Survival in a pediatric patient with cerebral aspergillosis: A case report.

Aspergillosis is an infrequent infection in the Central Nervous System with a mortality rate higher than 95 %. Early diagnosis is challenging and crucial. In this report, we present the case of a six-year-old female with an intense headache accompanied by left hemiparesis, gaze deviation, horizontal nystagmus, and vomiting of mucous content on five occasions. After several approaches, a cerebrospinal fluid PCR resulted positive for Aspergillus spp., and then management started with amphotericin B at 2.6 mg/kg/day and was managed to have voriconazole. She survived, and two years after her first hospital admission, she suffered from cerebral aspergillosis sequelae. An area of improvement is the coordination between the request and delivery of studies outside the institution. In this case, the patient´s mother did not report the analysis results on time, delaying the diagnosis.

A Growth-Based, High-Throughput Selection Platform Enables Remodeling of 4-Hydroxybenzoate Hydroxylase Active Site.

We report an aerobic, growth-based selection platform founded on NADP(H) redox balance restoration in Escherichia coli, and we demonstrate its application in the high-throughput evolution of an oxygenase. A single round of selection followed by a facile growth assay enabled Pseudomonas aeruginosa 4-hydroxybenzoate hydroxylase (PobA) to efficiently hydroxylate both 4-hydroxybenzoic acid (4-HBA) and 3,4-dihydroxybenzoic acid (3,4-DHBA), two consecutive steps in gallic acid biosynthesis. Structural modeling suggests precise reorganization of active site hydrogen bond network, which is difficult to obtain without deep navigation of combinatorial sequence space. We envision universal application of this selection platform in engineering NADPH-dependent oxidoreductases.

In Vivo, High-Throughput Selection of Thermostable Cyclohexanone Monooxygenase (CHMO).

Cyclohexanone monooxygenase (CHMO) from Acinetobacter sp. NCIMB 9871 is characterized as having wide substrate versatility for the biooxidation of (cyclic) ketones into esters and lactones with high stereospecificity. Despite industrial potential, CHMO usage is restricted by poor thermostability. Limited high-throughput screening tools and challenges in rationally engineering thermostability have impeded CHMO engineering efforts. We demonstrate the application of an aerobic, high-throughput growth selection platform in Escherichia coli (strain MX203) for the discovery of thermostability enhancing mutations for CHMO. The selection employs growth for the easy readout of CHMO activity in vivo, by requiring nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH)-consuming enzymes to restore cellular redox balance. In the presence of the native substrate cyclohexanone, variant CHMO GV (A245G-A288V) was discovered from a random mutagenesis library screened at 42 °C. This variant retained native activity, exhibited ~4.4-fold improvement in residual activity after 30 °C incubation, and demonstrated ~5-fold higher cyclohexanone conversion at 37 °C compared to the wild type. Molecular modeling indicates that CHMO GV experiences more favorable residue packing and supports additional backbone hydrogen bonding. Further rational design resulted in CHMO A245G-A288V-T415C with improved thermostability at 45 °C. Our platform for oxygenase evolution enabled the rapid engineering of protein stability critical for industrial scalability.

Condiciones de intubación, extubación y respuesta hemodinámica a la intubación traqueal: estudio de comparación de dos fármacos para técnicas de anestesia intravenosa total: remifentanilo y ketamina / Intubation and extubation, conditions and haemodynamic response to tracheal intubation. Comparative study of two drugs for total intravenous anaesthesia techniques: remifentanilo and ketamina

Introducción: El objetivo fue comparar dos técnicas, ketamina-fentanilo-midazolam y remifentanilo-midazolam, ambas en goteo y evaluar la dificultad de intubación endotraqueal, los criterios para predecir una extubación exitosa y los efectos sobre la respuesta cardiovascular. Pacientes y Métodos: Fueron estudiados 47 pacientes asignados a dos grupos: Grupo (K) ketamina: n=22, recibieron ketamina 0,1 mg/kg/m durante 10 minutos e Innovan 0,02 ml/kg. Grupo (R) remifentanilo: n=25, recibieron remifentanilo 1 A/kg//m durante 5 minutos. Se utilizó succinilcolina 1,5 mg/kg para la intubación endotraqueal. Variables medidas: Valoración de la dificultad de la intubación (IDS). Parámetros hemodinámicos: Tensión arterial sistólica (TAS), Tensión arterial diastólica (TAD), Frecuencia cardíaca (FC) en los siguientes momentos: MO: antes de las drogas anestésicas; M1: inmediatamente; M2, M3 y M4: 5, 10 y 15 minutos después de la intubación de la tráquea, respectivamente. Análisis estadístico: se consideró significativo p<0.05. Resultados: No se observaron diferencias significativas entre los grupos con relación a los datos demográficos, duración del procedimiento, dificultad para intubación y criterios para predecir una extubación exitosa. Con respecto a los parámetros hemodinámicos, no se detectaron diferencias dentro del grupo K en el estudio a lo largo del tiempo para TAS, TAD, FC y FCxTAS, mientras que el grupo R no se encontraron diferencias significativas entre los TAS (p=0.082), detectándose diferencias significativas para TAD, FC y FCxTAS entre M0 y M1, M2, M3 y M4. Comparación entre los grupos K y R: Se comprobaron diferencias significativas, K>R para TAS, TAD, FC, FCxTAS en M1, M2, M3 y M4. Discusión: El grupo ketamina mostró los valores significativos más elevados; a pesar de esto, no se observaron implicancias fisiológicas o clínicas. Se puede concluir que el remifentanilo provee una estabilidad hemodinámica superior a la ketamina. (AU)

Condiciones de intubación, extubación y respuesta hemodinámica a la intubación traqueal: estudio de comparación de dos fármacos para técnicas de anestesia intravenosa total: remifentanilo y ketamina / Intubation and extubation, conditions and haemodynamic response to tracheal intubation. Comparative study of two drugs for total intravenous anaesthesia techniques: remifentanilo and ketamina

Introducción: El objetivo fue comparar dos técnicas, ketamina-fentanilo-midazolam y remifentanilo-midazolam, ambas en goteo y evaluar la dificultad de intubación endotraqueal, los criterios para predecir una extubación exitosa y los efectos sobre la respuesta cardiovascular. Pacientes y Métodos: Fueron estudiados 47 pacientes asignados a dos grupos: Grupo (K) ketamina: n=22, recibieron ketamina 0,1 mg/kg/m durante 10 minutos e Innovan 0,02 ml/kg. Grupo (R) remifentanilo: n=25, recibieron remifentanilo 1 µ/kg//m durante 5 minutos. Se utilizó succinilcolina 1,5 mg/kg para la intubación endotraqueal. Variables medidas: Valoración de la dificultad de la intubación (IDS). Parámetros hemodinámicos: Tensión arterial sistólica (TAS), Tensión arterial diastólica (TAD), Frecuencia cardíaca (FC) en los siguientes momentos: MO: antes de las drogas anestésicas; M1: inmediatamente; M2, M3 y M4: 5, 10 y 15 minutos después de la intubación de la tráquea, respectivamente. Análisis estadístico: se consideró significativo p<0.05. Resultados: No se observaron diferencias significativas entre los grupos con relación a los datos demográficos, duración del procedimiento, dificultad para intubación y criterios para predecir una extubación exitosa. Con respecto a los parámetros hemodinámicos, no se detectaron diferencias dentro del grupo K en el estudio a lo largo del tiempo para TAS, TAD, FC y FCxTAS, mientras que el grupo R no se encontraron diferencias significativas entre los TAS (p=0.082), detectándose diferencias significativas para TAD, FC y FCxTAS entre M0 y M1, M2, M3 y M4. Comparación entre los grupos K y R: Se comprobaron diferencias significativas, K>R para TAS, TAD, FC, FCxTAS en M1, M2, M3 y M4. Discusión: El grupo ketamina mostró los valores significativos más elevados; a pesar de esto, no se observaron implicancias fisiológicas o clínicas. Se puede concluir que el remifentanilo provee una estabilidad hemodinámica superior a la ketamina.