RESUMO
Here we describe a homogeneous bioluminescent immunoassay based on the interaction between Fc-tagged SARS-CoV-2 Spike RBD and human ACE2, and its detection by secondary antibodies labeled with NanoLuc luciferase fragments LgBit and SmBit. The assay utility for the discovery of novel inhibitors was demonstrated with a panel of anti-RBD antibodies, ACE2-derived miniproteins and soluble ACE2. Studying the effect of RBD mutations on ACE2 binding showed that the N501Y mutation increased RBD apparent affinity toward ACE2 tenfold that resulted in escaping inhibition by some anti-RBD antibodies. In contrast, while E484K mutation did not highly change the binding affinity, it still escaped antibody inhibition likely due to changes in the epitope recognized by the antibody. Also, neutralizing antibodies (NAbs) from COVID-19 positive samples from two distinct regions (USA and Brazil) were successfully detected and the results further suggest the persistence of NAbs for at least 6 months post symptom onset. Finally, sera from vaccinated individuals were tested for NAbs and showed varying neutralizing activity after first and second doses, suggesting the assay can be used to assess immunity of vaccinated populations. Our results demonstrate the broad utility and ease of use of this methodology both for drug discovery and clinical research applications.
Assuntos
Enzima de Conversão de Angiotensina 2/metabolismo , Anticorpos Neutralizantes/análise , COVID-19/prevenção & controle , SARS-CoV-2/metabolismo , Glicoproteína da Espícula de Coronavírus/química , Glicoproteína da Espícula de Coronavírus/metabolismo , Anticorpos Antivirais/análise , Brasil , COVID-19/imunologia , Humanos , Luciferases/genética , Luciferases/metabolismo , Medições Luminescentes , Mutação , Ligação Proteica , Domínios Proteicos , SARS-CoV-2/imunologia , SARS-CoV-2/isolamento & purificação , Glicoproteína da Espícula de Coronavírus/genética , Estados Unidos , VacinaçãoRESUMO
ACE2 and TMPRSS2 are key players on SARS-CoV-2 entry into host cells. However, it is still unclear whether expression levels of these factors could reflect disease severity. Here, a case-control study was conducted with 213 SARS-CoV-2 positive individuals where cases were defined as COVID-19 patients with respiratory distress requiring oxygen support (N = 38) and controls were those with mild to moderate symptoms of the disease who did not need oxygen therapy along the entire clinical course (N = 175). ACE2 and TMPRSS2 mRNA levels were evaluated in nasopharyngeal swab samples by RT-qPCR and logistic regression analyzes were applied to estimate associations with respiratory outcomes. ACE2 and TMPRSS2 levels positively correlated with age, which was also strongly associated with respiratory distress. Increased nasopharyngeal ACE2 levels showed a protective effect against this outcome (adjOR = 0.30; 95% CI 0.09-0.91), while TMPRSS2/ACE2 ratio was associated with risk (adjOR = 4.28; 95% CI 1.36-13.48). On stepwise regression, TMPRSS2/ACE2 ratio outperformed ACE2 to model COVID-19 severity. When nasopharyngeal swabs were compared to bronchoalveolar lavages in an independent cohort of COVID-19 patients under mechanical ventilation, similar expression levels of these genes were observed. These data suggest nasopharyngeal TMPRSS2/ACE2 as a promising candidate for further prediction models on COVID-19.
Assuntos
Enzima de Conversão de Angiotensina 2/genética , COVID-19/genética , Síndrome do Desconforto Respiratório/genética , Serina Endopeptidases/genética , Adulto , Idoso , COVID-19/complicações , COVID-19/diagnóstico , COVID-19/terapia , Estudos de Casos e Controles , Regulação para Baixo , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Nasofaringe/metabolismo , RNA Mensageiro/genética , Síndrome do Desconforto Respiratório/diagnóstico , Síndrome do Desconforto Respiratório/etiologia , Síndrome do Desconforto Respiratório/terapia , SARS-CoV-2/isolamento & purificação , SARS-CoV-2/fisiologia , Regulação para CimaRESUMO
Página do Centro de Informações em Saúde para Viajantes (CIVES) sobre doença meningocócica, seu agente, transmissão, distribuição geográfica e riscos, medidas de proteção individual, manifestações e tratamento. Fornece dados epidemiológicos da doença no Brasil, de 1996 a 2005.
Assuntos
Saúde Pública , Saúde do Viajante , Doenças Transmissíveis , Infecções Meningocócicas , Meningites Bacterianas , Meningite Meningocócica , Neisseria meningitidis , Viagem , Controle Sanitário de Viajantes , Vigilância SanitáriaRESUMO
Página do Centro de Vacinação de Adultos - CVA, da Universidade Federal do Rio de Janeiro - UFRJ, com informações sobra a vacina contra tuberculose, conhecida como BCG (Bacilo de Calmette e Guérin), desenvolvida a partir de uma bactéria de origem bovina (Mycobacterium bovis), semelhante à causadora da doença, a Mycobacterium tuberculosis. Apresenta os eventos adversos, contra-indicações e precauções em relação à vacina. Fornece explicações sobre a doença, como transmissão, sintomas, medidas de proteção e tratamento. Disponibiliza calendário de vacinação e fornece links de acesso a páginas com temática semelhante.
Assuntos
Saúde Pública , Vacina BCG , Vacinação em Massa , Vacinação , Vacinas contra a Tuberculose , Programas de Imunização , Doenças Transmissíveis , Vacinação/veterináriaRESUMO
O Centro de Informação em Saúde para Viajantes - CIVES disponibiliza informações sobre a poliomielite, a etiologia, formas de transmissão, dados sobre a epidemiologia em regiões do Brasil e ocorrência no mundo, recomendações para os viajantes, sintomas e informações sobre a imunização.
Assuntos
Saúde Pública , Poliomielite , Vacinas contra Poliovirus , Perfil de Saúde , Imunização , Prevenção PrimáriaRESUMO
O Centro de Informação em Saúde para Viajantes - CIVES disponibiliza informações sobre a poliomielite, a etiologia, formas de transmissão, dados sobre a epidemiologia em regiões do Brasil e ocorrência no mundo, recomendações para os viajantes, sintomas e informações sobre a imunização
