Preeclamptic sera directly induce slit-diaphragm protein redistribution and alter podocyte barrier-forming capacity.

BACKGROUND/AIMS: Podocytes are critical in maintaining the filtration barrier of the glomerulus and are dependent on the slit diaphragm. We hypothesized that disturbances of podocyte biology contribute to proteinuria in women with preeclampsia (PE). METHODS: A human podocyte cell line was stimulated with serum from women with PE (patients) and healthy pregnant women (controls); the main changes in 3 important podocyte proteins: podocin, CD2AP and actin were established by immunofluorescence and Western blot; we also searched for changes in cell plasticity by measuring the resistance of cultured podocytes. RESULTS: Different distributions of CD2AP, podocin and actin were observed in the podocytes stimulated with patient sera compared to podocytes stimulated with control sera. We also found that the mean resistance value of podocytes cultured with serum from women with PE was significantly lower than podocytes cultured with serum from controls. There was no difference in the protein expression level of podocin and CD2AP between patients and controls. CONCLUSIONS: We present evidence that there are differences in podocytes when stimulated with sera from women with PE compared to those stimulated with healthy pregnancy sera. This is the first time that podocyte alterations have been directly related to PE; these descriptive findings could be considered as an interesting beginning for further studies relating podocytes and PE.

Efecto del inhibidor de fosfodiesterasa tipo 4 —rolipram, sobre la maduración in vitro de oocitos bovinos / Efeito do inibidor de fosfodiesterasa tipo 4 —rolipram, sobre a maturação in vitro de oocitos bovinos / Effect of phosphodiesterase type 4-inhibitor rolipram on in vitro maturatrion of bovine oocytes

Durante el proceso de maduración in vitro de oocitos, las gonadotropinas FSH y LH inducen la producción de AMPc. El AMPc tiene efecto dual, donde los altos niveles de AMPc intraoocitario mantienen su bloqueo meiótico, mientras que en las células de la granulosa inducen la maduración del oocito. Los niveles de AMPc son regulados por hidrólisis mediada por fosfodiesterasas (PDE), las cuales presentan expresión específica en el folículo, el oocito expresa la PDE 3, mientras que las células de la granulosa PDE 4. Con el objetivo de evaluar el efecto del rolipram, un inhibidor específico de PDE 4, sobre el porcentaje de maduración nuclear in vitro (MNIV) de oocitos bovinos, 629 complejos cúmulo oocito (CCO) fueron cultivados a 38.5 ºC/5% CO2/24 h, en medio TCM-199 con la adición de pFSH y hrLH, o rolipram. Los grupos experimentales fueron: adición de gonadotropinas, rolipram (25, 50 ó 75 M), rolipram 50 M + gonadotropinas, o control sin estímulo. Los oocitos fueron teñidos con DAPI y evaluados bajo fluorescencia para determinar el porcentaje de maduración nuclear por la expulsión del primer cuerpo polar. El rolipram 50M estimuló la maduración nuclear de oocitos bovinos de una manera similar a la obtenida con las gonadotropinas (76.83 vs 79.46%, p>0.05), pero en mayor medida que la observada con rolipram 25 y 75 M (31.25, y 28.61%, respectivamente). Los CCOs cultivados en presencia de rolipram 50 M+Gonadotropinas maduraron en menor proporción (63.74%) comparada con gonadotropinas (p<0.01) o rolipram 50 M (p<0.05). Los resultados permiten concluir que el porcentaje de maduración nuclear in vitro de oocitos bovinos depende de la dosis de rolipram utilizada, donde la concentración de rolipram 50 M presentó un comportamiento similar a las gonadotropinas en la maduración del oocito...

Gonadotropic follicle stimulating hormone (FSH) and lutenizing hormone (LH) induce intracellular cyclic AMP (cAMP) production during the in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes. Cyclic AMP exerts a dual effect, where high intraoocyte cAMP levels are responsible for oocyte meiotic blockage, while high cAMP levels into the granulose cells induce oocyte maturation. Intracellular cAMP levels are regulated by phosphodiesterases (PDE)-mediated hydrolysis, enzymes having a specific follicle expression pattern. Oocyte expresses typo 3 PDE (PDE 3), while granulose cells expresses type 4 PDE (PDE 4). With the aim to test the effect of the specific PDE 4 inhibitor rolliprom on percentage in vitro nuclear maturation (IVNM) of bovine oocytes, 629 cumulus-oocyte complexes (COC) were cultured at 38.5 ºC/CO2 5%/24 h on TCM-199 medium with pFSH and hrLH with or without rolipram. Experimental groups were: gonadotrophins alone, gonadotropins + rolipram (25, 50, or 75 M), rolipram 50 M + gonadotrophins, and control (media without stimulus). In order to determinate the nuclear maturation percentage by the first polar body expulsion, oocytes were dyed with DAPI and evaluated by fluorescence. Rolipram 50 M stimulated bovine oocyte nuclear maturation in a similar way to gonadotrophins stimulus (76.83 vs. 79.46%, p>0.05) did, but in a higher way than rolipram 25 M (31.25%) or 75 M (28.61%). The COC cultured with rolipram 50 M+gonadotrophins maturated in a lower proportion (63.74%) than did with gonadotropins (p<0.01) or rolipram 50 M (p<0.05). A dose-dependent response of percentage of IVNM of bovine oocytes was detected. Thus rolipram 50 M, exerts a similar effect of gonadotropins on oocyte maturation...

Durante o processo de maturação in vitro de oocitos, as gonadotrofinas FSH e LH induzem a produção de AMPc. O AMPc tem duplo efeito, pois os altos níveis de AMPc intraoocitario mantém o bloqueio meiótico, enquanto que nas células da granulosa induzem a maturação do oocito. Os níveis de AMPc são regulados pela hidrólise mediada das fosfodiesterasas (PDE), as quais apresentam expressão específica no folículo, o oocito expressa a PDE 3, enquanto que as células da granulosa PDE 4. Com o objetivo de avaliar o efeito do rolipram, um inibidor específico de PDE 4, sobre a percentagem de maturação nuclear in vitro (MNIV) de oocitos bovinos, 629 complexos cúmulo oocito (CCO) foram cultivados a 38.5 ºC/5% CO2/24 h, em meio TCM-199 com a adição de pFSH e hrLH, o rolipram. Os grupos experimentais foram: adição de gonadotrofinas, rolipram (25, 50 ó 75 M), rolipram 50 M + gonadotrofinas, ou controle sem estímulo. Os oocitos foram tingidos com DAPI e avaliados sob fluorescência para determinar a percentagem de maturação nuclear pela expulsão do primeiro corpo polar. O rolipram 50M estimulou a maturação nuclear de oocitos bovinos de maneira similar a obtida com as gonadotrofinas (76.83 vs 79.46%, p>0.05), porém em maior medida que a observada com rolipram 25 y 75 M (31.25, y 28.61%, respectivamente). Os CCOs cultivados na presença de rolipram 50 M+Gonadotrofinas maturaram em menor proporção (63.74%) quando comparado com gonadotrofinas (p<0.01) ou rolipram 50 M (p<0.05). Os resultados permitem concluir que a percentagem de maturação nuclear in vitro de oocitos bovinos depende da doses de rolipram utilizada, sendo que a concentração de rolipram 50 M apresentou um comportamento similar às gonadotrofinas na maturação do oocito...

Diabetes mellitus gestacional

La gestación ha sido considerada ®diabetogénica¼ debido a los cambios metabólicos que conducen a una marcada resistencia a la insulina. Esta alteración se asocia con un aumento de la morbilidad perinatal, en parte por la macrosomía que produce, y que si no es tratada también puede aumentar un poco la mortalidad perinatal. Se estima que el 47 por ciento de las mujeres que padecen diabetes mellitus gestacional, desarrolla una diabetes mellitus no insulino dependiente después de cinco años. Se recomienda el tamizaje para la diabetes gestacional en todas las pacientes embarazadas. La prueba de tamizaje se realiza con una carga de 50g de glucosa oral entre semanas 24 y 28 de la gestación. Las pacientes con resultados positivos en esta prueba usualmente deben ser sometidas a una prueba de tolerancia a la glucosa de 3 horas para definir el diagnóstico. Se describe la fisiopatología de este trastorno y se analizan los principales factores de riesgo asociados. Por último, se dan las recomendadas en la conferencia internacional de trabajo en diabetes gestacional para el tamizaje y diagnóstico.

Diabetes mellitus durante la gestación y morbimortalidad perinatal / Gestacional diabetes and perinatal morbimortality in Medellín, Colombia

El análisis retrospectivo de 166 pacientes embarazadas y con diagnóstico de diabetes mellitus, atendidas en el Hospital Universitario San Vicente de Paúl, de Medellín, Colombia, permite apreciar un registro inadecuado de la información, lo que le resta confiabilidad, y la carencia de protocolos apropiados de manejo. La diabetes gestacional (DMG) se presentó en 81 pacientes (48.8 por ciento), seguida por la diabetes mellitus no insulino dependiente (DMNID) (69 pacientes; 41.5 por ciento) y por último la diabetes insulina dependiente (DMID) en 16 pacientes (9.6 por ciento). Se halló una tasa de morbilidad perinatal del 52.2 por ciento (72 casos de los 138 en que se dispuso de información), inaceptable para esta población, distribuida así por entidades: macrosomía (16 casos; 22.2 por ciento), sufrimiento fetal agudo (15 casos; 20.8 por ciento), sufrimiento fetal crónico (10 casos; 13.9 por ciento), polihidramnios (9 casos; 12.5 por ciento), hipoglicemia (8 casos; 11.1 por ciento), trauma fetal (6 casos; 8.3 por ciento), síndrome de dificultad respiratoria (5 casos; 6.9 por ciento) hiperbilirrubinemia (5 casos; 6.9 por ciento) e hipocalcemia (1 caso). Cabe resaltar que las entidades potencialmente prevenibles (macrosomía, sufrimiento fetal agudo y crónico, polihidramnios, trauma fetal y síndrome de dificultad respiratoria ) fueron más frecuentes en la población de DMNID y DMG, lo que refleja un manejo clínico inadecuado. La mortalidad fetal fue del 3.6 por ciento (5 casos) y en tres de ellos se asoció a hipertensión materna. Se puso en evidencia la urgente necesidad de un protocolo interdisciplinarlo de manejo clínico, con el cual se puedan establecer un registro adecuado y pautas de manejo conforme a las necesidades de la población de riesgo que atiende esta Institución de referencia

Retrospective analysis of 166 pregnant women with gestational diabetes mellitus, at San Vicente de Paúl Hospital, Medellín, Colombia, evidenced inadequate registration of information and lack of clinical management protocols, despite the fact that this is a reference institution. Gestational diabetes mellitus (GDM) was found in 81 patients (48.8%), non-insulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM) in 69 (41.5%) and insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) in 16 (9.6%). Perinatal morbidity rate was 52.2% (72 cases among the 138 in which information was available), distributed as follows: macrosomy (16 cases; 22.2%), acute fetal distress (15 cases; 20.8%), chronic fetal distress (10 cases; 13.9%), polyhydramnios (9 cases; 12.5%), hypoglycemia (8 cases; 11.1 %) and delivery fetal trauma (6 cases; 8.3%). It was remarkable that the potentially preventable entities (macrosomy, acute and chronic fetal distress, polyhydramnios, fetal trauma and respiratory failure syndrome) were more frequent in NIDDM and GDM groups, indicating an inadequate clinical management; fetal mortality was 3.6% (5 patients) mostly associated to maternal hypertension. These results point out to the urgent need of establishing in this third level hospital an interdisciplinary management protocol of gestational diabetes, with apropriate registration of information and clear clinical guides

Preeclampsia, o hipertensión simplemente? Una señal de alarma

La expresión clínica de una alteración hipertensiva durante la gestación como la llamada "preeclampsia", refleja simplemente la incapacidad funcional del organismo materno para tolerar las adaptaciones fisiológicas de la gestación y /o las cargas que a ella se adicionen. Lógicamente el deterioro se considera funcional, o sea transitorio mientras persista la sobrecarga o la reserva. El tiempo requerido para que la enfermedad se manifieste es el tiempo de reserva, y la reserva puede recuperarse al estado evolutivo de la línea normal de declinación, pero muy probablemente más disminuida. Cuando ya se han consumido todos los elementos de tolerancia a la sobrecarga funcional, cualquiera que ella sea(evento fisiológico gestacional, noxa, sobrecarga, etc) aparece la enfermedad clínicamente manifiesta y se declara la Hipertensión Arterial Crónica. En este momento se hace evidente el deterioro orgánico con las consecuencias de la enfermedad y el camino hacia la muerte, innegable proceso al que todo ser vivo se ve condenado, pero que en definitiva se acelera con la presencia de una enfermedad