Giardia lamblia: distribuição de microtúbulos no citoesqueleto de trofozoítos e cistos utilizando taxóide fluorescente / Giardia lamblia: distribution of microtubules on the cytoskeleton of trophozoites and cysts by use of fluorescent taxoid

Giardia lamblia é um protozoário parasito do intestino delgado, agente etiológico da giardiose, o qual apresenta um complexo citoesqueleto composto por microtúbulos. Neste estudo, a distribuição dos microtúbulos no citoesqueleto de trofozoítos e cistos de G. lamblia foi investigada por meio de um taxóide fluorescente, o FLUTAX-2 - um derivado do Taxol que se liga aos dímeros polimerizados de alfabeta-tubulina. O efeito do metronidazol sobre o citoesqueleto do organismo também foi avaliado. FLUTAX-2 foi capaz de se ligar aos microtúbulos de trofozoítos e cistos de G. lamblia, tornando possível a visualização de estruturas do citoesqueleto do microrganismo, como flagelos, funis e disco adesivo. Além disso, FLUTAX-2 marcou os trofozoitos cultivados por diferentes períodos, revelando que o intervalo de 48 horas é o melhor tempo de cultivo. A incubação dos parasitos na presença de metronidazol não demonstrou alteração significativa na marcação microtubular por FLUTAX-2. Nosso grupo já apresentou a marcação pelo FLUTAX-2 em outros protozoários, Trichomonas vaginalis, T. gallinae e Tritrichomonas foetus, e este é o primeiro trabalho a revelar o perfil de ligação em G. lamblia. Os resultados contribuem para o conhecimento de aspectos biológicos e morfológicos do parasito e sugerem perspectivas para o diagnóstico laboratorial da giardiose.

G. lamblia is a protozoan parasite of the small intestine and the etiologic agent ofgiardiosis, which presents a complex cytoskeleton composed of microtubules. In this study, the microtubule cytoskeleton was labeled in trophozoites and cysts of G. lamblia, using a fluorescent taxoid (FLUTAX-2), a derivative of Taxol, which binds to áâ-tubulin dimer polymerized. In addition, the effect of metronidazole on the cytoskeleton of the parasite was also evaluated. FLUTAX-2 was able to labelthe microtubules of trophozoites and cysts, allowing the observation of cytoskeletal structures, such as flagella, funis, adhesive disk, and median body. Moreover, FLUTAX-2 labeled the trophozoites from several different cultivation times, revealing the 48 hours as the best incubation period. The incubation of parasites in presence of metronidazole did not show significant alteration on the microtubulelabeling by FLUTAX-2. We have shown the FLUTAX-2 labeling in other protozoa,Trichomonas vaginalis, T. gallinae and Tritrichomonas foetus, and this is the first report revealing the binding profile in G. lamblia. Our results contribute to the knowledge of biological and morphological features of this intestinal pathogen. Furthermore, our data showed no modification of microtubule profile labeling in presence of metronidazole. Finally, a new perspective for giardiosis diagnosticis suggested, since trophozoites and cysts of G. lamblia were labeled withFLUTAX-2.

Characterization of an ecto-5'-nucleotidase (EC 3.1.3.5) activity in intact cells of Trichomonas vaginalis.

The enzymatic properties of an ecto-5'-nucleotidase were described in Trichomonas vaginalis. The enzyme hydrolyzes nucleoside monophosphates in optimum pH values of 7.5 and 6.5 for the 30236 strain and for the 30238 strain, respectively. Mg(2+) and Ca(2+) were activators of AMP hydrolysis in both strains. The apparent K(m) (Michaelis constant) values for Mg(2+)-AMP were 111.4+/-28.1 microM (mean+/-SD, n=3) for 30236 strain and 420.2+/-35.7 microM (mean+/-SD, n=3) for 30238 strain. The ecto-5'-nucleotidase activity was insensitive to levamisole and tetramisole, inhibitors of alkaline phosphatases, whereas alpha,beta-methylene-ADP inhibited the enzymatic activity of both strains. Our results showed that the AMP hydrolysis presents differences in some kinetic parameters between the two strains investigated. An analysis of the enzymatic chain involved in the ATP hydrolysis to adenosine will contribute to understanding the biochemical aspects of the parasite and the mechanisms related to host-parasite interactions.

Ocorrência de cryptosporidium parvum entre pacientes sidéticos do Centro de Saúde de Porto Alegre, RS / Search cryptosporidium parvum oocysts in diarrheic feces from AIDS patients in a state medical unit in Porto Alegre, RS

A prevalência de oocistos de Cryptosporidium parvum foi determinada em amostras fecais de 25 sidéticos de ambos os sexos com gastroenterite, durante o período de abril a maio de 2002 no Centro de Saúde Vila dos Comerciários em Porto Alegre, RS. Os oocistos foram detectados pela coloraçäo da safranina modificada a quente. Pelos dados observados das 25 amostras estudadas, 16 porcento (4) apresentaram resultados positivos e 84 porcento (21) foram negativas para a pesquisa de oocistos. No que se refere à ocorrência de oocistos de C. parvum, em relaçäo ao sexo, foi verificado que os maiores percentuais de infecçäo foram obtidos entre as pacientes do sexo feminino 12 porcento (3), enquanto que entre os sidéticos do sexo masculino o índice de infecçäo foi igual a 4 porcento (1).

Diagnostico de laboratorio da criptosporidiose humana / Laboratory diagnostic of human cryptosporidiosis

No presente estudo sobre criptosporidiose humana sao apresentados os seus aspectos clinicos e descritos os metodos de laboratorio de diagnostico parasitologico e imunologico.