Effect of adding anethole to the cryopreservation medium (powdered coconut water) on morphology, kinetics, and oxidative stress of buck sperm / Efeito da adição de anethole ao meio de criopreserção (água de coco em pó) na morfologia, cinética e estresse oxidativo do sêmen de bode

The quality of post-thawing goat sperm is critical to the success of artificial insemination protocols and may be influenced by extenders, cryoprotectants, and antioxidant substances. Therefore, the objective of this study was to evaluate the effects of the antioxidant anethole on goat sperm diluted in preservation medium based on powdered coconut water (ACP-101c) and frozen. For that, each ejaculate was submitted to the following treatments: ACP-101c (control); control plus supplementation with 30, 300, or 2000 µg/ mL anethole. The samples were thawed and evaluated for morphology, kinetics, membrane integrity, and reactive oxygen species (ROS). The addition of anethole increased morphological abnormalities (P < 0.05), however, it did not affect sperm kinetics. Flow cytometry analysis showed that sperm cells cryopreserved with 300 µg/mL anethole had lower acrosome integrity than those cryopreserved in other treatments. Evaluation of oxidative stress revealed that cells stored in the presence of 2000 µg/mL anethole had small amounts of ROS when compared to those preserved in the control medium alone or supplemented with 300 µg/mL anethole (P < 0.05). After cryopreservation of sperm with 2000 µg/mL anethole, the highest percentage of viable sperm without ROS was observed (P < 0.05). In conclusion, despite reducing ROS levels, the supplementation of anethole in ACP-101c did not affect sperm kinetics or membrane integrity post-thawing, however, it did cause morphological damage to sperm.(AU)

A qualidade do espermatozoide caprino pós-descongelação é crítica para o sucesso dos protocolos de inseminação artificial e pode ser influenciada por extensores, crioprotetores e substâncias antioxidantes. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do antioxidante anetole sobre espermatozoides caprinos diluídos em meio de conservação à base de água de coco em pó (ACP-101c) e congelados. Para tanto, cada ejaculado foi submetido aos seguintes tratamentos: ACP-101c (controle); controle mais suplementação com 30, 300 ou 2000 µg / mL de anetole. As amostras foram descongeladas e avaliadas quanto à morfologia, cinética, integridade de membranas e espécies reativas de oxigênio. A adição de anetole aumentou as anormalidades morfológicas (P < 0,05), no entanto, não afetou a cinética dos espermatozoides. A análise da citometria de fluxo mostrou que as células de esperma criopreservadas com 300 µg / mL anethole tinham integridade acrosma menor do que aquelas criopreservadas em outros tratamentos. A avaliação do estresse oxidativo revelou que as células armazenadas na presença de 2000 µg / mL anethole apresentaram pequenas quantidades de ROS quando comparadas às preservadas em meio de controle isoladamente ou suplementadas com 300 µg / mL anethole (P < 0,05). Após a criopreservação de espermatozoides com 2000 µg / mL anethole, observou-se a maior porcentagem de espermatozoides viáveis sem ROS (P < 0,05). A população com espermatozoides viáveis sem ROS foi maior quando utilizado 2.000 µg / mL (P < 0,05). Em conclusão, apesar de reduzir os níveis de ROS, a suplementação de anetole em ACP-101c não afetou a cinética espermática e a integridade da membrana pós-descongelação, entretanto, causou danos morfológicos nos espermatozoides.(AU)

Diluentes seminais para pequenos ruminantes / Seminal extenders for small ruminants

Visando prolongar a conservação e o uso seminal, muitos diluentes vêm sendo utilizados em pequenos ruminantes, como os convencionais e os alternativos à base de substâncias vegetais, tendo como funções principais a proteção das membranas, a nutrição e a manutenção da pressão osmótica, bem como a multiplicação das doses inseminantes. Desta forma, este artigo tem como objetivo levantar os principais diluentes convencionais e alternativos utilizados na criopreservação seminal em pequenos ruminantes, a fim de maximizar seu uso e promover uma melhor qualidade espermática.(AU)

Looking to prolong preservation and seminal use, diluent muts are used in small ruminants, such as conventional ones and alternative ones based on vegetais substitions, tending as main functions to membrane protection, to nutrição e manutenção da pressão osmótica, bem as a multiplicação You give two inseminants. This way, this article aims to raise the main conventional and alternative diluents used in seminal cryopreservation, in small ruminants, in order to maximize its use and promote a better sperm quality.(AU)

Diluentes seminais para pequenos ruminantes / Seminal extenders for small ruminants

Visando prolongar a conservação e o uso seminal, muitos diluentes vêm sendo utilizados em pequenos ruminantes, como os convencionais e os alternativos à base de substâncias vegetais, tendo como funções principais a proteção das membranas, a nutrição e a manutenção da pressão osmótica, bem como a multiplicação das doses inseminantes. Desta forma, este artigo tem como objetivo levantar os principais diluentes convencionais e alternativos utilizados na criopreservação seminal em pequenos ruminantes, a fim de maximizar seu uso e promover uma melhor qualidade espermática.

Looking to prolong preservation and seminal use, diluent muts are used in small ruminants, such as conventional ones and alternative ones based on vegetais substitions, tending as main functions to membrane protection, to nutrição e manutenção da pressão osmótica, bem as a multiplicação You give two inseminants. This way, this article aims to raise the main conventional and alternative diluents used in seminal cryopreservation, in small ruminants, in order to maximize its use and promote a better sperm quality.

Fatores envolvidos na criopreservação do sêmen caprino / Factors involved in the cryopreservation of goat semen

Ao longo dos anos, tem-se observado um maior interesse em técnicas que possibilitem um melhor aproveitamento do material genético de reprodutores, em geral. Entretanto, para caprinos, a criopreservação seminal ainda tem alguns entraves, uma vez que não há um protocolo ideal, visando maximizar a utilização de boa qualidade e viabilidade. Nesse contexto, o presente trabalho tem como objetivo abordar os principais passos envolvidos na tecnologia da criopreservação do sêmen caprino, abrangendo desde a refrigeração, congelação, diluentes e crioprotetores, até a influência do plasma seminal sobre esses processos; com o intuito de aumentar o conhecimento das necessidades das células espermáticas, durante todas as etapas e colaborar para desenvolvimento de protocolos mais eficientes; favorecendo, assim, o melhoramento genético de animais de alto potencial.

Over the years, there has been a greater interest in technique that allow a better use of the genetic material of breeding herders in general. However, for goats, seminal cryopreservation still has some obstacles, since it does not have an ideal protocol, aiming to maximize the use of good quality and viability. In this context, the present work aims to address the main steps involved in the cryopreservation technology of goat semen, ranging from refrigeration, freezing, diluents and cryoprotectants to the influence of seminal plasma on these processes; With the aim of increasing the knowledge of the needs of spermatic cells during all the stages and collaborate to develop more efficient protocols, thus favoring the genetic improvement of high genetic animals.

Fatores envolvidos na criopreservação do sêmen caprino / Factors involved in the cryopreservation of goat semen

Ao longo dos anos, tem-se observado um maior interesse em técnicas que possibilitem um melhor aproveitamento do material genético de reprodutores, em geral. Entretanto, para caprinos, a criopreservação seminal ainda tem alguns entraves, uma vez que não há um protocolo ideal, visando maximizar a utilização de boa qualidade e viabilidade. Nesse contexto, o presente trabalho tem como objetivo abordar os principais passos envolvidos na tecnologia da criopreservação do sêmen caprino, abrangendo desde a refrigeração, congelação, diluentes e crioprotetores, até a influência do plasma seminal sobre esses processos; com o intuito de aumentar o conhecimento das necessidades das células espermáticas, durante todas as etapas e colaborar para desenvolvimento de protocolos mais eficientes; favorecendo, assim, o melhoramento genético de animais de alto potencial.(AU)

Over the years, there has been a greater interest in technique that allow a better use of the genetic material of breeding herders in general. However, for goats, seminal cryopreservation still has some obstacles, since it does not have an ideal protocol, aiming to maximize the use of good quality and viability. In this context, the present work aims to address the main steps involved in the cryopreservation technology of goat semen, ranging from refrigeration, freezing, diluents and cryoprotectants to the influence of seminal plasma on these processes; With the aim of increasing the knowledge of the needs of spermatic cells during all the stages and collaborate to develop more efficient protocols, thus favoring the genetic improvement of high genetic animals.(AU)

Parâmetros reprodutivos de caprinos da raça Canindé e Alpina Britânica nos Estados do Piauí e Ceará / Reproductive parameters of goats of the breed Canindé and British Alpine in the States of Piauí and Ceará

The objective of this study was to evaluate reproductive parameters of Canindé and British Alpine goatsin the states of Piauí and Ceará by measuring scrotal circumference (CE) and seminal parameters of eightanimals (Canindé (4) and British Alpine (4). Four samples were collected from each animal with the aid of anartificial vagina, after which each ejaculate was evaluated for volume, sperm concentration, total andprogressive mass motility, percentage of motile spermatozoa and vigor. Data were expressed as mean andstandard deviation and analyzed using the statistical program Graphpad Prism®. Although the values ofprogressive motility, scrotal circumference and volume were significantly higher in the British Alpine breed, thetwo races of the present study presented values regarding total motility and vigor within the one recommendedby the CBRA. Thus, the semen of the two breeds can be used for artificial insemination, germplasm bankformation and genetic breeding.(AU)

Protocolos de sincronização do estro e ovulação seguidos de inseminação artificial em tempo fixo em ovelhas deslanadas: Resultados preliminares / Synchronization protocols of oestrus and ovulation followed artificial insemination in fixed time in wooless sheep: Preliminary results

The objective of this study was to evaluate the oestrus and pregnancy using seven and 14 dayssynchronization protocol followed by fixed-time artificial insemination (FTAI) in sheep, 50 ewes were selectedand divided into two groups: G-14 (n = 25) and G-07 (n = 25). Were inserted vaginal sponges that remained forseven and 14 days, time when were applied e.G.C. and Cloroprostenol, this only in the G-07. Oestrus and FTAIwere 55 hours after. It was used sperm diluted in ACP-102 with 5% egg yolk, and refrigerated at 4 °C for fourhours. The results were: oestrus rates of 60% and 84%; pregnancy rates of 56% and 72%; lambing of 48% and68%, for G-07 and G- 14, respectively (P > 0.05). In conclusion, the short protocol was effective insynchronizing estrus wooless sheep, as well as long-term protocol.(AU)

Avaliação do sêmen fresco e criopreservado de caprinos autóctones no Estado do Piauí: Resultados preliminares / Evaluation of cryopreserved sperm of autochthonous goats in the State of Piauí: Preliminary results

This work aimed to evaluate the quantitative parameters of fresh and thawed sperm of Canindé goats in theState of Piauí. Ten sperm samples were collected, using artificial vagina, from four goats at reproductive age. Eachejaculate was evaluated for volume, sperm concentration, mass motility, total and progressive motility, percentage ofmotile spermatozoa and vigor, for further dilution in ACP-101. Then, the sperm was filled in 0.25 mL straws,cryopreserved using the TK3000 machine and stored in nitrogen cylinders at -196 °C, for further analysis at SCA. Thesperm parameters were submitted to the T test for comparison between the fresh and thawed groups. The values forfresh sperm relative to total and progressive motility, vigor and sperm viability were higher (P < 0.05) whencompared to thawed, although both fresh and thawed sperm of these animals could be used in programs of artificial insemination (IA).(AU)

Parâmetros reprodutivos de caprinos da raça Canindé e Alpina Britânica nos Estados do Piauí e Ceará / Reproductive parameters of goats of the breed Canindé and British Alpine in the States of Piauí and Ceará

The objective of this study was to evaluate reproductive parameters of Canindé and British Alpine goatsin the states of Piauí and Ceará by measuring scrotal circumference (CE) and seminal parameters of eightanimals (Canindé (4) and British Alpine (4). Four samples were collected from each animal with the aid of anartificial vagina, after which each ejaculate was evaluated for volume, sperm concentration, total andprogressive mass motility, percentage of motile spermatozoa and vigor. Data were expressed as mean andstandard deviation and analyzed using the statistical program Graphpad Prism®. Although the values ofprogressive motility, scrotal circumference and volume were significantly higher in the British Alpine breed, thetwo races of the present study presented values regarding total motility and vigor within the one recommendedby the CBRA. Thus, the semen of the two breeds can be used for artificial insemination, germplasm bankformation and genetic breeding.

Protocolos de sincronização do estro e ovulação seguidos de inseminação artificial em tempo fixo em ovelhas deslanadas: Resultados preliminares / Synchronization protocols of oestrus and ovulation followed artificial insemination in fixed time in wooless sheep: Preliminary results

The objective of this study was to evaluate the oestrus and pregnancy using seven and 14 dayssynchronization protocol followed by fixed-time artificial insemination (FTAI) in sheep, 50 ewes were selectedand divided into two groups: G-14 (n = 25) and G-07 (n = 25). Were inserted vaginal sponges that remained forseven and 14 days, time when were applied e.G.C. and Cloroprostenol, this only in the G-07. Oestrus and FTAIwere 55 hours after. It was used sperm diluted in ACP-102 with 5% egg yolk, and refrigerated at 4 °C for fourhours. The results were: oestrus rates of 60% and 84%; pregnancy rates of 56% and 72%; lambing of 48% and68%, for G-07 and G- 14, respectively (P > 0.05). In conclusion, the short protocol was effective insynchronizing estrus wooless sheep, as well as long-term protocol.

Avaliação do sêmen fresco e criopreservado de caprinos autóctones no Estado do Piauí: Resultados preliminares / Evaluation of cryopreserved sperm of autochthonous goats in the State of Piauí: Preliminary results

This work aimed to evaluate the quantitative parameters of fresh and thawed sperm of Canindé goats in theState of Piauí. Ten sperm samples were collected, using artificial vagina, from four goats at reproductive age. Eachejaculate was evaluated for volume, sperm concentration, mass motility, total and progressive motility, percentage ofmotile spermatozoa and vigor, for further dilution in ACP-101. Then, the sperm was filled in 0.25 mL straws,cryopreserved using the TK3000 machine and stored in nitrogen cylinders at -196 °C, for further analysis at SCA. Thesperm parameters were submitted to the T test for comparison between the fresh and thawed groups. The values forfresh sperm relative to total and progressive motility, vigor and sperm viability were higher (P < 0.05) whencompared to thawed, although both fresh and thawed sperm of these animals could be used in programs of artificial insemination (IA).

Avaliação da capacidade reprodutiva de caprinos tratados com testosterona bioidêntica por via transdérmica / Libido evaluation, serum testosterone and sperm quality goats treated with bioidentical testosterone transdermally

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da aplicação de testosterona bioidêntica, por via transdérmica escrotal em caprinos, sobre o comportamento sexual, a produção quanti-qualitativa dos espermatozoides e, as concentrações de testosterona, FSH (Hormônio Folículo Estimulante) e LH (Hormônio Luteinizante), para o tratamento de reprodutores temporariamente inaptos à reprodução, uma vez que não existem dados na literatura referentes à associação do hormônio bioidêntico com a via de aplicação transdérmica em caprinos. Foram utilizados quatro machos caprinos (Saanen=03 e Anglo Nubiano=01), apresentando baixa libido e qualidade seminal insatisfatória, comprovados por andrológico. Semanalmente, ao longo de dois meses, foram realizadas colheitas e avaliação do sêmen; mensuração da circunferência escrotal (CE); aplicação da testosterona bioidêntica por via transdérmica escrotal e colheita de sangue, para determinar concentração sérica de testosterona, FSH e LH; além da verificação do comportamento sexual através do teste de libido. Para efeito de análise dos dados utilizou-se o programa estatístico SAS v.8 (2000). As concentrações séricas de testosterona apresentaram diferença significativa em função do período de tratamento, entretanto, não foi observada diferença significativa para os valores de FSH e LH. Na análise, do sêmen fresco, e resfriado, os parâmetros seminais avaliados não foram influenciados significativamente ao longo do período experimental. Conclui-se que o método de aplicação da testosterona bioidêntica por via transdérmica em caprinos, foi eficaz, considerando-se que tornou mais explícita a exibição da libido dos animais tratados, embora apesar do aumento dos níveis séricos de testosterona, não houve nenhuma interferência na qualidade seminal.

The objective of this study was to evaluate the effect of testosterone bioidentical by transdermal route of applicantion in goat scrotal, sexual behavior, quantitative and qualitative production of sperm, testosterone concentrations, FSH (Follicle Stimulating Hormone) and LH (Luteinizing Hormone) for the treatment of reproductive temporarily unable to play, since there is no data in the literature concerning association with hormone bioidêntico transdermal route of application in goats. We used four male goats (Saanen=03 and Anglo Nubian=01), with low libido and poor sperm quality, proven by andrological exam. Every week, over two months, it were taken and evalued sperm samples the scrotal circumference (SC) was mensure the bioidentical testosterone was applicated in the scrotal by transdermal route; blood samples were collected to determine serum testosterone, FSH and LH; beyond sexual behavior verification by testing libido. For purposes of data analysis used the statistical program SAS v.8 (2000). Serum testosterone showed significant differences depending on the treatment period, however, no significant difference was observed for FSH and LH between the different treatment periods. At the fresh and cooled sperm, the seminal parameters evaluated were not affected significantly throughout the experimental period. It can be concluded that the transdermal bioidentical testosterone application method in goats was effective, considering that it made the libido of treated animals more explicit, although despite the increase in serum testosterone levels, there was no interference in the seminal quality.

Avaliação da capacidade reprodutiva de caprinos tratados com testosterona bioidêntica por via transdérmica / Libido evaluation, serum testosterone and sperm quality goats treated with bioidentical testosterone transdermally

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da aplicação de testosterona bioidêntica, por via transdérmica escrotal em caprinos, sobre o comportamento sexual, a produção quanti-qualitativa dos espermatozoides e, as concentrações de testosterona, FSH (Hormônio Folículo Estimulante) e LH (Hormônio Luteinizante), para o tratamento de reprodutores temporariamente inaptos à reprodução, uma vez que não existem dados na literatura referentes à associação do hormônio bioidêntico com a via de aplicação transdérmica em caprinos. Foram utilizados quatro machos caprinos (Saanen=03 e Anglo Nubiano=01), apresentando baixa libido e qualidade seminal insatisfatória, comprovados por andrológico. Semanalmente, ao longo de dois meses, foram realizadas colheitas e avaliação do sêmen; mensuração da circunferência escrotal (CE); aplicação da testosterona bioidêntica por via transdérmica escrotal e colheita de sangue, para determinar concentração sérica de testosterona, FSH e LH; além da verificação do comportamento sexual através do teste de libido. Para efeito de análise dos dados utilizou-se o programa estatístico SAS v.8 (2000). As concentrações séricas de testosterona apresentaram diferença significativa em função do período de tratamento, entretanto, não foi observada diferença significativa para os valores de FSH e LH. Na análise, do sêmen fresco, e resfriado, os parâmetros seminais avaliados não foram influenciados significativamente ao longo do período experimental. Conclui-se que o método de aplicação da testosterona bioidêntica por via transdérmica em caprinos, foi eficaz, considerando-se que tornou mais explícita a exibição da libido dos animais tratados, embora apesar do aumento dos níveis séricos de testosterona, não houve nenhuma interferência na qualidade seminal.(AU)

The objective of this study was to evaluate the effect of testosterone bioidentical by transdermal route of applicantion in goat scrotal, sexual behavior, quantitative and qualitative production of sperm, testosterone concentrations, FSH (Follicle Stimulating Hormone) and LH (Luteinizing Hormone) for the treatment of reproductive temporarily unable to play, since there is no data in the literature concerning association with hormone bioidêntico transdermal route of application in goats. We used four male goats (Saanen=03 and Anglo Nubian=01), with low libido and poor sperm quality, proven by andrological exam. Every week, over two months, it were taken and evalued sperm samples the scrotal circumference (SC) was mensure the bioidentical testosterone was applicated in the scrotal by transdermal route; blood samples were collected to determine serum testosterone, FSH and LH; beyond sexual behavior verification by testing libido. For purposes of data analysis used the statistical program SAS v.8 (2000). Serum testosterone showed significant differences depending on the treatment period, however, no significant difference was observed for FSH and LH between the different treatment periods. At the fresh and cooled sperm, the seminal parameters evaluated were not affected significantly throughout the experimental period. It can be concluded that the transdermal bioidentical testosterone application method in goats was effective, considering that it made the libido of treated animals more explicit, although despite the increase in serum testosterone levels, there was no interference in the seminal quality.(AU)