RESUMO
INTRODUCTION: Dengue is a disease caused by one of four serotypes of the dengue virus (DENV) and is endemic in approximately 130 countries. The incidence of dengue has increased dramatically in recent decades, as well as the frequency and magnitude of outbreaks. Despite all efforts, there are no prophylactic or therapeutic treatments for the disease. Accordingly, research on the processes governing the DENV infection cycle is essential to develop vaccines or antiviral therapies. One of themost attractive DENV molecules to investigate is nonstructural protein 3 (NS3), which is essential for viral replication and a major immune target for infection. OBJECTIVE: To produce antibodies to support future studies on NS3 and its cellular interactions with other proteins. MATERIALS AND METHODS: Two recombinant proteins of the helicase domain of DENV NS3 serotype 2 were expressed, and used to immunize mice and produce polyclonal antibodies. RESULTS: The antibodies produced were useful in Western blot and immunofluorescence tests. We report an NS3 antibody that immunoprecipitates the viral protein and detects it in Western blot with no need to over-express it or use cell extracts with metabolic radiolabeling. CONCLUSION: The recombinant proteins expressed and the antibodies produced constitute valuable tools for studying DENV infectious processes involving NS3 and for evaluating tests designed to interfere with its functions.
Assuntos
Anticorpos Antivirais/imunologia , Vírus da Dengue/imunologia , Dengue/virologia , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Proteínas não Estruturais Virais/metabolismo , Replicação Viral/fisiologia , Animais , Anticorpos Antivirais/química , Anticorpos Antivirais/metabolismo , Western Blotting , Humanos , Camundongos , RNA Helicases/química , RNA Helicases/genética , RNA Helicases/metabolismo , Serina Endopeptidases/química , Serina Endopeptidases/genética , Serina Endopeptidases/metabolismo , Proteínas não Estruturais Virais/química , Replicação Viral/genética , Replicação Viral/imunologiaRESUMO
Resumen Introducción: El dengue es una enfermedad causada por uno de los cuatro serotipos del virus del dengue (DENV) y es endémica en, aproximadamente, 130 países. Su incidencia ha aumentado notablemente en las últimas décadas, así como la frecuencia y la magnitud de los brotes. A pesar de los esfuerzos, no existen tratamientos profilácticos ni terapéuticos contra la enfermedad y, en ese contexto, el estudio de los procesos que gobiernan el ciclo de infección del DENV es esencial para desarrollar vacunas o terapias antivirales. Una de las moléculas del DENV más prometedoras es la proteína no estructural 3 (NS3), la cual es indispensable para la replicación viral y es uno de los principales blancos inmunológicos durante la infección. Objetivo: Producir anticuerpos policlonales para contribuir a los futuros estudios sobre las interacciones entre la proteína NS3 y otras proteínas celulares. Materiales y métodos: Se expresaron dos proteínas recombinantes del dominio helicasa de NS3 del DENV de serotipo 2, las cuales se emplearon para inmunizar ratas y producir anticuerpos policlonales. Resultados: Los anticuerpos producidos fueron útiles en ensayos de Western blot e inmunofluorescencia y se reportó por primera vez un anticuerpo policlonal anti-NS3 que permitió la inmunoprecipitación de la proteína viral y la detecta con Western blot sin necesidad de inducir sobreexpresión de NS3 o de usar extractos de células marcados metabólicamente con radioisótopos. Conclusión: Las proteínas recombinantes expresadas y los anticuerpos producidos constituyen herramientas valiosas para estudiar procesos infecciosos del DENV que involucren a la proteína NS3 y evaluar pruebas dirigidas a interferir las funciones de esta proteína.
Abstract Introduction: Dengue is a disease caused by one of four serotypes of the dengue virus (DENV) and is endemic in approximately 130 countries. The incidence of dengue has increased dramatically in recent decades, as well as the frequency and magnitude of outbreaks. Despite all efforts, there are no prophylactic or therapeutic treatments for the disease. Accordingly, research on the processes governing the DENV infection cycle is essential to develop vaccines or antiviral therapies. One of the most attractive DENV molecules to investigate is nonstructural protein 3 (NS3), which is essential for viral replication and a major immune target for infection. Objective: To produce antibodies to support future studies on NS3 and its cellular interactions with other proteins. Materials and methods: Two recombinant proteins of the helicase domain of DENV NS3 serotype 2 were expressed, and used to immunize mice and produce polyclonal antibodies. Results: The antibodies produced were useful in Western blot and immunofluorescence tests. We report an NS3 antibody that immunoprecipitates the viral protein and detects it in Western blot with no need to over-express it or use cell extracts with metabolic radiolabeling.
Assuntos
Animais , Humanos , Camundongos , Replicação Viral/fisiologia , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Proteínas não Estruturais Virais/metabolismo , Dengue/virologia , Vírus da Dengue/imunologia , Anticorpos Antivirais/imunologia , Replicação Viral/genética , Replicação Viral/imunologia , Serina Endopeptidases/genética , Serina Endopeptidases/metabolismo , Serina Endopeptidases/química , Western Blotting , Proteínas não Estruturais Virais/química , RNA Helicases/genética , RNA Helicases/metabolismo , RNA Helicases/química , Anticorpos Antivirais/metabolismo , Anticorpos Antivirais/químicaRESUMO
ANTECEDENTE: La relativa influencia del tipo de perfil, la forma del dorso nasal, la dimensión del tercio inferior y la posición del mentón en la preferencia de un perfil, son aspectos que han generado controversia.OBJETIVO Y METODOS: Para obtener mayor información al respecto, se realizó un estudio descriptivo en el que se elaboraron 18 perfiles que representaban diferentes características, combinando dos tipos de nariz con tres tipos de perfil, dos dimensiones de tercio inferior y dos posiciones del mentón. Cada perfil fue valorado y clasificado por un grupo de 80 personas organizadoas en cuatro grupos diferentes por afinidad.
Assuntos
Ortodontia , Estética Dentária , ColômbiaRESUMO
Se describe la distribución anual y regional de los casos y tasas de fasciolosis en las poblaciones bovina, porcina, ovina, equina, caprina y camélida desde los años 1989 a 1995. Para la construcción de las tasas se contó con la información que disponía el Ministerio de Salud y el Instituto Nacional de Estadísticas. La distribución regional señala que este parasitismo no se encuentra en la XII Región. En los bovinos es de amplia distribución, con una tasa de 30,1 por ciento y una tendencia al aumento; en caprinos muestra una tasa de 14 por ciento y también con tendencia al aumento. En porcinos, ovinos, y equinos las tasa son de 1,4 por ciento, 2,1 por ciento y 12,3 por ciento respectivamente y con tendencia la disminución