Meiotic analysis of the germoplasm of three medicinal species from Asteraceae family

Cytogenetic characterization was carried out on 12 accessions from Aster squamatus (Spreng.) Hieron., Pterocaulon polystachyum DC, and Solidago microglossa DC by studying their meiotic behavior and pollen viability. These species are from the Asteraceae family, native to Rio Grande do Sul State, Brazil, and are important for medicinal use. Young inflorescences with four accessions of each species were collected, fixed in ethanol-acetic acid (3:1), and conserved in ethanol 70% until use. The method used was that of squashing the anthers and coloring with acetic orcein 2%. Meiosis was regular in all accessions, presenting chromosomal associations preferentially bivalent, where n=10 was found for Aster squamatus and n=9 for Pterocaulon polystachyum, and Solidago microglossa. The studied accessions presented a Meiotic Index (MI) that varied from 65% to 87% in Aster squamatus, 85% to 92% in Pterocaulon polystachyum, and 64% to 92% in Solidago microglossa, indicating meiotic stability, although irregularities appeared during the cellular division. The pollen viability estimative was high in all studied accessions. These results indicate that the studied species can be included in future studies of genetic breeding.

Foi realizada a caracterização citogenética de doze acessos de Aster squamatus, Pterocaulon polystachyum e Solidago microglossa, espécies da família Asteraceae, nativas do Rio Grande do Sul, Brasil, por meio do estudo do comportamento meiótico e da viabilidade polínica, que possuem grande importância para uso medicinal. Inflorescências jovens de quatro acessos de cada espécie foram fixadas em álcool-ácido acético (3:1) e conservadas em álcool 70% até o uso. O método utilizado foi o de esmagamento de anteras e a coloração com orceína acética 2%. A meiose foi regular em todos os acessos, apresentando associações cromossômicas preferencialmente em bivalentes, encontrando-se n=10 para Aster squamatus e n=9 para Pterocaulon polystachyum e Solidago microglossa. Os acessos apresentaram índice meiótico que variou de 65% a 87% em Aster squamatus, de 85% a 92% em Pterocaulon polystachyum e de 64% a 92% para Solidago microglossa, indicando estabilidade meiótica, apesar de o aparecimento de irregularidades durante a divisão celular. A estimativa da viabilidade polínica foi alta para todos os acessos estudados. Esses resultados indicam que as espécies estudadas podem ser incluídas em futuros trabalhos de melhoramento genético.

Meiotic analysis of the germoplasm of three medicinal species from Asteraceae family

Cytogenetic characterization was carried out on 12 accessions from Aster squamatus (Spreng.) Hieron., Pterocaulon polystachyum DC, and Solidago microglossa DC by studying their meiotic behavior and pollen viability. These species are from the Asteraceae family, native to Rio Grande do Sul State, Brazil, and are important for medicinal use. Young inflorescences with four accessions of each species were collected, fixed in ethanol-acetic acid (3:1), and conserved in ethanol 70% until use. The method used was that of squashing the anthers and coloring with acetic orcein 2%. Meiosis was regular in all accessions, presenting chromosomal associations preferentially bivalent, where n=10 was found for Aster squamatus and n=9 for Pterocaulon polystachyum, and Solidago microglossa. The studied accessions presented a Meiotic Index (MI) that varied from 65% to 87% in Aster squamatus, 85% to 92% in Pterocaulon polystachyum, and 64% to 92% in Solidago microglossa, indicating meiotic stability, although irregularities appeared during the cellular division. The pollen viability estimative was high in all studied accessions. These results indicate that the studied species can be included in future studies of genetic breeding.

Foi realizada a caracterização citogenética de doze acessos de Aster squamatus, Pterocaulon polystachyum e Solidago microglossa, espécies da família Asteraceae, nativas do Rio Grande do Sul, Brasil, por meio do estudo do comportamento meiótico e da viabilidade polínica, que possuem grande importância para uso medicinal. Inflorescências jovens de quatro acessos de cada espécie foram fixadas em álcool-ácido acético (3:1) e conservadas em álcool 70% até o uso. O método utilizado foi o de esmagamento de anteras e a coloração com orceína acética 2%. A meiose foi regular em todos os acessos, apresentando associações cromossômicas preferencialmente em bivalentes, encontrando-se n=10 para Aster squamatus e n=9 para Pterocaulon polystachyum e Solidago microglossa. Os acessos apresentaram índice meiótico que variou de 65% a 87% em Aster squamatus, de 85% a 92% em Pterocaulon polystachyum e de 64% a 92% para Solidago microglossa, indicando estabilidade meiótica, apesar de o aparecimento de irregularidades durante a divisão celular. A estimativa da viabilidade polínica foi alta para todos os acessos estudados. Esses resultados indicam que as espécies estudadas podem ser incluídas em futuros trabalhos de melhoramento genético.

Número de cromossomos em populações de Achyrocline satureioides Lam. (marcela) do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil

The cytogenetics of medicinal plants in a country enlarges the perspectives of conservation of the vegetal diversity of species generally used in popular medicine. Some of the species used medicinally in Brazil are native, and Achyrocline satureioides Lam. (marcela), from Asteraceae Family, is highlighted among them. In this study the first counting of the chromosomal number in marcela populations, which are native from Rio Grande do Sul State, was performed. Seeds of five populations of marcela were collected in their native local. Such seeds were put at room temperature to germinate. After germinating, the root-tips were collected and pre-treated with saturated solution of paradichlorobenzene for five hours, fixed in absolute ethanol glacial acetic acid (3:1) for 24 hours at room temperature and, after that, maintained in alcohol 70% until they were used. The analysis of the chromosomal number was performed with slides of root-tips by using the squashing technique, hydrolysis in HCI 5N for 10min, acetic acid application 45% for 1min, squashing of the root-tips and staining in orcein acetic 2%. All populations presented 2n=24 chromosomes, suggesting it as the probable diploid number of the species.

A caracterização citogenética das plantas medicinais de um país amplia as perspectivas da conservação da diversidade vegetal de espécies comumente utilizadas na medicina popular. Das espécies utilizadas medicinalmente no Brasil, algumas são nativas, dentre as quais se destaca, Achyrocline satureioides Lam. (marcela) da Família Asteraceae. Neste estudo, pela primeira vez, foi realizada a contagem do número cromossômico de populações de marcela, nativas do estado do Rio Grande do Sul. Foram coletadas sementes de cinco populações de marcela em seus locais de origem, as quais foram colocadas para germinar em ambiente controlado. Após a germinação, as pontas de raízes foram coletadas e pré-tratadas com paradiclorobenzeno durante cinco horas, fixadas em álcool absoluto:ácido acético glacial (3:1) por 24h a temperatura ambiente e, posteriormente, conservadas em álcool 70%, até o seu uso. A análise do número cromossômico foi feita a partir da confecção de lâminas das pontas das raízes, sendo que para o preparo das lâminas utilizou-se a técnica do esmagamento, hidrólise em HCl 5N por 10min, aplicação de ácido acético 45% durante 1min, esmagamento das pontas das raízes e coloração com orceína acética a 2%. Todas as populações estudadas apresentaram 2n=24 cromossomos, o que sugere ser esse o número diplóide da espécie.

Número de cromossomos em populações de Achyrocline satureioides Lam. (marcela) do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil

The cytogenetics of medicinal plants in a country enlarges the perspectives of conservation of the vegetal diversity of species generally used in popular medicine. Some of the species used medicinally in Brazil are native, and Achyrocline satureioides Lam. (marcela), from Asteraceae Family, is highlighted among them. In this study the first counting of the chromosomal number in marcela populations, which are native from Rio Grande do Sul State, was performed. Seeds of five populations of marcela were collected in their native local. Such seeds were put at room temperature to germinate. After germinating, the root-tips were collected and pre-treated with saturated solution of paradichlorobenzene for five hours, fixed in absolute ethanol glacial acetic acid (3:1) for 24 hours at room temperature and, after that, maintained in alcohol 70% until they were used. The analysis of the chromosomal number was performed with slides of root-tips by using the squashing technique, hydrolysis in HCI 5N for 10min, acetic acid application 45% for 1min, squashing of the root-tips and staining in orcein acetic 2%. All populations presented 2n=24 chromosomes, suggesting it as the probable diploid number of the species.

A caracterização citogenética das plantas medicinais de um país amplia as perspectivas da conservação da diversidade vegetal de espécies comumente utilizadas na medicina popular. Das espécies utilizadas medicinalmente no Brasil, algumas são nativas, dentre as quais se destaca, Achyrocline satureioides Lam. (marcela) da Família Asteraceae. Neste estudo, pela primeira vez, foi realizada a contagem do número cromossômico de populações de marcela, nativas do estado do Rio Grande do Sul. Foram coletadas sementes de cinco populações de marcela em seus locais de origem, as quais foram colocadas para germinar em ambiente controlado. Após a germinação, as pontas de raízes foram coletadas e pré-tratadas com paradiclorobenzeno durante cinco horas, fixadas em álcool absoluto:ácido acético glacial (3:1) por 24h a temperatura ambiente e, posteriormente, conservadas em álcool 70%, até o seu uso. A análise do número cromossômico foi feita a partir da confecção de lâminas das pontas das raízes, sendo que para o preparo das lâminas utilizou-se a técnica do esmagamento, hidrólise em HCl 5N por 10min, aplicação de ácido acético 45% durante 1min, esmagamento das pontas das raízes e coloração com orceína acética a 2%. Todas as populações estudadas apresentaram 2n=24 cromossomos, o que sugere ser esse o número diplóide da espécie.

Seleção de Trichoderma spp. visando ao controle de Sclerotinia sclerotiorum, in vitro

The objective of this work was to select isolates of Trichoderma spp. with potential of antagonism against Sclerotina sclerotiorum, in vitro. Twelve isolates of Trichoderma spp. and three isolates of S. sclerotiorum were used in the techniques "cling film - modified" and "direct confrontation". Based on the technique in vitro it the isolates TSM1, J10 and I1 of Trichoderma spp.were selected with better antagonistic activity, on the isolates of S. sclerotiorum.

Este trabalho teve por objetivo selecionar isolados de Trichoderma spp. com potencial de antagonismo sobre o fitopatógeno Sclerotina sclerotiorum, in vitro. Foram utilizados doze isolados de Trichoderma spp. e três isolados de S. sclerotiorum nas técnicas "papel celofane - modificada" e "confrontação direta". Com o desenvolvimento das técnicas in vitro, foram selecionados os isolados TSM1, J10 e I1 de Trichoderma spp. com melhor atividade antagonista, sobre os isolados de S. sclerotiorum.

Seleção de Trichoderma spp. visando ao controle de Sclerotinia sclerotiorum, in vitro

The objective of this work was to select isolates of Trichoderma spp. with potential of antagonism against Sclerotina sclerotiorum, in vitro. Twelve isolates of Trichoderma spp. and three isolates of S. sclerotiorum were used in the techniques "cling film - modified" and "direct confrontation". Based on the technique in vitro it the isolates TSM1, J10 and I1 of Trichoderma spp.were selected with better antagonistic activity, on the isolates of S. sclerotiorum.

Este trabalho teve por objetivo selecionar isolados de Trichoderma spp. com potencial de antagonismo sobre o fitopatógeno Sclerotina sclerotiorum, in vitro. Foram utilizados doze isolados de Trichoderma spp. e três isolados de S. sclerotiorum nas técnicas "papel celofane - modificada" e "confrontação direta". Com o desenvolvimento das técnicas in vitro, foram selecionados os isolados TSM1, J10 e I1 de Trichoderma spp. com melhor atividade antagonista, sobre os isolados de S. sclerotiorum.

Sensibilidade de isolados de Trichoderma spp. a benomil e iprodione

The objective of this work was to evaluate the sensibility of wild isolates of Trichoderma spp.; T. viride (Tal1); T. viride (T2b); T. harzianum (Tal8); T. viride (Tligjap); T. harzianum (TW5) e T. harzianum (TMA4); at concentrations of 0; 0.25; 0.5; 1.0; and 2.5µg/ml of active ingredient of benomyl and at concentrations of 0; 2.5; 5.0; 10.0 e 100.0µg/ml of iprodione, in vitro. Fungitoxicity was evaluated by measuring sporulation, in Neubauer chamber, after seven days of incubation and calculation of colony growth rate. In general, benomyl and iprodione impaired micelial growth and sporulation. The isolate TW5 showed to be less affected by the fungicides. The mycelial growth was reduced at benomyl and at iprodione, and it also produced more spores in the presence of fungicides than the others isolates.

Este trabalho teve como objetivo avaliar a sensibilidade dos isolados selvagens de Trichoderma spp.; T. viride (Tal1); T. viride (T2b); T. harzianum (Tal8); T. viride (Tligjap); T. harzianum (TW5) e T. harzianum (TMA4) às concentrações de 0; 0,25; 0,5; 1,0 e 2,5µg/ml do ingrediente ativo do fungicida benomil e 0; 2,5; 5,0; 10,0 e 100,0µg/ml do ingrediente ativo do fungicida iprodione, in vitro. A avaliação consistiu de esporulação após sete dias de incubação, mediante o preparo de suspensão de esporos e contagem em câmara de Neubauer, e do cálculo da porcentagem de redução de crescimento das colônias (RC%) em meio BDA suplementado com as doses estabelecidas de cada fungicida. De modo geral, os fungicidas benomil e iprodione, presentes em meio de cultura, exerceram efeito negativo sobre o crescimento micelial e esporulação dos fungos. O isolado TW5 mostrou-se mais resistente com relação à redução de crescimento na dose de 1,0µg/ml de benomil e na dose de 10,0µg/ml de iprodione, sendo também um dos isolados que mais esporulou em presença dos fungicidas.

Sensibilidade de isolados de Trichoderma spp. a benomil e iprodione

The objective of this work was to evaluate the sensibility of wild isolates of Trichoderma spp.; T. viride (Tal1); T. viride (T2b); T. harzianum (Tal8); T. viride (Tligjap); T. harzianum (TW5) e T. harzianum (TMA4); at concentrations of 0; 0.25; 0.5; 1.0; and 2.5µg/ml of active ingredient of benomyl and at concentrations of 0; 2.5; 5.0; 10.0 e 100.0µg/ml of iprodione, in vitro. Fungitoxicity was evaluated by measuring sporulation, in Neubauer chamber, after seven days of incubation and calculation of colony growth rate. In general, benomyl and iprodione impaired micelial growth and sporulation. The isolate TW5 showed to be less affected by the fungicides. The mycelial growth was reduced at benomyl and at iprodione, and it also produced more spores in the presence of fungicides than the others isolates.

Este trabalho teve como objetivo avaliar a sensibilidade dos isolados selvagens de Trichoderma spp.; T. viride (Tal1); T. viride (T2b); T. harzianum (Tal8); T. viride (Tligjap); T. harzianum (TW5) e T. harzianum (TMA4) às concentrações de 0; 0,25; 0,5; 1,0 e 2,5µg/ml do ingrediente ativo do fungicida benomil e 0; 2,5; 5,0; 10,0 e 100,0µg/ml do ingrediente ativo do fungicida iprodione, in vitro. A avaliação consistiu de esporulação após sete dias de incubação, mediante o preparo de suspensão de esporos e contagem em câmara de Neubauer, e do cálculo da porcentagem de redução de crescimento das colônias (RC%) em meio BDA suplementado com as doses estabelecidas de cada fungicida. De modo geral, os fungicidas benomil e iprodione, presentes em meio de cultura, exerceram efeito negativo sobre o crescimento micelial e esporulação dos fungos. O isolado TW5 mostrou-se mais resistente com relação à redução de crescimento na dose de 1,0µg/ml de benomil e na dose de 10,0µg/ml de iprodione, sendo também um dos isolados que mais esporulou em presença dos fungicidas.