RESUMO
The increasing use of polymyxins as last-resort drugs for managing infections by Acinetobacter baumannii has led to the emergence of resistance. This study aimed to determine the resistance mechanisms in Acinetobacter baumannii isolates with colistin MIC ≥ 4 mg/L and to relate the mechanisms of resistance with the difficulties in detecting them. Absolute agreement among the different methodologies (Phoenix automatized system, broth and agar dilution, and a rapid colorimetric test) in the 140 colistin-susceptible isolates was observed; whereas in the 25 resistant isolates, the performance varied according to the colistin MIC value. Most of the discrepancies (irrespective of the methodology that was used) were observed in isolates with an MIC value close to the breakpoint. The number of errors in each method in the resistant isolates was as follows: rapid test, four of 25 (16%); agar dilution, eight of 25 (32%); Phoenix system, 13 of 25 (52%) and its manual reading at 24 h, eight of 25 (32%). Categorical errors were detected in 13 isolates: slow growth was the main reason in five isolates, whereas in the remaining eight isolates, slow growth was detected together with a low proportion of colistin-resistant subpopulations and the colistin MIC value was close to the breakpoint value. To understand the probable reason for the observed MIC values, sequencing of genes associated with colistin resistance was performed. Mutations at lpxA, lpxC, and pmrB genes were detected and it was observed that isolates carrying mutations in lpxC presented slow growth at killing curves.
Assuntos
Acinetobacter baumannii/efeitos dos fármacos , Acinetobacter baumannii/genética , Antibacterianos/farmacologia , Colistina/farmacologia , Farmacorresistência Bacteriana Múltipla/genética , Infecções por Acinetobacter/tratamento farmacológico , Acinetobacter baumannii/isolamento & purificação , Aciltransferases/genética , Amidoidrolases/genética , Humanos , Testes de Sensibilidade MicrobianaRESUMO
El presente estudio investiga la utilidad de determinar puntos de corte ajustados según la edad gestacional y el peso al nacer de neonatos (2-100 días) en la cuantificación de 17-hidroxiprogesterona en muestras de sangre seca en papel de filtro. Se analizaron los resultados de 6.266 determinaciones realizadas en el marco del Programa Nacional de Fortalecimiento de la Detección Precoz de Enfermedades Congénitas. Los datos se dividieron en cuatro grupos; Grupo 1: recién nacido pretérmino con bajo peso; Grupo 2: recién nacido pretérmino con peso normal; Grupo 3: recién nacido a término con bajo peso y Grupo 4: recién nacido a término con peso normal. Se establecieron puntos de corte diferentes a partir del cálculo del percentilo 99 de la distribución de frecuencias. Basado en este análisis se realizó la comparación de la tasa de resultados falsos positivos que se obtuvieron según el punto de corte establecido por el fabricante y los obtenidos en el estudio. Los nuevos puntos de corte obtenidos fueron: 217,72 nmol/L, 102,14 nmol/L, 61,62 nmol/L y 82,38 nmol/L para los grupos 1, 2, 3 y 4 respectivamente. Se evidenció una tasa total de falsos positivos del 1% con los nuevos puntos de corte, significativamente menor a la tasa del 6,2% obtenida al utilizar el punto de corte del fabricante. Esto puso en evidencia que el uso de puntos de corte adecuadamente establecidos para la población en estudio reduce significativamente las complicaciones derivadas de las repeticiones de análisis y eventualmente la tasa de recitaciones, lo cual es una importante contribución a la Salud Pública.
The present work studies the usefulness of determining adjusted cut-offs for the quantification of 17-hydroxyprogesterone in dried blood samples on filter paper, taking into account the gestational age and weight of the neonates. The results of 6266 determinations made within the framework of the National Program of Strengthening Early Detection of Congenital Disease were analysed. Data were divided into groups, Group 1: early established from the calculation of the 99 percentiles of the frequency distribution. New cutoff points were: 217.72 nmol/L, 102.14 nmol/L, 61.62 nmol/L and 82.38 nmol/L for groups 1, 2, 3 and 4 respectively. It showed a total rate of 1% false positives with the new cut-off points, which was significantly lower than the rate of 6.2% obtained using the manufacturer's cutoff. This revealed that the use of properly established cut-offs for the study of population reduces significantly the complications derived fromn analysis repetitions and eventually the recitation rate, which is an important contribution to Public Health.
O presente estudo investiga a utilidade de determinar pontos de corte estabelecidos conforme a idade gestacional e o peso ao nascer de neonatos (2-100 dias) na quantificação da 17-hidroxiprogesterona em amostras de sangue seco em papel filtro. Foram analisados os resultados de 6.266 determinações feitas no âmbito do Programa Nacional de Fortalecimento da Detecção Precoce de Doenças Congênitas. Os dados foram divididos em quatro grupos; Grupo 1: recém-nascido pré-termo com baixo peso, Grupo 2: recém-nascido pré-termo com peso normal, Grupo 3: recém-nascido a termo com baixo peso e Grupo 4: recém-nascido a termo com peso normal e foram estabelecidos pontos de corte diferentes a partir do cálculo do percentil 99 da distribuição de frequências. Com base nesta análise foi realizada a comparação da taxa de resultados falsos positivos obtidos conforme o ponto de corte estabelecido pelo fabricante e os obtidos no estudo. Os novos pontos de corte obtidos foram: 217,72 nmol/L, 102,14 nmol/L, 61,62 nmol/L e 82,38 nmol/L para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. Tornou-se evidente uma taxa total de 1% de falsos positivos, com os novos pontos de corte significativamente menor do que a taxa de 6,2% obtida utilizando o ponto de corte do fabricante. Isto revelou que o uso de pontos de corte de forma adequada estabelecidos para a população em estudo reduz significativamente as complicações decorrentes das repetições de análises e eventualmente a taxa de repetição de novos encontros, o que é uma importante contribuição para a saúde pública.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Recém-Nascido , 17-alfa-Hidroxiprogesterona/análise , 17-alfa-Hidroxiprogesterona/sangue , Hiperplasia Suprarrenal Congênita , Hiperplasia Suprarrenal Congênita/sangue , Doenças e Anormalidades Congênitas, Hereditárias e Neonatais , Doenças Genéticas Inatas , HidroxiprogesteronasRESUMO
El presente estudio investiga la utilidad de determinar puntos de corte ajustados según la edad gestacional y el peso al nacer de neonatos (2-100 días) en la cuantificación de 17-hidroxiprogesterona en muestras de sangre seca en papel de filtro. Se analizaron los resultados de 6.266 determinaciones realizadas en el marco del Programa Nacional de Fortalecimiento de la Detección Precoz de Enfermedades Congénitas. Los datos se dividieron en cuatro grupos; Grupo 1: recién nacido pretérmino con bajo peso; Grupo 2: recién nacido pretérmino con peso normal; Grupo 3: recién nacido a término con bajo peso y Grupo 4: recién nacido a término con peso normal. Se establecieron puntos de corte diferentes a partir del cálculo del percentilo 99 de la distribución de frecuencias. Basado en este análisis se realizó la comparación de la tasa de resultados falsos positivos que se obtuvieron según el punto de corte establecido por el fabricante y los obtenidos en el estudio. Los nuevos puntos de corte obtenidos fueron: 217,72 nmol/L, 102,14 nmol/L, 61,62 nmol/L y 82,38 nmol/L para los grupos 1, 2, 3 y 4 respectivamente. Se evidenció una tasa total de falsos positivos del 1% con los nuevos puntos de corte, significativamente menor a la tasa del 6,2% obtenida al utilizar el punto de corte del fabricante. Esto puso en evidencia que el uso de puntos de corte adecuadamente establecidos para la población en estudio reduce significativamente las complicaciones derivadas de las repeticiones de análisis y eventualmente la tasa de recitaciones, lo cual es una importante contribución a la Salud Pública.(AU)
The present work studies the usefulness of determining adjusted cut-offs for the quantification of 17-hydroxyprogesterone in dried blood samples on filter paper, taking into account the gestational age and weight of the neonates. The results of 6266 determinations made within the framework of the National Program of Strengthening Early Detection of Congenital Disease were analysed. Data were divided into groups, Group 1: early established from the calculation of the 99 percentiles of the frequency distribution. New cutoff points were: 217.72 nmol/L, 102.14 nmol/L, 61.62 nmol/L and 82.38 nmol/L for groups 1, 2, 3 and 4 respectively. It showed a total rate of 1% false positives with the new cut-off points, which was significantly lower than the rate of 6.2% obtained using the manufacturers cutoff. This revealed that the use of properly established cut-offs for the study of population reduces significantly the complications derived fromn analysis repetitions and eventually the recitation rate, which is an important contribution to Public Health.(AU)
O presente estudo investiga a utilidade de determinar pontos de corte estabelecidos conforme a idade gestacional e o peso ao nascer de neonatos (2-100 dias) na quantificaþÒo da 17-hidroxiprogesterona em amostras de sangue seco em papel filtro. Foram analisados os resultados de 6.266 determinaþ§es feitas no Ômbito do Programa Nacional de Fortalecimento da DetecþÒo Precoce de Doenþas CongÛnitas. Os dados foram divididos em quatro grupos; Grupo 1: recém-nascido pré-termo com baixo peso, Grupo 2: recém-nascido pré-termo com peso normal, Grupo 3: recém-nascido a termo com baixo peso e Grupo 4: recém-nascido a termo com peso normal e foram estabelecidos pontos de corte diferentes a partir do cálculo do percentil 99 da distribuiþÒo de frequÛncias. Com base nesta análise foi realizada a comparaþÒo da taxa de resultados falsos positivos obtidos conforme o ponto de corte estabelecido pelo fabricante e os obtidos no estudo. Os novos pontos de corte obtidos foram: 217,72 nmol/L, 102,14 nmol/L, 61,62 nmol/L e 82,38 nmol/L para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. Tornou-se evidente uma taxa total de 1% de falsos positivos, com os novos pontos de corte significativamente menor do que a taxa de 6,2% obtida utilizando o ponto de corte do fabricante. Isto revelou que o uso de pontos de corte de forma adequada estabelecidos para a populaþÒo em estudo reduz significativamente as complicaþ§es decorrentes das repetiþ§es de análises e eventualmente a taxa de repetiþÒo de novos encontros, o que é uma importante contribuiþÒo para a saúde pública.(AU)
