Preconditioning-Activated AKT Controls Neuronal Tolerance to Ischemia through the MDM2-p53 Pathway.

One of the most important mechanisms of preconditioning-mediated neuroprotection is the attenuation of cell apoptosis, inducing brain tolerance after a subsequent injurious ischemia. In this context, the antiapoptotic PI3K/AKT signaling pathway plays a key role by regulating cell differentiation and survival. Active AKT is known to increase the expression of murine double minute-2 (MDM2), an E3-ubiquitin ligase that destabilizes p53 to promote the survival of cancer cells. In neurons, we recently showed that the MDM2-p53 interaction is potentiated by pharmacological preconditioning, based on subtoxic stimulation of NMDA glutamate receptor, which prevents ischemia-induced neuronal apoptosis. However, whether this mechanism contributes to the neuronal tolerance during ischemic preconditioning (IPC) is unknown. Here, we show that IPC induced PI3K-mediated phosphorylation of AKT at Ser473, which in turn phosphorylated MDM2 at Ser166. This phosphorylation triggered the nuclear stabilization of MDM2, leading to p53 destabilization, thus preventing neuronal apoptosis upon an ischemic insult. Inhibition of the PI3K/AKT pathway with wortmannin or by AKT silencing induced the accumulation of cytosolic MDM2, abrogating IPC-induced neuroprotection. Thus, IPC enhances the activation of PI3K/AKT signaling pathway and promotes neuronal tolerance by controlling the MDM2-p53 interaction. Our findings provide a new mechanistic pathway involved in IPC-induced neuroprotection via modulation of AKT signaling, suggesting that AKT is a potential therapeutic target against ischemic injury.

Modelo de control de calidad para marcadores bioquímicos y ecográficos del cribado prenatal de aneuploidías fetales centralizado en el laboratorio / Quality control model for biochemical and ultrasound markers in prenatal screening for fetal aneuploidies with laboratory-centralized management

Introducción. El modelo de cribado combinado de primer trimestre de aneuploidías fetales es el más extendido a nivel nacional. Sin embargo, aunque está bien establecido que deben realizarse controles de calidad de las medidas bioquímicas, su implantación en las ecográficas es escasa. El objetivo de este artículo es describir cómo implantar desde el laboratorio un modelo de control de calidad que incluya todos los marcadores que se realizan en el cribado prenatal de aneuploidías. Material y métodos. Se valoró la precisión y el sesgo de los marcadores bioquímicos. En el caso de la TN se ha utilizado el método WIHRI como control de calidad y se ha aplicado el CUSUM a cada ecografista con los valores extraídos de la base de datos del software de cálculo. Resultados. Para los parámetros bioquímicos el CV se situó por debajo del 4%. El sesgo se situó dentro de especificaciones para las concentraciones de analito, tal y como ocurrió con los MoM excepto en una mensualidad. El control de calidad de la TN mostró que 5 de los 8 ecografistas evaluados no cumplieron con los criterios de calidad establecidos cuando se utilizó el método WIHRI y 6 cuando se aplicó el CUSUM. Conclusiones. Al mostrar desde el laboratorio a los profesionales implicados la dificultad de conseguir medidas veraces de la TN, se ha consensuado el método CUSUM como control de calidad para la misma. El laboratorio enviará un informe a cada ecografista en el momento en el que sobrepase el límite de desviación establecido (AU)

Introduction. First trimester combined fetal aneuploidy screening is the most widely implemented model at national level. Although it is well established to perform quality control of biochemical measurements, it has been seldom applied to ultrasound measures. The aim of this paper is to describe how to implement a model of quality control in the laboratory, which includes all markers in prenatal screening for aneuploidy. Methods. We have evaluated the precision and bias of biochemical markers. In the case of nuchal translucency (NT), the WIHRI method was employed to control quality, and CUSUM was applied to each ultrasound operator with the values extracted from the computer software database. Results. For the biochemical parameters CV was below 4%. The bias was within the specification for the analyte concentration levels, as was the case for MoMs, except for one month. Quality control of NT showed that 5 of the 8 ultrasound operators evaluated sdid not comply with the quality criteria when using the WIHRI method, and 6 when CUSUM was applied. Conclusions. After showing the difficulty in obtaining accurate NT measurements to the professionals involved, it was possible to reach a consensus on using the CUSUM method for quality control of NT. In this way, the laboratory will be responsible for sending a report to each ultrasound operatorin the cases where the deviation exceeds the established limit (AU)

Aductos de hemoglobina y micronúcleos en trabajadores hospitalarios expuesto a óxido de etileno: Venezuela / Hemoglobin adducts and micronuclei in hospital workers exposed to ethylene oxide: Venezuela

El óxido de etileno (OE) es un cancerígeno genotóxico con habilidad para reaccionar con macromoléculas biológicas, como la Hemoglobina y Acido desoxirribonucléico (ADN), formando N-(2-hidroxietil)valina (HEV) y 7-(2-hidroxietil)-guanina (7-HEG) respectivamente, compuestos llamados aductos. Estudio descriptivo, cuyo propósito fue evaluar trabajadores del área de esterilización de un hospital público expuestos a OE, mediante la determinación de aductos de hemoglobina, micronúcleos en linfocitos (MN), tioeteres en orina y parámetros hematológicos. La muestra estuvo conformada por 10 individuos expuestos (GE) entre 24 y 56 años y 9 sujetos control (GC) con el mismo rango de edad de una universidad pública. El valor medio de N-(2-hidroxietil)valina (HEV) (pmol/g globina), en el GE fue 6758,5 ± 4143,6 y de 465,7 ± 484,5 en el GC (p < 0,0001), para MN x 1000 células, en el GE el valor medio fue de 4,8 ± 2,5 y de 0,7 ± 0,8 en el GC (p < 0,0001); Para la concentración de tioéter (mmolesSH/mol de creatinina), se obtuvo en el GE 38,5 ± 22,6 y en el GC 23,2 ± 8,8, encontrándose diferencias significativa al 5% (p=0,04), entre ambos grupos. Los parámetros hematológicos estudiados en GE y GC, puso en evidencia disminución de hemoglobina y hematocrito en el GE con una diferencia significativa entre las medias, de la hemoglobina (p=0,03) y en el hematocrito (p=0,04). Concluyéndose que los resultados son consistentes con algunos estudios previos de biomonitoreo ocupacional, demostrándose la importancia de disponer de una batería de biomarcadores en la evaluación de la exposición al OE.

Ethylene oxide (EO) is a genotoxic carcinogen, able to react with biological macromolecules such as hemoglobin and deoxyrebonucleic acid (DNA) to form N-(2-hydroxyethyl)valine (HEV) and 7-(2-hydroxyethyl)-guanine (7-HEG), respectively; these compounds are known as adducts. We evaluated biomarkers of effect and exposure workers from the central sterilization unit of a public hospital. The purpose of this descriptive study was to evaluate 10 EO-exposed employees (GE), ranging in age from 24 to 56 years, and 9 control workers from a public university (GC) of similar age.. The mean value of N-(2-hydroxyethyl)valine (HEV)(pmol/mol globin) in the GE group was 6758.6 ± 4143.6 and 465.7 ± 484.5 in the GC group; for micronuclei (MN) in lymphocytes (MNx1000 cells), the mean value in GE was 4.8 ± 2.5 and for GC it was 0.7 ± 0.8 in GC (p< 0,0001). Thioether concentrations (mmoles SH/mol creatinine), were also significantly higher in GE (38.5 ± 22.6) than in GC (23.2±8.8) (p=0,04). Standard hematological indices (hemoglobin and hematocrit) were lower in GE than in GC (p=0.03 and 0.04, respectively). These results agreed with some prior occupational biomonitoring studies that demonstrate the importance of using biomarker batteries in the evaluation of exposure to EO.