Control of sodium and potassium homeostasis by renal distal convoluted tubules.

Distal convoluted tubules (DCT), which contain the Na-Cl cotransporter (NCC) inhibited by thiazide diuretics, undergo complex modulation to preserve Na+ and K+ homeostasis. The lysine kinases 1 and 4 (WNK1 and WNK4), identified as hyperactive in the hereditary disease pseudohypoaldosteronism type 2, are responsible for activation of NCC and consequent hypokalemia and hypertension. WNK4, highly expressed in DCT, activates the SPAK/OSR1 kinases, which phosphorylate NCC and other regulatory proteins and transporters in the distal nephron. WNK4 works as a chloride sensor through a Cl- binding site, which acts as an on/off switch at this kinase in response to changes of basolateral membrane electrical potential, the driving force of cellular Cl- efflux. High intracellular Cl- in hyperkalemia decreases NCC phosphorylation and low intracellular Cl- in hypokalemia increases NCC phosphorylation and activity, which makes plasma K+ concentration a central modulator of NCC and of K+ secretion. The WNK4 phosphorylation by cSrc or SGK1, activated by angiotensin II or aldosterone, respectively, is another relevant mechanism of NCC, ENaC, and ROMK modulation in states such as volume reduction, hyperkalemia, and hypokalemia. Loss of NCC function induces upregulation of electroneutral NaCl reabsorption by type B intercalated cells through the combined activity of pendrin and NDCBE, as demonstrated in double knockout mice (KO) animal models, Ncc/pendrin or Ncc/NDCBE. The analysis of ks-Nedd-4-2 KO animal models introduced the modulation of NEDD4-2 by intracellular Mg2+ activity as an important regulator of NCC, explaining the thiazide-induced persistent hypokalemia.

Control of sodium and potassium homeostasis by renal distal convoluted tubules

Distal convoluted tubules (DCT), which contain the Na-Cl cotransporter (NCC) inhibited by thiazide diuretics, undergo complex modulation to preserve Na+ and K+ homeostasis. The lysine kinases 1 and 4 (WNK1 and WNK4), identified as hyperactive in the hereditary disease pseudohypoaldosteronism type 2, are responsible for activation of NCC and consequent hypokalemia and hypertension. WNK4, highly expressed in DCT, activates the SPAK/OSR1 kinases, which phosphorylate NCC and other regulatory proteins and transporters in the distal nephron. WNK4 works as a chloride sensor through a Cl- binding site, which acts as an on/off switch at this kinase in response to changes of basolateral membrane electrical potential, the driving force of cellular Cl- efflux. High intracellular Cl- in hyperkalemia decreases NCC phosphorylation and low intracellular Cl- in hypokalemia increases NCC phosphorylation and activity, which makes plasma K+ concentration a central modulator of NCC and of K+ secretion. The WNK4 phosphorylation by cSrc or SGK1, activated by angiotensin II or aldosterone, respectively, is another relevant mechanism of NCC, ENaC, and ROMK modulation in states such as volume reduction, hyperkalemia, and hypokalemia. Loss of NCC function induces upregulation of electroneutral NaCl reabsorption by type B intercalated cells through the combined activity of pendrin and NDCBE, as demonstrated in double knockout mice (KO) animal models, Ncc/pendrin or Ncc/NDCBE. The analysis of ks-Nedd-4-2 KO animal models introduced the modulation of NEDD4-2 by intracellular Mg2+ activity as an important regulator of NCC, explaining the thiazide-induced persistent hypokalemia.

Progresso metodológico e sua influência na produção in vitro de embriões bovinos no Brasil / Influence of methodology progress on in vitro production of bovine embryo in Brazil

A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos apresenta significativa expressão nacional em níveiscomercial e científico, sendo responsável pela produção de aproximadamente 250 mil embriões ao ano. Obteveseus primeiros produtos em 1977 no Japão e em 1982 nos Estados Unidos, ao passo que o primeiro bezerrobrasileiro foi produzido anos mais tarde, em 1994. A partir daí, como uma técnica consolidada, vemapresentando estudos para o melhoramento de sua metodologia acerca de diversos temas, como maturaçãooócitária, capacitação espermática, aditivos para os meios de cultura, entre outros. Esta revisão teve comoobjetivo elencar os avanços nas metodologias que marcaram a história contribuindo para o aumento da eficiêncianas taxas de bovinos produzidos in vitro no Brasil. Adicionalmente, serão abordados aspectos históricosnecessários para o desenvolvimento da produção in vitro de embriões bovinos no Brasil e aspectos atuais queainda se apresentam como um empecilho na elevação da eficiência dessa biotécnica. Mesmo sendo uma técnicabem estabelecida e amplamente utilizada, ainda é perceptível a necessidade de avanços em determinadas etapas,principalmente em relação à maturação.(AU)

The first products resulting from the in vitro production of bovine embryos (IVP) were obtained in 1977in Japan, 1982 in the United States of America and some years later in Brazil (1994). Since these events thetechnique has been seen as successful it is importance to the science and industry. Nowadays the Brazilianproduction of in vitro products is about 250,000 embryos per year. Although widely used, this biotechnologyneeds to be updated constantly to ensure more efficiency in its stages. Thus, the purposes of this review are tolist in chronological order the advances which have marked the history, contributing to increasing the efficiencyof IVP in Brazil and current aspects that still stand as an obstacle to improve this technique.(AU)

Progresso metodológico e sua influência na produção in vitro de embriões bovinos no Brasil / Influence of methodology progress on in vitro production of bovine embryo in Brazil

A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos apresenta significativa expressão nacional em níveiscomercial e científico, sendo responsável pela produção de aproximadamente 250 mil embriões ao ano. Obteveseus primeiros produtos em 1977 no Japão e em 1982 nos Estados Unidos, ao passo que o primeiro bezerrobrasileiro foi produzido anos mais tarde, em 1994. A partir daí, como uma técnica consolidada, vemapresentando estudos para o melhoramento de sua metodologia acerca de diversos temas, como maturaçãooócitária, capacitação espermática, aditivos para os meios de cultura, entre outros. Esta revisão teve comoobjetivo elencar os avanços nas metodologias que marcaram a história contribuindo para o aumento da eficiêncianas taxas de bovinos produzidos in vitro no Brasil. Adicionalmente, serão abordados aspectos históricosnecessários para o desenvolvimento da produção in vitro de embriões bovinos no Brasil e aspectos atuais queainda se apresentam como um empecilho na elevação da eficiência dessa biotécnica. Mesmo sendo uma técnicabem estabelecida e amplamente utilizada, ainda é perceptível a necessidade de avanços em determinadas etapas,principalmente em relação à maturação.

The first products resulting from the in vitro production of bovine embryos (IVP) were obtained in 1977in Japan, 1982 in the United States of America and some years later in Brazil (1994). Since these events thetechnique has been seen as successful it is importance to the science and industry. Nowadays the Brazilianproduction of in vitro products is about 250,000 embryos per year. Although widely used, this biotechnologyneeds to be updated constantly to ensure more efficiency in its stages. Thus, the purposes of this review are tolist in chronological order the advances which have marked the history, contributing to increasing the efficiencyof IVP in Brazil and current aspects that still stand as an obstacle to improve this technique.

Xenotransplante em camundongos imunossuprimidos coletado por meio de ovariectomia unilateral total vídeolaparoscópica em ovelha / Xenotransplantation in immunosuppressed mice collected from total unilateral laparoscopic ovariectomy in sheep

Objetivou-se neste estudo descrever a técnica de xenotransplante gonadal em camundongosimunossuprimidos por meio de ovariectomia unilateral total videolaparoscópica (OVL) em ovelhas. Foramutilizadas quatro ovelhas como doadoras do tecido reprodutivo e camundongos em fase reprodutiva (n = 12)como receptores. As coletas foram realizadas por videocirurgia, e foram avaliados o tempo de cirurgia, as respostascomportamentais antiálgicas, o apetite, o escore corporal e a locomoção durante 10 dias pós-operatórios. Osxenotransplantes foram realizados na cápsula renal dos camundongos, sendo avaliados histologicamente 60 diasapós o transplante. O tempo de cirurgia foi de 18 ± 3 min. A técnica OVL apresentou-se minimamente invasiva,sem complicações cirúrgicas, proporcionando mínimo desconforto e ótima recuperação dos animais, e pode serempregada em ovelhas adultas e pré-púberes para coleta de tecidos reprodutivos para conservação de gametas. Parahistologia dos tecidos xenotransplantados, verificou-se viabilidade tecidual, com neovascularização e ausência defocos necróticos, porém não se visualizaram folículos nas diferentes fases. Concluiu-se que a OVL pode ser atécnica empregada em ovelhas pré-púberes e adultas para recuperação de tecido reprodutivo paraxenotransplante. Para o xenotransplante, sugere-se que os fragmentos ovarianos selecionados contenham umnúmero suficiente de folículos primordiais para o possível sucesso da biotécnica.(AU)

The aim of this study was to describe the technique of gonadal xenotransplantation inimmunosuppressed mice from total unilateral laparoscopic ovariectomy (OVL) in sheep. Four sheep were usedas donors of reproductive tissue in mice in the reproductive phase (n = 12) as receivers. Samples were collectedby laparoscopic surgery, evaluating the time of surgery, observation of behavioral anti-painful responses,monitoring appetite, body condition score and locomotion for 10 days postoperatively. The xenografts wereperformed in the renal capsule of mice, as evaluated histologically 60 days after transplantation. The operationtime was 18 ± 3 min, the technique presented OVL minimally invasive surgical complications without providingminimum discomfort and optimum recovery of the animals and can be used in adult and prepubertal sheep forcollecting reproductive tissues for the conservation of gametes. Histology tissue xenotransplanteted was a viabletissue, with neovascularization and absence of necrotic foci, but follicles at different stages were not visualized.It was concluded that the OVL technique can be employed in sheep and adult prepubertal for recoveringreproductive tissue for xenotransplantation. For xenotransplantation, it is suggested that the ovarian fragmentsselected contain a sufficient number of primordial follicles for the possible success of biotech.(AU)

Xenotransplante em camundongos imunossuprimidos coletado por meio de ovariectomia unilateral total vídeolaparoscópica em ovelha / Xenotransplantation in immunosuppressed mice collected from total unilateral laparoscopic ovariectomy in sheep

Objetivou-se neste estudo descrever a técnica de xenotransplante gonadal em camundongosimunossuprimidos por meio de ovariectomia unilateral total videolaparoscópica (OVL) em ovelhas. Foramutilizadas quatro ovelhas como doadoras do tecido reprodutivo e camundongos em fase reprodutiva (n = 12)como receptores. As coletas foram realizadas por videocirurgia, e foram avaliados o tempo de cirurgia, as respostascomportamentais antiálgicas, o apetite, o escore corporal e a locomoção durante 10 dias pós-operatórios. Osxenotransplantes foram realizados na cápsula renal dos camundongos, sendo avaliados histologicamente 60 diasapós o transplante. O tempo de cirurgia foi de 18 ± 3 min. A técnica OVL apresentou-se minimamente invasiva,sem complicações cirúrgicas, proporcionando mínimo desconforto e ótima recuperação dos animais, e pode serempregada em ovelhas adultas e pré-púberes para coleta de tecidos reprodutivos para conservação de gametas. Parahistologia dos tecidos xenotransplantados, verificou-se viabilidade tecidual, com neovascularização e ausência defocos necróticos, porém não se visualizaram folículos nas diferentes fases. Concluiu-se que a OVL pode ser atécnica empregada em ovelhas pré-púberes e adultas para recuperação de tecido reprodutivo paraxenotransplante. Para o xenotransplante, sugere-se que os fragmentos ovarianos selecionados contenham umnúmero suficiente de folículos primordiais para o possível sucesso da biotécnica.

The aim of this study was to describe the technique of gonadal xenotransplantation inimmunosuppressed mice from total unilateral laparoscopic ovariectomy (OVL) in sheep. Four sheep were usedas donors of reproductive tissue in mice in the reproductive phase (n = 12) as receivers. Samples were collectedby laparoscopic surgery, evaluating the time of surgery, observation of behavioral anti-painful responses,monitoring appetite, body condition score and locomotion for 10 days postoperatively. The xenografts wereperformed in the renal capsule of mice, as evaluated histologically 60 days after transplantation. The operationtime was 18 ± 3 min, the technique presented OVL minimally invasive surgical complications without providingminimum discomfort and optimum recovery of the animals and can be used in adult and prepubertal sheep forcollecting reproductive tissues for the conservation of gametes. Histology tissue xenotransplanteted was a viabletissue, with neovascularization and absence of necrotic foci, but follicles at different stages were not visualized.It was concluded that the OVL technique can be employed in sheep and adult prepubertal for recoveringreproductive tissue for xenotransplantation. For xenotransplantation, it is suggested that the ovarian fragmentsselected contain a sufficient number of primordial follicles for the possible success of biotech.

Criopreservação e xenotransplante de tecido ovariano / Cryopreservation and xenotransplantation of ovarian tissue

A criopreservação de tecido ovariano é uma biotécnica alternativa potencialmente útil na formação de bancos de células germinativas para a estocagem de DNA de espécies de alto valor zootécnico, raras ou em extinção. Além disso, gera grandes perspectivas na preservação da fertilidade de pacientes com câncer ou com problemas de infertilidade que possam provocar falha ovariana prematura. A criopreservação aliada ao processo de xenotransplante é um campo vasto para pesquisas, abrangendo desde métodos e protocolos mais efetivos de preservação até aspectos fundamentais da foliculogênese.

Cryopreservation of ovarian tissue is an alternative biotechnology potentially useful to implement gene DNA banks of livestock animals, rare and endangered species. Furthermore, it generates great prospects to save the fertility of patients with cancer or infertility problems that can cause premature ovarian failure. The cryopreservation combined with xenotransplantation is an ample field for research, rangingfrom more effective methods and protocols, including fundamental aspects of folliculogenesis.

Potencial do cultivo in vitro e do xenotransplante na sobrevida e no desenvolvimento de folículos ovarianos pré-antrais em matrizes de ruminantes domésticos em risco de morte: revisão de literatura / Potential of in vitro culture and xenotransplantation on surviving and development of ovarian preantral follicles in ruminant females at risk of death: a review

A presente revisão aborda os principais avanços do cultivo in vitro e do xenotransplante de folículos ovarianos pré-antrais e como estas técnicas poderão contribuir, de maneira isolada ou conjunta, para a produção in vitro de embriões a partir de matrizes de estimado valor genético ou zootécnico e que estejam em situações de morte iminente ou imediatamente post-mortem. As informações apresentadas nesta revisão permitem concluir que ambas as biotécnicas estão em constante desenvolvimento e que, num futuro próximo, poderão fornecer, isolada ou conjuntamente, folículos antrais aptos à rotina de produção in vitro de embriões de ruminantes.

This review approaches the main contributions on advances and how does in vitro culture and xenotransplantation of preantral follicles can contribute in each one or both of these techniques, for in vitro production of embryos from ruminants of high genetic or zootechnic merits that are in imminent death or in the immediately post-mortem period. The informations presented in this review allows the conclusion that both biotecniques are in progress and, in a near future, they could provide, separately or in conjunction, antral follicles suitable for routine in vitro production of embryos from ruminants.

Potencial do cultivo in vitro e do xenotransplante na sobrevida e no desenvolvimento de folículos ovarianos pré-antrais em matrizes de ruminantes domésticos em risco de morte: revisão de literatura / Potential of in vitro culture and xenotransplantation on surviving and development of ovarian preantral follicles in ruminant females at risk of death: a review

A presente revisão aborda os principais avanços do cultivo in vitro e do xenotransplante de folículos ovarianos pré-antrais e como estas técnicas poderão contribuir, de maneira isolada ou conjunta, para a produção in vitro de embriões a partir de matrizes de estimado valor genético ou zootécnico e que estejam em situações de morte iminente ou imediatamente post-mortem. As informações apresentadas nesta revisão permitem concluir que ambas as biotécnicas estão em constante desenvolvimento e que, num futuro próximo, poderão fornecer, isolada ou conjuntamente, folículos antrais aptos à rotina de produção in vitro de embriões de ruminantes.(AU)

This review approaches the main contributions on advances and how does in vitro culture and xenotransplantation of preantral follicles can contribute in each one or both of these techniques, for in vitro production of embryos from ruminants of high genetic or zootechnic merits that are in imminent death or in the immediately post-mortem period. The informations presented in this review allows the conclusion that both biotecniques are in progress and, in a near future, they could provide, separately or in conjunction, antral follicles suitable for routine in vitro production of embryos from ruminants.(AU)

Criopreservação e xenotransplante de tecido ovariano / Cryopreservation and xenotransplantation of ovarian tissue

A criopreservação de tecido ovariano é uma biotécnica alternativa potencialmente útil na formação de bancos de células germinativas para a estocagem de DNA de espécies de alto valor zootécnico, raras ou em extinção. Além disso, gera grandes perspectivas na preservação da fertilidade de pacientes com câncer ou com problemas de infertilidade que possam provocar falha ovariana prematura. A criopreservação aliada ao processo de xenotransplante é um campo vasto para pesquisas, abrangendo desde métodos e protocolos mais efetivos de preservação até aspectos fundamentais da foliculogênese.(AU)

Cryopreservation of ovarian tissue is an alternative biotechnology potentially useful to implement gene DNA banks of livestock animals, rare and endangered species. Furthermore, it generates great prospects to save the fertility of patients with cancer or infertility problems that can cause premature ovarian failure. The cryopreservation combined with xenotransplantation is an ample field for research, rangingfrom more effective methods and protocols, including fundamental aspects of folliculogenesis.(AU)

Biópsia hepática com agulha tru-cut guiada por videolaparoscopia em caprinos / Videolaparoscopic guided hepatic biopsy with tru-cut needle in goats

Descreve-se a técnica de biópsia hepática com agulha tru-cut guiada por videolaparoscopia em 12 caprinos machos, castrados, hígidos, sem raça definida, distribuídos em dois grupos (G): G1, com cinco animais de 12 meses e G2, com sete de seis meses de idade. O procedimento foi realizado sob anestesia geral intravenosa com o animal em decúbito lateral esquerdo. O pneumoperitônio e a laparoscopia foram procedidos no flanco direito, aproximadamente a 10cm ventral aos processos transversos das vértebras lombares. A agulha tru-cut foi introduzida no 11º espaço intercostal direito, a aproximadamente 12cm ventral à coluna vertebral, para punção e remoção de fragmento do lobo hepático direito. O tempo operatório médio foi de 23 minutos e cinco segundos. A hemorragia causada pela perfuração hepática cessou em dois minutos em 75 por cento dos animais e em três minutos, nos 25 por cento restantes. Nas avaliações clínicas feitas no pré-jejum e às 24, 48 e 72 horas após a biópsia, não foram observadas alterações (P>0,05) da temperatura retal, das frequências cardíaca e respiratória e dos movimentos rumenais nos dois grupos. A biópsia hepática com agulha tru-cut guiada por videolaparoscopia foi considerada eficaz para uso em caprinos, permitindo a obtenção de fragmentos hepáticos suficientes para exame histológico.(AU)

The videolaparoscopic guided hepatic biopsy with tru-cut needle is described in 12 healthy, no defined breed, castrated male goats. Animals were distributed in two groups: G1 (n=5) 12-month-old animals; and G2 (n=7) six-month-old animals. The procedure was performed with the animal in left lateral recumbency and under total intravenous anesthesia. Pneumoperitoneum and laparoscopy were performed in the right flank, approximately 10cm ventral to the transverse processes of the lumbar vertebrae. The tru-cut needle was inserted into the right eleventh intercostal space, around 12cm ventral to the spinal column, for punching and removal of a fragment from the right hepatic lobe. The average time spent in the surgical procedure was 23 minutes and five seconds. The hemorrhage caused by the liver biopsy ceased in two minutes (75 percent) and in three minutes in the other animals (25 percent). In the clinical evaluations performed during the pre-fasting period and 24, 48, and 72 hours after the biopsy procedure, neither group presented alterations (P>0.05) evaluated by rectal temperature; and cardiac, respiratory, and rumen frequencies. The videolaparoscopic guided hepatic biopsy with tru-cut needle was considered efficacious to be used in goats, providing hepatic tissue fragments suitable for histological examination.(AU)

Biópsia hepática com agulha tru-cut guiada por videolaparoscopia em caprinos / Videolaparoscopic guided hepatic biopsy with tru-cut needle in goats

Descreve-se a técnica de biópsia hepática com agulha tru-cut guiada por videolaparoscopia em 12 caprinos machos, castrados, hígidos, sem raça definida, distribuídos em dois grupos (G): G1, com cinco animais de 12 meses e G2, com sete de seis meses de idade. O procedimento foi realizado sob anestesia geral intravenosa com o animal em decúbito lateral esquerdo. O pneumoperitônio e a laparoscopia foram procedidos no flanco direito, aproximadamente a 10cm ventral aos processos transversos das vértebras lombares. A agulha tru-cut foi introduzida no 11º espaço intercostal direito, a aproximadamente 12cm ventral à coluna vertebral, para punção e remoção de fragmento do lobo hepático direito. O tempo operatório médio foi de 23 minutos e cinco segundos. A hemorragia causada pela perfuração hepática cessou em dois minutos em 75 por cento dos animais e em três minutos, nos 25 por cento restantes. Nas avaliações clínicas feitas no pré-jejum e às 24, 48 e 72 horas após a biópsia, não foram observadas alterações (P>0,05) da temperatura retal, das frequências cardíaca e respiratória e dos movimentos rumenais nos dois grupos. A biópsia hepática com agulha tru-cut guiada por videolaparoscopia foi considerada eficaz para uso em caprinos, permitindo a obtenção de fragmentos hepáticos suficientes para exame histológico.

The videolaparoscopic guided hepatic biopsy with tru-cut needle is described in 12 healthy, no defined breed, castrated male goats. Animals were distributed in two groups: G1 (n=5) 12-month-old animals; and G2 (n=7) six-month-old animals. The procedure was performed with the animal in left lateral recumbency and under total intravenous anesthesia. Pneumoperitoneum and laparoscopy were performed in the right flank, approximately 10cm ventral to the transverse processes of the lumbar vertebrae. The tru-cut needle was inserted into the right eleventh intercostal space, around 12cm ventral to the spinal column, for punching and removal of a fragment from the right hepatic lobe. The average time spent in the surgical procedure was 23 minutes and five seconds. The hemorrhage caused by the liver biopsy ceased in two minutes (75 percent) and in three minutes in the other animals (25 percent). In the clinical evaluations performed during the pre-fasting period and 24, 48, and 72 hours after the biopsy procedure, neither group presented alterations (P>0.05) evaluated by rectal temperature; and cardiac, respiratory, and rumen frequencies. The videolaparoscopic guided hepatic biopsy with tru-cut needle was considered efficacious to be used in goats, providing hepatic tissue fragments suitable for histological examination.

Fotossensibilização em animais de produção na região semi-árida do rio grande do norte

ABSTRACT The present work aimed to study the photosensitization outbreaks that have occurred in several livestock species in the semi-arid region of Rio Grande do Norte State, Northeastern Brazil. Seventeen farms with natural cases of photosensitization were visited, interviews were performed with animal keepers, and clinical examinations and serum biochemical panel for hepatic function were done. It was also performed evaluation of the pastures searching for suspected plants which could be promoting the disease. Samples of suspected plants as responsible for photosensitization were tested for trial detection of saponins. It was verified that photosensitization is characteristic of the secondary type (hepatogenous), and the most affected species are horses and cattle, but sheep, goats, and donkeys may also be affected. Furthermore, it seems that does not exist variation on the age susceptibility, but there are seasonal differences for occurrence of photosensitization, with outbreaks incidence in the rainy season. The most probably plant responsible for the disease is Floehlichia humboldtiana ('ervanço'), the only highly prevalent species in all places and that contains saponin

RESUMO O presente trabalho objetivou estudar a ocorrência de surtos naturais de fotossensibilização que vêm ocorrendo em diversas espécies animais na região semi-árida do Estado do Rio Grande do Norte. Foram visitadas 17 propriedades nas quais estavam ocorrendo casos naturais desta patologia. Foram realizadas entrevistas com os tratadores, exames clínicos e provas séricas bioquímicas de função hepática nos animais afetados. Também foram realizadas avaliações das pastagens para busca de plantas suspeitas de causarem a doença. Essasa mostras foram testadas para detecção preliminar de saponinas. Foi verificado que a fotossensibilização é do tipo secundária (hepatógena) e as espécies mais acometidas são a eqüina e a bovina, mas também ocorre em ovinos, caprinos e asininos. Além disto, parece não haver variação na susceptibilidade entre as diferentes faixas etárias, mas há uma sazonalidade na ocorrência da fotossensibilização, ocorrendo no período final da estação das chuvas. A possível etiologia é a planta conhecida popularmente como ervanço (Floehlichia humboldtiana), a única com alta prevalência em todos os locais afetados e contêm saponinas.