Prenatal diagnosis of congenital Chagas' disease (American trypanosomiasis).

The prenatal diagnosis of congenital transmission of Chagas' disease in a pregnant woman with the indeterminate form of the disease is reported. Sonography revealed fetal hydrops at 31 weeks' gestation. Anti-Trypanosoma cruzi IgM and IgG antibodies were negative in the fetal blood sampled by cordocentesis, but T. cruzi trypomastigotes were found in its buffy coat. Owing to anemia, in utero exchange transfusion was undertaken, but fetal demise ensued. Labor was induced and a stillborn infant weighing 2030 g was delivered. The pathological examination revealed placentitis and meningoencephalitis, myocarditis and splenitis in the stillborn fetus. Amastigotes were found in the myocardium, brain and placenta.

Immunoglobulin M (IgM)-glycoinositolphospholipid enzyme-linked immunosorbent assay: an immunoenzymatic assay for discrimination between patients with acute toxoplasmosis and those with persistent parasite-specific IgM antibodies.

In the present study we developed an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to measure immunoglobulin M (IgM) specific for glycoinositolphospholipids (GIPL) derived from tachyzoite membrane (IgM-GIPL ELISA). The sensitivity and specificity of the assay were compared with those of commercially available Toxoplasma-specific IgM serological tests, namely, immunofluorescence assay (IFA) with fixed tachyzoites and capture ELISA employing tachyzoite extracts. Our results show that all patients with acute toxoplasmosis, as determined by clinical data and conventional serological tests, were also positive by the IgM-GIPL ELISA. Interestingly, many patients that were classified as indeterminate, who had IgG with high avidity but positive results in the IgM-specific IFA and capture ELISA, were negative by the IgM-GIPL ELISA. Finally, we tested the sera from patients with rheumatoid arthritis and various parasitic infections and found no evidence of false positives in the IgM-GIPL ELISA.

DOT-Elisa for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluid using a new solid phase (resin-treated polyester fabric) and Cysticercus longicollis antigens

Foi desenvolvido o teste dot-Elisa para deteccao de anticorpos em liquido cefalorraquiano (LCR) no diagnostico imunologico da neurocisticercose humana, utilizando antigenos de membrana e escolex de Cysticercus cellulose (M+E-Cc) e, alternativamente, membrana (M) e liquido vesicular (LV) de Cysticercus longicollis (Cl) covalentemente ligados a um novo suporte constituido de tecido de poliester-resina de N-metilolacrilamida (dot-TR). O teste foi realizado a temperatura ambiente, com tempos de incubacao reduzidos e sem necessidade de cuidados na manipulacao do suporte...

Schistosoma mansoni circulating polysaccharide and protein antigens recognized by sheep antisera in patients with different clinical forms of schistosomiasis before and after treatment

Dois antissoros produzidos em carneiros, um dos quais contra a fracao polissacaridica (Po) e outro contra componentes proteicos (Pt) de vermes adultos de Schistosoma mansoni, foram avaliados quanto ao seu desempenho na deteccao de antigenos parasitarios circulantes em pacientes com diferentes formas ciclicas da esquistossomose mansonica, atraves de um ensaio imunoenzimatico, (ELISA). O primeiro antissoro revelava antigenos parasitarios no granuloma hepatico e o segundo, nos glomerulos renais de pacientes com esquistossomose mansonica, bem como em camundongos experimentalmente infectados pelo S. mansoni....

Observacoes relativas a acao do itraconazol sobre o Toxoplasma gondii / Observations relating to the itraconazole activity against Toxoplasma gondii

Com o intuito de melhor conhecer o espectro de acao terapeutica do itraconazol, um novo composto triazolico, foi analisada sua eventual acao sobre o Toxoplasma gondii, atraves de observacoes "in vitro" e "in vivo", na infeccao experimental de camundongos. O estudo teve tambem interesse em aprimorar o tratamento da toxoplasmose quanto a inocuidade e a facilidade de execucao. O presente experimento nao mostrou atividade "in vivo" ou "in vitro" do itraconazol na infeccao experimental pelo Toxoplasma gondii em camundongos diversamente do observado em pesquisa previa, em relacao ao Trypanosoma cruzi.

A reaçåo imunoenzimática para cisticercose no líquido cefalorraquiano: consideraçöes sobre o limiar de reatividade / Immunoenzymatic assay for spinal fluid neurocysticercosis: cut off considerations

Um teste imunenzimático (ELISA) para neurocistercercose foi realizado em 335 amostras de líquidos cefalorraquianos (LCR), sendo 132 normais (LN), 115 com alteraçöes näo decorrentes de neurocisticercose (LA) e 88 obtidas de pacientes com neurocisticercose (LC). O limiar de reatividade (LR) foi determinado pela média aritmética das densidades ópticas (DO) das amostras LA acrescidas de 2 desvios padräo (sd). O teste ELISA apresentou sensibilidade de 97,7 por cento e especificidade de 96,4 por cento. Os valores de sensibilidade encontrados para as reaçöes de imunofluorescência indireta, fixaçäo de complemento e hemaglutinaçåo foram, respectivamente, de 80,7 por cento, 69,3 por cento e 62,5 por cento. A associaçäo do teste ELISA e a reaçäo de fixaçäo de complemento forneceu sensibilidade de 100 por cento. Näo houve correlaçäo entre as densidades ópticas do teste ELISA e os níveis de proteínas totais de amostras, tanto no grupo LA (r= -0,02), como no LC (r= -0,07).

Dot-elisa for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics): preliminary report

Foi desenvolvido o teste DOT-ELISA em tecido de poliéster tratado com resina polimerizada(NMA) para o imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC) humana pesquisando anticorpos específicos em líquido cefalorraquiano (LCR). O teste pode ser empregado em levantamentos epidemiológicos e em laboratórios de média e baixa complexidade, já que todas as etapas säo realizadas a temperatura ambiente, o antígeno é covalentemente ligado ao suporte permitindo obter um reagente estável, e o suporte sensibilizado näo requer cuidados especiais no seu manuseio. Foram ensaidas 30 amostras de LCR; todas as 15 amostras do grupo controle foram negativas e 14 (93,3%) das 15 amostras de LCR do grupo de pacientes com NC foram positivas (títulos de 1 a 128). Os estudos de sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade, establidade e padronizaçäo do uso de soro como amostra estäo em andamento

Chaga's disease: IgA, IgM and IgG antibodies to T. cruzi amastigote, trypomastigote and epimastigote antigens in acute and in different chronic forms of the disease

Com o intúito de se aperfeiçoar o diagnóstico sorológico das diferentes formas clínicas da doença de Chagas, foram estudados antígenos de formas amastigotas e tripomastigota, obtidas de camundongos imunossuprimidos infectados com cepa Y de T. cruzi, em comparaçäo com o de epimastigota convencionalmente utilizado. Um total de 506 amostras de soro de pacientes chagásicos com formas aguda e crônicas (indeterminada, cardíaca e digestiva), de indivíduos com infecçöes näo relacionadas e de indivíduos sadios foi analisado por reaçäo de imunofluorescência, para detecçäo de anticorpos IgG, IgM e IgA. O antígeno de amastigota apresentou os mais altos índices de eficiência relativa em testes de IF IgG (0,946), IF IgM (0,871) e IF IgA (0,914), mostrando ser mais conveniente para a finalidade proposta. Anticorpos anti-amastigota apresentaram médias geométricas de títulos mais altas que anti-tripomastigota e anti-epimastigota. Anticorpos IgG anti-corpos IgG anti-amastigota foram encontrados em todas as formas clínicas da doença de Chagas, e anticorpos IgA foram encontrados predominantemente em formas crônicas digestivas e em formas agudas, além de anticorpos IgM nestas últimas formas. Portanto, testes com antígeno amastigotas poderiam ser úteis para a triagem de indivíduos chagásicos em bancos de sangue. Aspectos práticos e econômicos na obtençäo de amastigotas, conforme descrito neste trabalho favorecem seu uso em países em desenvolvimento, já que o antígeno obtido por meio de outras fontes requer uma infraestrutura mais complexa, equipamentos e pessoal especializados

A sífilis avança: progride o diagnóstico? / The syphilis advance: will the diagnosis progress?

A sorologia da sífilis tem como alicerce os testes de cardiolipina, mas estes precisam ser realizados segundo técnica rigorosa e com reagentes bem padronizados. As evidências indicam que em nosso país tais exigências com freqüência näo säo cumpridas, impondo-se com urgência um sistema de controle de qualidade. Pelas limitaçöes de sensibilidade e, principalmente, de especificidade, os testes de cardiolipina devem ser complementados por testes treponêmicos. Destes, o mais divulgado é o teste de imunofluorescência FTA-ABS, mas a confiabilidade de seus resultados depende de rigorosa padronizaçäo no laboratório, da experiência técnica do laboratorista que o executa e da qualidade dos reagentes utilizados. O teste de hemaglutinaçäo tem valor comparável ao teste de imunofluorescência com a vantagem de padronizaçäo mais fácil, desde que os reagentes já säo fornecidos devidamente estandardizados e de ser de execuçäo mais simples. Porém, é preciso sublinhar que os testes sorológicos näo fornecem o diagnóstico, mas seus resultados têm apenas valor de probabilidade, que varia segundo diferentes fatores. Assim, esses resultados precisam ser ponderados e adequadamente valorizados pelo médico, de acordo, com dados clínicos, epidemiológicos, etc. Discute-se a interpretaçäo de resultados dos testes e apresenta-se um algorítmo para sua adequada utilizaçäo. Os novos testes treponêmicos para anticorpos IgM vieram abrir perspectivas para a identificaçäo de sífilis em atividade, recente ou tardia, para o diagnóstico de reinfecçöes e para avaliaçäo de resultados terapêuticos. Sua utilizaçäo na clínica está na dependência de maior simplificaçäo técnica e reduçäo de custos, o que se pode esperar para breve

Lectins for the detection of IgM antibodies to T. gondii in the diagnosis of acute toxoplasmosis by immunofluorescence test

Lectinas foram marcadas com fluoresceína e testadas na reaçäo de imunofluoresceína e testadas na reaçäo de imunofluorescência para a detecçäo de anticorpos anti-T. gondii, no diagnóstico da toxoplasmose aguda. Neste estudo tentou-se encontrar reagentes alternativos para conjugados fluorescentes anti-IgM humano (CFAIgMH), que com freqüência contém anticorpos antitoxoplasma, como contaminantes, devido às infecçöes naturais por T. gondii, entre os animais utilizados para imunizaçäo. Conjugados fluorescentes de lectina de lentilha (CFL) (Lens culinaris) forneceram resultados satisfatórios. Avaliaçäo do CFL efetuada em total de 179 amostras de soros de pacientes com toxoplasmose aguda e crônica, com infecçöes näo relacionadas e de indivíduos sadios, mostrou valores altos nos índices de eficiência relativa, co-positividade e co-negatividade, respectivamente de 0,989, 0,969 e 1,000, em relaçäo ao CFFAIgMH convencional. Além disso, três partidas de CFL preparadas sucessivamente forneceram resultados reprodutíveis. A vantagem de se empregar o LFC como reagente alternativo no diagnóstico sorológico da toxoplasmose aguda consiste nos aspectos práticos da sua preparaçäo