, 97.14% (34/35) were resistant to cefoxitin, 94.29% (33/35) to oxacillin, and 31.43% (11/35) to ceftaroline. Of the ceftaroline-resistant strains, 27.27% (3/11) were obtained from the ears of dogs while the rest (8/11) were from the skin. The current report is the first description of MRSP resistance to ceftaroline.(AU)
Infecções causadas por Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) são uma preocupação médica constante. A ceftarolina fosamila é uma nova cefalosporina ativa contra Staphylococcus aureus resistente à meticilina recentemente aprovada para uso em humanos e raros casos de resistência relatados até agora. Não há relatos de resistência à ceftarolina em Staphylococcus pseudintermedius, principal bactéria causadora de dermatite e otite em cães. Com o objetivo de avaliar a resistência estafilocócica à ceftarolina, 35 amostras de S. pseudintermedius resistentes à meticilina (MRSP), portadoras do gene mecA, provenientes de 26 cães com foliculite e 9 com otite externa foram submetidos ao teste de disco-difusão com cefoxitina, oxacilina e ceftarolina. Os testes realizados com cefoxitina e oxacilina mostraram mais de 90% de sensibilidade na detecção da resistência à meticilina em ambas. No teste da disco-difusão, 97,14% (1/35) foram resistentes à cefoxitina, 94,29% (3/35) à oxacilina e 31,43% (11/35) à ceftarolina. Das cepas resistentes às ceftarolina, 27,27 (3/11) foram provenientes de ouvido de cães e as demais (8/11), provenientes da pele, sendo essa primeira descrição de resistência de MRSP à ceftarolina na literatura atual.(AU)
Asunto(s)
Animales , Perros , Oxacilina , Staphylococcus/genética , Staphylococcus aureus , Infecciones Cutáneas Estafilocócicas/veterinaria , Cefoxitina , Resistencia a las Cefalosporinas , Perros/microbiología , Dermatitis/veterinaria , Pruebas Antimicrobianas de Difusión por Disco/veterinaria , Foliculitis/veterinariaRESUMEN
Infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) being a constant concern, ceftaroline fosamil has been recently approved as a new cephalosporin, active against MRSA, for use in humans; only rare cases of resistance have been reported till date. There is no report of resistance to ceftaroline in Staphylococcus pseudintermedius, which is the main bacterium causing dermatitis and otitis in dogs. To evaluate staphylococcal resistance to ceftaroline, 35 isolates of methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP), carrying the mecA gene, from 26 dogs with folliculitis and nine dogs with external otitis, underwent disk diffusion test with cefoxitin, oxacillin, and ceftaroline. Tests with cefoxitin and oxacillin showed > 90% sensitivity in methicillin resistance detection. In the disk diffusion test, 97.14% (34/35) were resistant to cefoxitin, 94.29% (33/35) to oxacillin, and 31.43% (11/35) to ceftaroline. Of the ceftaroline-resistant strains, 27.27% (3/11) were obtained from the ears of dogs while the rest (8/11) were from the skin. The current report is the first description of MRSP resistance to ceftaroline.(AU)
Infecções causadas por Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) são uma preocupação médica constante. A ceftarolina fosamila é uma nova cefalosporina ativa contra Staphylococcus aureus resistente à meticilina recentemente aprovada para uso em humanos e raros casos de resistência relatados até agora. Não há relatos de resistência à ceftarolina em Staphylococcus pseudintermedius, principal bactéria causadora de dermatite e otite em cães. Com o objetivo de avaliar a resistência estafilocócica à ceftarolina, 35 amostras de S. pseudintermedius resistentes à meticilina (MRSP), portadoras do gene mecA, provenientes de 26 cães com foliculite e 9 com otite externa foram submetidos ao teste de disco-difusão com cefoxitina, oxacilina e ceftarolina. Os testes realizados com cefoxitina e oxacilina mostraram mais de 90% de sensibilidade na detecção da resistência à meticilina em ambas. No teste da disco-difusão, 97,14% (1/35) foram resistentes à cefoxitina, 94,29% (3/35) à oxacilina e 31,43% (11/35) à ceftarolina. Das cepas resistentes às ceftarolina, 27,27 (3/11) foram provenientes de ouvido de cães e as demais (8/11), provenientes da pele, sendo essa primeira descrição de resistência de MRSP à ceftarolina na literatura atual.(AU)
Asunto(s)
Animales , Perros , Oxacilina , Staphylococcus/genética , Staphylococcus aureus , Infecciones Cutáneas Estafilocócicas/veterinaria , Cefoxitina , Resistencia a las Cefalosporinas , Perros/microbiología , Dermatitis/veterinaria , Pruebas Antimicrobianas de Difusión por Disco/veterinaria , Foliculitis/veterinariaRESUMEN
Objetivou-se identificar microrganismos isolados de diferentes tipos de ceratite ulcerativa em cães, juntamente com a sua susceptibilidade a antimicrobianos. O resultado do tratamento médico e cirúrgico também foi correlacionado com o tipo de isolado. Amostras para microbiologia foram obtidas com auxílio de swab estéril em 104 olhos de 72 pacientes sem histórico prévio de tratamento com antibióticos tópicos, atendidos no período de maio de 2012 a março de 2015. Os antibióticos testados foram: neomicina, gentamicina, tobramicina, cloranfenicol, polimixina B, ciprofloxacino, ofloxacino e moxifloxacina. No total, 131 bactérias foram isoladas de 96/104 olhos estudados, sendo o gênero Staphylococcus (48,09%) predominante, seguido por Pseudomonas aeruginosa (16,01%). O Shih Tzu foi a raça mais prevalente (33,33%) e o número de isolados gram-negativos foi significativamente maior nessa raça, comparativamente aos Pinschers (p=0,003), aos Filas, aos Poodles e aos sem raça definida (p=0,046). As bactérias isoladas neste estudo apresentaram maior susceptibilidade ao ofloxacino (84,55%), que foi significativamente mais eficaz em relação a neomicina e a polimixina B (p<0,0001), ao cloranfenicol (p=0,0001), a tobramicina (p=0,0007), a gentamicina (p=0,0021) e as outras fluorquinolonas, ciprofloxacino (p=0,0004) e moxifloxacino (p<0,0001). Os organismos gram-positivos foram isolados de um número significativamente maior de olhos que apresentavam ceratite ulcerativa não complicada, comparativamente àqueles com olhos acometidos por ceratite ulcerativa complicada (p=0,011). Igualmente, o número de bactérias gram-positivas foi maior que o de gram-negativas, tanto nos casos que receberam tratamento médico, como nos que foram operados, sem significativa estatística (p=0,745). Na presente pesquisa, Staphylococcus sp. foi a bactéria mais encontrada nas ceratites ulcerativas não complicadas. Já nos olhos com...(AU)
The purpose of the present study was to analyze antibiotic susceptibility of bacteria associated with different types of ulcerative keratitis in dogs. The outcome of medical or surgical treatment was also correlated with the type of isolate. Samples for microbiology were obtained by means of sterile swab from 104 eyes of 72 canine patients with ulcerative keratitis without previous history of antibiotic treatment, seen from May 2012 to March 2015. Only patients with no previous treatment with antibiotics were included in the study. Bacterial isolates were identified and the antibiotic susceptibility was tested to neomycin, gentamicin, tobramycin, chloramphenicol, polymyxin B, ciprofloxacin, ofloxacin and moxifloxacin. In total, 131 species of bacteria were isolated from 96/104 eyes, and Staphylococcus sp. predominated (48.09%), followed by Pseudomonas aeruginosa (16.01%). Shih Tzus were over represented (33.33%) and the number of gram-negative isolates were significantly higher in this breed, in comparison to Pinchers (P=0.003), Filas, Poodles, and other mixed-breeds (P=0.046). All species isolated in this study were more sensitive to ofloxacin (84.55%), that was significantly most efficient than neomycin and polymyxin B (P<0.0001), chloramphenicol (P=0.0001), tobramycin (P=0.0007), gentamicin (P=0.0021) and the other fluoroquinolones, ciprofloxacin (P=0.0004) and moxifloxacin (P<0.0001). Gram-positive organisms were isolated in a significant larger number of eyes with uncomplicated ulcerative keratitis, in comparison to those eyes with complicated ulcerative keratitis (P=0.011). Likewise, gram-positive were isolated in a larger number than gram-negatives microorganisms in cases that received either medically or surgical treatment, without statistical significance (P=0.745). In the present research, Staphylococcus sp. was the bacteria...(AU)