RESUMO
Genetic engineering is considered to be an important tool for the improvement of cassava. Cassava is a highly heterozygous crop species for which conventional breeding is a lengthy and tedious process. Robust transformation is based on Agrobacterium-mediated transformation of friable embryogenic callus (FEC). Production of FEC is genotype-dependent and considered to be a major bottleneck for the genetic transformation of cassava. As a consequence, routine genetic transformation has only been established for a handful of cassava cultivars. Therefore, development of procedures enabling efficient production of high-quality cassava FEC is required to allow the translation of research from the model cultivar to farmer-preferred cassava cultivars. Here we study the FEC production capacity of Brazilian cassava cultivars and report the modification of the protocol for the genetic transformation of Verdinha (BRS 222), a recalcitrant cultivar with high potential for protein production that is extensively used by farmers in Brazil.
RESUMO
A method for the induction of somatic embryogenesis in eight cassava genotypes from northeastern Brazil is described. The explants used were shoot apexes isolated both from in vitro grown plants and from shoots that sprouted from stem cuttings. Somatic embryogenesis was achieved in high frequencies by the addition in the induction medium of the auxin picloram over a wide range of concentrations. Green cotyledons of primary somatic embryos were used as explants to induce somatic (cyclic) secondary embryogenesis in an inducing medium supplemented with picloram at 12 mg/L. The method could be used not only for the mass production of plants of the cassava genotypes, but also to generate explants (green cotyledons of somatic embryos) as themselves excellent targets for genetic transformation.
Um método para a indução de embriogênese somática em oito genótipos de mandioca cultivados no Nordeste brasileiro foi desenvolvido. A indução de embriogênese somática foi feita utilizando como explantes ápices caulinares isolados de plantas cultivadas in vitro e ápices caulinares isolados a partir de brotações induzidas em casa-de-vegetação em manivas de plantas adultas. Em todos os genótipos a auxina picloram, em uma ampla faixa de concentrações, foi capaz de induzir embriogênese somática em altas freqüências e com um grande número de embriões por explante. Foi mostrado também, que é possível induzir embriogênese somática secundária (cíclica) a partir de cotilédones verdes de embriões somáticos maduros, utilizando picloram no meio de indução. O método aqui apresentado poderá ser utilizado para a produção em massa de plantas dos genótipos utilizados. A alta freqüência de embriogênese somática secundária obtida quando cotilédones verdes de embriões somáticos são utilizados como explantes, mostra que tais cotilédones podem se constituir em excelentes alvos para a transformação genética e posterior obtenção de plantas transgênicas de mandioca.
