DNA methylation changes associated with risk factors in tumors of the upper aerodigestive tract.

Cancers of the upper aerodigestive tract (UADT) are common forms of malignancy associated with tobacco and alcohol exposures, although human papillomavirus and nutritional deficiency are also important risk factors. While somatically acquired DNA methylation changes have been associated with UADT cancers, what triggers these events and precise epigenetic targets are poorly understood. In this study, we applied quantitative profiling of DNA methylation states in a panel of cancer-associated genes to a case-control study of UADT cancers. Our analyses revealed a high frequency of aberrant hypermethylation of several genes, including MYOD1, CHRNA3 and MTHFR in UADT tumors, whereas CDKN2A was moderately hypermethylated. Among differentially methylated genes, we identified a new gene (the nicotinic acetycholine receptor gene) as target of aberrant hypermethylation in UADT cancers, suggesting that epigenetic deregulation of nicotinic acetycholine receptors in non-neuronal tissues may promote the development of UADT cancers. Importantly, we found that sex and age is strongly associated with the methylation states, whereas tobacco smoking and alcohol intake may also influence the methylation levels in specific genes. This study identifies aberrant DNA methylation patterns in UADT cancers and suggests a potential mechanism by which environmental factors may deregulate key cellular genes involved in tumor suppression and contribute to UADT cancers.

Aberrant DNA methylation of cancer-associated genes in gastric cancer in the European Prospective Investigation into Cancer and Nutrition (EPIC-EURGAST).

Epigenetic events have emerged as key mechanisms in the regulation of critical biological processes and in the development of a wide variety of human malignancies, including gastric cancer (GC), however precise gene targets of aberrant DNA methylation in GC remain largely unknown. Here, we have combined pyrosequencing-based quantitative analysis of DNA methylation in 98 GC cases and 64 controls nested within the European Prospective Investigation into Cancer and Nutrition (EPIC) cohort and in cancer tissue and non-tumorigenic adjacent tissue of an independent series of GC samples. A panel of 10 cancer-associated genes (CHRNA3, DOK1, MGMT, RASSF1A, p14ARF, CDH1, MLH1, ALDH2, GNMT and MTHFR) and LINE-1 repetitive elements were included in the analysis and their association with clinicopathological characteristics (sex, age at diagnosis, anatomical sub-site, histological sub-type) was examined. Three out of the 10 genes analyzed exhibited a marked hypermethylation, whereas two genes (ALDH2 and MTHFR) showed significant hypomethylation, in gastric tumors. Among differentially methylated genes, we identified new genes (CHRNA3 and DOK1) as targets of aberrant hypermethylation in GC, suggesting that epigenetic deregulation of these genes and their corresponding cellular pathways may promote the development and progression of GC. We also found that global demethylation of tumor cell genomes occurs in GC, consistent with the notion that abnormal hypermethylation of specific genes occurs concomitantly with genome-wide hypomethylation. Age and gender had no significant influence on methylation states, but an association was observed between LINE-1 and MLH1 methylation levels with histological sub-type and anatomical sub-site. This study identifies aberrant methylation patters in specific genes in GC thus providing information that could be exploited as novel biomarkers in clinics and molecular epidemiology of GC.

Análise comparativa da imunoexpressão da proteína p53 (clones DO-7 e PAb-240) em carcinomas de células escamosas intrabucais e labiais / Comparative analysis of p53 protein immunostaining (antibodies DO-7 and PAb-240) in oral cavity and lip squamous cell carcinomas

INTRODUÇÃO: A carcinogênese caracteriza-se como um processo multifatorial, e a inativação da proteína p53 é uma alteração genética comumente observada nos carcinomas de células escamosas de boca (CCEB). OBJETIVO: Analisar e comparar a imunoexpressão da proteína p53, por meio dos clones DO-7 e PAb-240, em CCEB com localização intrabucal e em lábio inferior. MATERIAL E MÉTODOS: Foram selecionados 40 casos de CCEB, sendo 20 de localização intrabucal e 20 em lábio inferior. Foi realizado um estudo imuno-histoquímico utilizando os anticorpos anti-p53 clone DO-7 e PAb-240. A imunoquantificação foi realizada por meio de análise digital de imagem, e os resultados, submetidos a tratamentos estatísticos. RESULTADOS: A imunoexpressão da proteína p53 foi verificada com o anticorpo DO-7 em 13 casos (65 por cento) de carcinoma intrabucal e em 19 (95 por cento) de carcinoma de lábio inferior. Imunorreatividade para o anticorpo PAb-240 foi observada em 9 casos (45 por cento) de lesões intrabucais e em 15 (75 por cento) localizados em lábio inferior. Não foram observadas, segundo o teste de Mann-Whitney, diferenças estatisticamente significativas (p > 0,05) na expressão da proteína p53 entre as duas localizações estudadas, independentemente do anticorpo avaliado. Foram identificadas, pelo teste de Wilcoxon, diferenças estatisticamente significativas entre a expressão dos clones DO-7 e PAb-240 em cada um dos grupos analisados (valor p = 0,013 - lábio inferior; valor p = 0,016 - intrabucal). CONCLUSÕES: A expressão da proteína p53 observada nos CCEB, com localizações intrabucais e labiais, sugere a ocorrência de mutações no gene TP53. As diferenças quantitativas obtidas entre os anticorpos estudados, independentemente da localização das lesões, refletem uma especificidade distinta entre os clones DO-7 e PAb-240. O desenvolvimento de mais estudos será fundamental para estabelecer o anticorpo mais adequado para proteína p53 em CCEB.

BACKGROUND: Carcinogenesis is a multifactorial process and inactivation of p53 protein is a genetic change commonly observed in oral squamous cell carcinomas (OSCC). OBJECTIVES: To analyze and compare the expression of p53 protein through antibodies DO-7 and PAb-240 in OSCC samples located in the oral cavity and lower lip. MATERIAL AND METHODS: Forty cases of OSCC were selected and divided into oral cavity and lower lip groups (20 cases each). Immunohistochemical technique was performed using antibodies DO-7 and PAb-240. Quantification of the cases was performed through digital image analysis and underwent specific statistical treatments. RESULTS: Expression of p53 protein was verified with DO-7 antibody in 13 cases (65 percent) of oral cavity carcinomas and in 19 cases (95 percent) of lower lip carcinoma. PAb-240 positivity was detected in 9 cases (45 percent) of oral cavity lesions and in 15 cases (75 percent) located in the lower lip. According to Mann-Whitney test, there were no statistically significant differences between the expressions of p53 protein in both groups, regardless of the antibody used. According to Wilcoxon test, there were statistically significant differences between the expression of DO-7 antibody and PAb-240 in each of the analyzed groups (p-value = 0.013; lower lip p-value = 0.016 - oral cavity). CONCLUSIONS: The expression of p53 protein was observed both in the oral cavity and lip OSCC, which suggests the occurrence of mutations in TP53 gene. The quantitative differences between the antibodies studied, regardless of the site of the lesions, reflect different specificity between clones DO-7 and PAb-240. Further studies are required to establish the best antibody for p53 protein in oral squamous cell carcinomas.

Análise comparativa da ação de anabolizantes em gengiva e sistema reprodutor de ratos (Rattus norvegicus) / Comparative analysis of the action of anabolic steroids on the gingiva and reproductive system of rats (Rattus norvegicus)

Os esteróides anabólicos-androgênicos (EAA) se caracterizam como um grupo de compostos naturais e sintéticos formados a partir da testosterona e seus derivados e foram desenvolvidos com finalidade terapêutica. No entanto, a partir da década de 90 o seu uso tem sido considerado um problema de saúde pública; e o seu consumo aumentado entre atletas profissionais e amadores que usam a medicação até 100 vezes acima da dose recomendada. Os efeitos adversos mais comuns relacionados ao uso dos EAA são alterações hepáticas, endócrinas, músculo-esqueléticas, cardiovasculares, imunológicas, reprodutivas, psicológicas, efeitos virilizantes e feminilizantes; e efeitos tóxicos. Apesar de diversos efeitos deletérios, os EAA em dose e freqüência adequada podem ter efeitos benéficos no reparo de feridas, revertendo os efeitos de corticosteróides. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de doses suprafisiológicas (10mg/semana, por 60 dias) do EAA decanoato de nandrolona em 32 ratos (Rattus norvegicus), sendo divididos igualmente para o grupo experimental e controle (8 fêmeas e 8 machos para cada grupo) através da macroscopia, microscopia e morfometria. Os resultadosmostraram que os animais do grupo controle ganharam mais peso ao final do tratamento do que os animais tratados. Os ovários e testículos apresentaram atrofiaenquanto a hipertrofia foi observada nos úteros e próstatas, com diferença de peso significativa estatisticamente em todos os órgãos entre o grupo experimental e controle. Nos testículos, a contagem do número de células de Sertoli não apresentou diferença estatística, assim como no percentual de fibras colágenas entre o grupo experimental e controle. A média da altura das células epiteliais nas próstatas dos animais tratados apresentou-se maior que as do controle. Os ovários das ratas medicadas apresentaram diminuição de corpos lúteos e folículos atrésicos.

Os resultados encontrados indicam que as altas doses do EAA decanoato de nandrolona causam alterações macroscópicas e morfológicas nos sistemas reprodutores de machos e fêmeas, podendo ser irreversíveis. O efeito benéfico do uso de EAA na síntese de colágeno não foi observado nos fragmentos de gengiva analisados.

The anabolic-androgenic steroids (AAS) are characterized as a group of natural and synthetic compounds formed from testosterone and derivatives, and have been developed for therapeutic purposes. However, after the 1990s, their utilization has been considered a public health problem and the intake increased among professional and amateur athletes, who ingest up to 100 times the recommended dose of the drug. The most common adverse effects related to utilization of AAS are hepatic, endocrine, muscle-skeletal, cardiovascular, immunological, reproductive and psychological alterations; masculinizing and feminizing effects; and toxic effects. Despite the several harmful effects, utilization of AAS at adequate dose and frequency may have beneficial effects on wound repair, reverting the effects of corticosteroids. This study evaluated the effects of supraphysiological doses (10mg/week, for 60 days) of the AAS nandrolone decanoate in 32 rats (Rattus norvegicus), equally divided into experimental and control groups (8 females and 8 males for each group), by macroscopic, microscopic and morphometric analyses. The results revealed that animals in the control group gained more weight at treatment completion than treated animals. The ovaries and testicles presented atrophy, and hypertrophy of uterus and prostates was observed, with statistically significant difference in weight in all organs between the experimental and control groups. In the testicles, counting of the number of Sertoli cells and the percentage of collagen fibers did not present statistically significant difference between the experimental and control groups. The mean height of epithelial cells in the prostates of treated animals was greater in treated animals than in the control group. The ovaries of treated rats exhibited reduction in corpora lutea and atresic follicles.

The results indicated that high doses of AAS nandrolone decanoate caused macroscopic and morphological alterations in the reproductive systems of males and females, which may be irreversible. The beneficial effect of utilization of AAS on the collagen synthesis was not observed on gingival fragments analyzed.

Terapia de cicatriz hipertrófica e quelóide em mucosa bucal: relato de caso clínico / Hypertophic cicatrix and keloid therapy in oral mucosa: caso report

O presente trabalho aborda as características clínicas e histopatológicas das cicatrizes hipertróficas e quelóides, além do tratamento proposto atualmente na literatura. É relatado ainda, um caso clínico de cicatriz hipertrófica em mucosa interna de lábio superior, onde se utilizou, intralesionalmente, o acetato de triamcinolona como terapia

Fibroma ossificante periférico: relato de caso e histórias de recidivas / Peripheral ossifying fibroma: case report and recurrence histoy

O fibroma ossificante periférico apresenta-se como uma das lesões hiperplásicas inflamatórias reacionais mais comuns da cavidade bucal. Sua localização mais frequente é na papila interdentária anterior da maxila. Aparece clinicamente como um crescimento focal de tecido bem delimitado e seu aspecto histopatológico mais marcante consiste na presença de calcificações em um estroma de tecido conjuntivo com inúmeros fibroblastos. O tratamento recomendado é a excisão cirúrgica total da lesão, que apresenta alto índice de recidiva, em média de 15 por cento. O presente trabalho tem como objetivo relatar um caso clínico de fibroma ossificante periférico com história de três recidivas