Acción larvicida de extractos alcohólicos de semilla de Annona Muricata (guanábana) sobre Aedes Aegypti y Aedes Albopictus / Larvicidal action of alcoholic extracts of the seed of Annona Muricata (soursop) on Aedes Aegypti y Aedes Albopictus

Cada vez es más frecuente el reporte de resistencia de diferentes especies de vectores a los insecticidas usados en los programas de control; por ello existe un interés creciente en el desarrollo de productos eficaces, económicos y más amigables con el medio ambiente que permitan el control de los vectores de enfermedades como el dengue. Los extractos crudos obtenidos a partir de diferentes plantas han demostrado poseer actividades larvicidas. El objetivo de esta investigación fue evaluar la actividad larvicida de dos extractos alcohólicos (etanólico y metanólico) obtenidos a partir de las semillas de Annona muricata (guanábana) sobre Ae. aegypti (cepa Rockefeller) y Ae. albopictus exponiéndolas durante 24 h a diferentes diluciones de cada extracto. Las concentraciones letales (CL50) fueron las siguientes: a) para Ae. aegypti 41,8 mg L-1 (LC0,95=34,5-49,2 mg L-1) con el extracto etanólico y 32,8 mg L-1 (LC0,95=27,4-38,4 mg L-1) con el extracto metanólico; y b) para Ae. albopictus 299,6 mg L-1 (LC0,95=224,9-377,3 mg L-1) con el extracto etanólico y 326,1 mg L-1 (LC0,95=209,5-442,4 mg L-1) con extracto metanólico. El análisis de los resultados demostró que el efecto tóxico de ambos extractos sobre las larvas de Aedes fue similar y depende de la especie y de la concentración utilizada. Los resultados apuntan a que los extractos alcohólicos obtenidos a partir de A. muricata son una alternativa para el control de las especies de Aedes presentes en Venezuela.

Reports of resistance of different species of vectors to insecticides used in control programs are every time more frequent. Therefore, there is a growing interest to control harmful vectors (that transmit diseases such as dengue) by developing products that are effective, economical and environment friendly. Crude extracts obtained from different plants have demonstrated larvicidal activities. The objective of this research was to evaluate the larvicidal activity of two alcoholic extracts (ethanol and methanol) obtained from the seeds of Annona muricata (soursop) on Ae. aegypti (strain Rockefeller) and Ae. albopictus, exposed for 24 h to different dilutions of each extract. Lethal concentrations (LC50) were as follows: a) For Ae. aegypti 41.8 mg L-1 (LC0.95 =34.5 to 49.2 mg L-1) with ethanolic extract and 32.8 mg L-1 (LC0.95 =27.4 to 38.4 mg L-1) with methanolic extract; and b) For Ae. albopictus 299.6 mg L-1 (LC0.95=224.9 to 377.3 mg L-1) with ethanolic extract and =326.1 mg L-1 (LC0.95=209.5 to 442.4 mg L-1) with methanolic extract. The analysis of the results showed that the toxic effect of both alcoholic extracts on Aedes was similar and depends on the species and the concentration used. The results suggest that the alcoholic extracts obtained from A. muricata are an alternative for control of Aedes species present in Venezuela.

Effect of Leishmania spp infection on the survival, life expectancy, fecundity and fertility of Lutzomyia longipalpiss.l. and Lutzomyia pseudolongipalpis

We evaluated the effects of Leishmaniaspp infection on several population parameters of Lutzomyia longipalpis sensu lato andLutzomyia pseudolongipalpis, vectors of visceral leishmaniasis in Venezuela, under experimental conditions during the first post-feeding period. Females of both species were allowed to feed and engorge on a suspension of fresh washed human red blood cells in foetal calf serum. These blood cells were either non-infected or infected with one of the fourLeishmaniaspp strains and were offered through a chicken skin membrane. The longevity, life expectancy and the fecundity of uninfected flies were similar in both species, but the fertility was significantly lower in uninfected Lu. longipalpis females. In all cases, the infection of Lu. longipalpis and Lu. pseudolongipalpis by the Leishmaniastrains resulted in significant detrimental effects, which exerted a fitness cost expressed by reduced survival and life expectancy, as well as decreased fertility and fecundity compared with the control groups. Nevertheless, differences in these parameters were observed between these vector species depending on whether they were infected with the autochthonous Venezuelan Leishmania infantum strain (NESA) or the Brazilian reference strain (PP75). The experimental data obtained agree with field data on the natural infection of these vector species and the significance of this scenario is discussed.

Effect of Leishmania spp infection on the survival, life expectancy, fecundity and fertility of Lutzomyia longipalpiss.l. and Lutzomyia pseudolongipalpis.

We evaluated the effects of Leishmaniaspp infection on several population parameters of Lutzomyia longipalpis sensu lato andLutzomyia pseudolongipalpis, vectors of visceral leishmaniasis in Venezuela, under experimental conditions during the first post-feeding period. Females of both species were allowed to feed and engorge on a suspension of fresh washed human red blood cells in foetal calf serum. These blood cells were either non-infected or infected with one of the fourLeishmaniaspp strains and were offered through a chicken skin membrane. The longevity, life expectancy and the fecundity of uninfected flies were similar in both species, but the fertility was significantly lower in uninfected Lu. longipalpis females. In all cases, the infection of Lu. longipalpis and Lu. pseudolongipalpis by the Leishmaniastrains resulted in significant detrimental effects, which exerted a fitness cost expressed by reduced survival and life expectancy, as well as decreased fertility and fecundity compared with the control groups. Nevertheless, differences in these parameters were observed between these vector species depending on whether they were infected with the autochthonous Venezuelan Leishmania infantum strain (NESA) or the Brazilian reference strain (PP75). The experimental data obtained agree with field data on the natural infection of these vector species and the significance of this scenario is discussed.

Efecto larvicida de extractos metanólicos obtenidos de semillas y hojas de Persea americana (Laurales: Lauraceae) (aguacate) sobre Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) / Larvicide effect of methanolic extracts from seeds and leaves Persea americana (Laurales: Lauraceae) (avocado) on Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Aedes aegypti es el principal vector del dengue en el continente americano, una de las arbovirosis de mayor impacto en Venezuela, debido a su alta morbilidad y mortalidad. La ausencia de una vacuna contra este virus ha llevado al uso indiscriminado de insecticidas provocando la resistencia del vector, daños al medio ambiente y reacciones adversas en personas susceptibles. En un esfuerzo por encontrar formas eficaces y asequibles para el control, surge como una alternativa el uso de extractos vegetales que proporcionen menos riesgo ambiental y bajo costo. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto larvicida de extractos metanólicos obtenidos a partir de semillas y hojas de Persea americana (aguacate) sobre Ae. aegypti [cepas Rockefeller y Mario Briceño Iragorry (MBI)]. El mayor efecto tóxico se observó con el extracto metanólico obtenido a partir de las semillas con 100% de mortalidad a 25 mg/L para la cepa Rockefeller y 50 mg/L para la cepa MBI, 24 horas post-exposición. Las concentraciones letales (CL50) fueron las siguientes: a) extracto metanólico preparado a partir de las semillas CL50= 5,7mg/L para Rockefeller y CL50=9,9 mg/L para MBI; b) extracto metanólico de las hojas CL50= 22,8mg/L para Rockefeller y para MBI CL50= 26,2 mg/L. Los resultados muestran el efecto tóxico de los extractos metanólicos preparados a partir de la semilla y de la hoja del aguacate, sobre Ae. aegypti y sugieren la potencialidad de estos productos como agentes de control químico.

Aedes aegypti is the main vector of dengue in the Americas. This disease is one of the most important arboviruses in Venezuela due to the high morbidity and mortality it produces. The absence of a vaccine against this virus has led to the indiscriminate use of insecticides causing vector resistance, environmental damage and adverse reactions in susceptible individuals. The search for effective and inexpensive ways to control dengue has led to the evaluation of plant extracts as a low environmental risk, economical alternative. The aim of this study was to assess the larvicidal effect of methanol extracts obtained from the seeds and leaves of Persea americana (avocado) on Ae. aegypti [Rockefeller and Mario Briceño Iragorry (MBI) strains]. The methanol extract obtained from the seeds proved to be the most toxic for Ae. aegypti, producing 100% mortality 24 hours post-exposure, at concentrations of 25 mg/L (Rockefeller strain) and 50 mg/L (MBI strain). The lethal concentrations (LC50) were: a) methanol seed extract LC50 = 5.7 mg/L (Rockefeller strain) and 9.9 mg/L (MBI strain), b) methanol leaf extract LC50 = 22.8 mg/L (Rockefeller strain) and 26.2 mg/L (MBI strain). These results demonstrate the toxicity of methanol extracts from avocado seeds and leaves for Ae. aegypti and suggest that these products have potential as chemical controls of this vector.

Prevalencia de la infección por Leishmania spp. en un área periurbana de Altagracia de Orituco, estado Guárico, Venezuela / Prevalence of infection with Leishmania spp. in a suburban area of Altagracia de Orituco, Guarico State, Venezuela

Leishmania infantum es el agente etiológico de la leishmaniasis visceral (LV). Sin embargo, tanto en el Viejo Mundo como en el Nuevo Mundo(América Central), este protozoario ha sido involucrado en casos de leishmaniasis cutánea atípica (LCA). Evidencias clínicas, parasitológicas, moleculares y entomológicas han demostrado que una situación similar está ocurriendo en un área periurbana de Altagracia de Orituco (Guárico, Venezuela). Con la finalidad de contribuir al entendimiento de este nuevo escenario epidemiológico, se realizó un estudio transversal en el cual se determinó la reactividad a la prueba de leishmanina [Leishmanin skin test (LST)] y la seroprevalencia a antígenos crudos de Leishmania spp. y al antígeno específico rK39 mediante la prueba de ELISA en una muestra de ocho casos de LCA detectados en el periodo 1997-2000, en sus cohabitantes (n=15) y en una muestra de 233 de la comunidad igualmente expuestas a riesgo. La dermoprevalencia resultó ser de 31,6% (67/212). El 28,8% (67/233) resultó positivo a la prueba de ELISA usando promastigotas de L. infantum (=L. chagasi) y 13,3% (31/233) poseían anticuerpos anti-L. braziliensis. Así mismo, la prueba de ELISA usando el antígeno rK39 resultó positiva en uno de los ocho casos estudiados y en dos de sus cohabitantes; así como también en 13,7% (32/233) de los individuos residentes en la comunidad. Los resultados obtenidos indican la circulación de especies del subgénero Leishmania y del subgénero Viannia en el área en estudio y que la presencia de anticuerpos anti-Leishmania en general se encontró asociada a la edad y al tiempo de residencia en la zona

Leishmania infantum is the etiological agent of the visceral leishmaniasis (VL). However, in the OldWorld as well in the New World (Central America), thisprotozo an has also been involved in cases of atypicalcutaneous leishmaniasis (ACL). Clinical, molecularand entomological evidences have demonstrated thata similar situation is happening in a peri-urban areaof Altagracia de Orituco (Guárico state, Venezuela). With the purpose of contributing to the understandingof such an epidemiological scenario, a cross-sectionalstudy was carryed out using the leishmanin skin test(LST) and screening for the seroprevalence to crudeantigens of Leishmania spp. and rK39 by means ofthe ELISA test in cases of ACL reported in the period1997-2000 (n=8), among their co-inhabitants (n=15) and in a randomly selected sample of 233 people. Thedermoprevalence was 31.6% (67/212); 28.8% (67/233)were positive to the ELISA test using promastigotes of L. infantum (= L. chagasi) and 13.3% (31/233) hadantibodies anti-L. braziliensis. In addition, the test of ELISA using the antigen rK39 was positive in oneout of the eight cases studied and in two out of theirco-inhabitants; as well as in 13.7% (32/233) of theinhabitants of the community. The results obtained inthis epidemiological study indicate the circulation of species of the sub-genus Leishmania as well as of thesubgenus Viannia. The presence of antibodies anti-Leishmania in general was associated to the age andthe time of residence in the zone

Establecimiento de un sistema in vitro para el cultivo de Leishmania chagasi/ infantum en macrófagos de perro / Establishing an in vitro system for culturing leishmania chagasi/infantum in dog macrophages

Se han publicado pocos estudios donde se utilizan macrófagos de perro para el cultivo in vitro de Leishmania chagasi/infantum. El uso de macrófagos caninos para obtener amastigotas permite el estudio de la biología de esta forma parasitaria en el interior de su célula hospedadora. Con la finalidad de determinar las condiciones adecuadas para el establecimiento de un sistema in vitro que permita el cultivo de amastigotas de L. chagasi/infantum, el agente etiológico de la leishmaniasis viceral americana, macrófagos de perro pertenecientes a la línea continua DH82 fueron infectados usando promastigotas bajo diferentes condiciones. Se observó que aunque las células ingirieron rápidamente los promastigotas, los parásitos fueron transformados en amastigotas y los macrófagos fueron capaces de soportar la replicación intracelular de los amastigotas. En la fase de crecimiento celular, la proporción parásito: célula y la temperatura de incubación afectam el porcentaje de células infectadas. Los porcentajes de infección más elevados se obtuvieron al infectar monocapas de cultivo en fase estacionaria, utilizando una proporción parásito: células de 50:1 e incubando a 33ºC; lo cual sugiere que estas son las condiciones ideales para el desarrollo del cultivo in vitro de estas amastigotas. Los hallazgos abren la posibilidad de utilizar esta línea celular en el estudio de las interacciones parásito-hospedador y en la evaluación de drogas con potencial leishmancida

Feeding behavior of Lutzomyia pseudolongipalpis (Diptera: Psychodidae), a putative vector of visceral leishmaniasis in Venezuela.

Lutzomyia pseudolongipalpis Arrivillaga & Feliciangeli is the first new sand fly species in the L. longipalpis species complex that has been formally described since it was separated by genetic as well as by morphological characters. It is the putative vector of the American visceral leishmaniasis in La Rinconada, Curarigua, a restricted focus in central western Venezuela. We investigated the feeding behavior of this species. The blood meals from 210 of 429 (48.9%) engorged females caught by CDC light traps were identified by a dot enzyme-linked immuno-absorbent assay using antisera against humans and common domestic animals. We propose a new index, the host selectivity index, which is the number of sand flies fed on a given host relative to the available biomass of that host, as an indicator of the feeding behavior of this phlebotomine sand fly. The host selectivity index is compared with the forage ratio, which is the percentage of sand flies fed on a given host by the percentage which that host represented in the total census of available animals and humans. The most attractive animal for L. pseudolongipalpis in Curarigua was the dog, whereas humans were shown to be relatively unattractive. However, not only selectivity or biomass, but also the accessibility to this host may have influenced these results. The low population density of dogs and the low accessibility of L. pseudolongipalpis to humans in relation to domestic animals might help to explain the sporadic transmission of visceral leishmaniasis in this focus.

Tripanosomiasis americana cerebral en un paciente con síndrome de inmunodeficiencia adquirida, diagnóstico por exámen directo y confirmado por reacción de polimerasa en cadena (PCR) en líquido cefalorraquídeo / A case report of a cerebral american trypanosomiasis in a patient with aids, diagnosed by direct examination of cerebrospinal fluid and confimred by pcr

Se describe la aparición de un cuadro meningoencefálico en un paciente con enfermedad de chagas 7 años después de que las pruebas para el virus de inmunodeficiencia adquirida (VIH) dieran positivas. Formas compatibles con tripomastigotes de Trypanosoma cruzi fueron visualizadas al microscopio de luz en LCR y posteriormente comprobadas como tales por reacción de polimerasa en cadena (PCR). El paciente fue tratado con benznidazol y ha sobrevivido 2 años al cuadro meningoencefálico con buena recuperación de las funciones cerebrales. Se trata del primer caso reportado en Venezuela donde la inmunosupresión, inducida por VIH, determinó una reactivación de la enfermedad de Chagas que involucró al SNC. La enfermedad de Chagas es endémica en Venezuela y en buena parte de Latinoamérica y es creciente el número de pacientes con VIH/SIDA, por lo que la probabilidad de coinfección debe ser tomada en cuenta a fin de iniciar un tratamiento antiparasitario oportuno. Se discute la importancia del examen del LCR para la detección de T. cruzi como patógeno oportunista en los cuadros meningoencefálicos de pacientes con VIH/SIDA, el uso del PCR como indicador temprano de la presencia de parásitos en sangre o tejidos y la posibilidad de iniciar tratamientos parasiticidas en todos los pacientes seropositivos para ambas enfermedades