Haptoglobin and its association with naturally occurring diseases in Holstein heifer calves / [Haptoglobina e sua associação com doenças ocorridas naturalmente em bezerras da raça Holandesa]

The present study evaluated the use of haptoglobin (Hp) as an indicator of health and performance in 166 Holstein heifer calves reared in an intensive production system. Calves were evaluated at D6-9; D10-13; D20-23; D35-38 and D65-68, corresponding to the days of life. The absence or presence of diseases was evaluated by physical examination and classification of scores. The performance parameters evaluated were body weight, height at withers and hind width. Hp was measured by spectrophotometric technique. The highest prevalence of diarrhea (59.4%; 98/165) was observed in D10-13, bovine respiratory disease (BRD) was on D35-38 (25.8%; 42/163), and umbilical inflammations in D6-D9 (7.8%; 13/166). Highest values of Hp were observed in animals with diarrhea (P=0.02), and umbilical inflammation (P=0.057), in comparison with the group of healthy calves. A significant negative correlation was observed between Hp and performance index. This protein presented an important relation with diarrhea and performance of the calves, opening perspectives on its utilization as a biomarker of diseases.(AU)

O presente estudo avaliou o uso da haptoglobina (Hp) como indicadora de sanidade e desempenho em 166 bezerras Holandesas criadas em um sistema de produção intensivo. As bezerras foram avaliadas nos momentos D6-9; D10-13; D20-23; D35-38 e D65-68, sendo estes correspondentes aos dias de vida. A ausência ou a presença de doenças foi avaliada por meio do exame físico e da classificação por escores. Os parâmetros de desempenho avaliados foram peso corporal, altura de cernelha e largura de garupa. A Hp foi mensurada por técnica espectrofotométrica. A maior prevalência de diarreia (59,4%; 98/165) foi observada em D10-13, doença respiratória bovina (DRB) ocorreu em D35-38 (25,8%; 42/163) e inflamações umbilicais em D6-D9 (7,8%; 13/166). O valor de Hp foi maior nos animais que apresentaram diarreia (P=0,02) e inflamações umbilicais (P=0,057), em comparação ao grupo de bezerras saudáveis. Houve correlação negativa significativa entre a Hp e os índices de desempenho. Essa proteína apresentou uma importante relação com a diarreia e com o desempenho das bezerras, abrindo perspectivas sobre a sua utilização como biomarcadora de doenças.(AU)

Collagen, glycosaminoglycans and matrix metalloproteinase-2 and metalloproteinase-9 in the cervix of the ewe during prepubertal development.

The tortuous nature of the ovine cervix restricts the transcervical passage of the cannula, and many studies have aimed to understand the endocrine mechanism of the remodelling of cervical tissue in adult ewe. However, little is known about the remodelling of the cervical tissue during the prepubertal development of the lambs. To obtain histochemical and biochemical evidence about the nature of the prepubertal development of the cervix of the ewe, cervices of Corriedale lambs obtained at 0, 1, 2, 4, 6 and 8 months of age (n = 5 to 6 in each) were processed. Neutral and acidic glycosaminoglycans (by PAS-Alcian stain) were weakly in the cervical stroma and not shown change during the development, whereas the percentage volume of fibrillar collagen (by van Gieson stain) increases throughout the experimental period in the superficial fold stroma and deep wall stroma (p < 0.05). The relative cervical weight (g/kg of body weight) and the collagen concentration (by spectrophotometry, mg/mg wet tissue) showed an early decreasing phase from months 0 to 4 and a later increasing phase from months 4 to 8 (p < 0.05). The latent form of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) detected by gelatin zymography (ng/mg protein) decreased from months 0 to 2 and increased from months 4 to 8, whereas the activated form decreased from months 0 to 2, remained low until month 6 and then recovered on month 8 (p < 0.0001). Data suggest that the relative cervical weight biphasic pattern during the development is related to MMP-2-dependent changes in the collagen content.

A novel enolase from Taenia solium metacestodes and its evaluation as an immunodiagnostic antigen for porcine cysticercosis.

Cysticercosis is a worldwide parasitic disease of humans and pigs principally caused by infection with the larvae of the pork tapeworm Taenia solium. Through the use of the recently-made-available T. solium genome, we identified a gene within a novel 1448 bp ORF that theoretically encodes for a 433 amino acid-long protein and predicted to be an α-enolase closely related to enolases of other flatworms. Additional bioinformatic analyses revealed a putative plasminogen-binding region on this protein, suggesting a potential role for this protein in pathogenesis. On this basis, we isolated the mRNA encoding for this presumptive enolase from T. solium metacestodes and reverse-transcribed it into cDNA before subsequently cloning and expressing it in both E. coli (rEnoTs) and insect cells (rEnoTsBac), in a 6xHis tagged manner. The molecular weights of these two recombinant proteins were ∼48 and ∼50 kDa, respectively, with the differences likely attributable to differential glycosylation. We used spectrophotometric assays to confirm the enolase nature of rEnoTs as well as to measure its enzymatic activity. The resulting estimates of specific activity (60.000 U/mg) and Km (0.091 mM) are quite similar to the catalytic characteristics of enolases of other flatworms. rEnoTs also exhibited high immunogenicity, eliciting a strong polyclonal antibody response in immunized rabbits. We subsequently employed rEnoTsBac for use in an ELISA aimed at discriminating between healthy pigs and those infected with T. solium. This diagnostic assay exhibited a sensitivity of 88.4% (95% CI, 74.92%-96.11%) and a specificity of 83.7% (95% CI: 69.29%-93.19%). In conclusión, this study reports on and enzymatically characterizes a novel enolase from T. solium metacestode, and shows a potential use as an immunodiagnostic for porcine cysticercosis.

Determinación de los valores de colesterol LDL equina por espectrofotométrica sometidos a ejercicio en estera y suplementados con vitamina "E" / Determination of equine's LDL cholesterol by spectrophotometry submitted to exercise on treadmill and supplemented with vitamin "E" / Determinação dos valores de colesterol-LDL de equinos por espectrofotometria submetidos a exercício em esteira e suplementados com vitamina "E"

La lipoproteína de baja densidad (LDL) esparte de un grupo de lipoproteínas que en la naturaleza anfifílica, son responsables de transportar el colesterol en plasma, siendo el arratre importante, ya que el colesterol es insoluble en el plasma sanguíneo. Se sabe que la fuente de alimentación principal de los caballos a la contracción basal del músculo, se obtiene a partir de los ácidos grasos libres del tejido adiposo y los cuerpos cetónicos, productos de rotura de los ácidos grasos del hígado, un proceso que genera especies reactivas de oxígeno (ROS), que, en exceso, conduce a estrés oxidativo celular. Para evitar el daño resultante de este proceso, el cuerpo tiene un sistema de defensa antioxidante, que incluye la participación de la vitamina E (DL-α-tocoferol). Cuando LDL es alta, el colesterol puede ser depositado en el lumen de los vasos sanguíneos, lo que reduce su tamaño y por lo tanto puede causar el endurecimiento de la pared del vaso sanguíneo y la formación de placas de ateroma en los caballos. Normalmente, los valores de colesterol LDL que se obtienen mediante la ecuación de Friedewald, por lo que este estudio tuvo como objetivo determinar los niveles de colesterol LDL por espectrofotometría en caballos sometidos a ejercicio en estera y suplementados con vitamina "E". Para esto diez caballos sanos fueron seleccionados de la raza Criollo y Àrabe, en el que las muestras se procesaron por duplicado utilizando los kits comerciales de LDL directa (BioClin®) por medio de espectrofotómetro semi-automática BA-88A (Mindray®). Este estudio no presentó una diferencia estadísticamente significativa entre el tiempo analizado y no con la administración de suplementos de vitamina "E" con el protocolo establecido.

Low density lipoprotein (LDL) is part of a group of lipoproteins which in amphiphilic nature, are responsible for transporting cholesterol plasma, it is important entraiment, since cholesterol is insoluble in blood plasma. It is known that the main power source of the horses to the basal contraction of the muscle, is obtained from the free fatty acids from adipose tissue and ketone bodies, breakage products of fatty acids from the liver, a process that generates species reactive oxygen (ROS), which, in excess, leads to cellular oxidative stress. To avoid the resulting damage of this process, the body has an antioxidant defense system, which includes the participation of vitamin E (dl-α-tocopherol). When LDL is high, cholesterol can be deposited in the lumen of blood vessels, reducing their size and can thus cause the hardening of the blood vessel wall and the formation of atheroma in horses. Normally, the values that LDL cholesterol are obtained by the Friedewald equation, so this study aimed to determine the LDL cholesterol levels by spectrophotometry in horses submitted to exercise on a treadmill and supplemented with vitamin "E". To this ten healthy Arabe and Criolo horses were selected. The samples were processed in duplicate using the Direct LDL commercial kits (BioClin®) by means of semi-automatic spectrophotometer BA-88A (Mindray®). This study did not present a statistically significant difference between the analyzed time and not with vitamin supplementation "E" with the established protocol.

A lipoproteína de baixa densidade (LDL) faz parte de um grupo de lipoproteínas que, por sua natureza anfifílica, são responsáveis pelo transporte de colesterol plasmático, sendo esse carreamento importante, uma vez que o colesterol é insolúvel no plasma sanguíneo. Sabe-se que a principal fonte de energia dos cavalos, para a contração basal dos músculos, é obtida a partir dos ácidos graxos livres proveniente do tecido adiposo e os corpos cetônicos, produtos da quebra de ácidos graxos provenientes do fígado, processo que gera espécies reativas de oxigênio (ERO), que, em excesso, leva a um estresse oxidativo celular. Para evitar o dano resultante desse processo, o organismo tem um sistema de defesa antioxidantes, que conta com a participação da vitamina E (dl-α-tocoferol). Quando a LDL se encontra elevada, o colesterol pode se depositar na luz dos vasos sanguíneos, diminuindo o seu calibre e podendo, desse modo, causar o enrijecimento da parede do vaso sanguíneo e a formação de placas de ateroma nos cavalos. Normalmente, os valores desse colesterol LDL são obtidos pela equação de Friedewald, por isso neste estudo objetivou-se determinar os valores de colesterol LDL por espectrofotometria em equinos submetidos à exercício físico em esteira e suplementados com vitamina “E”. Para tal, foram selecionados dez cavalos hígidos da raça Árabe e Crioulo, em que as amostras foram processadas em duplicata utilizando os kits comerciais LDL Direto (BioClin®) por meio de espectrofotômetro semiautomático BA-88A (Mindray®). Neste estudo, não se obteve diferença estatística significante entre os tempos analisados e nem com a suplementação de vitamina “E”, com o protocolo estabelecido.

Determinación de los valores de colesterol LDL equina por espectrofotométrica sometidos a ejercicio en estera y suplementados con vitamina "E" / Determination of equine's LDL cholesterol by spectrophotometry submitted to exercise on treadmill and supplemented with vitamin "E" / Determinação dos valores de colesterol-LDL de equinos por espectrofotometria submetidos a exercício em esteira e suplementados com vitamina "E"

La lipoproteína de baja densidad (LDL) esparte de un grupo de lipoproteínas que en la naturaleza anfifílica, son responsables de transportar el colesterol en plasma, siendo el arratre importante, ya que el colesterol es insoluble en el plasma sanguíneo. Se sabe que la fuente de alimentación principal de los caballos a la contracción basal del músculo, se obtiene a partir de los ácidos grasos libres del tejido adiposo y los cuerpos cetónicos, productos de rotura de los ácidos grasos del hígado, un proceso que genera especies reactivas de oxígeno (ROS), que, en exceso, conduce a estrés oxidativo celular. Para evitar el daño resultante de este proceso, el cuerpo tiene un sistema de defensa antioxidante, que incluye la participación de la vitamina E (DL-α-tocoferol). Cuando LDL es alta, el colesterol puede ser depositado en el lumen de los vasos sanguíneos, lo que reduce su tamaño y por lo tanto puede causar el endurecimiento de la pared del vaso sanguíneo y la formación de placas de ateroma en los caballos. Normalmente, los valores de colesterol LDL que se obtienen mediante la ecuación de Friedewald, por lo que este estudio tuvo como objetivo determinar los niveles de colesterol LDL por espectrofotometría en caballos sometidos a ejercicio en estera y suplementados con vitamina "E". Para esto diez caballos sanos fueron seleccionados de la raza Criollo y Àrabe, en el que las muestras se procesaron por duplicado utilizando los kits comerciales de LDL directa (BioClin®) por medio de espectrofotómetro semi-automática BA-88A (Mindray®). Este estudio no presentó una diferencia estadísticamente significativa entre el tiempo analizado y no con la administración de suplementos de vitamina "E" con el protocolo establecido.(AU)

Low density lipoprotein (LDL) is part of a group of lipoproteins which in amphiphilic nature, are responsible for transporting cholesterol plasma, it is important entraiment, since cholesterol is insoluble in blood plasma. It is known that the main power source of the horses to the basal contraction of the muscle, is obtained from the free fatty acids from adipose tissue and ketone bodies, breakage products of fatty acids from the liver, a process that generates species reactive oxygen (ROS), which, in excess, leads to cellular oxidative stress. To avoid the resulting damage of this process, the body has an antioxidant defense system, which includes the participation of vitamin E (dl-α-tocopherol). When LDL is high, cholesterol can be deposited in the lumen of blood vessels, reducing their size and can thus cause the hardening of the blood vessel wall and the formation of atheroma in horses. Normally, the values that LDL cholesterol are obtained by the Friedewald equation, so this study aimed to determine the LDL cholesterol levels by spectrophotometry in horses submitted to exercise on a treadmill and supplemented with vitamin "E". To this ten healthy Arabe and Criolo horses were selected. The samples were processed in duplicate using the Direct LDL commercial kits (BioClin®) by means of semi-automatic spectrophotometer BA-88A (Mindray®). This study did not present a statistically significant difference between the analyzed time and not with vitamin supplementation "E" with the established protocol.(AU)

A lipoproteína de baixa densidade (LDL) faz parte de um grupo de lipoproteínas que, por sua natureza anfifílica, são responsáveis pelo transporte de colesterol plasmático, sendo esse carreamento importante, uma vez que o colesterol é insolúvel no plasma sanguíneo. Sabe-se que a principal fonte de energia dos cavalos, para a contração basal dos músculos, é obtida a partir dos ácidos graxos livres proveniente do tecido adiposo e os corpos cetônicos, produtos da quebra de ácidos graxos provenientes do fígado, processo que gera espécies reativas de oxigênio (ERO), que, em excesso, leva a um estresse oxidativo celular. Para evitar o dano resultante desse processo, o organismo tem um sistema de defesa antioxidantes, que conta com a participação da vitamina E (dl-α-tocoferol). Quando a LDL se encontra elevada, o colesterol pode se depositar na luz dos vasos sanguíneos, diminuindo o seu calibre e podendo, desse modo, causar o enrijecimento da parede do vaso sanguíneo e a formação de placas de ateroma nos cavalos. Normalmente, os valores desse colesterol LDL são obtidos pela equação de Friedewald, por isso neste estudo objetivou-se determinar os valores de colesterol LDL por espectrofotometria em equinos submetidos à exercício físico em esteira e suplementados com vitamina “E”. Para tal, foram selecionados dez cavalos hígidos da raça Árabe e Crioulo, em que as amostras foram processadas em duplicata utilizando os kits comerciais LDL Direto (BioClin®) por meio de espectrofotômetro semiautomático BA-88A (Mindray®). Neste estudo, não se obteve diferença estatística significante entre os tempos analisados e nem com a suplementação de vitamina “E”, com o protocolo estabelecido.(AU)

Spectrophotometry and Ultracentrifugation for Measurement of Plasma Lipids in Dogs with Diabetes Mellitus.

BACKGROUND: There are conflicting reports of plasma lipoprotein lipid content in dogs with diabetes mellitus (DM). OBJECTIVES: To determine lipoprotein lipid content of plasma of dogs with DM by spectrophotometry and ultracentrifugation; to compare lipoprotein lipid content in diabetic and healthy dogs; and to quantify apolipoprotein B-100 (ApoB) in dogs with DM. ANIMALS: 22 dogs with DM and 9 healthy dogs. METHODS: Cross-sectional study. Triglyceride (TG), total cholesterol (TC), and high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) concentrations were measured by spectrophotometry. Very low-density lipoprotein cholesterol (VLDL-C) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) concentrations were calculated after ultracentrifugation. Non-HDL-C cholesterol was calculated by subtracting HDL-C from TC. ApoB was quantified by ELISA. The Mann-Whitney test was used for comparison of median lipoprotein concentrations, and Spearman's correlation was used to assess associations between ApoB and lipoprotein fractions. RESULTS: All values are reported in mg/dL. Median TG (122), TC (343.5), HDL-C, (200), VLDL-C, (27) LDL-C (68), non-HDL-C (114), and ApoB (320) were significantly higher in dogs with DM, compared to healthy dogs (57, 197, 168, 12, 16, 31, and 258, respectively, P-values 0.0079, <0.001, 0.029, 0.011, <0.001, <0.001, 0.025, respectively). A significant association was found between ApoB and LDL-C (Spearman's rho = 0.41, P = 0.022) and between ApoB and non-HDL-C (Spearman's rho = 0.40, P = 0.027). CONCLUSIONS AND CLINICAL IMPORTANCE: Dyslipidemia of dogs with DM is characterized by pronounced increases in LDL-C and non-HDL-C concentrations, although all lipoprotein fractions are significantly increased. Knowledge of specific lipoprotein fraction alterations in dogs with DM can enhance treatment options for diabetic dyslipidemia in dogs.

Feline Toxoplasmosis: Tumor Necrosis Factor, Nitric Oxide, and Free Radicals in Seropositive Cats.

Toxoplasma gondii is a cosmopolitan protozoan that causes disease in several species, including humans. In cats, these infections are usually asymptomatic, but in other species they can lead to high levels of inflammatory and cell damage markers, causing cellular damage. Therefore, the aim of this study was to measure levels of tumor necrosis factor (TNF-α), reactive oxygen species (ROS), and nitric oxide (nitrite/nitrate-NOx) in the serum of cats seropositive for T. gondii. Initially, we investigated the presence of antibodies against T. gondii in cats in the city of Concordia, Santa Catarina, Brazil, with the use of indirect immunofluorescence (IFA), and found 30 cats seropositive for T. gondii and 30 seronegative cats. In this study, seropositive cats showed higher levels of TNF-α, ROS, and NOx compared to seronegative cats. Although cats do not show clinical signs of disease, constant inflammatory response can cause cell damage, which over time may adversely affect the animal.

Adulterants interference on Fourier Transform Infrared analysis of raw milk / Interferência de adulterantes na análise do leite cru por espectroscopia pela transformada de Fourier

O objetivo deste trabalho foi analisar as leituras de composição do leite cru por meio de espectrofotometria FTIR, utilizando-se curva de regressão PLS, bem como as contagens de células somáticas e bacteriana total por citometria de fluxo, após adição de amido e sacarose. O leite cru foi adulterado com três concentrações de amido e sacarose (0,1%, 0,5% e 1%), colocado em frascos contendo bronopol ou azidiol, os quais foram armazenados em duas temperaturas (7±2°C e 25±2°C ). As análises foram realizadas após zero, três, 24, 48, 72 e 168 horas de armazenamento. O modelo de regressão linear múltipla foi utilizado para análise estatística. A adição de amido e sacarose resultou em mudança significativa (P<0,05) para todas as variáveis dependentes. O leite adulterado com amido resultou em aumento nas leituras de gordura, proteína, lactose, sólidos totais (ST), sólidos não gordurosos (SNG), CCS e CBT e em diminuição das leituras de caseína, do nitrogênio ureico do leite (NUL) e do ponto de congelamento. O leite adulterado com sacarose resultou no aumento das leituras da lactose, ST, SNG e NUL, enquanto as leituras de proteína, caseína, ponto de congelamento e CCS diminuíram. Este trabalho evidencia a importância do monitoramento de adulterantes reconstituintes no leite por afetarem os resultados analíticos da qualidade do leite, obtidos por métodos eletrônicos.(AU)

Adulterants interference on Fourier Transform Infrared analysis of raw milk / Interferência de adulterantes na análise do leite cru por espectroscopia pela transformada de Fourier

O objetivo deste trabalho foi analisar as leituras de composição do leite cru por meio de espectrofotometria FTIR, utilizando-se curva de regressão PLS, bem como as contagens de células somáticas e bacteriana total por citometria de fluxo, após adição de amido e sacarose. O leite cru foi adulterado com três concentrações de amido e sacarose (0,1%, 0,5% e 1%), colocado em frascos contendo bronopol ou azidiol, os quais foram armazenados em duas temperaturas (7±2°C e 25±2°C ). As análises foram realizadas após zero, três, 24, 48, 72 e 168 horas de armazenamento. O modelo de regressão linear múltipla foi utilizado para análise estatística. A adição de amido e sacarose resultou em mudança significativa (P<0,05) para todas as variáveis dependentes. O leite adulterado com amido resultou em aumento nas leituras de gordura, proteína, lactose, sólidos totais (ST), sólidos não gordurosos (SNG), CCS e CBT e em diminuição das leituras de caseína, do nitrogênio ureico do leite (NUL) e do ponto de congelamento. O leite adulterado com sacarose resultou no aumento das leituras da lactose, ST, SNG e NUL, enquanto as leituras de proteína, caseína, ponto de congelamento e CCS diminuíram. Este trabalho evidencia a importância do monitoramento de adulterantes reconstituintes no leite por afetarem os resultados analíticos da qualidade do leite, obtidos por métodos eletrônicos.(AU)

Cattle naturally infected by Eurytrema coelomaticum: Relation between adenosine deaminase activity and zinc levels.

The enzyme adenosine deaminase (ADA) is critical for modulating the immune system, and in the presence of zinc, its activity is catalyzed. The aim of this study was to evaluate the ADA activity in pancreas of cattle naturally infected by Eurytrema coelomaticum in relation to the results of zinc levels, pathological findings and parasite load. For this study 51 slaughtered cattle were used. The animals were divided into two groups: Group A consisting of animals naturally infected by E. coelomaticum (n=33) and Group B of uninfected animals (n=18). Blood and pancreas were collected of each animal for analysis of zinc and ADA, respectively. Infected cattle showed a reduction on seric levels of zinc, and decreased ADA activity in the pancreas (P>0.05). A positive correlation between zinc levels and ADA activity was observed. Thus, high parasite load and severity of histopathologic lesions affect the ADA activity in pancreas, as well as the zinc levels in serum of infected animals (negative correlation between these variables). Therefore, we can conclude that cattle infected by E. coelomaticum have low ADA activity in pancreas, which can be directly related to zinc reduction, responsible for ADA activation and catalyzes.

Determinación de la concentración de Mycobacterium por espectrofotometría / Determination of Mycobacterium fortuitum concentration by spectrophotometry / Determinação da concentração de Mycobacterium fortuitum através da espectrofotometria

Mycobacterium fortuitum es agente causante de enfermidad oportunista en humanos y animales. Es un agente biológico modelo para estudios experimentales que sustituy Mycobacterium bovis, que es más patógeno. Este estudio presenta una metodología alternativa para el recuento de unidades formadoras de colonias por mililitro de inóculo para determinar la concentración de Mycobacterium fortuitum usando espectrofotometría. Catorce muestras se utilizaron Mycobacterium fortuitum, cultivadas en Lowesntein-Jensen, ocho de ellos de siete días de cultivo, y la otra entre 8 y 14 días en la cultura. Todas las muestras se colocaron en placas y se incubaron a 37o.C durante 7 días en un invernadero. De cada muestra se hicieron lecturas las variables de absorbancia (Abs) y transmitancia (T%) en un espectrofotómetro, a una longitud de onda de 560 nm y 600 nm. La comparación de los valores de UFC, ABS y T% por análisis de regresión lineal simple, el estadístico SAS versión 8.2 del software, hubo una fuerte evidencia estadística de que el aumento del valor de transmitancia se asocia con la disminución en el valor de UFC chapado, siguiendo el modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21,012 - 0,1936 * transmitancia, con p = 0,0025 y una repetibilidad de más de 80%.

Mycobacterium fortuitum is an opportunistic agent which causes disease in human and animals. It is also a biological model for experimental studies instead of using Mycobacterium bovis, which is more pathogenic. This work presents an alternative methodology using spectrophotometry to count colony forming units (CFU) per milliliter of inoculum, in order to determinate Mycobacterium fortuitum concentration. Fourteen Mycobacterium fortuitum samples were cultivated in Lowenstein-Jensen culture media, considering that eight of them were seven days old cultures and the others were between eight and 14 days old. All samples were seeded and incubated at 37o.C for 7 days in an incubator. For each sample, the variables absorbance (Abs) and transmitance (T%) were read with an spectrophotometer and wave length of 560nm and 600nm. When the values of CFU, Abs and T% were compared through simple linear regression analysis and using the statistic software SAS Version 8.2., it was observed strong statistical evidence that the increase of transmitance value is associated to the decrease of CFU plate values, according to the mathematic model: LOG10 (CFU) = 21.012 - 0.1936*Transmitance, and p value = 0.0025 and a repeatability over 80%.

O Mycobacterium fortuitum é um agente oportunista causador de doença em humanos e animais. Além disso, é um modelo biológico para estudos experimentais em substituição ao Mycobacterium bovis, que é mais patogênico. Este estudo apresenta metodologia alternativa à contagem de unidades formadoras de colônia por mililitro de inóculo, para determinar a concentração do Mycobacterium fortuitum utilizando espectrofotometria. Utilizaram-se 14 amostras de Mycobacterium fortuitum, cultivadas em meio Lowesntein-Jensen, sendo oito delas com sete dias de cultivo e as demais entre oito e 14 dias de cultivo. Todas as amostras foram semeadas e incubadas a 37o.C por 7 dias em estufa. Fizeram-se, de cada amostra, leituras das variáveis absorbância (Abs) e transmitância (T%) em espectrofotômetro, nos comprimentos de onda de 560nm e 600nm. Comparando-se os valores obtidos de UFC, Abs e T% por meio da análise de regressão linear simples, pelo programa estatístico SAS versão 8.2, observou-se forte evidência estatística que o aumento do valor da transmitância está associado com o decréscimo do valor de UFC em placas, seguindo o modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21.012 - 0.1936*Transmitância, com valor de p = 0,0025 e uma repetibilidade de mais de 80%.

Determinación de la concentración de Mycobacterium por espectrofotometría / Determination of Mycobacterium fortuitum concentration by spectrophotometry / Determinação da concentração de Mycobacterium fortuitum através da espectrofotometria

Mycobacterium fortuitum es agente causante de enfermidad oportunista en humanos y animales. Es un agente biológico modelo para estudios experimentales que sustituy Mycobacterium bovis, que es más patógeno. Este estudio presenta una metodología alternativa para el recuento de unidades formadoras de colonias por mililitro de inóculo para determinar la concentración de Mycobacterium fortuitum usando espectrofotometría. Catorce muestras se utilizaron Mycobacterium fortuitum, cultivadas en Lowesntein-Jensen, ocho de ellos de siete días de cultivo, y la otra entre 8 y 14 días en la cultura. Todas las muestras se colocaron en placas y se incubaron a 37o.C durante 7 días en un invernadero. De cada muestra se hicieron lecturas las variables de absorbancia (Abs) y transmitancia (T%) en un espectrofotómetro, a una longitud de onda de 560 nm y 600 nm. La comparación de los valores de UFC, ABS y T% por análisis de regresión lineal simple, el estadístico SAS versión 8.2 del software, hubo una fuerte evidencia estadística de que el aumento del valor de transmitancia se asocia con la disminución en el valor de UFC chapado, siguiendo el modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21,012 - 0,1936 * transmitancia, con p = 0,0025 y una repetibilidad de más de 80%.(AU)

Mycobacterium fortuitum is an opportunistic agent which causes disease in human and animals. It is also a biological model for experimental studies instead of using Mycobacterium bovis, which is more pathogenic. This work presents an alternative methodology using spectrophotometry to count colony forming units (CFU) per milliliter of inoculum, in order to determinate Mycobacterium fortuitum concentration. Fourteen Mycobacterium fortuitum samples were cultivated in Lowenstein-Jensen culture media, considering that eight of them were seven days old cultures and the others were between eight and 14 days old. All samples were seeded and incubated at 37o.C for 7 days in an incubator. For each sample, the variables absorbance (Abs) and transmitance (T%) were read with an spectrophotometer and wave length of 560nm and 600nm. When the values of CFU, Abs and T% were compared through simple linear regression analysis and using the statistic software SAS Version 8.2., it was observed strong statistical evidence that the increase of transmitance value is associated to the decrease of CFU plate values, according to the mathematic model: LOG10 (CFU) = 21.012 - 0.1936*Transmitance, and p value = 0.0025 and a repeatability over 80%.(AU)

O Mycobacterium fortuitum é um agente oportunista causador de doença em humanos e animais. Além disso, é um modelo biológico para estudos experimentais em substituição ao Mycobacterium bovis, que é mais patogênico. Este estudo apresenta metodologia alternativa à contagem de unidades formadoras de colônia por mililitro de inóculo, para determinar a concentração do Mycobacterium fortuitum utilizando espectrofotometria. Utilizaram-se 14 amostras de Mycobacterium fortuitum, cultivadas em meio Lowesntein-Jensen, sendo oito delas com sete dias de cultivo e as demais entre oito e 14 dias de cultivo. Todas as amostras foram semeadas e incubadas a 37o.C por 7 dias em estufa. Fizeram-se, de cada amostra, leituras das variáveis absorbância (Abs) e transmitância (T%) em espectrofotômetro, nos comprimentos de onda de 560nm e 600nm. Comparando-se os valores obtidos de UFC, Abs e T% por meio da análise de regressão linear simples, pelo programa estatístico SAS versão 8.2, observou-se forte evidência estatística que o aumento do valor da transmitância está associado com o decréscimo do valor de UFC em placas, seguindo o modelo matemático: LOG10 (UFC) = 21.012 - 0.1936*Transmitância, com valor de p = 0,0025 e uma repetibilidade de mais de 80%.(AU)

Monitoreo de la adquisición de la inmunidad pasiva en corderos con la ingestion voluntaria del colostro por la determinación de la proteína sérica total / Monitoring of acquisition of passive immunity in lambs with voluntary colostrum intake by determining the serum total protein / Monitoramento da aquisição de imunidade passiva em cordeiros com ingestão voluntária de colostro pela determinação da proteína total sérica

Debido a la placenta de los pequeños rumiantes no permitir el paso de inmunoglobulinas para el feto, los recién nacidos reciben anticuerpos exclusivamente a través de la ingestión de calostro durante las primeras horas de vida, lo que garantiza la defensa inmune en el período neonatal hasta que su propio cuerpo sea capaz de producir inmunoglobulinas. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la posibilidad de controlar la adquisición de la inmunidad pasiva en corderos con la ingestión voluntaria de calostro por la determinación de la proteína sérica total (PT) por refractometría. Se utilizaron 17 corderos Santa Inés divididos en dos grupos. En 10 corderos recién nacidos (Grupo Experimental - GE) se evaluaron en el nacimiento y después de 6 horas: el peso, el volumen celular empacado (Ht), la proteína sérica total por refractometría y espectrofotometría, y los valores de albúmina y globulina mediante espectrofotometria.Excepto para la evaluación del peso, los mismos parámetros fueron evaluados en7 corderos nacidos hace 72 horas (Grupo de Referencia - GR) que habían permanecido desde su nacimiento con las madres y con el consumo voluntario de calostro ad libitum. [...](AU)

Due to the small ruminant placenta does not allow passage of immunoglobulins to the fetus, newborns get antibodies exclusively through ingestion of colostrum within the first hours of life, which guarantees the immune defense in the neonatal period until its own body is capable of producing immunoglobulins. The present study aimed to evaluate the possibility to monitor the acquisition of passive immunity in lambs with voluntary ingestion of colostrum by determining serum total protein (TP) by refractometry. They were used 17 Santa Inês lambs divided into two groups. In 10 newborn lambs (Experimental Group - EG) were assessed at birth and after 6 hours: weight, packed cell volume (PCV), serum total protein by refractometry and spectrophotometry, and the fractions of albumin and globulin by spectrophotometry. Except for the evaluation of the weight, the same parameters were evaluated in 7 newborn lambs with 72 hours (Reference Group - RG) who had remained since birth with mothers and voluntary intake of colostrum ad libitum. Data were analyzed using descriptive statistics by determining the measure of central tendency and their dispersions, the means were compared by T test, settling for some variables, the Pearson correlation coefficient. [...](AU)

Devido à placenta dos pequenos ruminantes não permitir a passagem de imunoglobulinas para o feto, os neonatos adquirem anticorpos exclusivamente através da ingestão do colostro nas primeiras horas de vida, o que garante a defesa imunológica no período neonatal até que seu próprio organismo seja capaz de produzir imunoglobulinas. Com o presente estudo objetivou-se avaliar a possibilidade de monitorar a aquisição da imunidade passiva em cordeiros com ingestão voluntária do colostro através da determinação sérica de proteína total (PT) por refratometria. Foram utilizados 17 cordeiros da raça Santa Inês divididos em dois grupos. Em 10 cordeiros recém-nascidos (Grupo Experimental - GE) foram avaliados ao nascimento e após 6 horas, peso, volume globular (HT), proteínas totais séricas, por refratometria e espectrofotometria, e as frações de albumina e globulina séricas por espectrofotometria e em 7 cordeiros nascidos há 72 horas (Grupo Referência - GR) que haviam permanecido desde o nascimento com as mães e com ingestão voluntária de colostro ad libitum, foram obtidos os valores séricos de PT por refratometria e espectrofotometria e valores de albumina e globulina séricas por espectrofotometria. [...](AU)

Efeito alcalinizante da solução de Ringer com lactato em ovelhas sadias e acidóticas / Alkalinizing effect of lactated Ringer's solution in healthy and acidotic sheep

O estudo teve o objetivo de testar a hipótese de que o efeito alcalinizante da solução de Ringer com lactato (SRL) pode ser maior nos animais portadores de acidose metabólica do que nos sadios, como consequência da necessidade de retorno ao equilíbrio. Seis ovelhas receberam a SRL em volume correspondente a 10% do peso corporal, administrada por infusão contínua intravenosa, durante quatro horas, em duas condições definidas: enquanto eram saudáveis e após a indução experimental de acidose láctica ruminal aguda (ALRA). Amostras de sangue venoso e de urina foram colhidas em quatro momentos: antes do início da infusão, na metade do volume infundido, ao término da infusão e duas horas após. Foram determinados valores de pH sanguíneo e urinário, de pCO2, HCO3 - e BE no sangue, de Na+, K+, Cl-, SID, AG, PPT, Atot e lactato L no plasma, e das excreções fracionadas urinárias de Na+, K+, Cl- e lactato L. A SRL provocou hemodiluição, mas não interferiu nos equilíbrios eletrolítico e acidobase das ovelhas sadias. Apesar de eficaz para reverter a desidratação, não foi capaz de corrigir a acidose metabólica presente após a indução da ALRA.

The aim of this study was to investigate if the alkalinizing effect of lactated Ringer's solution (LRS) is greater in animals with metabolic acidosis than in healthy ones, as a result of the need to restore acid-base balance. LRS was intravenously infused in a volume corresponding to 10% of body weight, continously during four hours, in two definite conditions in the same six ewes: when they were healthy and after experimentally induced acute rumen lactic acidosis (ARLA). Venous blood and urine samples were taken in four moments: before the beginning, in the middle, at the end of the infusion and two hours after. Blood and urine pH, blood pCO2, HCO3 - and BE, and plasma Na+, K+, Cl-, TP and L lactate were measured. Na+, K+, Cl- and L lactate fractional clearance and plasma SID, AG, and Atot were calculated. LRS caused hemodilution but didn't change electrolyte and acid-base balances in healthy ewes. When ewes were affected by ARLA, the infusion of this solution was effective for dehydration reversion but was unable to correct metabolic acidosis.

Efeito alcalinizante da solução de Ringer com lactato em ovelhas sadias e acidóticas / Alkalinizing effect of lactated Ringer's solution in healthy and acidotic sheep

O estudo teve o objetivo de testar a hipótese de que o efeito alcalinizante da solução de Ringer com lactato (SRL) pode ser maior nos animais portadores de acidose metabólica do que nos sadios, como consequência da necessidade de retorno ao equilíbrio. Seis ovelhas receberam a SRL em volume correspondente a 10% do peso corporal, administrada por infusão contínua intravenosa, durante quatro horas, em duas condições definidas: enquanto eram saudáveis e após a indução experimental de acidose láctica ruminal aguda (ALRA). Amostras de sangue venoso e de urina foram colhidas em quatro momentos: antes do início da infusão, na metade do volume infundido, ao término da infusão e duas horas após. Foram determinados valores de pH sanguíneo e urinário, de pCO2, HCO3 - e BE no sangue, de Na+, K+, Cl-, SID, AG, PPT, Atot e lactato L no plasma, e das excreções fracionadas urinárias de Na+, K+, Cl- e lactato L. A SRL provocou hemodiluição, mas não interferiu nos equilíbrios eletrolítico e acidobase das ovelhas sadias. Apesar de eficaz para reverter a desidratação, não foi capaz de corrigir a acidose metabólica presente após a indução da ALRA(AU)

The aim of this study was to investigate if the alkalinizing effect of lactated Ringer's solution (LRS) is greater in animals with metabolic acidosis than in healthy ones, as a result of the need to restore acid-base balance. LRS was intravenously infused in a volume corresponding to 10% of body weight, continously during four hours, in two definite conditions in the same six ewes: when they were healthy and after experimentally induced acute rumen lactic acidosis (ARLA). Venous blood and urine samples were taken in four moments: before the beginning, in the middle, at the end of the infusion and two hours after. Blood and urine pH, blood pCO2, HCO3 - and BE, and plasma Na+, K+, Cl-, TP and L lactate were measured. Na+, K+, Cl- and L lactate fractional clearance and plasma SID, AG, and Atot were calculated. LRS caused hemodilution but didn't change electrolyte and acid-base balances in healthy ewes. When ewes were affected by ARLA, the infusion of this solution was effective for dehydration reversion but was unable to correct metabolic acidosis(AU)

Stress response in silver catfish (Rhamdia quelen) exposed to the essential oil of Hesperozygis ringens.

This study investigated the effects of prolonged exposure of silver catfish (Rhamdia quelen) to the essential oil (EO) of Hesperozygis ringens. Ventilatory rate (VR), stress and metabolic indicators, energy enzyme activities, and mRNA expression of adenohypophyseal hormones were examined in specimens that were exposed for 6 h to 0 (control), 30 or 50 µL L(-1) EO of H. ringens in water. Reduction in VR was observed in response to each treatment, but no differences were found between treatments. Plasma glucose, protein, and osmolality increased in fish exposed to 50 µL L(-1). Moreover, lactate levels increased after exposure to both EO concentrations. Plasma cortisol levels were not changed by EO exposure. Fish exposed to 30 µL L(-1) EO exhibited higher glycerol-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH) activity, while exposure to 50 µL L(-1) EO elicited an increase in glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH), fructose-biphosphatase (FBP), and 3-hydroxyacyl-CoA-dehydrogenase (HOAD) activities compared with the control group. Expression of growth hormone (GH) only decreased in fish exposed to 50 µL L(-1) EO, while somatolactin (SL) expression decreased in fish exposed to both concentrations of EO. Exposure to EO did not change prolactin expression. The results indicate that GH and SL are associated with energy reorganization in silver catfish. Fish were only slightly affected by 30 µL L(-1) EO of H. ringens, suggesting that it could be used in practices where a reduction in the movement of fish for prolonged periods is beneficial, i.e., such as during fish transportation.

Adição de óleos de copaíba (Copaifera langisdorffii) e sucupira (Pterodon emarginatus) na alimentação de poedeiras: estabilidade lipídica de gema de ovos armazenados em diferentes temperaturas / Effect of dietary supplementation with oils of copaíba (Copaifera langsdorffii) and sucupira (Pterodon emarginatus): lipid oxidation of egg yolks stored in different temperatures

The aim of this study was to evaluate the antioxidant effect of dietary supplementation of plant oil resins in laying hens on the oxidative stability of cooked egg yolk kept at 4ºC for 30 days, and fresh eggs stored under refrigeration (R) at the same temperature for 60 days or kept in room temperature (RT) for 30 days. Hens were fed corn- and soybean-based diets (15% CP and 2,900 kcal kg-1) and supplemented with two levels of Copaifera langsdorffii oil resin (CP-0.03; 0.06 and 0.09%) or Pterodon emarginatus oil resin (SC-0.03 and 0.06%), plus a negative control (CN). At 37 weeks of age, 667 eggs were collected and randomly distributed in different storage conditions, in natura or cooked. The progression of lipid oxidation of egg yolk in natura was quantified in quadruplicate and cooked egg yolks in duplicate, using pool of 3 egg yolks/treatment to analyze TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) concentration in quadruplicate. Data analysis was performed using a mixed model and Tukey test, at a 5% significance level. The storage period was considered a longitudinal factor, which varied from five times, for R cooked yolk and TA fresh yolk (0-30 days), to nine times, for R fresh yolk (0-60 days). For fresh eggs stored at RT or R, the supplementation of plant oils did not protect egg yolks from lipid oxidation, compared to NC. However, for cooked egg yolks, the addition of 0.03 and 0.06% of CP oil resin showed antioxidant activity since it reduced lipid oxidation up to day 21 of storage, but had a prooxidant effect for 0.09%. Therefore, it can be concluded that the supplementation of copaíba oil resin had an antioxidant protection of cooked egg lipids...

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antioxidante da adição de óleos de copaíba (CP) e sucupira (SC) na alimentação de poedeiras sobre a oxidação lipídica de ovos in natura armazenados em temperatura ambiente (TA) por 30 dias e sob refrigeração (R) a 4ºC por 60 dias, e de gemas cozidas mantidas sob R por 30 dias. As poedeiras foram alimentadas com ração isoproteica (15% PB) e isoenergética (2900 kcal kg-1) à base de milho e farelo de soja, com inclusão de óleo de Copaifera langsdorffii (CP) nas proporções de 0,03; 0,06 e 0,09% ou de Pterodon emarginatus (SC) nas proporções de 0,03 e 0,06%, mais um controle negativo (CN). Foram coletados 667 ovos às 37 semanas de idade e distribuídos aleatoriamente nas diferentes condições de armazenamento (TA ou R). A oxidação dos lipídios de ovos in natura foi quantificada em quadruplicata e das gemas cozidas em duplicata, utilizando-se pool de 3 gemas/tratamento para as análises de TBARS (thiobarbituric acid reactive substances). Os dados foram avaliados adotando um modelo misto e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey em 5% de nível de significância e o período de armazenamento foi considerado como um fator longitudinal, variando de cinco tempos no experimento com gemas cozidas, e nos ovos in natura sob R e em TA (0 a 30 dias), até nove tempos sob R (0 a 60 dias). Foi observado que a adição de óleo de CP e SC não reduziu os valores de TBARS em ovos in natura armazenados em TA e sob R em relação ao CN. No armazenamento de gemas cozidas, a inclusão CP (0,03 e 0,06%) protegeu os lipídios até os 21 dias, mas apresentou efeito pró-oxidante quando suplementado a 0,09%. Concluiu-se que a inclusão de até 0,06% de óleorresina de CP nas rações de poedeiras pode proteger os lipídios da gema cozida contra a oxidação durante o armazenamento refrigerado por até 21 dias...

Adição de óleos de copaíba (Copaifera langisdorffii) e sucupira (Pterodon emarginatus) na alimentação de poedeiras: estabilidade lipídica de gema de ovos armazenados em diferentes temperaturas / Effect of dietary supplementation with oils of copaíba (Copaifera langsdorffii) and sucupira (Pterodon emarginatus): lipid oxidation of egg yolks stored in different temperatures

The aim of this study was to evaluate the antioxidant effect of dietary supplementation of plant oil resins in laying hens on the oxidative stability of cooked egg yolk kept at 4ºC for 30 days, and fresh eggs stored under refrigeration (R) at the same temperature for 60 days or kept in room temperature (RT) for 30 days. Hens were fed corn- and soybean-based diets (15% CP and 2,900 kcal kg-1) and supplemented with two levels of Copaifera langsdorffii oil resin (CP-0.03; 0.06 and 0.09%) or Pterodon emarginatus oil resin (SC-0.03 and 0.06%), plus a negative control (CN). At 37 weeks of age, 667 eggs were collected and randomly distributed in different storage conditions, in natura or cooked. The progression of lipid oxidation of egg yolk in natura was quantified in quadruplicate and cooked egg yolks in duplicate, using pool of 3 egg yolks/treatment to analyze TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) concentration in quadruplicate. Data analysis was performed using a mixed model and Tukey test, at a 5% significance level. The storage period was considered a longitudinal factor, which varied from five times, for R cooked yolk and TA fresh yolk (0-30 days), to nine times, for R fresh yolk (0-60 days). For fresh eggs stored at RT or R, the supplementation of plant oils did not protect egg yolks from lipid oxidation, compared to NC. However, for cooked egg yolks, the addition of 0.03 and 0.06% of CP oil resin showed antioxidant activity since it reduced lipid oxidation up to day 21 of storage, but had a prooxidant effect for 0.09%. Therefore, it can be concluded that the supplementation of copaíba oil resin had an antioxidant protection of cooked egg lipids(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antioxidante da adição de óleos de copaíba (CP) e sucupira (SC) na alimentação de poedeiras sobre a oxidação lipídica de ovos in natura armazenados em temperatura ambiente (TA) por 30 dias e sob refrigeração (R) a 4ºC por 60 dias, e de gemas cozidas mantidas sob R por 30 dias. As poedeiras foram alimentadas com ração isoproteica (15% PB) e isoenergética (2900 kcal kg-1) à base de milho e farelo de soja, com inclusão de óleo de Copaifera langsdorffii (CP) nas proporções de 0,03; 0,06 e 0,09% ou de Pterodon emarginatus (SC) nas proporções de 0,03 e 0,06%, mais um controle negativo (CN). Foram coletados 667 ovos às 37 semanas de idade e distribuídos aleatoriamente nas diferentes condições de armazenamento (TA ou R). A oxidação dos lipídios de ovos in natura foi quantificada em quadruplicata e das gemas cozidas em duplicata, utilizando-se pool de 3 gemas/tratamento para as análises de TBARS (thiobarbituric acid reactive substances). Os dados foram avaliados adotando um modelo misto e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey em 5% de nível de significância e o período de armazenamento foi considerado como um fator longitudinal, variando de cinco tempos no experimento com gemas cozidas, e nos ovos in natura sob R e em TA (0 a 30 dias), até nove tempos sob R (0 a 60 dias). Foi observado que a adição de óleo de CP e SC não reduziu os valores de TBARS em ovos in natura armazenados em TA e sob R em relação ao CN. No armazenamento de gemas cozidas, a inclusão CP (0,03 e 0,06%) protegeu os lipídios até os 21 dias, mas apresentou efeito pró-oxidante quando suplementado a 0,09%. Concluiu-se que a inclusão de até 0,06% de óleorresina de CP nas rações de poedeiras pode proteger os lipídios da gema cozida contra a oxidação durante o armazenamento refrigerado por até 21 dias(AU)

Digestibility marker and ileal amino acid digestibility in phytase-supplemented soybean or canola meals for growing pigs.

Two experiments using soybean meal (SBM) or canola meal (CM) were conducted to investigate whether the choice of digestibility marker influenced the apparent ileal digestibility (AID) or standardized ileal digestibility (SID) of N and AA in diets supplemented with phytase. In each experiment, 18 barrows fitted with T-cannulas at the ileocecal junction were assigned to 3 diets consisting of a N-free diet to determine endogenous losses of N and AA, a semipurified diet (SBM in Exp. 1 or CM in Exp. 2), and the semipurified diet supplemented with phytase at 1,000 phytase units/kg. Three digestibility markers including acid-insoluble ash (AIA), chromic oxide (Cr2O3), and titanium dioxide (TiO2) were added to each diet at 3 g/kg. Each diet was fed for 7 d, consisting of a 5-d adjustment and a 2-d collection of ileal digesta. In both studies, basal ileal endogenous losses determined with Cr2O3 as a digestibility marker were lower (P<0.01) than with those determined with AIA or TiO2 digestibility markers. Using SBM as the protein source in Exp. 1, there was no interaction between phytase and digestibility marker on AID or SID of AA. The AID of N and AA in SBM using AIA as a digestibility marker tended to be lower (P<0.1) compared with Cr2O3 or TiO2 digestibility markers. Phytase supplementation increased (P<0.001) the AID of Ca and P. The use of AIA or Cr2O3 digestibility marker tended to be associated with lower (P<0.1) SID values compared with TiO2. Phytase did not affect the SID of N or any AA in SBM except for Met, for which there was an increase (P<0.05) with phytase supplementation. Using CM as the protein source in Exp. 2, there were significant interactions between digestibility marker and phytase. Phytase supplementation had effects (P<0.01) on AID or SID when Cr2O3 or TiO2 was used as the digestibility marker. With Cr2O3 or TiO2 as the digestibility marker in the CM diets, phytase supplementation increased (P<0.05) the SID of N and all AA (except Trp). There was no SID of N or AA response to phytase supplementation of CM when AIA was used as a digestibility marker. In contrast, there were no clear improvements in AA digestibility from phytase supplementation for SBM. Phytase effects on AID or SID of AA were dependent on the digestibility marker used in diets when CM was used as the protein source but not when SBM was used as the protein source. Therefore, AA digestibility response to phytase supplementation may depend on the protein being evaluated as well as the choice of digestibility marker.

A family of serine protease inhibitors (serpins) in the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

Proteins belonging to the serine protease inhibitor (serpin) superfamily play essential roles in many organisms. In arthropods these proteins are involved in innate immune system, morphogenesis and development. In mammals serpins regulate pathways that are essential to life such as blood coagulation, fibrinolysis, inflammation and complement activation, some of which are considered the host's first line of defense to hematophagous and/or blood dueling parasites. Thus, it is hypothesized that ticks use serpins to evade host defense, facilitating parasitism. This study describes eighteen full-length cDNA sequences encoding serpins identified in Rhipicephalus (Boophilus) microplus, here named RmS 1-18 (R. microplus serpin). Spatial and temporal transcriptional profiling demonstrated that R. microplus serpins are transcribed during feeding, suggesting their participation in tick physiology regulation. We speculate that the majority of R. microplus serpins are conserved in other ticks, as indicated by phylogeny analysis. Over half of the 18 RmSs are putatively functional in the extracellular environment, as indicated by putative signal peptides on 11 of 18 serpins. Comparative modeling and structural-based alignment revealed that R. microplus serpins in this study retain the consensus secondary of typical serpins. This descriptive study enlarges the knowledge on the molecular biology of R. microplus, an important tick species.