RESUMO
The N-acetyl-galactosamine specific lectin from Macrotyloma axillare seeds (LMA) was purified by precipitation and ion exchange chromatography. The LMA 0.2 mol L(-1) fraction showed hemagglutinating activity on erythrocytes A1. The results for molecular mass determinations were about 28 kDa. The LMA pH-dependent assays showed best hemagglutinating activity at pH 6.0-8.0; being decreased at acidic/alkaline conditions and by EDTA treatment. LMA is a tetramer at pH 8.2 and a dimer at pH 4.0. Human erythrocytes from ABO system confirmed the A1 specificity for LMA. This new methodology is useful and easy, with low costs, for lectin purification in large amounts.
Assuntos
Bioquímica/economia , Bioquímica/métodos , Fabaceae/química , Lectinas de Plantas/isolamento & purificação , Sementes/química , Cálcio/farmacologia , Precipitação Química , Cromatografia em Gel , Cromatografia por Troca Iônica , Misturas Complexas/química , Ácido Edético/farmacologia , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Etanol , Hemaglutinação/efeitos dos fármacos , Humanos , Concentração de Íons de Hidrogênio/efeitos dos fármacos , Manganês/farmacologia , Peso Molecular , Lectinas de Plantas/química , Espectrometria de Massas por Ionização por Electrospray , TemperaturaRESUMO
Schistosoma mansoni is 1 of the causative agents of schistosomiasis, an endemic disease in 76 countries of the world. The study of its genome, estimated to be 270 Mb, is very important to understanding schistosome biology, the mechanisms of drug resistance, and immune evasion. Repetitive elements constitute more than 40% of the S. mansoni genome and may play a role in the parasite evolution. The retrotransposons Boudicca, a long terminal repeat (LTR), and Perere 03, a non-LTR, are present in a high number in the S. mansoni genome and were localized with the use of fluorescence in situ hybridization (FISH) and primed in situ labeling (PRINS). Bacterial artificial chromosomes (BAC) clones containing the retrotransposons Boudicca and Perere 03 were selected by bioinformatic analysis and used as probes in FISH. Using metaphase chromosomes from sporocysts and the FISH and PRINS techniques, we were able to map these retrotransposons. Perere 03 was localized in the euchromatic regions of the short arm of chromosome 2 and Boudicca in the euchromatic regions of the short arm of chromosomes 2 and Z.
Assuntos
Genoma Helmíntico/genética , Retroelementos/fisiologia , Schistosoma mansoni/genética , Animais , Mapeamento Cromossômico/métodos , Cromossomos Artificiais Bacterianos/genética , Hibridização in Situ Fluorescente , Cariotipagem , Microscopia Confocal , Marcação in Situ com Primers , Alinhamento de Sequência , Sequências Repetidas TerminaisRESUMO
The present work describes the identification of toxins expressed by the venom gland of the spider Lasiodora sp. The toxins LTx1, LTx2 and LTx3 were identified by the screening of a cDNA library. These toxins showed significant similarity at the amino acid level with spider toxins from Lasiodora parahybana, Eurypelma californicum, Brachypelma smithii, Selenocosmia huwena.
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Venenos de Aranha/química , Aranhas/química , Sequência de Aminoácidos , Animais , Sequência de Bases , Clonagem Molecular , Expressão Gênica , Dados de Sequência Molecular , Alinhamento de Sequência , Especificidade da EspécieRESUMO
We have produced a fragment of hepatitis B surface antigen (HBsAg) corresponding to amino acids 1-60 as a fusion protein with the alpha mating factor of yeast. The product is secreted from yeast as a soluble monomer that expresses HBsAg antigenicity. Unlike other heterologous fusion proteins, it is not processed by the Lys-Arg endoprotease, possibly due to a proline in the linker between the two coding sequences. The resulting soluble fragment will enable us to map the immunodominant sites of HBsAg recognized by T cells and to identify additional factors contributing to vaccine potency.
Assuntos
Antígenos de Superfície da Hepatite B/genética , Peptídeos/genética , Saccharomyces cerevisiae/genética , Sequência de Aminoácidos , Sequência de Bases , DNA Viral/genética , DNA Viral/isolamento & purificação , Escherichia coli/genética , Vetores Genéticos , Antígenos de Superfície da Hepatite B/biossíntese , Antígenos de Superfície da Hepatite B/isolamento & purificação , Vírus da Hepatite B/genética , Fator de Acasalamento , Dados de Sequência Molecular , Oligodesoxirribonucleotídeos/síntese química , Biossíntese Peptídica , Fragmentos de Peptídeos/biossíntese , Fragmentos de Peptídeos/genética , Fragmentos de Peptídeos/isolamento & purificação , Peptídeos/isolamento & purificação , Feromônios/genética , Plasmídeos , Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese , Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação , Mapeamento por Restrição , Transformação GenéticaRESUMO
Duas cepas de Leishmania originalmente isoladas in vitro de casos humanos de leishmaniose cutânea e que ab initio näo infectaram animais de laboratório, tornaram-se infectantes para hamnsters após serem mantidos por vários anos em meio de cultura quimicamente definido. Foram realizadas observaçöes sobre o crescimento de promastigotas in vitro, curso da infecçäo em hamsters, morfologia das amastigotas, mobilidade eletroforética de oito enzimas solúveis. Foram obtidas informaçöes sobre a densidade de flutuaçäo do n-DNA e do k-DNA e uma das cepas foi testada contra anticorpos monoclonais. Ambas as cepas permanecem sem identificaçäo precisa
Assuntos
Cricetinae , Meios de Cultura , Técnicas In Vitro , Leishmania/crescimento & desenvolvimentoRESUMO
Attempts have been made to characterize two strains of Leishmania that became infective to golden hamsters only after they had been maintained for several years in a chemically defined culture medium. Observations were made on the growth rates of promastigotes in vitro, course of infection in hamsters, morphology of amastigotes, and electrophoretic mobility patterns of eight isoenzymes. Information was obtained about the buoyant densities of n-DNA and k-DNA, and one strain was tested against monoclonal antibodies. The identity of both strains remains obscure.
